全 文 ：·中药及天然药物 ·
RP-HPLC法测定湖南产藤黄科植物元宝草中金丝桃苷的含量
闵　江1 ,刘向前1 ,张晓丹1 ,姚金鹏2(1.中南大学制药工程系 , 湖南 长沙 410083;2.长沙博海生物科技有限公司 , 湖南
长沙 410004)
摘要:目的　采用 RP-H PLC 法测定元宝草中有效成分金丝桃苷的含量。方法　使用 ODS 柱(150 mm×4.6 mm , 5 μm);流动相
为甲醇-0.025 mol· L-1磷酸溶液(50∶50), 流速 0.5 m L·min-1;检测波长 363 nm ,外标法定量 ,测定元宝草中的金丝桃苷的含
量。结果　金丝桃苷的线性范围为 0.254 4～ 1.272 μg , r =0.999 9 ,加样回收率为 98.3%, RSD为 1.9%。结论　方法简便 , 快
速 ,准确。
关键词:元宝草;金丝桃苷;RP-H PLC
中图分类号:R927.2　　　文献标识码:A　　　文章编号:1004-2407(2007)05-0241-02
Determination of hyperoside in Hypericum sampsonii Hance by RP-HPLC
MIN Jiang1 , LIU Xiang-qian1 , ZHANG Xiao-dan1 , YAO Jin-peng 2(1.Department of Pharmaceutical Engineering , Central South
University , Changsha 410083 , China;2.B road-Ocean Bio-Science & Technique Co.L td , Changsha 410000 , China)
Abstract:Objec tive To determine the content of hypero side in Hype ricum sampsonii H ance by RP-HPLC.Methods The analy sis of
hypero side was carried out on an ODS column(150 mm×4.6 mm , 5μm).The mobile phase was MeOH-0.025 mo l· L-1H3PO4(50∶50).
The flow-r ate was 0.5 m L·min-1 .The de tection wave length w as 363 nm.Results The line r range o f hypero side w as 0.254 4 ～
1.272 μg.The recovery was 98.3% and RSD w as 1.9%.Conclusion The me thod is sim ple , fast and accurate.
Key words:Hy pericum sampsonii Hance;hypero side;RP-HPLC
　　元宝草(Hy pericum sampsoni i Hance)系金丝
桃科(Hypericaceae )金丝桃属(Hypericum Linn.)
多年生药用植物 ,广泛分布于我国长江流域以南各省
区〔1〕 ,为中国特有品种。传统理论认为其有治内出
血 、抗风湿 、调经 、止血 、生肌 、治肝炎等功效。金丝桃
苷为藤黄科植物主要有效成分 ,属黄酮类化合物 ,具
有凉血止血 、活血祛瘀 、清热解毒 、散郁结等功效〔2〕 。
主治吐血 、咯血 ,外用于创伤出血 、痈疖肿毒 、烧烫伤
等。据文献〔3〕报道 ,对治疗肿瘤有特殊效果。已有文
献报道了测定贯叶连翘 、鱼腥草 、照白山等植物中金
丝桃苷含量的方法 ,但测定元宝草中金丝桃苷的含
量尚未见报道 。笔者采用 RP-HPLC 法测定元宝草
中金丝桃苷的含量 ,为开发药用植物资源和品质评
价提供依据 。
1　仪器与试药
1.1　仪器　日本岛津 LC-10 AT vp色谱仪;SPD-10
Avp检测器 , LC-10 A Tvp 二元泵;AUW-D 型电子
分析天平(Shimadzu Corporat ion)。
