全 文 ：!#
两种岩白菜属植物根茎黄酮和多糖的提取及抗氧化活性研究
陈! 蕉，#，黎云祥，#，!，陈光登，#，杜武庭，#
（!西华师范大学生命科学学院，四川南充 #$%&&’；
’西华师范大学四川省高校环境科学与生物多样性保护重点实验室，四川南充 #$%&&’）
摘( 要：以两种岩白菜属植物根茎为材料，在测定并比较黄酮和多糖含量的基础上，利用体外法研究了其对亚硝酸盐
和羟自由基的清除作用。结果表明，天全岩白菜根茎黄酮含量大于峨嵋岩白菜，而峨嵋岩白菜根茎多糖含量大于天全
岩白菜。清除亚硝酸盐能力大小为：峨嵋岩白菜根茎黄酮 )天全岩白菜根茎黄酮 ) *+ )天全岩白菜根茎多糖 )峨嵋
岩白菜根茎多糖；清除羟自由基能力大小为：天全岩白菜根茎黄酮 )峨嵋岩白菜根茎黄酮 ) *+ )峨嵋岩白菜根茎多
糖 )天全岩白菜根茎多糖。
关键词：岩白菜，黄酮，多糖，抗氧化性
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中图分类号：I4’&!’( ( ( ( 文献标识码：J( ( ( ( 文 章 编 号：!&&’,&$&#（’&&K）&$,&&KL,&M
收稿日期：’&&L,&%,’L( !通讯联系人
作者简介：陈蕉（!KLM,），女，硕士，研究方向：药用植物有效成分研究。
基金项目：四川省科技厅应用基础研究项目（’&&LNO&!!!）；四川省杰
出青年学科带头人培养计划项目（&MPQ&’#,&M%）；四川省
重点学科建设项目（4PR&M’&）。
( ( 虎耳草科岩白菜属（!#$%&’）植物为民间常用
中草药，其根状茎和全草均可入药。味甘，微涩，性
凉，具有清热解毒、止血止咳的作用，不仅广泛用于
肠炎、痢疾、吐血、咯血、咳嗽，还具有抗菌抗炎和一
定的免疫增强作用［!，’］。其主要成分岩白菜素已被
《中华人民共和国药典》收为镇咳祛痰药，用于慢性
支气管炎，目前已制成片剂用于临床［$］。岩白菜还具
有食用、观赏等广泛的开发利用价值。黄酮和多糖是
目前倍受关注的天然活性产物，都具有抗氧化及抗
自由基、防癌抗癌等［M］作用。峨嵋岩白菜（!(&%)&)
+O9G）和天全岩白菜（!*&’%+,’%&%)&) NIS86）为四
川产的两种岩白菜［T，#］，其化学成分及抗氧化方面的
研究未见报道。本文对这两种岩白菜根茎黄酮和多
糖进行提取和含量比较，并对体外清除羟自由基和
亚硝酸盐进行比较研究，为进一步提取分离岩白菜
活性成分及合理开发这一极具潜力的中草药提供理
论基础。
! 材料与方法
=! 材料与仪器
岩白菜( ’&&% 年 MUT 月采集于四川省天全县，
DOI:10.13386/j.issn1002-0306.2009.03.005
!!
