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几种金丝桃属药用植物的金丝桃苷含量测定



全 文 :3.3  有机腐植酸液肥与复合肥的施用配比及施用
量对子莲增产和质量影响有待更深入的研究 。
注:本项工作为福建省科技厅重大科技研究项目(2002Y006)
参 考 文 献
1  葛有茂.太空莲 36 号在吉阳镇试种成功 , 中国农技推
广 , 2002 ,(1)∶34
(2003-08-26收稿
2004-02-02修回)
·资源·
几种金丝桃属药用植物的金丝桃苷含量测定
万德光 裴 瑾 严铸云
(成都中医药大学药学院 ,成都 610075)
  摘要 目的:比较金丝桃属药用植物中金丝桃苷含量 , 为筛选新的药用品种以及为定量评价提供参考依据。
方法:采用 HPLC 法测定金丝桃属 3组 5 种 1亚种金丝桃苷的含量。结果:金丝桃苷的进样量在 0.101~ 2.023 μg范
围内峰面积值与进样量之间线性关系良好 ,平均回收率为 96.527%。贯叶连翘的含量最高 1.257%, 其次是川滇金
丝桃 0.461%, 含量最低是元宝草 0.137%。结论:本方法的稳定性和重现性较好 ,可作为药材的品质评价方法之
一。贯叶连翘 、川滇金丝桃等金丝桃属药用植物有进一步研究 、开发价值。
关键词 金丝桃属 金丝桃苷 HPLC
  藤黄科金丝桃属 Hypericum L.广布于全世界 ,
我国有 8组 55种 8亚种 ,其中约 1/3的种类在民间
用于治疗多种疾病 。该属贯叶连翘 Hypericum perfo-
ratum Linn的提取物有抗抑郁 、抗病毒作用 ,而成为
国内外研究的热点 ,并认为所含的二蒽酮类化合物
金丝桃素是抗抑郁的主要有效成分之一 。因此贯叶
连翘的质量大多以金丝桃素为指标 ,但金丝桃素含
量很低 ,不能全面反映药材质量。而黄酮 、黄酮醇和
黄烷醇类化合物普遍存在于金丝桃属植物中 ,尤其
金丝桃苷是金丝桃属植物的特征性成分之一 ,具有
较强的镇痛和保护脑缺血损伤等作用〔1〕 。本研究以
HPLC法测定并比较金丝桃属 3组 5种 1亚种的金
丝桃苷含量 ,为合理开发及筛选新的药用种提供参
考依据。
1  材料与方法
1.1  实验材料 样品均采自野外 ,并经万德光教
授鉴定 ,详见表 1。
1.2  仪器与试剂 Agilentl100高效液相色谱仪 , P-
I型笔式 pH计(江苏电分析仪器厂),金丝桃苷对照
品自制 ,甲醇为色谱纯 ,磷酸 、三乙胺为分析纯 ,水为
重蒸水。
1.3  色谱条件〔2〕  色谱柱:Alltima C18(250mm ×
4.6 mm ,5μm);流动相:甲醇-0.5%磷酸(45∶55 ,混合
后用三乙胺调 pH 值为 3.0);流速:0.8 ml/min;检测
波长:360 nm;柱温:35℃;进样量:10μl。
 表 1 样品及来源
组别 品种 采集地 采集/购买时间
金丝桃组
Ascyreia
川滇金丝桃
H.forrestii 汶川县 2000.8
遍地金组
Adenosepalum
遍地金
H.wightianum 峨眉山 2000.7
察隅遍地金
H.wightianum subsp.