1.2　试药　元宝草(饮片 ,批号 050818)购自湖南三
湘中药饮片公司 ,经中南大学制药工程系刘向前教授
鉴定为元宝草(Hypericum sampsoni i Hance);金丝
桃苷对照品购自中国药品生物制品检定所;乙腈(色谱
纯),甲醇(色谱纯),水为双蒸水 ,其它试剂为分析纯。
2　方法和结果
2.1　色谱条件　岛津 VP-ODS色谱柱(150 mm×4.6
mm ,5 μm);流动相为甲醇-0.025 mol·L-1磷酸溶液
(50∶50);检测波长为363 nm;流速为0.5 mL·min-1 ;
柱温30 ℃。
2.2　溶液的制备
2.2.1　对照品溶液的制备　精密称取金丝桃苷对照
品 11.357 0 mg 于 50 mL 量瓶中 ,加甲醇 45 mL 后
超声溶解 20 min ,冷却 ,定容至刻度 ,即得 。
2.2.2　元宝草供试液的制备　取元宝草干燥药材粗
粉过 60目 ,精密称取 2 g ,加入石油醚 50 mL ,加热回
流脱脂 1 h ,过滤 ,挥干滤渣 ,加入 50 mL 甲醇回流提
取 4 h ,过滤 ,定容至 50 mL ,即得 ,色谱图见图 1。
图 1　高效液相色谱图
A-金丝桃苷对照品;B-元宝草供试品溶液
2.3　线性关系考察　精密量取 2.2.1下的金丝桃苷
对照品溶液 2 ,4 ,6 , 8和10μL 进样 ,以进样量为横坐
标 ,峰面积为纵坐标进行回归分析 ,得回归方程:Y =
22 597 630X -11 721.08 , r =0.999 9。说明进样量
在 0.254 4 ～ 1.272 μg 范围内呈良好线性。
2.4　精密度实验　精密量取金丝桃苷对照液 10 μL
进样 ,重复进样 5次 , RSD 为 0.28%,表明该方法有
良好的精密度。
241西北药学杂志　2007 年 10 月　第 22 卷　第 5 期
2.5　稳定性实验　取新配制的金丝桃苷供试液 ,进
样 10 μL ,以后每 1.5 h进样 1 次 ,共进样 5次 , RSD
为 0.65%,表明金丝桃苷在 7.5 h内基本稳定。
2.6　重现性实验　元宝草药材粗粉过 60目筛 , 40
℃干燥4 h ,取约1.0 g ,精密称定 ,按 2.2.2项下制得
供试液 5份 ,每份取 10 μL 进样。测得金丝桃苷的平
均含量为 0.037%, RSD为 1.52%,说明该方法具有
很好的重现性。
2.7　加样回收率实验　精密称取已知金丝桃苷含量
的元宝草药材 3份 ,每份约 1 g ,分别精密加入金丝桃
苷对照品(0.071 2 mg ·mL-1)3 , 4和 5 mL ,按样品
测定同法进行 ,其回收率和平均回收率见表 1。
表 1　金丝桃苷加样回收实验结果
样品量/g 样品含量/m g 加入量/m g 测得量/mg 回收率/ % 平均回收率/ % RSD/%
0.999 6 0.369 8 0.213 7 0.567 0 95.5
1.001 4 0.370 5 0.284 9 0.670 9 98.8 98.3 1.9
1.009 6 0.373 6 0.356 2 0.816 6 100.6
2.8　样品含量测定　取 2.2.2 项下的供试品溶液 ,
进样 10 μL ,测定金丝桃苷的峰面积 ,由外标法计算
含量 ,重复进样 3次 ,取其平均值 ,测得元宝草中金丝
桃苷的含量为 0.037%。
3　讨论
实验表明湖南产藤黄科植物元宝草中含有金丝桃
苷 ,其含量测定方法未见报道 ,笔者采用 RP-HPLC法测
定了该植物中金丝桃苷的含量 ,结果表明该方法稳定性
和重现性均较好 ,是一种较好的含量测定方法。
参考文献:
〔1〕　中国植物志编辑委员会.中国植物志[ M] .第 50 卷(第 2
分册).北京:科学出版社 , 1990.65.
〔2〕　全国中草药汇编编委会.全国中草药汇编[ M] .上册.
北京:人民卫生出版社 , 1975.124.
〔3〕　Song BW , Ma CG , Xu SY.Hyperin:a new peripheral anal-
gesic agent[ J] .Asia Pac J Pharmacol , 1988 , 3(1):1～ 5.
