全 文 ：广 西 植 物 Guihaia 29(5)：698— 702 2009年 9月
枇杷花主要有效成分的含量
李 琪1，杨必坤1，张晓喻1，2
(1．四川师范大学 生命科学学院，成都 610068；2
， 张 宏 ，2 ，黄春萍1，2，于树华i
四川师范大学 植物资源应用与开发研究所 ，成都 610068)
摘 要 ：采用紫外分光光度法及高效液相色谱法，研究不同产地不同年份的枇杷花总黄酮和三萜化合物的差
异，以确定其含量较高的产地及年际变化情况。结果表明：同一年份不同产地枇杷花中总黄酮和三萜化合物含
量有显著差异，龙泉、仁寿、攀枝花及莆田总黄酮含量显著高于其它产地(P<0．01)，齐墩果酸以龙泉、仁寿、浦江
和莆田四地较高，并显著高于遂宁和内江等地(P<0．05或 P≤0．01)，熊果酸含量最高的产地为浙江余杭，其含
量显著高于遂宁、攀枝花、壁山等地(P
关键词：枇杷花 ；熊果酸 ；齐墩果酸；总黄酮 ；紫外分光光度法 ；反相高效液相色谱法
中图分类号：Q946 文献标识码：A 文章编号：i000—3142(2009)05—0698—05
Contents of effective components in flowers
of Eriobotrya j aponica
LI Qi ，YANG Bi—Kun ，ZHANG Xiao-Yu 一，ZHANG Hong ， ，
HUANG Chun-PingI，2。YU Shu-HuaI，2
(1．Colege of Life Sciences．Sichuan Normal University，Chengdu 610068。China；
2．Institute of Phytochemistry．Sichuan Normal University，Chengdu 610068．China)
Abstract：With the ultraviolet spectrophotometry and HPLC，the contents of total flavonoids and triterpenoid in Io—
quat flowers from diferent localities and growth ycars were studied for determining the optimum localities and the
changes of effective component contents in different growth years．The results showed that the differences of total
flavonoid and triterpenoid contents among the samples of different localities were significant． The total flavonoids
contents of samples from Longquan，Renshou，Panzhihua and Putian were higher than that from other localities(P<
0．0 1)．The oleanolic acid content of samples from Longquan，Renshou，Pujiang and Putian were higher than that
from Suining and Neijiang(P
contents of effective components had slight changes in same localities．The oleanolic acid had certain correlativity with
latitude and longitude but other components had no correlativity．
Key words：flowers of Eriobotrya japonica；ursolic acid；oleanolic acid；total flavonoids；ultraviolet spectrophotome
try；Rp-HPLC
枇杷花系蔷薇科枇杷属植物枇杷 (Eriobotrya
japonica)的干燥花蕾及花序 。味淡 ，性微温，用于
治疗伤风感 冒、咳嗽、痰血(全 国中草药汇编编写组 ，
1996)。枇杷花有效成 分主要为三萜和黄酮类化合
物。三萜类化合物主要是齐墩果酸(Oleanolic acid，
OA)和熊果酸(Ursolic acid，UA)(成丽等，2001)，
收稿日期：2008—06—01 修回日期：2009—02—18
基金项目：四川省教育厅青年基金(2。06B035)；四川省攀枝花市科技局重点项目(2008CY-S-1)[Supported byYouth Found of theEducation
Department of Siehuan Province(2006B035)；Key Project of the Science and Technology Bureau of Panzhihua，Sichuan(2008CY-S-1)]
作者简介：李琪(1983一)，女，四川省自贡市人，硕士研究生，研究方向为植物资源开发与应用。
通讯作者(Author for corespondence，E—mail：zhanghong65 1@yahoo．corn．en)
5期 李琪等 ：枇杷花主要有效成分的含量 699
