全 文 ：广 西 植 物 Gu i ha ia 1 2 (1 ) :9 5一 3 6 Pe b .19 9 2
绞股蓝的快速繁殖研究 *
王秀琴 刘春惠 林 荣
广西植物研究所 , 桂林 5 41 0 0 6 )
摘要 本文报道以广西四个县所产绞股蓝 , 在 M S 基本培养基中进行茎段培养 , 研究植物 激
素对器官形成的影响。 试验结果表明 , 细胞分裂素 B A 明显促进芽的形成和 增 殖 , B A 和 N A A
或 G A配合使用有助于苗的形成和生长 , 不同产地的绞股蓝类型均能诱导形成丛生芽 , 但 分 化芽
数有差异 。 诱导生根用 1/ 2 M S 附加 N A A 或 I B A , 试管苗一年四季移栽均获得较高的成活率。
幼苗移栽大田生长良好 , 当年可获得较好产量 。
关键词 绞股蓝 ; 快速繁殖 ; 植物激素 ; 器官形成 ; 移栽
绞股蓝 (G y 。 o s t e m m a p e n t a p h y l l u m ( T h u n b · ) M a k i n o ) 为葫芦科多年生草本 植 物 ,
是名贵的中草药 , 含有绞股蓝皂贰50 多种 , 有活化细胞 , 增强机体免疫力 , 降低血脂 , 抗衰
老 , 镇静安眠等作用 , 临床应用还对多种癌细咆有较好的抑制作用 〔 ’ 了 。 近年来绞股蓝 的 开
发利用已引起人们的重视 , 因野生资源不足 , 需要进行人工栽培 。 常规采用插条和 种 子 繁
殖 , 费种材多 , 且受季节限制 , 进行组培快速繁殖研究 , 为绞股蓝种苗生产工厂化提供新途
径 。
材 料 和 方 法
供试材料用广西金秀 、 乐业 、 崇左 、 扶绥等县产的插条苗和实生苗 。 种子经表面消毒后
进行试管播种 , 培养无菌苗 。 当年生嫩茎 , 经O , 1% H g C I : 消毒 3 一 5 分钟 , 用无菌水 冲 洗
3 一 4 次 , 剪成 1 c m 长的带腋芽茎段进行接种。 分化培养基以 M S为基本培养基附加 B A 0 . 5
一 2 . 0 m g 1/ 与 N A A 0 . 1一 1 . 0 m g八或 G A 0 . 5一 2 . 0 m g l/ 配合使用 ; 生根培养基用 1 / 2 M S
附加 I B A 0 . 5一 2 . o m g八 或 N A A O . 1一 1 . o m g八 。 白糖浓度 1 . 5一 3 . 0% , 粉状琼脂 0 . 45 % ,
p H S
.
8
, 以 1 k g / c m z高压蒸气灭菌20 分钟 。 接种后置于25 士 2 ℃ , 每天用 日光灯照光 9 一 10
小时 , 光照强度 1 0 0 0一 1 5 0 0勒克斯 。
结 果 和 讨 论
一 、 植物激案对芽形成的影晌
不同的植物对激素浓度及其组合比例的要求有很大差异 。 M S 培养基附加 不 同 浓 度 的
B A
、
N A A 或 G A 的试验结果表明 ( 表 1 ) , 在各激素弩合的培养基中 , 均能诱导形成芽 、
苗 , 细胞分裂素 B A 明显促进芽的形成和增殖 , B A 和生长素 N A A或G A 配合使用 , 能提高芽
的增殖数和有助于无根苗的形成和生长 , 但要控制适当的浓度 , 以获得一定数量的壮苗 。 当
件张燕玲 、 唐高凤同志参加试验工作 。 李锋同志提供 田间试验数据 , 特此致谢。
6 0广 西 植 物 2 1卷
表 1植物激素对芽形成的影响
激 素 组 合
( m g /L )
外植体
数 量
(块 )
形 成 芽 芽丛 形 成 无 根 苗
拓 个 /块 万 男 株 /块 高度 ( e m )
,户土aJ.人1000ù,Jnliq自八O八b
.…,土1占曰9口弓IQ自,1,勺Q通1nùn.八UfloùnUó0日U六UO“oJ丹J此h任1山Q曰口乙dnj任八月O万八舀OJJqóU,181冉七ù.…,l,éQ白月性冉匀口JC0L,1ó6通任n.U八曰Uonùó甘U通`J口J任月性d占ù,涌M SM S + B A 1 . 0M S + B A 0 . 5+ N A A 0 . 1
M S + B A 1
.
