全 文 ：2015　第十七卷　第九期　★Vol.17 No.9
〔World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica〕1872
藤黄科（Guttiferae）属于双子叶植物纲五桠果
亚纲的一科。约 35 属 400 余种，泛热带分布。中
国有 5 属（其中 2 属即猪油果属和铁力木属为引种
栽培）约 30 种，分布于湖南、江西以南包括台湾及
西藏东南部在内的各省区。中国的主要属包括藤黄
属、金丝桃属、铁力木属、红厚壳属和黄牛木属等。
此科植物广泛作为食用水果、木材和各种其他天然
产品的来源，也是化工和医药的重要原料，具有广
泛的经济和药用价值 [1,2]。
近年来，随着人们对藤黄科植物研究的不断深
入，从中分离出了大量的黄酮类化合物 [3]、呫吨酮
类化合物 [4,5] 和萜类化合物 [6] 等。其中，异藤黄酚
（Isogarcinol）是多异戊烯基取代的苯甲酮类化合
物，是藤黄酚（Garcinol）的氧化同分异构体，具有
多种生物活性，如抗疟原和抗菌活性 [7,8]。Cen J等 [9]
和 Fu Y等 [10]研究发现，异藤黄酚能够明显抑制 2，4-
二硝基氟苯（Dinitrofluorobenzene，DNFB）诱导的
小鼠耳肿胀、延长同种异体小鼠皮肤移植皮片的存
活时间并明显降低 II 型胶原诱导的小鼠关节肿胀，
有望作为一种新颖低毒的口服免疫抑制剂用于器
官移植排斥和自身免疫性疾病的治疗。因此，本研
究通过对异藤黄酚色谱条件的选择和优化，建立测
定异藤黄酚含量的测定方法，为藤黄科植物资源的
开发及利用提供理论基础和试验依据。
1 仪器与材料
岛津高效液相仪 LC-20A、LCSolution（ver.1.21）
工作站 [ 岛津国际贸易（上海）有限公司 ]；SPD-
20A紫外 -可见检测器［珀金埃尔默（上海）责任有
限公司］；AR2140 电子天平（奥豪斯仪器上海有限
HPLC 测定 7 种藤黄科植物中异藤黄酚的含量＊
刘子金 1，2，蒋尧英 2，张育霞 1，2，李英英 1，2，周 婧 1，2，李东海 1，2，
杨小波 1，2＊＊，岑举人 1，2＊＊
（1. 海南大学热带作物种质资源保护与开发利用教育部重点实验室 海口 570228；
2. 海南大学园艺园林学院 海口 570228）
摘 要：目的：建立测定藤黄科植物中异藤黄酚含量的高效液相色谱分析方法（HPLC）。方法：使用岛津
Inertsil WP300 C18填料色谱柱（4.6 mm×150 mm，5 μm），流动相为甲醇 ׃水 =75׃25，流速为 1.0 mL·min-1，
柱温为 40℃，检测波长 γ为 277 nm。结果：异藤黄酚的线性范围为 0.005 7-0.039 9 μg，平均加样回收率为
99.58%，相对标准偏差（RSD）为 1.25%。山竹子、岭南山竹子、单花山竹子、黄牛木和薄叶红厚壳中异藤黄
酚（Isogarcinol）的含量分别为 0.285%，0.199%，0.857%，0.161%和 0.006%；而越南黄牛木和红厚壳中没检
测出异藤黄酚。结论：该方法简便、准确、灵敏度高，稳定性和重复性好，可用于中药材中异藤黄酚含量的测定。
关键词：高效液相色谱 山竹子 异藤黄酚 检测
doi：10.11842/wst.2015.09.022　　中图分类号：R284.1　　文献标识码：A
　　　收稿日期：2015-06-17
　　　修回日期：2015-07-16
＊　　 海南省科学技术厅自然科学基金面上项目（20153155）：新免疫抑制剂 Isogarcinol在藤黄属、红厚壳属和黄牛木属中生物合成的差异及其关
系的初步研究，负责人：岑举人；海南大学博士科研启动基金项目（kyqd1420）：新免疫抑制剂 Isogarcinol在藤黄属、红厚壳属和黄牛木属中生
物合成的差异及其关系的初步研究，负责人：岑举人；科学技术部国家科技支撑计划子课题（2012BAC18B00）：海岸带及近海生态修复关键技
术与示范，负责人：杨小波。
＊＊　 通讯作者：杨小波，博士生导师，教授，海南大学热带作物种质资源保护与开发利用教育部重点实验室主任，主要研究方向：热带农业与森林生
态系统保护；岑举人，博士，讲师，主要研究方向：热带药用植物资源及其活性物质研究。
