全 文 ：第 44 卷第 5 期
2016 年 3 月
广 州 化 工
Guangzhou Chemical Industry
Vol. 44 No. 5
Mar. 2016
姜科植物益智儿茶素含量测定分析研究*
田建平1，胡远艳2，王俊芳3
(1 海南医学院药学院，海南 海口 571199;2 海南大学热带生物资源教育部重点实验室，
海南 海口 570228;3 海南医学院药学院本科生，海南 海口 571199)
摘 要:对益智不同部位和储藏年份中儿茶素含量进行了研究。利用超声提取和紫外分光光度法，在检测波长 280 nm处测
定样品吸光度，计算儿茶素含量。结果表明:提取儿茶素最适宜的条件为 80%乙醇、1∶10 料液比，超声提取时间 40 min;平均
加样回收率为 92. 5%，ＲSD = 0. 074%(n = 5) ;益智不同部位的儿茶素含量依次为种子(0. 50%)＞叶(0. 49%)＞茎(0. 21%)＞果
皮(0. 06%) ;不同储藏年份的益智果实儿茶素含量依次为 2014 年产(0. 48%)＞ 2013 年产(0. 46%)＞ 2012 年产(0. 36%)。益智叶
为一类值得开发的药用资源;同时应大力改善储藏条件，以减少益智有效成分含量的损失。
关键词:益智;儿茶素;含量测定
中图分类号:Ｒ931. 6 文献标志码:A 文章编号:1001 － 9677(2016)05 － 0149 － 03
* 基金项目:海南医学院科研培育基金 (HY2012 － 024)。
第一作者:田建平 (1972 －) ，男，副教授，主要从事生药学研究。
Study on Determination of The Content of Catechin in Alpinia oxyphylla*
TIAN Jian － ping1，HU Yuan － yan2，WANG Jun － fang3
(1 School of Pharmaceutical Sciences，Hainan Medical University，Hainan Haikou 571199;
2 Key Laboratory for Tropical Biological Ｒesources，MOE，Hainan University，Hainan Haikou 570228;
3 Undergraduate of School of Pharmaceutical Sciences，Hainan Medical University，Hainan Haikou 571199，China)
Abstract:The content of Catechin in different parts of Alpinia oxyphylla and the content of the Catechin in different
storage years of fruit of A. oxyphylla were studied. Ultrasonic extraction and ultraviolet spectrophotometric methods were
used，and detection wavelength was in 280 nm. Ｒesults showed that the most suitable conditions were 80% ethanol，1∶10
ratio，40 min of ultrasonic extraction time，the average recovery rate was 92. 5%，ＲSD =0. 074% (n = 5)． The content
of catechin in different parts of A. oxyphylla was seed (0. 50%)＞ leaf(0. 49%)＞ stem (0. 21%)＞ pericarp(0. 06%) ，
and the content of fruit in different storage years was 2014 (0. 48%)＞ 2013(0. 46%)＞ 2012(0. 36%)． Leaf of
A. oxyphylla was a kind of medicinal resources worth developing，and the storage conditions should be improved，so as to
reduce the loss of the content of the effective components of fruit of A. oxyphylla.
