全 文 ：广 西 植 物 Guihaia 27(5)：801— 802 2007年 9月
不同采收期紫玉盘中抗癌活性的初步研究
黄永林1，龚受基2，阮 俊1，徐 庆
(1． 篝 广西植物研究所，广西桂林54106；2．桂林医学院，广西桂林54104)
摘 要；对不同采收期紫玉盘植物提取物，采用 SRB法观察其对人口腔上皮癌细胞株(KB)生长的影响进行
抗癌活性检测，结果发现抗癌活性物质随采收期的不同其活性具有显著差异，1o月份采收的紫玉盘植物提取
物体外抗癌活性最强。
关键词：紫玉盘 ；抗癌活性；采收期
中图分类号 ：Q946 文献标识码 ：A 文章编号：1000—3142(2007)05-0801-02
Primary study 0n anticancer activitv 0f Uvaria
microcarpa in different harvest time
HUANG Yong-LinI，GONG Shou—Ji2，RUAN Jun1，XU Qing
(1．Cruangxi Institute of Botany，Cruangxi Zhuangzu Autonomous Region and the Chinese Academy of
Sciences，Guilin 541006，China；2．Cruilin Medical College，Guilin 541004，China)
Abstract：SRB was used tO examine the inhibition rate of different harvest time and dfifferent Uvaria microcarpa ex-
tracts to the KB cel，the result shows that different harvest times lead to different inhibition rate and the October ex—
tracts have the highest inhibition rate tO the KB cel1．
Key words：Uvaria microcarpa；anticancer activity；harvest times
紫玉盘(Uvaria microcarpa)为番荔枝科紫玉
盘属植物，分布于我国广西、广东和台湾等省区。紫
玉盘味苦、性甘，微温，民间用于治疗消化不良，腹胀
腹泻，跌 打损伤 ，腰 腿 疼痛 等 症 (江苏 新 医学 院，
1997)。国内外学者对 紫玉盘属植物 的抗癌活性进
行了大量的研究(符立梧等，1997；杨早，2005；杨世
林等，2000)，但未见有对其进行不同采收期抗癌活
性进行比较研究的报道。我们对采自广西的紫玉盘
植物进行抗癌活性筛选，发现了与文献报道不同的
体外抗癌活性部位(张小玲等，2005)，同时还发现，
在同一地点不同采收期的样品体外抗癌生物活性成
分随着时间变化具有显著差异。本实验以体外对
KB细胞抑制率为指标，通过全年每月定时采收同
一 地点紫玉盘植物进行体外抗癌生物活性检测，并
进行比较，发现其抗癌生物活性成分分布的基本规
律，对深入研究紫玉盘及紫玉盘属其它植物抗癌生
物活性成分分布规律有一定的指导意义，同时对其
它植物生物活性成分的筛选也有一定的参考价值。
仪器 、材料和试剂
1．1仪器
MCO一15AC CO。培养箱(日本三洋公司)，倒置
显微镜 (XSB—IA)(上海长方光学仪器有限公司)，超
净工作台(天津尘埃净化设备厂)，96孑L细胞培养板
(美国Coming公司)，细胞培养盒(美国Coming公
司)，550型酶标仪(美国Bio—Rad公司)，R一114型旋
转蒸发仪(瑞士 Bf~chi公司)。
1．2材料
药材于2004年 1月至 12月每月中旬采自广西
收稿日期：2005—12—18 修回日期：2006—11-20
基金项 目：广西自然科学基金(0342002—3)[Supported by Natural Science Foundation of Guangxi(03420。2—3)]
作者简介：黄永林(1974一)，男 ，广西桂林人，助理研究员，从事天然产物开发利用研究，(E-mail)hyl@gxib．cn。
维普资讯 http://www.cqvip.com
802 广 西 植 物 27卷
防城。经广西植物研究所分类室刘演副研究员生药
鉴定为紫玉盘属植物紫 玉盘 (U．microcarpa)。人
口腔上皮癌细胞株 (KB)引 自中国科学院上海药物
研究所 。
1．3试剂
RPM11640(GIBC0U 公 司)，SBR(Sulforhad-
mine B)(北京瀛海针细化工厂)，小牛血清(美国 In—