〔World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica〕 1873
世界科学技术—中医药现代化★中药研究
公司）；XO-5200DTD超声波清洗器（南京先欧仪器
制造有限公司）；HC-500T2 高速多功能粉碎机（永
康市天棋盛世工贸有限公司）。
异藤黄酚对照品（海南大学热带作物种质资
源保护与开发利用教育部重点实验室自制，纯度
=97.64%）；甲醇为色谱纯，水为超纯水，其余试剂
为分析纯；经海南大学热带作物种质资源保护与开
发利用教育部重点实验室主任杨小波教授鉴定，7
种植物采集正确。材料见表 1。
2 试验方法
2.1  色谱条件
色谱柱为岛津 Inertsil WP300 C18 填料色谱
柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）；流动相为甲醇 ׃ 水
=75׃25；检测波长 γ 为 277 nm，进样量为 20 μL；流
速为 1.0 mL·min-1；柱温为 40℃。
2.2  对照品溶液的制备
精密称取异藤黄酚标准品 5 mg，置于具塞锥形
瓶中，加入 75% 甲醇 5 mL，浸泡过夜，超声溶解，放
冷，即得对照品溶液。
2.3  标准曲线绘制
取对照品溶液，按照“2.1”项下的色谱条件，依
次进样 2、4、6、8、10、12 和 14 μL，记录相应的色谱
面积，以峰面积为纵坐标（Y），系列对照品溶液浓度
为横坐标（X），利用 Execl 2003 软件进行线性回归
曲线绘制。
2.4  供试品溶液制备
取样品粉末（过 60 目筛）0.5 g，精密称定，置具
塞锥形瓶中，精密加入 75%甲醇 5 mL，密塞，称定重
量，浸泡过夜，超声处理（功率 100 W，频率 40 kHz）
30 min 两次，放冷，再称定重量，用 75% 甲醇补足
减失的重量，摇匀，离心，过滤，取滤液，即得。
3 试验结果
3.1  色谱图获取
取对照品和山竹子供试品溶液，按照“2.1”项
下的色谱条件进样检测获取色谱图（见图 1）。
3.2  线性关系考察
取对照品溶液，按照“2.1”项下的色谱条件，依
次进样 2、4、6、8、10、12 和 14 μL，记录相应的色谱
面积，以峰面积为纵坐标（Y），系列对照品溶液浓度为
横坐标（X）进行线性回归。回归方程为 Y=2.036 27×
106X-116 647，r=0.999 9，异藤黄酚进样量在 0.005 7-
0.039 9 μg 范围内呈良好的线性关系。
3.3  精密度考察
取对照品溶液，在上述色谱条件下，连续进样 6
次，每次 20 μL，测定得到异藤黄酚含量的相对标准
偏差（Relative Standard Deviation，RSD）为 0.52%，
表明仪器精密度良好。
3.4  重复性考察
精确制备 6 份供试品溶液，在上述色谱条件
下，分别进样，每次 20 μL，异藤黄酚含量的 RSD 为
1.37%，表明重现性良好。
3.5  稳定性考察
取供试品溶液，在上述色谱条件下，分别于 0、
2、4、6、24、32 h 吸取 20 μL，进样分析并记录峰面
图 1 异藤黄酚对照品及山竹子树皮中异藤黄酚的 HPLC 色谱图
注：A.异藤黄酚对照品，B.异藤黄酚。
表 1 材料名称及来源
序号 种名 采集地 个体数
1 红厚壳 Calophyllum inophyllum 海口市演丰镇 3
2 薄叶红厚壳 C. membranaceum 陵水市吊罗山 3
3 山竹子Garcinia mangostana 五指山市毛道乡 3
4 岭南山竹子G. oblongifolia 陵水市吊罗山 3
5 单花山竹子G. oligantha 陵水市吊罗山 3
6
黄牛木
Cratoxylum cochinchinense 昌江市霸王岭 3
7 越南黄牛木 C. formosum 昌江市霸王岭 3
2015　第十七卷　第九期　★Vol.17 No.9
〔World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica〕1874
积，异藤黄酚含量的 RSD 为 0.94%，表明样品溶液