经西华师范大学生命科学学院秦自生教授鉴定为虎
耳草科岩白菜属植物峨嵋岩白菜（!#$%&’ (&%)&)
!#$%）和天全岩白菜（!#$%&’ *&’%+,’%&%)&) & ’
()*）。样品洗去泥沙，阴干，粉碎后过 +, 目筛；浓硫
酸、蒽酮、葡萄糖、无水乙醇、芦丁（中药固体制剂制
造技术国家工程研究中心，编号：-,./0,+,.-1）、三
氯化铝、对氨基苯磺酸、20-0苯基乙二胺盐酸盐、亚
硝酸钠、抗坏血酸等化学试剂3 均为分析纯；实验用
水3 为蒸馏水。
/45 型紫外可见分光光度计3 上海精密科学仪
器有限公司；6778*9:;< =8>8);?@ 移液器 3 德国
6778*9:;<；塞多利斯 A’-5BC电子天平3 塞多利斯科
学仪器（北京）有限公司；DEB05 型低速离心机3 北
京医用离心机厂；AF!GH旋转蒸发仪3 瑞士 AF!GH；
EI$0B 型电子恒温水浴锅 3 北京中兴伟业仪器有
限公司；CGI0HHHE 循环水式真空泵3 上海亚荣生化
仪器厂。
!#$ 实验方法
-5-3 岩白菜根茎黄酮和多糖的提取
-5--3 岩白菜根茎黄酮的提取3 准确称取 JK 岩白
菜根茎粉末，置于圆底烧瓶中，先以石油醚回流除去
脂质，然后加入 +,LD +,M 乙醇，在热水浴中浸提
J@，浸提两次，结束后抽滤，收集滤液，经旋转蒸发仪
浓缩，配制成 -,,LD的粗黄酮溶液。
-5-53 岩白菜根茎多糖的提取3 准确称取 JK 岩白
菜根茎粉末，置于圆底烧瓶中，先以石油醚回流除去
脂质，然后加入 +,LD 蒸馏水，在热水浴中浸提 J@，
浸提两次，结束后抽滤，收集滤液，经旋转蒸发仪浓
缩到一定体积，收集浓缩液至三角瓶中，加入 J 倍量
的无水乙醇，搅拌以沉淀多糖，放于 BN冰箱过夜。
离心收集沉淀物，回收乙醇。所得沉淀依次用无水
乙醇、丙酮、无水乙醚洗涤数次。挥干溶剂后，沉淀
用水溶解，配制成 -,,LD粗多糖溶液。
-553 黄酮和多糖含量的测定
-55-3 芦丁标准曲线的绘制3 精密称取在 -5,N下
减压干燥至恒重的芦丁对照品 -,,LK，加 .4M乙醇
充分溶解后，转移至 -,,LD 容量瓶中，定容，摇匀即
得芦丁对照品溶液（,-LK O LD）。精密吸取对照品溶
液 ,,、,4、-,、-4、5,、54、J,LD 于 / 只 -,LD 容量
瓶中，加乙醇补足 J,LD，分别加入 -LD -M PQ!QJ 乙
醇溶液，加乙醇定容，摇匀放置 5,LR*，在 B5,*L处测
定其吸光度。以溶液质量浓度 ! 为横坐标，吸光度
P为纵坐标，绘制标准曲线。得线性回归方程为：
P S5J5!0,,,JB，=5 S ,...1。
-5553 黄酮含量的测定 3 精密吸取黄酮提取液
-,LD，按上述标准曲线绘制项操作，分别测定两种
岩白菜中总黄酮的吸光度，然后计算出黄酮含量。
-55J3 葡萄糖标准曲线的绘制3 精确称取在 -,4N
下干燥至恒重的葡萄糖 -,LK，加适量蒸馏水充分溶
解，转移至 -,,LD 容量瓶中，定容，摇匀即得标准葡
萄糖溶液（,-LK O LD）。精密吸取葡萄糖标准溶液
,、,-、,5、,J、,B、,+、,1LD 置于 / 只试管中，加蒸
馏水补足 -LD，再分别加入 BLD蒽酮试剂（加完 - 支
后立即摇匀，置冰水中，以下相同），一起放入沸水浴
-,LR*，取出流水冷却到室温并静置 -,LR*后，在波长
+5,*L处测定吸光度。以葡萄糖浓度 ! 为横坐标，