vitogen Corporation公司)，乙醇为工业级 ，醋酸、三
氯醋酸、氯仿、乙酸乙酯均为分析纯 ，水为重蒸馏水。
2 实验方法
2．1紫玉盘提取物的制备
将同一地点，每月定时采收的样品，阴干，粉碎
过 4O目，用乙醇提取 3次，时间分别为 3 h，2 h，2
h，过滤，合并滤液，滤液减压浓缩至稠膏状，加 1．5
倍水混悬，氯仿萃取 5次，每次 250 mL，剩余混悬液
用乙酸乙酯萃取 5次，每次 250 mL，合并乙酸乙酯
萃取溶液浓缩至膏状，待用。
2．2人口腔上皮癌细胞株 (KB)的培养
人 口腔上皮癌细胞常规培养于 37℃、5 CO2
的饱和湿度培养箱内，培养液为 1O 的小牛血清、100
u／mL青霉素、100~g／mL链酶素等物质组成的 RP—
MI1640培养液，用0．25 的胰蛋白酶消化传代。
2．3 SRB试验
将增殖 良好，处于指数增长期的细胞，用含
1O 小牛血清的 RPMI164O培养液将细胞分到 96
孔细胞培养板孔中，每孔含 3×lO 个细胞。将紫玉
盘提取物最终浓度定为 0．16>g／mL，0．8>g／mL，4
>g／mL，2O>g／mL的药液加入到 96孔细胞培养板
孔中，在 37℃、5 CO 的饱和湿度培养箱内培养
72 h，弃去培养液，轻轻甩干，用滤纸吸干板孔中的
培养液。每孔中轻轻加入 4℃预冷的5O 三氯醋
酸溶液 5O L，静置 片刻 ，将 96孔板移入 4℃冰箱
放置 30 rain，取出，以去离子水冲洗培养板 4遍，每
孔再加 0．4 SRB(以 l 醋酸配制 )染色剂 5O L，
室温下染色 30 min，弃去各孔内液体，用 1 醋酸溶
液冲洗5遍，除去未结合的染料，每孔中加入 pH为
10．0的 Tris缓冲液 lO0 L(10 mmol／L)，置平板
振荡器振荡 5 min，用酶标仪在 5l5 nm波长检测吸
光度 A值。按下列公式计算细胞抑制率：
细胞抑制率一(1一用药组吸光度 A值)／x~照
组吸光度A值×l。O ，并以SPSS软件统计。
3 结果与分析
将全年每月定 时采收同一地点 的紫玉盘植物 ，
按 2．1项方法制备紫玉盘提取物，按 2．3项方法进
行体外抗肿瘤活性检测 ，结果如表 1、2。
表 1 不同采收期、不同剂量紫玉盘
提取物对 KB细胞的抑制率
Table 1 Inhibition rate of U．microcarpa in different hap
vest time and different extracts dosages to the KB cel1
月份 剂量 (细胞抑制率 )
Month Dosage(t~g／mI )Cel inhibition rate( )
表 2 l0月份紫玉盘提取物对 KB细胞的抑制率
Table 2 Inhibition rate of U．microcarpa
extracts in October to the KB cell
P
口腔上皮癌细胞 (KB)抑制生物活性具有 明显的差
别，9月 、lO月、11月份采收的紫 玉盘生物抑制活性
较强，10月份生物抑制活性最强，IC。达到2．58 g／
mL，且具有显著性差异(P<0．01)，其它月份采收
的紫玉盘提取物生物抑制活性较弱。
4 讨论
(1)本实验采用 NCI近年推荐的一种抗癌药物
(下转第 785页 Continue on page 785)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 O 1 2
维普资讯 http://www.cqvip.com
5期 李桂芬等：紫花芒花芽生长发育规律研究 785
次健壮 的秋 梢作 为来 年 的结 果母 枝 提 供 了理 论
依据 。
参考文献 ：
赵宝军．1997．树莓花芽分化的研究[J]．北方园艺，4：35—37
Li CY(李长缨)，Jian YC(简元才)，Du GC(杜广岑)，et a1．1999．
Research of evaluation method and standard of Sea cabbage’S
winter habit(甘蓝冬性鉴定方法及标准的研究)[J]．Acta Ag—
ric Boreali—Sin(华北农学报)，14(3)；123～127
Li YZ(李永忠)，Ma wH(马蔚红 )．1994．Preliminary study of
Mango flower bud differentiation in weat of Guangdong(粤西地
区芒果花芽 分化初步 研究 )[J]．J Cmangxi Trop Crop Sci
c (广西热作科技)，2：15—17
Lin SZ(林淑增)，Chen ZW(陈宗苇)．1981．The first researchful