0 + N A A 0
.
1
M S + BA 1
.
5+ N A A 0
.
1
M S + B A 2
.
0 + N A A 0
.
1
M S + B A 1
.
0+ N A A 0
.
3
M S + B A 1
.
0 + N A A 0
.
5
M S + B A 1
.
0 + N A A 1
.
0
M S + B A 1
.
0+ G A 0
.
5
M S + B A 1
.
0 + G A 1
.
0
M S + B A 1
.
0 + G A 2
.
0
1 0 0
1 0 0
1 0 0
1 0 0
1 0 0
1 0 0
1 0 0
1 0 0
1 0 0
1 0 0
1 0 0
1 0 0
7 0
7 0
1 0 0
1 0 0
9 0
1 0 0
1 00
1 0 0
1 0 0
9 0
1 0 0
1 0 0
4
。
8
3
.
3
4
.
5
4
.
0
2
.
9
3
.
0
3
。
3
3
.
8
3
。
7
3
,
2
3
.
7
2
.
6
芽丛 : 形成难以统计的丛生小芽的块数
表2 植物激素对不同产地类型芽分化的影响
种数接 量激 素 组 合 芽 分 化 ( 个 / 块 )
( m g / L )
M S
M S + B A 1
.
0
M S + B A 1
.
0 + N A A 0
.
1
M S + B A Z
`
0 + N A A 0
.
1
M S + B A 1
.
0 + N A A 0
.
3
M S + B A 1
.
0 + G A 0
.
5
M S + B A 1
.
0 + G A 1
.
0
M S + B A 1
.
0 + G A 2
.
0
( 块 ) 崇左 金秀 乐业 扶绥
ó
O八”ù一匕产公民J几nUùU勺自户anùQé九b,`q通
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N A A为 0 . 1 m g / 1 , B A 浓度提高到 1 . 5 m g八时 , 形成许多丛生小芽 , 且 .苗少 , 而 B A为 1 . 0 ` g
l/
,
N A A提高到 1 . 0 m g八时 , 则产生大量愈伤组织 , 影响芽 、 苗的形成 , 这与植物组织 培
养器官发生与激素配比的有关报道相似 〔Z J 。 绞股蓝的分化培养基 以 M S + B A 1 . 0 m g l/ 十
N A A 0
.
1 m g八 或 M S 十 B A 1 . 0 m g / 1 + G A 1 . 0 m g / 1效果较好 。
二 、 不同产地的绞股蓝类型与器官形成的关系
我们采用广西金秀 、 乐业 、 崇左及扶绥等四个不 同产地的绞股蓝类型进行培养 , 结果表
明 ( 表 2 ) , 不 同产地的绞股蓝类型在各种激素组合的培养基中 , 均能诱导形成丛生芽 , 但
分化芽数却有很大差异 , 广西乐业县产的绞股蓝 , 在附加 B A 1 . 0 m g / 1 + G A 1 . 0 m g八的培
养基中分化芽数最多 , 平均分化芽数为 10 . 25 个 , 在 B A浓度相 同的情况下 , 附加 G A 比 N A A
好 ,扶绥县产的绞股蓝在附加 B人 2 . o m g八十 N A A Q . l m g / 1的培养基中分化较好 , 平均分化
1期 王秀琴等 : 绞股蓝的快速繁殖研究
表 3 糖分浓度对器官形成的影响
接 种 形 成 芽
形 个 /块
形 成 无 根 苗 形 成 根
生数均平根率)根解生(数 量 % 株 / 块 高度( e m ) 生 根 情 况
IQ0 2
.
1 4
`
3
1 0 0 2
。
1 4
。
0
1 0 0 2
.
9 4
。
5
1 0 0
1 0 0
1 0 0
3
.
