全 文 ：第 30 卷 第 6 期
2 0 1 2 年 6 月
中 华 中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol． 30 No． 6
Jun． 2 0 1 2
中
华
中
医
药
1390
学
刊
芸香科柑桔属黄酮类成分质量研究
史锐，吴品昌
(辽宁中医药大学，辽宁 沈阳 110847)
摘 要:利用反相高效液相色谱定量法进行 10 种芸香科柑橘属生药中橙皮苷、柚皮苷等黄酮类成分进行了
质量标准研究。采用 phenomsil C18(250mm × 4． 6mm，5u)色谱柱，橙皮苷、柚皮苷等黄酮类成分以甲醇—磷酸三
乙胺溶液(1000mL水中含有 1． 7mL磷酸和 1． 8mL三乙胺) (1 ∶ 2)为流动相。其中橙皮普、柚皮苷分别在 0． 2170
～ 2． 1680μg·μL －1，0． 2152 ～ 2． 1520μg·μL －1浓度范围内，线性关系良好(r = 0． 997、0． 996、0． 992) ;三者加样
回收率分别为 97． 9%，97． 4%。测定结果显示不同原植物和产地来源的各橘属生药中黄酮类成分种类及含量具
有显著的差异;且随着果实成熟程度的增加，黄酮类成分的含量均有下降的趋势;而整个果实黄酮类成分含量，大
于某一部分。为药材的标准化研究提供科学的方法和试验依据。
关键词:橘属;橙皮苷;柚皮苷;高效液相色谱法
中图分类号:R284． 1 文献标识码:A 文章编号:1673 － 7717(2012)06 － 1390 － 02
收稿日期:2012 － 01 － 15
作者简介:史锐(1979 －) ，男，辽宁本溪人，讲师，研究方向:化学教
学和药物合成、分析研究。
芸香科柑桔属(Cirtrus sp．)药材中的橙皮苷、柚皮苷等
生物类黄酮(bioflavonoids)成分由于具有抗自由基、抗癌、
防癌以及防治心血管疾病等广泛药理作用而日益受到青
睐［1］，日本等国以开发出了富含柑橘黄酮的青橘提取物，
用于预防和治疗生活习惯病。枳实、枳壳、陈皮、青皮、橘
核、橘络、橘叶、化橘红、佛手、香橼枳实、枳壳、陈皮和青皮
均为芸香科橘属(Citrus sp．)中药，被收载于《中华人民共
和国药典》(2005 年版)中［2］。上述生药具有相似的化学成
分与药理功效。上述生药具有相似的化学成分与药理功
效。
本实验对 10 种橘属生药的化学品质进行了比较研究，
采用 HPLC法测定了 10 批市售药材样品中生物橙皮苷、柚
皮苷等黄酮类成分的含量，枳实作为理气药应用历史悠久，
其苦泄辛散，沉降力强，有良好的破气消枳导滞之功，主治
食枳痰滞不消，胸腹痞满胀痛。为建立芸香科柑桔属(Cir-
trus sp．)生药药材质量评价方法以及枳实提取物和柑橘黄
酮提取物原料药材的选择提供研究依据。
1 对照品、试剂与仪器
对照品:橙皮苷和柚皮苷(中国药品生物制品检定所)
试剂:甲醇(色谱纯，山东禹王实业有限公司禹城化工
厂;分析纯，天津博迪化工有限公司) ;三乙胺(沈阳东兴试
剂厂) ;磷酸(分析纯，沈阳化学试剂厂) ;水为重蒸水(本室
自制)
仪器:AG—245 型电子分析天平(瑞士 Mettl － erToldeo
公司) ;电子分析天平(日本 A＆D 有限公司) ;DL—360 型
超声波清洗仪(浙江象山县石浦海天电子仪器厂) ;H—26F
型离心机(日本 Kokusna公司) ;PHS—ZC 型数字式酸度计
(上海虹益仪器厂) ;微型粉碎机旧本 Master 公司) ;ZDHW
调温电热套(北京市光明医疗仪器厂)
2 HPLC仪器及色谱条件
HPLC仪器:Waters 高效液相色谱仪(Water Model 510
泵;LC － 10UV 检测器) ;江申色谱工作站;
色谱柱:phenomsil c18 BDS(250 × 4． 6mm，5u)
色谱条件:橙皮苷、柚皮苷:流动相:甲醇—磷酸三乙胺
溶液(1000mL水中含有 1． 7mL磷酸和 1． 8mL三乙胺) (1∶
2) ;流速:1． 0mL /min;柱温:25℃;检测波长:284nm;灵敏
度:0． 02AUFS;进样量:10μL。
3 供试溶液及对照溶液制备
3． 1 供试品溶液制备 取柑橘属中药粉末约 0． 4g，精密
称定，置 150mL具塞锥形瓶中，精密加甲醇 25mL，称定重
量，超声处理(功率 250W，频率 42kHz)30min，放冷，再称定
重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，即得。