reports of Mango flower bud differentiation(芒果花芽分化研
究初报)[J]．Acta Hort Sin(园艺学报)，8(4)：9—14
Rao MM，Bojappa KM．1979．Fruit—bud differentiation in Mango
“AlpLonso and Totapuri”under tropical raing conditionsEJ]．Sci
Hort，10(1)：95—99
Ravishankar H． 1979． Studies on fruit bud difetentiationand
flowering in mango(MangiferⅡindia L．)cv[j]．Alphonso
and Totapuri Hort Abs，49(5)38—70
Samon JA，Li GX(李 国华)．1989．Cultivation of overseas Mango
(国外芒果栽培)EJ]．J Yunnan Trop Crop Sci Tech(云南热作
科技)，4：43—48
Tao YL(陶月良)，Zeng GW(曾广文)，Zhu C(朱成)．2002．The
morphological and anatomical studies on differentiation of floral
buds in cucumbers(黄瓜花芽启始分化的形态解剖研究)[J]．
Guihaia(广西植物)，22(3)
WangcY(王彩云)，Gao LP(高莉萍)，Lu DF(鲁涤非)，et a1．
2002．Study on flower bud morp hological differentiation of Os—
manthus]Yagrans‘Houban Jingui’(‘厚瓣金桂’桂花花芽形态
分化的研究)[J]．Acta Hort Sin(园艺学报)，29(1)：52—56
Xu MX(许明宪)，Huang SZ(黄 尚志)．1962．The physiological
differentiation and morphological differentiation of apple flower
bud(苹果花芽的生理分化和形态分化)[J]．Acta Hort Sin(园
艺学报)，1(2)：137—140
Xue MN(薛妙男)，Wei AH(韦安华)，Chen TT(陈腾土)，et a1．
1991．A study on diferentiation of the flower buds in Shatinyu
Hort(沙 田柚花芽分化研究)[j]．Guihaia(广西植物)，11(2)：
]77一 】8O
(上接第 802页 Continue from page 802)
筛选新方法，SRB(suforhodamine B)法 (王青青等，
2000)，这种筛选方法比以前常用的 MTT筛选方法
更简单、快速、敏感，结果更准确、可靠。
(2)本实验仅对紫玉盘属植物中紫玉盘植物进行
不同采收期抗癌生物活性研究，发现了其分布规律，
抗癌生物活性成分将另文发表。但是，要弄清其积累
规律，以及同属中其它植物抗癌生物活性物质的分
布、积累规律等相关问题，还有待进一步研究。
本研究得到广西植物研究所刘演副研究员的大
力帮助，特此致谢!
参考文献：
江苏新医学院．1997．中药大辞典[M]．上海：上海人民出版社：
3 955
张小玲，阮俊，宋芸娟，等．2005．广西产紫玉盘提取物抗肿瘤活
性的粗筛EJ]．南华大学学报 ·医学版 ，32(5)：695—696
杨早．2005．番荔 枝科植物抗肿瘤作用研究概况[J]．安徽医
药，9(7)；484—485
杨世林 ，余竞光，徐丽珍．2000．番荔枝科植物化学成分及其抗
肿瘤活性[J]．中国医学科学院学报，8(22)：376—82
Fu LW(符立梧 )，Pan QC(潘 启超)，Chen WS(陈文森)，et a1．
1997．The cytotoxicity of the amnonaeeous aeetogenins in vitro
(阿蒂莫耶番荔枝总内酯体外抗肿瘤作用)fJ]．Chin J Cancer
(癌症)，16(6)：409
Wang QQ(王青青)，Yu H(余海)．2000．Studies on application of
SRB cytotoxicity assay in evaluating anti-cancer drugs(SRB显色
法用于抗癌药物敏感性试验的研究)[J]．BullSci Tech(科技
通报)，16(2)：104—107
维普资讯 http://www.cqvip.com