Key words:Alpinia oxyphylla;Catechin;content determination
四大南药之一的益智仁源于姜科 (Zingiberaceae)山姜属植
物益智 (Alpinia oxyphylla Miq．)的干燥成熟果实，具有暖肾固
精、温脾止泻等重要作用。益智植物主要分布于海南和广东，
常生长于林下阴湿环境，其中海南是益智的主产地［1］。益智的
化学成分种类复杂，至今研究较多的种类主要有挥发油、二芳
基庚烷类、倍半萜类、黄酮、甾体和有机酸、酚类等多种成
分［2 － 4］。但益智所含儿茶素的化学成分含量至今未见文献报
道。儿茶素作为一种酚类物质，具有防治心血管疾病、抗衰
老、预防癌症、抗菌等多种功能，因此是一种重要的生物活性
物质，在食品，药品和化学工业等方面应用非常广泛。鉴于儿
茶素在医药方面的重要性，因此有必要研究分析儿茶素在益智
中的含量，同时通过比较益智植物不同部位儿茶素的含量及不
同储藏时期益智仁中儿茶素含量的差异，为重要南药益智的适
宜开发、仓储保管和可持续性利用提供科学依据。
1 仪器、试剂与材料
1. 1 仪 器
粉碎器;电子分析天平;超声仪;Ｒ －200 旋转蒸发仪，德
国 Büchi;干燥箱;750S 紫外分光光度仪， Perkin Elmer
Spectrometer Lambda。
1. 2 试 剂
儿茶素对照品 (中国食品药品检定研究院提供，110877 －
201203)。其他试剂均为国产市售分析纯。
1. 3 材 料
益智仁，分三年 (2012 年 7 月至 2014 年 7 月)购买，常
规储存，产区均为海南屯昌，同时将 2014 年产益智仁分别解剖
为种子、果皮，将海南屯昌产的益智植物的茎和叶分别采集，
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自然风干后在 50 ℃干燥箱中干燥至恒重，粉碎，备用。
2 方 法
2. 1 供试品溶液的制备
采用超声法提取益智中儿茶素，取益智植物各部位和不同
贮藏年份的益智仁样品适量，粉碎 40 目过筛，每样品精密称
取 5. 00 g，放入具塞瓶中，加入 80%乙醇 150 mL，在 70 ℃超
声仪中超声提取 30 min，提取三次。趁热离心，收集上清液，
旋转蒸发仪回收上清液中的乙醇，温度 50 ℃，至无醇味后冷
却至室温，收集浓缩液置 250 mL 量瓶中，用蒸馏水定容后，
摇匀，作为供试品溶液，备用。
2. 2 对照品溶液的制备
准确称取干燥至恒重的 4. 00 mg儿茶素标准品作为对照品，
用 80%乙醇溶解并定容于 25 mL 容量瓶中，得 0. 16 mg /mL 的
对照品贮备液。
2. 3 空白对照品溶液
以 80%乙醇做空白对照品溶液。
2. 4 方法学考察
2. 4. 1 测定波长的选择
精密量取儿茶索对照品溶液 2. 0 mL 于 10 mL 容量瓶中，
用 80%乙醇定容。用 80%乙醇作对照，于紫外分光光度计上在
200 ～ 600 nm波长范用内进行扫描，确定最大吸收波长。
2. 4. 2 线性关系考察
分别精密吸取 0. 16 mg /mL的儿茶素对照品溶液 1. 0、2. 0、
3. 0、4. 0、5. 0、6. 0 mL置于 10 mL 容量瓶中，用 80%乙醇定
容，摇匀，以 80%乙醇作对照，分别测定各对照品溶液的吸光
度。以儿茶素对照品浓度(X)为横坐标，吸光度(Y)为纵坐标
绘制标准曲线，考察线性关系。
2. 4. 3 稳定性试验
取同一供试品溶液，分别在常温下于第 0、2、4、6、8、
12、24 h后测定吸光度，计算吸光度相对标准偏差 (ＲSD)值。
2. 4. 4 精密度试验
精密吸取儿茶索对照品溶液 3. 0 mL 于 10 mL 容量瓶中，
用 80%乙醇定容，测定其吸光度值，重复 5 次，计算吸光度
ＲSD值。
2. 4. 5 加样回收率试验
采用加样回收法。精密量取 5 份已知浓度的儿茶素提取液
5. 0 mL，分 3 次注入已知浓度的儿茶素对照品溶液，摇匀，测
定吸光度，计算回收率及 ＲSD值。
2. 4. 6 正交试验
表 1 正交试验因素水平设计
Table 1 Design of orthogonal test factors
水平
因素
(A)
料液比 /(g /mL)
(B)
提取时间 /min
(C)
乙醇浓度 /%
1 1∶8 25 70
2 1∶10 40 80
3 1∶12 60 90
在单因素试验的基础上，以儿茶素含量为指标，设计三因
素三水平的正交试验优化提取工艺(表 1) ，试验条件为:超声
