全 文 ：收稿日期:2008-02-17;　修订日期:2008-11-10
基金项目:国家科技支撑计划重点项目(No.2007BAI25B05);
国家中医药管理局中医药科技研究专项课题 (No.06 -
07ZP43);
四川省青年基金项目(No.07ZQ026-011)
作者简介:夏　清(1982-),男(羌族),四川绵阳人 ,现为西南民族大学在
读硕士研究生 ,学士学位 ,主要从事民族药物研究工作.
＊通讯作者简介:刘　圆(1968-), 女(汉族),重庆忠县人 , 现任西南民族
大学副教授 ,博士学位 ,主要从事民族药及中药教学与科研工作.
反相高效液相色谱法测定鬼针草属药材
不同药用部位和不同品种中槲皮素的含量
夏　清 , 刘　圆＊ , 李　莹
(西南民族大学少数民族药物研究所 ,成都 四川　610041)
摘要:目的 建立鬼针草属药材中槲皮素的含量测定方法并比较鬼针草属不同药用部位和不同品种中槲皮素的含量。
方法 KromasilC18柱(4.6 mm×250 mm, 5 μm), 柱温 30 ℃;流动相为甲醇 -0.4 %磷酸水溶液(41∶59);检测波长 360
nm;流速 1ml· min-1。结果 槲皮素在 0.02 ～ 0.80 μg, 峰面积与进样量具有良好的线性关系 ,回归方程 Y=3×106X-
33 404, R2 =0.999 9(n=5),平均回收率 99.87%。鬼针草属药材各部位和各品种中槲皮素的含量分别为:根 0.075 %,
茎 0.48 %,叶 1.4 %,狼杷草 0.095 %,白花鬼针草 0.677%, 婆婆针 0.329 %, 三叶鬼针草 0.085 %。结论 该法简便 、
准确 、重复性好 ,可以作为控制鬼针草属药材质量的方法之一;就化学成分槲皮素的角度考虑 ,不同部位以叶入药最好 ,
其次是茎 , 因此建议鬼针草属药材以地上部分为好;就不同种而言 ,以白花鬼针草槲皮素含量最高 ,质量最好。
关键词:鬼针草属;　槲皮素;　反相高效液相色谱法
中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2009)03-0584-02
DeterminationofQuercetininDifferentPartsandDifferentSpeciesofHerbBidensby
RP-HPLC
XIAQing, LIUYuan＊ , LIYing
(EthnicPharmaceuticalInstituteofSouthwestUniversityforNationalities, Chengdu610041, China)
Abstract:ObjectiveTodevelopanRP-HPLCmethodtodeterminequercetininHerbBidens, andtoinvestigatethecontentof
quercetinindifferentpartsanddifferentspeciesofHerbBidens.MethodsTheanalysiswascarriedoutat25℃ onaKromasilC18
columnelutedwithamobilephaseconsistingofamixtureofMethanol-(0.4 %phosphoric)acidwater(41∶59).Theflowrate
was1 ml· min-1 , thedetectionwavelengthwas360nm.ResultsThecalibrationcurvewaslinearwithintherangeof0.02 ～ 0.80
μg(r=0.999 9).Theaveragerecoverywas99.87%.Thecontentintheroot, bark, leafofBidenspilosaL.was0.075%,
0.48%, 1.4% respectively, andthecontentinBidenstriparticaLinn., BidensbipinataL.var.ratiataSch-Bip., Bidensbipin-
nataLinn., BidenspilosaLinn.was0.095%, 0.67%, 0.329%, 0.085% respectively.Conclusion Thismethodissimple, ac-
curate, replicateandsuitableforthedeterminationofquercetininHerbBidens.Consideringtoquercetin, thecontentofleafin
BidenspilosaL.andBidensbipinataLinnarehigher.Soitissuggestedthatleafandstemcanbeusedasmedicine, andBidens
bipinataLinnisbetterthanothers.