吸光度 P 为纵坐标，绘制标准曲线。得到线性回归
方程为：P S++5,+! T ,,J5J，=5 S ,...+。
-55B3 多糖含量的测定 3 精密吸取 -,LD 的多糖
样品溶液，按上述标准曲线绘制项操作，测定吸光
度，根据标准曲线计算多糖的浓度，计算出多糖的
含量。
-5J3 岩白菜黄酮和多糖对亚硝酸盐的清除作用的
测定［/］3 2U 05 在酸性条件下与对氨基苯磺酸重氮反
应后，再与 20-0苯基乙二胺盐酸盐偶合生成紫红色
络合物，在 4B,*L 处有最大吸收，可用比色法测定
2U 05 量。
分别吸取不同浓度的黄酮提取液、多糖提取液
和 V! 水溶液于 -,LD 容量瓶中，加入 4!K O LD 的亚
硝酸钠溶液 5LD，然后置于 J/N 水浴锅中反应
J,LR*，各加入 ,BM 对氨基苯磺酸 5LD，摇匀静置
4LR*；再加入 ,5M 盐酸萘乙二胺显色剂 -LD，摇匀
加水定容，静置 -4LR* 后，以蒸馏水为参比测各溶液
的吸光度，考虑到提取液本身的吸光值，做试样空
白，测出扣除试样空白的吸光度 P-，同时测定空白对
照液的吸光度 P,，清除率（M）S（ P, 0 P-）O P,
W -,,M
-5B3 岩白菜黄酮和多糖对羟自由基清除作用的测
定［1 ］3 通过 X8*Y:* 反应产生· UG，水杨酸捕获
·UG产生有色物质，该物质在 4-,*L 有特征吸收，
通过测定水杨酸捕获·UG 所得到的产物，确定
·UG的清除率。
在 -,LD容量瓶中加入一定浓度的提取液，然后
加入 5LL:Q O D X8CUB 5LD，+LL:Q O D 水杨酸 5LD，摇
匀，最后加入 -LL:Q O D G5U5 5LD 启动反应，于 J/N
水浴加热 J,LR* 后取出，以蒸馏水为参比测各溶液
的吸光度，考虑到提取液本身的吸光值，做试样空
白，测出扣除试样空白的吸光度 P-，同时测定空白对
照液的吸光度 P,，清除率（M）S（P, 0 P-）O P,
#$ 结果与分析
#!$ 两种岩白菜属植物根茎黄酮和多糖的含量
两种岩白菜属植物根茎黄酮和多糖的含量见
表 -。由表 - 可知，两种岩白菜属植物根茎黄酮和多
糖的含量有较大差异。根茎黄酮含量为：天全岩白
菜 Z峨嵋岩白菜；根茎多糖含量为：峨嵋岩白菜 Z天
全岩白菜。
##$ 两种岩白菜属植物根茎黄酮、多糖和 %& 对亚
硝酸盐的清除作用
测定了两种岩白菜植物不同黄酮加入量对亚硝
酸盐的清除率，并与常用抗氧化剂 V! 进行比较，结
果见图 -[图 J。由图可知，随着黄酮加入量的增加，
两种岩白菜对亚硝酸盐的清除率都呈上升趋势，且
都具有较大清除率。当达到相同清除率时，天全岩
白菜黄酮加入量大于峨嵋岩白菜。而两种岩白菜多
糖对亚硝酸盐的清除率随多糖加入量的增加变化缓
慢。总的说来，对亚硝酸盐的清除率大小排序为：峨
!#
表 ! 两种岩白菜属植物根茎黄酮和多糖的含量
编号
黄酮含量
（#$ % $）
多糖含量
（#$ % $）
黄酮平均含量
（#$ % $）
&’(
（)）
多糖平均含量
（#$ % $）
&’(
（)）
天全岩白菜
! *+,-! !.+,/0
. 1+/.2 !.+.,3
* 1+!0! !!+-0!
1 1+.!2 !*+!*2
1+/,. .+-01 !.+0.* 1+,,!
峨嵋岩白菜
! .+!!* ./+,32
. !+,20 .!+!03
* .+.!- ..+,1!