5
2
。
8
苗壮 、 根长 、侧根多
苗壮 、 侧根多 、气生根少
叶枯萎 、 根长 、气生根多
一. 5. 4
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一10Unn甘`U八J从泣任
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表 4 无根苗与生根苗移栽比较试验
率)活多成 (处 理 根生长情况 移栽数量(株 ) 气 产
产an甘ō“八ùOdóU1ù八U
心1. Jl心`上
Qóno,l叮自,目n比jIùO0叮自勺无无根苗
转生根培养 10 天
转生根培养 2 0夭
转生根培养 30天
少 、 短
根多
芽5 . 8 5个 , 附加瓦A A 比G A 好 , 金秀县产的绞股蓝 , 对激素组合及浓度的效应没有明显的差
异 ; 崇左县的绞股蓝对这些激素比例配方 , 其分化芽数偏低 。 这可能是培养材料的种性及生
长环境所致 。
三 、 箱分浓度对器官形成的影晌
在植物组织培养中 , 糖类物质及其浓度对器宫分化的影响已引起注意 , 曾有过这方面的
报道 “ 一 “ 二 。 为了探索绞股蓝组织培养适宜的糖浓度 , 我们进行了不 同糖浓度的比较 试 验 ,
为便于生产上应用 , 采用市售白糖作为碳源 , 试验结果表明 ( 表 3 ) , 2 一 4 %的白糖浓度
对形成丛生芽和苗无明显差异 , 为节约用糖 , 分化培养基采用 2 % 糖浓度为宜 。 1 . 5一 3 . 0%
的白搪浓度虽能 10 %诱导生根 , 但苗的生长状况有一定的差异 , 1 . 5一 2 . 0% 糖浓度长 出 的
侧根较多 , 且苗壮 , 因此诱导生根以此糖浓度为宜 。
绞股蓝的茎段在适宜的培养基中培养 10 天左右腋芽处开始长出芽 , 培养约 3 周腋芽周 围
分化出密集丛生芽 , 并形成无根苗 。 6 一 7 周后进行分管培养 , 将健壮的无根苗转入生根培
养基诱导生根 , 一般转管后两周可长出根 , 获得完整植株 , 将丛生芽和小苗转入新鲜的分化
培养基继代培养 , 增殖速度快 ( 图1一 2 ) 。 一般每隔 6 一 7 周继代一次 , 开始 1一 3 次继代
培养增殖系数低 , 仅 2 一 4 倍 , 从第 4 代以后增殖速度较快 , 以 10 倍甚至 10 多倍速度增殖 ,
为了培育壮苗 , 需调整激素浓度 , 使其保持在 3 一 5 倍的增殖速度为宜 。
四 、 根的诱导
绞股蓝诱导生根较为容易 , 在没有激素的培养基 中亦能形成根 , 但长出根的时间较长 ,
且. 多为气生根 , 根细长 。 经附加各种生长素及不同浓度的试验结果表明 , 以 1 / ZM S + I B A 1 . 0
m g / 1或 N A A 0 . sm g / 1较好 , 生根率达 1 0 % , 且苗壮 , 根系发达 , 气生根少 , 移栽 成 活 率
葵狮笋蕊之
1期 王秀琴等 :绞股蓝的快速繁殖研究 6J
参 考 文 献
〔 l〕 王庆勇 , 1 9 8 4 : 绞股蓝介绍 。 陕西中医学皖学报 , 7 ( 2 ) : 46 一 4 70
〔 2 〕颜昌敬 , 1 9 8 9 : 植物组织培养手册 , 2 0 3 。
( 3 〕王秀琴等 , 1 9 8 5 : 金桔组织培养研究 。 中国柑桔 , ( l ) : 2 0
〔4 〕林 荣等 , 1 9 8 9 : 马蹄莲组织培养和快速繁殖 。 广西植物 , g ( 2 ) : 98 一9 。
〔 5 〕 A . M . K i n n e r s l e y a n d w , E . H e n d e r s o n , 1 9 8 5 : A l t e r n a t i v e e a r b o h y d r a t e s P r o m o -
t e d i f f e r e n t i a t i o n o f p la n t e e 15
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T h e P la n t s w e r e g r o w n w e l l i n f i e dl
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.
K e y w o r d s G少 n o s t e m m a P e 作 t a P h少 I l u 仇 ; r a P i d P r o Pa g a t i o n : P l a n t h o r m o n e s : o r g a -
n o g e n e s i s ; t r a n s P l a n t i n g