Keywords:HerbBidens;　Quercetin;　RP-HPLC
　　鬼针草为菊科植物鬼针草属多种植物的全草 , 药材资源丰
富 , 广泛分布于热带及温带地区 , 遍布全国各地 ,极易采集。根据
文献报道 , 鬼针草属多种植物含有槲皮素成分 [ 1];槲皮素具有抗
肿瘤 、抗炎 、抗菌 、抗病毒 、镇痛 、抗血小板聚集 、扩张冠状动脉等
作用 [ 2～ 4] 。 《中国药典》尚未收载鬼针草药材的质量标准。 《贵
州中药材标准》收载三叶鬼针草 BidenspoilsaL.、鬼针草 Bidens
bipinataLinn.的干燥全草 , 《湖南中药材标准》收载三叶鬼针草
BidenspoilsaL.的干燥地上部分 , 《甘肃中药材标准 》 1995年收
载鬼针草 BidensbipinataLinn., 《广西中药材标准》 1990年收载
三叶鬼针草 BidenspoilsaL.、白花鬼针草 BidenspoilsaL.var.ra-
diataSch.-Bip.的干燥全草 ,河南中药材标准 1991年收载三叶
鬼针草 BidenspoilsaL.、鬼针草 BidensbipinataLinn.、金盏银盘
Bidensbiternata(Lour.)Merr.EtSherff.的干燥全草 , 《上海中药
材标准 》收载鬼针草 BidensbipinataLinn.(婆婆针)的干燥地上部
分 [ 5] 。从国内地方标准收载情况可以看出全国各地均有广泛的
应用 , 入药部位为全草或地上部分 , 本实验拟采用 RP-HPLC法
建立鬼针草属药材中槲皮素的含量测定方法并比较鬼针草不同
药用部位和不同种中槲皮素的含量 ,为该类药材的传统入药部位
是否正确和质量评价提供参考依据。
1　仪器与材料
美国 waters2695高效液相色谱仪 , VWD检测器;鬼针草采自
云南红河州 、广西 , 经刘圆副教授和戴斌教授鉴定为菊科鬼针草
属植物狼杷草 BidenstriparticaLinn., 白花鬼针草 BidenspilosaL.
var.ratiataSch-Bip., 婆婆针 BidensbipinataLinn., 三叶鬼针草
BidenspilosaLinn.的干燥全草;槲皮素(批号 081-9304, 中国药
品生物制品检定所 ,含量测定用);甲醇为色谱纯;水为二次重蒸
水;其余试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2.1　色谱条件 KrosmasilC18柱(4.6 mm×250 mm, 5 μm),柱温
30℃, 流动相为甲醇 -0.4 %磷酸水溶液(41∶59), 检测波长 360
nm, 流速 1ml· min-1。槲皮素峰可以达到基线分离 , 峰形对称 ,
分离度好 ,按照槲皮素峰计 , 理论塔板数不应低于 5 000。见图 1
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时珍国医国药 2009年第 20卷第 3期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2009VOL.20NO.3　
～ 8。
t/min　　　　　　　　　　　　　　　t/min
1.槲皮素　　　　　　　　　　　　　1.槲皮素
图 1　槲皮素对照品色谱图　　图 2　三叶鬼针草(云南产)根色谱图
t/min　　　　　　　　　　　　　　　t/min
1.槲皮素　　　　　　　　　　　　　1.槲皮素
图 3　三叶鬼针草(云南产)茎色谱图　　图 4　三叶鬼针草(云南产)叶色谱图
t/min　　　　　　　　　　　　　　　t/min
1.槲皮素　　　　　　　　　　　　　1.槲皮素
图 5　狼杷草色谱图　　　　　　　　图 6　白花鬼针草色谱图
t/min　　　　　　　　　　　　　　　t/min
1.槲皮素　　　　　　　　　　　　　1.槲皮素
图 7　婆婆针色谱图　　　图 8　三叶鬼针草色谱图
2.2 　供试品溶液的制备
2.2.1　对照品溶液的制备 精密称取槲皮素对照品适量 , 加甲醇