波提取，每组试验超声功率为 240 W，提取温度为 30 ℃。
2. 5 儿茶素含量测定
准确称取不同部位和年份的益智样品粗粉，按“2. 1”项
下方法分别配制成供试品溶液，测定其吸光度，重复三次，计
算儿茶素的含量。
3 结 果
3. 1 方法学考察结果
3. 1. 1 检测波长
结果表明，样品在 280 nm 波长处有最大吸收，因此确定
检测波长为 280 nm。
3. 1. 2 线性关系
根据线性关系考察结果，得到线性回归方程:y = 25. 696x －
0. 0242，相关系数 r = 0. 9995。结果表明儿茶素对照品溶液在
0. 016 ～ 0. 096 mg /mL浓度范围内，吸光度与浓度呈良好的线性
关系 (图 1)。
图 1 儿茶素标准曲线
Fig. 1 Standard curve of catechin
3. 1. 3 稳定性
吸光度 ＲSD值为 1. 2%，表明样品在 24 h内稳定。
3. 1. 4 精密度
6 次测定的吸光度分别为 1. 1872、1. 1864、1. 1855、
1. 1867、1. 1846、1. 1865，ＲSD 值为 0. 079%(n = 6) ，表明方
法精密度良好。
3. 1. 5 回收率
结果表明，平均加样回收率为 92. 5%，ＲSD 值为 0. 074%
(n = 5)。
3. 1. 6 正交试验结果
表 2 正交试验结果
Table 2 Orthogonal test results
编号
(A)
乙醇浓度
(B)
料液比
(C)
提取时间
A
儿茶素得
率 /%
1 1 1 1 1. 0694 1. 33
2 1 2 2 1. 0941 1. 36
3 1 3 3 1. 1352 1. 41
4 2 1 2 1. 1516 1. 43
5 2 2 3 1. 2339 1. 53
6 2 3 1 1. 1845 1. 47
7 3 1 3 1. 1434 1. 42
8 3 2 1 1. 1434 1. 42
9 3 3 2 1. 1352 1. 41
K1 1. 37 1. 38 1. 41
K2 1. 48 1. 44 1. 4
K3 1. 42 1. 43 1. 45
Ｒ 0. 11 0. 06 0. 05
第 44 卷第 5 期 田建平，等:姜科植物益智儿茶素含量测定分析研究 151
三因素及三水平正交试验及正交试验结果见表 2 所示，由
Ｒ可看出乙醇浓度的影响最大，料液比与提取时间的影响较
小，最佳提取工艺为 80%的乙醇，1∶10 料液比，提取时间
40 min。
3. 2 儿茶素含量测定
不同部位和不同储藏年份的益智中儿茶素平均含量见表 3
所示。
表 3 不同部位和不同储藏年份的益智中儿茶素平均含量
Table 3 Average content of catechin of Alpinia oxyphylla
in different storage years and different parts
样品 平均含量 /% ＲSD /% n
茎 0. 21 1. 9 3
叶 0. 49 2. 3 3
果皮 0. 06 2. 1 3
种子 0. 50 2. 6 3
2012 产果实 0. 36 2. 9 3
2013 产果实 0. 46 2. 3 3
2014 产果实 0. 48 1. 8 3
4 分析与讨论
4. 1 益智植物不同部位中儿茶素含量比较
本研究表明，在益智植物中叶所含有的儿茶素含量较高，
与药用部位果实的含量差别不大，但益智植物叶与果实的生物
量相比较，叶显著要大。因此益智叶是一种不容忽视的可开发
的有用资源。就益智果皮和种子中所含儿茶素而言，儿茶素主
要存在于种子中，种皮中儿茶素的含量非常低，因此传统上益
智仁去壳使用有其科学性。
4. 2 不同储藏年份的益智仁儿茶素含量比较
由于不同储藏年份的中药随着贮藏年份的增加，其有效成
分含量将持续下降。有关益智主要成分挥发油的研究证实了这
一结论［5］。本研究考察了 3 年中益智仁所含儿茶素含量的变
化。本研究也证明了上述观点，在常规储藏条件下，益智仁所
含儿茶素的含量变化将随储藏年份的增加将显著减少，因此如
何做好仓储工作，降低药材质量的损耗是一个值得大力研究的
课题。
参考文献
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檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵
339 － 342．
(上接第 130 页)
参考文献
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