免费文献传递   相关文献

苹果属Dw矮化基因试材组培苗受植物内源激素ABA调控的研究



全 文 :现代农业 2015 年 4 期
苹果属 Dw矮化基因试材组培苗受植物
内源激素 ABA调控的研究
赵国芳
辽宁省兴城市中等职业技术专业学校
[摘 要] 根据各国果树发展,矮化密植已成为当前苹果集约化栽培的主要方式,我国的苹果生产也正朝
着由稀植到密植,由粗放管理到精细管理、由低质量向高质量方向发展,并逐步实现苹果生产的集约化、无病毒
化、密植矮化、果品无公害化等。 文章以扎矮山定子为材料,应用外施植物生长调节剂对组培苗进行研究,观察
这激素是否对植株有影响。
[关键词] 扎矮山定子 组织培养 激素 敏感性 矮化机理
植物矮化突变体是进行植物发育生物学研究的
重要材料,对植物发育研究与农业生产有极其重要的
意义。 近年来,植物学家对植物矮化相关基因的遗传
学、矮化突变体的激素调控以及矮化相关基因的克隆
和利用等方面开展了广泛而深入的研究。利用基因工
程手段控制植物株高来控制农作物生长是未来农业
生产上成本更低廉、效益更高的增产措施。 利用这些
基因控制信号转导从而获得适合的株高,将是未来农
业生产的重要手段。
“扎矮山定子”基因型为 Dwdw 杂合体,它可使嫁
接在其上的东光苹果树体矮化,株仅为对照植株的一
半。而且当其与普通山定子(dwdw)杂交后,F1代中高
株与矮株的比例为 1∶1。 为了得出“扎矮山定子”是否
是 ABA内源激素的突变体, 因此对 DW基因突变体
及非突变体的组培苗和实生苗进行激素处理。 判断
DW 基因突变类型与已知的类型是否具有相似性,揭
示“扎矮山定子”的矮生机理。为进一步从分子水平上
研究提供突破口。 由于苹果属植物生长周期长、自交
亲和力差、基因型复杂、种子繁殖无法保持矮化性状
等自然属性的存在,因而利用组织培养加快其生长。
一、材料与方法
1.试验材料
首先,将“扎矮山定子”母株自然授粉的种子进行
层积处理,然后待种子具备萌芽生长能力而又未长出
胚根时,将种子用清水冲洗 1 小时以上,先用 70%酒
精消毒 35s,倒出多余酒精,直接加入 0.1% HgCl2 振
荡灭菌 10 分钟, 残余酒精可增强 HgCl2 的杀菌效
果,无菌水冲洗 4~5遍,最后接入 MS培养基当中。等
到种子萌发后,选择生长势比较一致的普通型苗和矮
生型苗进行扩繁培养。
2.试验方法
(1)组培苗对外源 ABA的敏感性试验方法。试验
选择 4 个 ABA 的浓度梯度, 浓度由低到高分别为:
0.05、0.1、0.5、2.5毫克/升,设 1组对照,用无菌水代替
ABA水溶液。 先配制 1毫克/10毫升的 ABA母液,称
10 毫克 ABA 原药,用少量 90%乙醇完全溶解,然后
果的综合体现,必然在人与人之间、部门之间建立联
系或互动机制,科研活动从立项、审批、实施、验收的
各个环节,其中任何一个节点的活动都产生大量的资
料信息,各类信息系统之间的信息共享和有效传递是
实现档案工作信息化的关键。各参建单位要依照国家
有关项目工程档案管理的相关法律法规、 规章制度,
以及相关行业标准,制定符合项目建设以及自身情况
的项目档案管理工作制度。因为项目的个性以及各参
建单位在项目建设过程中发挥的作用不同,因根据自
身的特点,建立符合自己单位的文件材料的收集整理
制度,文件材料的利用管理制度,档案管理人员的岗位
责任制度以及工程竣工档案验收实施细则和工程档
案管理实施办法等档案管理的规章制度,以此来规范
项目建设过程中文件材料的管理工作,使项目档案从
形成、收集、整理、保管等阶段均有明确规定和相应的
制约措施,使项目档案管理有章可循。 做到无论是在
项目建设各阶段还是各参建单位内部,都能从制度上
保证文件材料的收集和管理工作,使项目档案管理工
作规范化、标准化、系统化,实现信息形成、信息采集、
信息传递、信息处理实时监控,达到各类信息共享和
各项工作标准化、规范化。
3.统筹建设科研项目档案信息化体系
由于科研项目实施中可能形成大量电子文件,倘
若规章制度存在漏洞,执行不严,势必会造成反复归
档,浪费人力财力的现象,甚至会导致文件归档混乱。
因此,做好电子文件归档前的准备工作,尤其是规章
制度的建设、宣传以及推广应用,为后续的电子文件
归档工作奠定良好基础。 依照科研项目的实施过程,
从而以一种统一的规范实现档案标准化管理,实现档
案接收、鉴定、归档、移交、报表打印、分析统计等一系
列的管理功能,促进部门之间、部门与社会之间的档
案共享,提高资源的利用效率。 文书档案管理实现信息
化, 档案人员就可以从繁琐的整理工作中解脱出来,可
以把时间和精力放在档案编研和二次信息开发利用上
来,从而提高档案管理工作的质量和利用效率。
学 术 园 地
·110·
DOI:10.14070/j.cnki.15-1098.2015.04.083
现代农业 2015 年 4 期 学 术 园 地
表 1 不同浓度 ABA溶液配制
          