具多种生物学活性，在抗肿瘤 、抗氧化 、保肝 、降血脂
方面作用显著(王德仁，2003；殷晓东等，2004)，也有
良好 的抗 炎、止 咳、祛痰 和平 喘作 用 (王 立为 等，
2004；鞠建华等，2003)。黄酮类化合物具降压、活血
化瘀、保肝、止咳、祛痰、抗炎、抗癌、抗氧化、镇痛等
多种功效(宋 晓凯 ，2004；林玉霖等 ，2006；郭宇 等，
2006；朱丹等，2007)，在医学和营养学上有较高的应
用价值。目前，在我国枇杷已经产业化栽培，枇杷树
在花期进行疏花以提 高枇 杷 品质 ，每株有 6O ～
8O 的鲜花蕾被疏掉，而疏掉的花蕾却没有充分利
用。为此，可开发利用枇杷花资源从 而将其变废为
宝。本文测定和比较不同产地不同生长年份枇杷花
总黄酮和三萜类化合物的含量，并对枇杷花有效成
分含量与地理、气候因子问的相关性进行分析，为枇
杷花的开发和利用奠定基础 ，对农业发展和植物资
源的合理利用具有重要意义
1 仪器 、试剂与材料
仪器：SHIMADZU—UV一1700型紫外可见分光
光度计；DIONEX—Summit P680A DGP一6型双三元
高效液相色谱仪；BUCHI Syncore Analyst R～12多
功能平行浓缩仪 ，德 国 SARTORIUS(BP211D型)
电子天平。试剂：熊果酸(批号：110742—200516)、齐
墩果酸(批号：1l0709—200304)、芦丁(批号：100080—
200306)对照品由中国药品生物制品检定所提供。
表 1 各样品采集地地理分布及气候因子
Table 1 Climatic and geographical conditions of locality
产地
I ocality 竽度cE 纬度cN T L ．~tiongit d Lat d 一 三
无霜期 (d) 年日照 (h)
Frost free Annual SUnshine
period hours
浙江余杭 Yuhang，Zhejiang
浙江杭州 Hangzhou，Zhejiang
福建蒲田Putian，Fujian
湖北黄石 Huangshi。Hubei
湖南岳阳 Yueyang，Hunan
重庆壁山Bishan．Chongqing
四JI攀枝花 Panzhihua，Sichuan
四JI仁寿Renshou。Sichuan
四JI蒲江 Pujiang，Sichuan
四川遂宁Suining．Sichuan
四JIl自贡 Zigong，Sichuan
四川内江 Neijiang，Siehuan
四JIl龙泉 Longquan，Siehuan
色谱用试剂为色谱纯，其余试剂均为分析纯。材料：
枇杷花样品由本课题组于 2005、2006、2007年在全
国各地采集，经本院植物教研室鉴定为蔷薇科植物
枇杷(Eriobotrya japonica)花。样品采集地的地理
分布、气候因子见表 1。
2 方法
2．1总黄酮的测定
2．1．1标准 曲线的绘 制 精 密称 取芦 丁标 准品
0．02065 g，用 50 乙醇配制成 206．5 mg·L。的储
备液。精密移取上述储备液 0．1、0．5、1．0、2．0、
3．0、4．0、5．0 mL于 lO mL容量瓶中，各加 5％
NaNO2溶液 0．3 mL，摇匀 ，静置 6 min，加 lO Al
(NO ) 溶液 0．3 mL，摇匀，静置 6 rain，加 4 9／6
NaOH溶液4 mL(孙学斌等，2007)，用 5O 乙醇定
容，分 别得 到 浓度 为 2．065、10．325、2O．650、
41．300、61．950、82．600、103．250 mg·L 的标准显
色溶液，以不加标准品同法制备空白对照。上述芦
丁标准显色溶液在 510nm处测定吸光度值(范维刚
等，2OO5)，以芦丁浓度为横坐标 ，吸光度值 为纵坐
标，绘制标准曲线。
2．1．2样品的制备 精确称取过 3O目筛的枇杷花
样品 1．0 g，按 1：3O固液 比用 5O 乙醇浸泡 3O
min后超声提取，提取条件：40KHz；30 rain；75℃。
提取液过滤、浓缩、定容备用。
2．1．3样品总黄酮含量测定 按 2．1．2制备的样品
溶液充分摇匀并过滤，取 1．0 mL滤液按照 2．1．1
进行显色，在 510 nm处测定吸光度值。利用回归
方程计算枇杷花中总黄酮含量。
能
9 7 3 5 4 加 ∞ ∞ L ∞ ∞ 卯 ¨ n 髂 加
8 5 5 4 7 7 O 2 2 1 5 O 7 弛 鹪 ∞ 勰
O O 2 7 O 5 5 0 O ∞ ∞ 撤∞勰 毗∞∞3 113 11E O 1 111
0 ” ” ：2
弘 ∞口^¨钉 弱拍 D。 口。
n 如 娼 ～ 一一 一
700 广 西 植 物 29卷
2．2三萜主成分含量测定
2．2．1色谱条件 色谱柱 ：Altech Apolo C18(250
mm×4．6 ilm，5 m)；流 动相 ：甲醇一醋 酸水溶液
(pH3．4)94：6，流速：0．5 mL·min‘。；柱温 ：2O℃ ；
检测 波 长：210 nm；进 样 量 ：10 L(张 晓 喻 等 ，
2007)。
2．2．2标 准 曲线 的 绘 制 精 密称 取 齐 墩 果 酸
0．0055l g、熊果酸 0．01760 g，甲醇溶解并定容至 50
mL，配制成 1lO．2 mg·L 齐墩果酸和 352．0 mg·
L 熊果酸的混合标准品溶液，作为对照品储备液。
精密吸取上述对照品储备液 0．1、0．2、0．4、1．0、
2．0、4．0、8．0 mL于 10 mL容量瓶 中，用 甲醇稀释