(收稿日期:2006-11-06)
反相高效液相色谱法测定石榴皮中
没食子酸的含量
霍　文 ,刘占军 ,张婷婷(华北煤炭医学院药学系 , 河北
唐山 063000)
摘要:目的　建立石榴皮中没食子酸的含量测定方法。方法
采用反相高效液相色谱法测定石榴皮中没食子酸的含量。色
谱柱为 C18柱 , 流动相为甲醇-0.05%磷酸溶液(5∶95), 流速
0.8 mL · min-1 , 检测波长 273 nm。 结果 　没食子酸在
0.021 3～ 0.341 mg· L-1范围内线性关系良好 , r =0.999 9;
平均回收率为 99.7%;RSD为 0.6%。结论　方法简便 、快速 ,
准确可靠 ,重复性好 ,可为石榴皮药材的质量控制提供参考。
关键词:石榴皮;没食子酸;高效液相色谱法;含量测定
中图分类号:R927.2　　　文献标识码:A　　　
文章编号:1004-2407(2007)05-0242-02
石榴皮是石榴科植物石榴 Punica granatum L.
的干燥果皮 。石榴属于石榴科石榴属落叶灌木或小
乔木 ,原产于伊朗及阿富汗等中亚地区 ,至西汉张骞
出使西域得涂林安石榴引入我国〔1〕 。石榴皮是《中国
药典》历版收载的品种 ,其主要成分为没食子酸 ,有涩
肠止泻 、止血 、驱虫的功效 ,临床用于久泻 、久痢 、便
血 、脱肛 、崩漏 、白带 、虫积腹痛等〔2〕 。石榴皮还具有
抗病毒 、抗菌 、抗癌 、抗氧化等药理活性。石榴皮中所
含鞣质类成分有没食子酸 、石榴皮亭 A 、石榴皮亭 B
等〔3〕 。中国药典通过鞣质测定法测定其中鞣质的含
量 ,对石榴皮中多种有效成分还不能测定 。本实验采
用高效液相色谱法对 2批不同产地的石榴皮中的没
食子酸进行含量测定 ,结果稳定 ,重复性好 ,为石榴皮
药材质量控制提供依据。
1　仪器与试药
1.1　仪器 　KQ-100型超声波清洗器(昆山市超声
仪器有限公司);KDC-1042低速离心机(科大创新股
份有限公司中佳分公司);FA1004 HANGPING 电
子天平(上海精科天平);Diamonsil C18柱(150 mm ×
4.6 mm ,5 μm);美国 AGILEN T1100高效液相色谱
仪 ,AGIKEN T 工作站。
1.2　试药　没食子酸对照品(中国药品生物制品检
定所 , 批号 110831-200302 ,供含量测定用);甲醇为
色谱纯(天津永大化学试剂开发中心);其它试剂均为
分析纯 ,水为双蒸水。
石榴皮药材购于唐山市医药公司药材站 ,产地河
北 ,经我院药学系生药教研室鉴定为石榴科植物石榴
Punica granatum L.的干燥果皮。
2　方法与结果
2.1　色谱条件及系统适用性实验　Diamonsil C18柱
(150 mm×4.6 mm ,5 μm),流动相为甲醇-0.05%磷
酸溶液(5∶95),流速为 0.8 mL·min-1 ,检测波长为
273 nm ,进样量 20 μL。在此条件下 ,没食子酸的色
谱峰分离良好 ,分离度均大于 1.5 ,保留时间约为 12
min ,见图 1。
图 1　HPLC图
A-没食子酸对照品;B-石榴皮样品
2.2　对照品溶液的制备　精密称取干燥至恒重的没
食子酸对照品 0.002 13 g ,置 50 mL 量瓶中 ,用体积
分数 50%甲醇稀释至刻度 ,摇匀 ,即得对照品溶液 ,
质量浓度为 0.042 6 g ·L-1 。
242 西北药学杂志　2007 年 10 月　第 22 卷　第 5 期