3． 2 对照品溶液制备 取对照品橙皮苷 2． 71mg、柚皮苷
2． 69mg，精密称定，分别置于 25mL 量瓶中，加甲醇稀释至
刻度，摇匀，作为对照品溶液。
4 定量法
精密吸取各对照品溶液及样品供试溶液 10μL，按 1． 2
项色谱条件进样分析，每个样品测定 3 次。由外标法计算
各供试品中橙皮苷、柚皮苷含量。
5 结 果
5． 1 提取条件考察 ①取江西枳实药材粉末 0． 4g，3 份，
精密称定，分别置 150mL 的具塞锥形瓶，250mL 圆底烧瓶
及索氏提取器中，加 25mL 甲醇，分别进行超声处理，回流
处理和索氏提取，做为供试品溶液，测定橙皮苷、柚皮苷的
含量。结果显示:江西枳实采用不同提取方法，结果超声提
取江西枳实中橙皮苷、柚皮苷含量最高，因此采用超声提
取，方法简单。
②取江西枳实药材粉末 0． 4g，4 份，精密称定，置
150mL的具塞锥形瓶中，精密加 25mL 甲醇，分别超声处理
(功率 250W，频率 42kHz)10、20、30、60min，做为供试品溶
液，测定橙皮苷、柚皮苷的含量。结果显示:江西枳实采用
甲醇不同超声时间提取，结果当甲醇超 60min时，江西枳实
中橙皮苷、柚皮苷含量最高，但 30min含量分别为最高值的
100%，99． 8%，表明超声 30min橙皮苷基本提取完全。
③取江西枳实药材粉末 0． 4g，3 份，精密称定，置
150mL的具塞锥形瓶中，分别精密加 25mL 甲醇、乙醇、乙
腈，超声处理(功率 250W，频率 42kHz)30min，做为供试品
溶液，测定橙皮苷、柚皮苷的含量。结果显示:江西枳实采
用不同提取溶剂提取，结果当用甲醇超 30min时，江西枳实
中橙皮苷、柚皮苷含量最高。
0931
DOI：10.13193/j.archtcm.2012.06.208.shir.056
第 30 卷 第 6 期
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提取条件的选择:本研究分别对提取方法、提取溶
剂、提取时间进行了考察，确定提取条件为:取本品粉末
约 0． 4g，精密称定，置 150mL 具塞锥形瓶中，精密加甲
醇 25mL，称定重量，超声处理(功率 250W，频率 42kHz)
30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇
匀，即得。
5． 2 检测波长选择 文献报道黄酮类成分检侧波长分别
280nm、283nm等，本研究测得 2 种黄酮类成分的紫外吸收
图谱以及不同波长下的光谱图。橙皮苷最大吸收波长为
284． 5nn，柚皮苷为 283． 3nm，因此选择 284nm 为黄酮类成
分检测波长。
5． 3 色谱条件的选择 本法中采用的甲醇—磷酸三乙胺
溶液(1 ∶ 2)系统对橙皮苷等黄酮类成分具有良好的分离
度，各色谱峰峰形尖锐，并具有经济、对环境污染小等优点。
5． 4 色谱系统适用性试验 理论塔板数按橙皮苷、柚皮苷
峰计算均为 10000 以上。2 种组分色谱峰与相邻峰之间分
离度大于 1． 5，拖尾因子在 0． 8 ～ 0． 9 之间。
5． 5 线性关系考察 精密吸取已配制好的对照品溶液
2． 0，5． 0，10． 0，15． 0，20． 0μL，按 1． 2 项下色谱条件进样分
析，以对照品进样量横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲
线。回归方程为:橙皮苷 y = 5． 0 × 106 x + 155153 r =
0． 9996;柚皮苷 y = 6． 0 × 106 x + 259942 r = 0． 9992。
结果表明橙皮苷在 0． 2170 ～ 2． 1680μg，柚皮苷在 0． 2152 ～
2． 1520范围内线性关系良好。结果表明，各指标成分在相
应浓度范围内线性关系良好。
5． 6 精密度试验 仪器精密度:精密吸取各对照品溶液
10μL，按 2 项下色谱条件进样分析，重复测定 5 次，橙皮苷、
柚皮苷对照品峰面枳 RSD 值为 1． 7%，1． 3%，表明仪器精
密度良好。
5． 7 稳定性试验 精密吸取江西枳实供试品溶液，置于透
明量瓶中，于 0、2、4、6、8、10h按 2 项色谱条件进样分析，测
定样品中橙皮苷、柚皮苷峰面枳，室温条件下 RSD 值为
1． 5%、1． 1%，说明样品在 10h内稳定。
5． 8 重复性实验 取江西枳实药材粉末供试品 0． 4g，5
份，精密称定，照供试品溶液制备方法制备，每次进样
10μL，测得橙皮苷、柚皮苷含量，结果橙皮苷、柚皮苷含量