配置成 0.04 mg· ml-1的溶液。
2.2.2　样品溶液的制备 称取鬼针草药材粉末(过 40目筛)约
1.0 g,精密称定 , 置圆底烧瓶中加入甲醇 -25﹪盐酸溶液(4∶
1)25 ml,称定重量 , 加热回流 1h,取出 , 冷却至室温 , 用上述混合
溶液补足减失重量 , 摇匀 ,过滤 , 取续滤液 , 过 0.45 μm的微孔滤
膜 , 作为样品溶液。
2.3　线性关系的考察 分别精密量取上述对照品溶液 0.5, 2, 4,
8, 20 μl, 在上述色谱条件下测定峰面积。以进样量(μg)为横坐
标 , 峰面积为纵坐标绘制标准曲线 , 回归方程为 Y=3 ×106X-
33 404, R2 =0.999 9(n=5)。结果表明槲皮素在 0.02 ～ 0.80 μg
范围内与峰面积具有良好的线性关系。
2.4　精密度实验 精密吸取对照品溶(0.04 mg· ml-1)10 μl, 重
复进样 6次 , 测得峰面积的 RSD为 0.97 %(n=6)。结果表明精
密度良好。
2.5　稳定性实验 精密量取样品溶液 10μl,分别于 0, 2, 4, 6, 8 h
测定。按照槲皮素对照品峰面积计算 RSD为 0.6%(n=6)。结
果表明样品溶液在配制后 8h内稳定。
2.6　重复性实验 取同一批样品溶液 ,精密称取 6份 , 按 “ 2.2”
项下方法制备样品溶液 ,按照 “ 2.1”项下色谱条件测定槲皮素的
含量 , RSD为 1.6%(n=6),表明重复性良好。
2.7　回收率实验 精密称取 9份已知含槲皮素量的药材粉末
0.25 g, 依次加入低 、中 、高 3种质量浓度槲皮素对照品溶液 , 按
“ 2.2”项下方法制备样品溶液 , 按照 “ 2.1”项下色谱条件测定。
结果平均回收率为 99.87%, RSD为 0.9%(n=9)。
2.8　样品含量测定 按 “ 2.2.2”项下方法制备供试品溶液 ,再按
照 “ 2.1”项下方法测定 , 不同部位测定结果见表 1, 不同种测定结
果见表 2。
表 1　三叶鬼针草不同部位中槲皮素的含量 %
部位 产 地 含量
根 云南红河州 0.075
茎 云南红河州 0.480
叶 云南红河州 1.400
表 2　鬼针草属不同种中槲皮素的含量 %
品种 产地 含量
狼杷草 广西全州材湾 0.095
白花鬼针草 广西平乐 0.677
婆婆针 广西临贵盘山 0.329
三叶鬼针草 广西南宁 0.085
3　讨论
实验曾考察了甲醇 -0.4 %磷酸溶液(50∶50);甲醇 -0.4
%磷酸溶液(45∶55);甲醇 -0.4 %磷酸溶液(40∶60);甲醇 -
0.4 %磷酸溶液(41∶59)为流动相 , 流速 1 ml· min-1 , 柱温
30℃, 以 KromasilC18柱(4.6 mm×250 mm, 5 μm)为分析柱。 本
实验以甲醇 -0.4 %磷酸溶液(41∶59)为流动相 , 槲皮素峰可以
达到基线分离 ,峰形对称 , 分离度好。本法简便 、准确 、重复性好 ,
可以作为控制鬼针草属药材质量的标准之一。
就化学成分槲皮素的角度考虑 , 不同部位以叶入药最好 , 其
次是茎 ,因此建议鬼针草属药材以地上部分为好;就不同种而言 ,
以白花鬼针草槲皮素含量最高 ,质量最好。
参考文献:
[ 1 ] 　张延昌 ,张永民.鬼针草的研究现状与应用前景 [ J] .山东教育学院
学报 , 2004, 104(3):79.
[ 2 ] 　吕　蔡 ,张　杰.槲皮素的药理作用 [ J] .国外医药· 植物药分册 ,
2005, 20(3):108.
[ 3 ] 　宋玉乔 ,姚凌云.槲皮素的药理作用研究近况 [ J] .西北药学杂志 ,
2002, 17(1):40.
[ 4 ] 　朱宇同 ,王艳芳 ,王新华.槲皮素药理作用研究进展 [ J] .天然产物
研究与开发 , 2003, 15(2):171.
[ 5 ] 　黎跃成.药材标准品种大全 [ M] .成都:四川科学技术出版社 ,
2001:43.
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