在 32 h内稳定。
3.6  加样回收率考察
精密称取已知含量的样品（0.285%）溶液 1 mL 6
份，每份准确加入异藤黄酚对照品溶液（C=1 mg·mL-1）
285 μL，制备供试品溶液后，进行测定。结果见表
2，异藤黄酚的平均加样回收率在 99.58%，RSD 为
1.25%，表明测定的加样回收率良好。
3.7  样品测定
分别取 7 种藤黄科植物树皮样品各 6 份，共
42 份样品，其中每个个体取 2 份，精密称定。按照
“2.3”项下方法制备供试品溶液，进样 20 μL，记录
色谱峰，计算异藤黄酚的含量。山竹子、岭南山竹
子、单花山竹子、黄牛木和薄叶红厚壳中 Isogarcinol
的 含 量 分 别 为 0.285%、0.199%、0.857%、0.161%
和 0.006%；而越南黄牛木和红厚壳中没检测出
Isogarcinol。总体上看，藤黄属植物（山竹子、岭南
山竹子、单花山竹子）中 Isogarcinol 的含量很高，
红厚壳属中 Isogarcinol 的含量很少甚至没有。此
外，在黄牛木属植物中，黄牛木中有一定含量的
Isogarcinol，而越南黄牛木中没有检测到 Isogarcinol
的含量（见图 2）。
4 讨论
异藤黄酚是最早从藤黄属植物印度藤黄
（Garcinia indica）中分离出来的多异戊烯基取代的
苯甲酮类化合物 [11]，现代药理实验表明其具有抗肿
瘤、抗疟原虫和抗菌等药理作用。而且最新研究结
果显示，异藤黄酚在动物水平上具有明显的免疫抑
制作用，有望作为一种新颖低毒的口服免疫抑制剂
用于器官移植排斥和自身免疫性疾病的治疗 [9]。因
此，本研究建立一种测定藤黄科植物中异藤黄酚含
量的方法具有重要的意义。
本研究分别采用不同的提取方法（包括超声和
回流）、不同的甲醇浓度和不同的超声时间，最终发
现在 75%的甲醇浓度下，超声提取 2次，每次 30 min，
能够获得异藤黄酚的最佳提取率，缩短提取时间。
此外，通过采用紫外 - 可见分光光度法，将对照品
溶液在 200-400 nm 条件下进行扫描，发现对照品
溶液在 277 nm 处有最大吸收值，因此选择 277 nm
作为测定波长。同时，在色谱条件选择过程中，本
试验分别比较了甲醇 - 磷酸二氢钾水溶液、甲醇 -
水、乙腈 - 水 3 个不同的流动相系统，经过多次条
件的优化洗脱，初步确定了以甲醇 -水作为流动相，
并对比了甲醇 - 水不同浓度比对分离效果的影响，
最终确定以甲醇 -水（75׃25）系统作为流动相。
本研究结果表明，藤黄属植物（山竹子、岭南山
竹子、单花山竹子）中异藤黄酚的含量很高，而红厚
壳属中异藤黄酚的含量很少甚至没有。藤黄属和红
厚壳属都属于藤黄科，然而其中的异藤黄酚含量却
有很大的差异，原因可能是异藤黄酚生物合成中关
键酶存在差异。异藤黄酚是多异戊烯基取代的苯甲
酮类化合物，而苯甲酮类化合物可能是黄酮类生物
合成途径中主要的中间产物 [12]，具体地说可能是黄
表 2 加样回收试验（n=6）
样品质量 /mg 样品含量 /μg 异藤黄酚加入量 /μg 异藤黄酚测得量 /μg 回收率 /% 平均回收率 /% RSD/%
1 000 285 285 564.46 99.03
99.58 1.25
1 000 285 285 557.74 97.85
1 000 285 285 563.13 98.79
1 000 285 285 575.62 100.99
1 000 285 285 569.94 99.99
1 000 285 285 574.83 100.85
图 2 7 种藤黄科植物中异藤黄酚含量
〔World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica〕 1875
世界科学技术—中医药现代化★中药研究
酮类生物合成途径中关键酶存在差异，因此，本课
题组以后将从生物合成途径方面进行深入研究，探
究其含量差异的原因。
总之，本研究建立了一种测定藤黄科植物中异
藤黄酚含量的高效液相色谱分析方法，为异藤黄酚
的资源保护和开发利用提供理论基础和试验依据。
1 中国科学院植物志编辑委员会 . 中国植物志 . 北京 : 科学出版社 ,
1990׃ 111-112.