定容。取上述不同浓度对照品混合液和对照品储备
液在上述色谱条件下，进行测定。以峰面积为纵坐
标 ，进样浓度(mg·L )为横坐标 ，绘制标准曲线 。
2．2．3样品的制备 精确称取过 3O目筛 的枇杷 花
样品 1．0 g，按 l：3O固液 比用 95 乙醇浸泡 3O
min后超声提取 ，提取条件 ：40 KHz；3O min；75℃。
提取液过滤、浓缩 、定容备用 。测定前样品经 0．45
m微孔滤膜过滤。
2．2．4样品三萜主成分的含量测定 取 2．2．3备用
溶液按照 2．2．1色谱条件进行测定，根据峰面积计
算样品中齐墩果酸和熊果酸的含量。
2．3数据分析
数据分析采用 SPSS13．0软件 ，结果以 Mean±
SD表示 。
3 结果与分析
3．1标准 曲线
标准曲线方程 、线性关系、线性范围及检出限见
表 2。
表 2 标准曲线方程 、线性范围及检出限
Table 2 The standard curves．1inear range and the limit of detection
表 2结果表明，总黄酮 、齐墩果酸及熊果酸在一
定浓度范围内呈良好的线性关系 ，检测范围较宽，检
测限较低，适用于枇杷花主要有效成分的定量分析。
3．2主要有效成分的含量 比较及方差分析
对 2005、2006、2007年采集 的各地枇杷花样 品
按 2．1，3，2．2．4方法分别进行了总黄酮、齐墩果酸
和熊果酸的含量测定。测定结果和差异性分析见表
3。从表3看出，同一产地不同年份枇杷花样品中主
要有效成分的含量变化较小，但三种主要有效成分
的含量均呈现显著地区差异 。(1)总黄酮含量以四
川龙泉、仁寿、攀枝花及福建莆 田四地相对较高，含
量为 8．792％～9．113 ，与其它产地相 比均有极显
著差异(P<0．01)，四川内江及遂宁的含量最低 ，仅
5．125 ～5．855 。(2)齐墩果酸含量以四川龙泉、
仁寿、浦江和福建莆田四地较高，含量为 0．091 9／6～
0．104 ，四川遂 宁和 内江 的含 量 (0．059 ～
0．069％)显著低于其它产地 (P<0．05或 P≤
O．O1)。(3)熊果酸含量最高的产地是浙江余杭，三
年样品中熊果酸含量均为最高；其次福建莆田、浙江
杭州和湖北黄石其含量也相对较高，并显著高于四
川I遂宁、攀枝花、重庆壁山等地(P<0．01)。(4)多
数产地枇杷花三种成分含量变化规律不完全一致，
如浙江余杭的熊果酸含量较高，但黄酮及齐墩果酸
含量却较低 ；而福建莆田、四川遂宁和内江三地含量
变化较为一致，即福建莆田样品的三种成分含量均
较高，四川遂宁及内江样品含量均较低
3．3枇杷花有效成分含量与地理、气候因子问的相
关性
枇杷花总黄酮、齐墩果酸和熊果酸含量与地理、
气候因子间的相关性分析见表 4。
由分析结果可以看出，齐墩果酸与经度、纬度有一定
的相关性 ，而其它成分的相关性不大。
4 讨论
枇杷花中总黄酮和三萜化合物的含量年际变化
较小，表明其有效成分稳定性较好，有利于开发利
用。在不同地域中植物有效成分的含量会存在一定
的差异。袁珂等(1998)发现熊果酸与齐墩果酸在冬
凌草叶中的含量变化规律极为相似。本研究表明枇
5期 李琪等 ：枇杷花主要有效成分的含量 701
杷花总黄酮与三萜化合物的含量存在着显著地区差
异，而枇杷花中熊果酸与齐墩果酸的含量随地区差
异没有呈现出规律性 ，有可能是受特定的土壤条件
和气候等环境影响，为此在开发利用枇杷花资源时
表 3 枇杷花中总黄酮、齐墩果酸和熊果酸的含量(n=3)
Table 3 The content of total flavonoids．oleanolic acid and ursolic acid in samples(n一3)
注：同一·列中不同大小写字母分别表示0．01和0．05水平显著。
Note：The capital letters and small letters in the same rank showed the significant difference at 0
． 01 and 0．05 lex，els，respectively
表 4 枇杷花有效成分含量与地理、气候因子间的相关性分析
Table 4 The correlative analysis of effective components with climatic and geographical conditions
齐墩果酸 Oleanolic acid
熊果酸 Ursolic acid
0．705
0．564
0．601
0．O85
—0．193
— 0．049
0，361
0．403
— 0．496
— 0．148
702 广 西 植 物 29卷
应选择适宜的产地 。
对表 4所列的 6个地理和气候因子相关性分析
表明，枇杷花总黄酮、齐墩果酸和熊果酸含量与它们
均没有显著相关性。这可能是枇杷花中黄酮等次生
代谢产物与土壤类型和局部特殊气候有密切关系的
原因。成都平原、福建莆田、浙江余杭塘栖等地土壤
深厚肥沃，质地粘重，主要呈酸性，适宜枇杷生长发
育 ，本研究也表明上述三地枇杷花 中主要有效成分
含量显著高于其它产地。遂宁、内江产地 的枇杷花
主要有效成分含量较低可能与这些地区的气候复杂
多样有关，如遂宁的降雨年际变化大、地区分布不均
且降雨集中；内江则有明显的冬干春早现象，夏季降
雨量 占全年的 60 。因此特定 的环境特征 以及气
候因子对枇杷花中有效成分含量的影响还有待于进
一 步研究。
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