   
  !   
!     
 !    
# !   ! 
 培养基做好后暂时存放于遮荫处,一周左右观察
培养基是否污染,选择未污染的培养基进行实验(我
们在试验过程中极少发现培养基污染)。 然后将经过
MS 培养基 15 天空白培养的两类组培苗按要求转接
在含不同浓度 ABA的培养基当中, 组培苗的大小保
证一致,全部剪成近似 1 厘米长茎段,去掉全部的叶
片(使试材保持齐整,叶片数为 0,这样增加的叶片数
可作为描述生长量的指标)。在每瓶中转接 6个植株,
所需 A62 苗与 DW 苗的数量分别为 288 株。 瓶上注
明材料类型及处理编号。
二、结果与分析
1.不同类型组培苗对外源 ABA的敏感性
(1)不同浓度 ABA处理对组培苗株高的影响。从
图 2 中可以看出,ABA 处理对两种类型苗有一定的
抑制作用,4种 ABA浓度处理的株高均比对照小。 总
体来说,随着 ABA浓度的升高,组培苗的株高逐渐减
少。 只有 3号处理 D类苗有些异常,可能是测量误差
造成的。 从图中植株变化趋势看 D类苗对 ABA不敏
感。
(2)不同浓度 ABA处理对组培苗叶片数的影响。
从图 3 中可以看出,ABA 处理的两种类型苗的叶片
数在 4~4.6之间,只有对照的叶片数超过 4.7片,说明
ABA 对组培苗叶片数也有抑制作用。 从图中叶片数
变化趋势看 D类苗对 ABA不敏感。 组培苗的节间数
均为 1个左右,因此数据未列出。
三、结论
实验表明, 经 ABA 处理的两种类型组培苗从植
株变化趋势看,D 苗与 A 苗的变化基本一致,即反应
不敏感。 但是否受其它激素影响,可以在以后的试验
中进一步观察鉴定。
——————
参考文献:
[1]Walther Walder.Apple production inItaly and the
South Tyrol:acreage,varieties and prognosis[J].Compact
Fruit Tree,1998,31(4):1~5
[2]杨朝选.种果树要用矮化苗西北园艺果树专刊,
2003.4.
[3]李山玉.植物生长调节剂在果树上的应用,2002.
[4]王宏伟.甜樱桃矮化砧木矮化机理研究 .山东农业
大学硕士学位论文,2004.
[5]乔志新.植物生长调节剂对苹果属 DW 基因资源
生长和内源赤霉属特性的影响研究 沈阳农业大学硕
士学位论,2003.
[6]李宗伟.扎矮山定子矮生机理的研究 沈阳农业大
学硕士学位论文 沈阳农业大学,2005.
图 2 不同浓度 ABA培养基对组培苗株高的影响 图 3 不同浓度 ABA培养基对组培苗叶片数的影响








   










 







    












 
加水定容至 100毫升。 不同浓度 ABA 培养基配制见
表 1。 每个浓度处理做培养基 0.5L,可以装 16 瓶,这
样每种类型的苗可以重复 8 次,共需要 96 瓶。 30 天
后对每瓶苗进行形态指标的测定, 测定指标包括:株
高、叶片数、节间数。
·111·