2 Hemshekhar M, Sunitha K, Sebastin Santhosh M, et al. An overview on
genus garcinia: phytochemical and therapeutical aspects. J Phytochem
Rev, 2011, 10(3)׃ 325-351.
3 Kumar S, Sharma S, Chattopadhyay S K. The potential health benefit
of polyisoprenylated benzophenones from Garcinia and related genera:
ethnobotanical and therapeutic importance. Fitoterapia, 2013, 89׃ 86-125.
4 Deng Y X, Guo T, Shao Z Y, et al. Three new xanthones from the resin
of Garcinia hanburyi. Planta Med, 2013, 79(9)׃ 792-796.
5 Niu S L, Li Z L, Ji F, et al. Xanthones from the stem bark of Garcinia
bracteata with growth inhibitory effects against HL-60 cells.
Phytochemistry, 2012, 77׃ 280-286.
6 张俊艳 , 韩英梅 , 常允平 . 藤黄属植物的化学成分和药理作用研究
进展 . 现代药物与临床 , 2012, 27(3)׃ 297-303.
7 Marti G, Eparvier V, Litaudon M, et al. A new xanthone from the bark
extract of Rheedia acuminata and antiplasmodial activity of its major
compounds. Molecules, 2010, 15(10)׃ 7106-7114.
8 Rukachaisirikul V, Naklue W, Sukpondma Y, et al. An antibacterial
biphenyl derivative from Garcinia bancana MIQ. Chem Pharm Bull
(Tokyo), 2005, 53(3)׃ 342-343.
9 Cen J, Shi M, Yang Y, et al. Isogarcinol is a new immunosuppressant.
PloS one, 2013, 8(6)׃ e66503.
10 Fu Y, Zhou H, Wang M, et al. Immune regulation and anti-inflammatory
effects of isogarcinol extracted from Garcinia mangostana L. against
collagen-induced arthritis. J Agric Food Chem, 2014, 62(18)׃ 4127-4134.
11 Krishnamurthy N, Lewis Y S, Ravindranath B. On the structures of
garcinol, isogarcinol and camboginol. Tetrahedron Lett, 1981, 22(8)׃
793-796.
12 Padhye S, Ahmad A, Oswal N, et al. Emerging role of Garcinol, the
antioxidant chalcone from Garcinia indica Choisy and its synthetic
analogs. J Hematol Oncol. 2009, 2׃ 38.
Determination of Isogarcinol in Seven Guttiferae Plant Species by HPLC
Liu Zijin1,2, Jiang Yaoying2, Zhang Yuxia1,2, Li Yingying1,2, Zhou Jing1,2,
Li Donghai1,2, Yang Xiaobo1,2, Cen Juren1,2
(1. Key Laboratory of Protection and Development Utilization of Tropical Crop Germplasm Resources,
Ministry of Education, Hainan University, Haikou 570228, China;
2. College of Landscape Architecture, Hainan University, Haikou 570228, China)
Abstract: This study was aimed to establish a HPLC method for the determination of isogarcinol. Daojin
Inertsil WP300 C18 (4.6 mm × 150 mm, 5 μm) was employed with methanol and water (75׃25) as the mobile
phase. The flow rate was 1.0 mL·min-1. The column temperature was set at 40°C. The detection wavelength
γ was set at 277 nm. The results showed that the linear range of isogarcinol was 0.005 7-0.039 9 μg. The
average recovery rate was 99.58%. The relative standard deviation (RSD) was 1.25%. The contents of
isogarcinol in Garcinia mangostana, Garcinia oblongifolia, Garcinia oligantha, Cratoxylum cochinchinense
and Calophyllum membranaceum were 0.285%, 0.199%, 0.857%, 0.161% and 0.006%, respectively.
Isogarcinol was not detected in Cratoxylum formosum or Calophyllum inophyllum. It was concluded that the
method was convenient, accurate with high sensitivity, good stability and repeatability. It can be used for
determination of isogarcinol content in Chinese herbal medicine.
Keywords: HPLC, guttiferae, Isogarcinol, determination
（责任编辑：刘馨雨　张志华，责任译审：王　晶）
参考文献