相对标准偏差为 1． 1%、1． 6%，小于 3%，表明方法重复性
较好。
5． 9 回收率试验 ①取已知含量的江西枳实药材粉末约
0． 2g，5 份，精密称定，精密加入橙皮苷对照品溶液
(1． 0212mg /mL)25mL，按 3 项下制备方法制备，依法测定，
计算回收率为 99． 0%。
②取已知含量的江西枳实药材粉末约 0． 2g，5 份，精密
称定，精密加入柚皮苷对照品溶液(0． 4100mg /mL)25moL，
按 3 项下制备方法制备，依法测定，计算回收率为 98． 7%。
上述结果表明:本方法作为 Citrus 属药材中黄酮类成分的
定量法是适当的。
5． 10 含量测定 依法测定了 17 批市售柑橘属药材样品
中橙皮苷、柚皮苷两种黄酮类指标成分，江西枳实(产地)
12． 28%、4． 93%(以下药材含量皆以橙皮苷、柚皮苷先后为
序) ，大连枳实(商品地)0． 88%、7． 51%，广东陈皮(产地)
5． 12%、0，黄岩陈皮(产地)6． 98%、0，湖南陈皮(产地)
7． 28%、0，四川陈皮(产地)8． 42%、0，沈阳陈皮(商品地)
5． 32、0，大连枳壳(商品地)0、3． 38%，江西枳壳(产地)0、
3． 83%，四川枳壳(产地)0、4． 62%，大连香椽(商品地)0、
2． 24%、广西香椽(产地)0、2． 82%，江西青皮(产地)
9． 76%、0，湖南桔核(产地)0． 73%、0，湖南桔叶(产地)
1． 26%、0． 85%，广西化桔红(产地)1． 93%、1． 68%，湖南桔
络(产地)6． 29%、0，佛手中未检出橙皮苷和柚皮苷成分。
6 讨 论
(1)本研究建立了 HPLC法测定芸香科柑桔属(Cirtrus
sp．)生药枳实、枳壳、陈皮、青皮、橘核、橘络、橘叶、化橘红、
佛手、香橼中橙皮苷、柚皮苷 2 种指标成分含量的定量分析
方法。方法学考察表明:该方法操作简单，结果准确，是综
合评价和控制芸香科柑桔属(Cirtrus sp．)生药药材质量的
可行而有效的方法。
(2)黄酮类成分在 Cirtus属各药材中的分布:本实验所
测各橘属生药结果:枳实各样品中四川和江西品中含有橙
皮苷、柚皮苷，湖南和广东品中含有橙皮苷;枳壳各样品中
均含有柚皮苷，且其各样品中柚皮苷含量均大于 2%，符合
2005 年版药典规定;陈皮各样品中含有橙皮苷，且橙皮苷
含量不少于 5%，符合药典规定，青皮样品中含有橙皮苷，
且橙皮苷含量不少于 5%，亦符合药典规定。橘络样品中
含有橙皮苷，且橙皮苷含量不少于 5%，符合药典规定。化
桔红和橘叶样品中含有橙皮苷和柚皮苷，含量小于 2%。
香橼样品中含有柚皮苷，含量小于 3%。橘核含有柚皮苷，
含量小于 2%。而且佛手中基本无黄酮类成分。上述原料
药材测定结果显示:不同原植物和产地来源的各 Citurs 属
药材中黄酮类成分种类及含量均有显著的差异。且随着成
熟程度的增加，黄酮类成分的含量亦有下降的趋势;而整个
果实黄酮类成分含量，大于某一部分，即橘叶、橘核、橘络低
于陈皮。
(3)相同品种各药材的内在品质比较研究:中药材的
化学成分复杂，包括有效成分和无效成分，中药的诸成分之
间具有协同和拮抗作用。中药功效多样，一个成分难以代
表一味中药，某个作用不能概括其全部功效，其药效往往是
多种成分相互作用的结果，将所测芸香科柑桔属各样品中
所含的辛弗林、黄酮类成分以及挥发油的平均含量作评价，
可看出 Citurs属药材中均含有药效成分黄酮类成分比辛弗
含量高的多。枳实药材中主要成分为橙皮苷，其次为柚皮
苷，且总黄酮含量为最高;枳壳中则是柚皮苷含量占主导地
位，总黄酮含量低于枳实;陈皮和青皮中黄酮类成分主要为
橙皮苷。香橼中是柚皮苷含量占主导地位，但总黄酮含量
较低。佛手中基本无黄酮类成分。橘络、橘叶、橘核等含黄
酮类成分，且低于陈皮和青皮。
本实验建立了 PIILC法测定不同产地橘属药材样品中
橙皮苷和柚皮苷 2 种指标成分含量的定量分析方法，从实
验上证明了该法是综合评价和控制芸香科柑桔属药材质量
的可行而有效的方法。
参考文献
［1］ 陈修，黄倩霞，周铁军，等． 枳实及其升压有效成分与多巴
胺、多巴酚丁胺对心脏功能和血液动力学的对比研究［J］．
药学学报，1980，15(2) :71 － 76．
［2］ 国家中医药管理局《中华本草》编委会． 中华本草:第 4 卷
［M］．上海:上海科学技术出版社，2002:874，880．
［3］ 李秀玲，李龙，肖红斌，等．反相高效液相色谱法侧定枳实、枳
壳中橙皮贰和抽皮贰的含量［J］． 色谱，2002，20(6) :585 －
586．
1931