1 .+*/0 .*+!-3
.+!00 3+*,- ..+/3/ 0+.03
嵋岩白菜根茎黄酮 4天全岩白菜根茎黄酮 4 56 4天
全岩白菜根茎多糖 4峨嵋岩白菜根茎多糖。
图 ! 两种岩白菜属植物根茎黄酮对亚硝酸盐的清除作用
图 . 两种岩白菜属植物根茎多糖对亚硝酸盐的清除作用
图 * 56 对亚硝酸盐的清除作用
!#$ 两种岩白菜属植物根茎黄酮、多糖和 %& 对羟
自由基的清除作用
由图 1 可知，随着黄酮加入量的增多，两种岩白
菜属植物对羟自由基的清除率较大，达到 -/)以上，
且具有相同趋势，都是先增加后趋于稳定，天全岩白
菜的清除率略大于峨嵋岩白菜，并且都大于 56 对羟
自由基的清除作用。由图 0 可见，峨嵋岩白菜多糖
对羟自由基的清除率明显大于天全岩白菜，不过都
小于 56 对羟自由基的清除作用。总的来说，对羟自
由基的清除能力大小为：天全岩白菜根茎黄酮 4峨
嵋岩白菜根茎黄酮 4 56 4峨嵋岩白菜根茎多糖 4天
全岩白菜根茎多糖。
图 1 两种岩白菜植物根茎黄酮对羟自由基的清除作用
图 0 两种岩白菜植物根茎多糖对羟自由基的清除作用
图 3 56 对羟自由基的清除作用
#$ 讨论
#’ 两种岩白菜属植物根茎黄酮和多糖的含量差异
较大，分析原因可能是两种植物生长环境不同所引
起的。峨嵋岩白菜生长于海拔 !0,/# 左右的石隙，
而天全岩白菜生长在海拔 ..// 7 **//# 的岩坡石
隙［0，3］。海拔不同，许多生态因子也不同，如光照、温
度、水分等；除此之外，也有可能只是由于自身的遗
传特性决定的。
#! 自由基是生物体在代谢过程中不断产生的中间
产物，在正常生理状况下，人体内自由基是处于不断
产生与清除的动态平衡中。自由基产生过多或清除
过慢，都会造成机体的各种损伤，加速机体的衰老进
程并诱发各种疾病。其中羟基自由基是目前所知活
性氧中对生物体毒性最强、危害最大的一种自由
基［,，!/］。89 :. 也是一种对人体非常有害的离子，它可
!!#
以与仲胺、叔胺在一定条件下形成强致癌物质亚硝
胺［!!］。因此，在体内外清除过多的自由基、清除亚
硝酸盐是防治癌症及人体多种疾病的有效途径
之一。
!! 两种岩白菜属植物根茎黄酮对亚硝酸盐和羟自
由基的清除率大，达 #$%以上，且都大于 &’。这可
能是由于岩白菜属植物乙醇提取液中含有较多多元
酚类物质引起的。岩白菜属 !$ 种植物中普遍含有
多元酚类，如岩白菜素（ ()*+),-,），熊果酚苷
（.*(/0-,）以及它们的没食子酰化物。还含有山奈酚
（1.)234)*56）、槲皮素（7/)*8)0-,）等多种黄酮类化合
物［!9 : !;］，多糖［!<］、蒽醌类化合物［!#］，多种氨基酸和有
机酸［!=］等化学成分。研究已表明，多酚类物质具有
良好的抗氧化、抗癌作用［!>］。岩白菜根茎黄酮的抗
氧化性应该是提取液中多种活性成分协同作用的
结果。
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6’((&%&17 M3)8-)M［A］? W6.,0. @)L，!>#>，B;（9）：9;B?
［!>］耿中华 ? 植物多酚的研究进展［ A］? 广西轻工业，9$$=
（;）：
###############################################
D:;?
（上接第 ># 页）
对肉制品质构和色泽的测量通常主要靠人为主
观的评定，简单易行，但是由于感官检验是靠主观感
觉判断的，难免会受诸多因素，如嗜好与偏爱、经验、
广告、价格等的影响，而用仪器测定方法可以得到较
客观性的评定结果［!!］。但仍存在一些问题，如各项
实验条件设定、KWU 质构参数的影响并不为食品研
究人员所熟知、广式腊肠肥瘦分明的特点影响测定
结果的一致性；另外，仪器测定与化学组分或感官评
定的相关性有待于更深入的研究。
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