axillare
卧龙 2000.9
贯叶连翘组
Hypericum
贯叶连翘
H.perforatum 茂县 2000.7
元宝草
H.sampsonii 峨眉山 2000.8
扬子小连翘
H.faberi 峨眉山 2000.7
1.4  线性关系考察 精密称取金丝桃苷对照品
10.3 mg ,置 100 ml容量瓶中 ,加甲醇溶解稀释至刻
度 ,摇匀 。进样量 10μl ,测定其峰面积 ,按面积归一
法计算 , 金丝桃苷的含量为 98.186%, RSD 为
0.096%。以下试验对照品纯度均按 98.186%计算 。
对照品进样量分别为 1 、2 、4 、6 、8 、10 、20μl ,测定
其峰面积值 ,并以峰面积值(A)对进样量(C)进行直
线回归 , 求得标准曲线方程为:A =2739.726C +
34.241 , r=0.9998 。结果表明 ,金丝桃苷的进样量在
0.101 ~ 2.023 μg 范围内峰面积值与进样量之间线
性关系良好 。
·397·中药材第27卷第 6 期 2004 年 6月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2004.06.004
1.5  精密度试验 金丝桃苷对照品溶液及贯叶连
翘供试品溶液分别进样 10 μl ,连续 5 次 ,测定其峰
面积 ,结果 RSD%分别为 1.109%、1.215%,精密度
良好 。
1.6  重现性试验 按拟定的含量测定方法 ,取同
一样品5份 ,分别制备样品供试溶液 ,测定含量。结
果 RSD为 2.214%,重现性良好 。
1.7  稳定性试验 方法同精密度试验 。精密度试
验结果即为第一次测定结果 ,于第一次测定完毕 8
h 、24 h后 ,进行第二 、第三次测定 ,记录对照品及样
品的峰面积值。RSD分别为 0.833%、1.175%,表明
稳定性良好。
1.8  回收率试验 精密称取已知含量样品约 0.2
g ,共 6份 ,分别加入不同量的金丝桃苷对照品(三水
平共六份),按样品测定项下提取和测定 ,由标准曲
线计算金丝桃苷含量 ,平均回收率为 96.527%,RSD
为1.421%。
2  样品测定结果
取供试样品 0.2 g ,分别精密称定 ,加入石油醚
25 ml ,加热回流脱脂 1 h ,过滤 ,挥干滤渣 ,加入25 ml
甲醇回流提取 4 h ,过滤 ,定容至 25 ml。取续滤液备
用 ,测定峰面积 ,结果见表 2。
3  讨论
本课题建立了金丝桃苷的 HPLC 含量测定方
法。采用甲醇-0.5%磷酸(45∶55 ,混合后用三乙胺
调pH值为3.0)为流动相 , 检测波长360nm , 各样
 表 2 金丝桃苷含量测定结果(n=3)
样品 平均含量(%) RSD(%)
金丝桃组 川滇金丝桃 0.461 1.146
遍地金组 遍地金 0.431 1.710
察隅遍地金 0.349 1.595
贯叶连翘组 贯叶连翘 1.257 1.352
元宝草 0.137 1.974
扬子小连翘 0.163 2.554
品均能达到基线分离 ,稳定性和重现性较好 ,可用于
药材的质量控制。
金丝桃属 3组 5 种 1亚种药用植物采用 HPLC
法测定金丝桃苷含量结果:贯叶连翘远高于其它种
达 1.257%,其次是川滇金丝桃(0.461%),含量最低
是元宝草(0.137%),提示了贯叶连翘和川滇金丝桃
等值得进一步研究和开发。
参 考 文 献
1  陶遵威 .金丝桃苷药理作用研究进展 .天津药
学 , 2002 , 14(002)∶14
2  王峰 ,等.RP-HPLC 法测定贯叶连翘片剂中有效成分金
丝桃素和金丝桃苷的含量 .药物分析杂志 , 2000 , 20
(2)∶101
(2003-09-15收稿
2004-03-10修回)
Determination of Hyperin in Genus Hypericum Medicinal Plants
Wan Deguang , Pei Jin , Yan Zhuyun
(College of Pharmacy , Chengdu University of TCM , Chengdu 610075)
Abstract Objective:To compare the content of hyperin in Hypericum medicinal plants.Methods:HPLCmethod was established.Alltima
C18 radial compression column was used with a mobile phase of methanol-0.5% phosphoric acid(45∶55 , adjusted to pH=3.0 with triethy-
lamine).The detecting wavelength was 360nm.Flow rate was 0.8 ml/ min , external standard method was quantitative analysis method.Results:
The linear range was 0.101~ 2.023 μg.The average recovery was 96.527%.The result showed that the content of hyperin in H.perforatum ,
H.forrestii was higher than that of others (1.257% and 0.461% respectively).Conclusion:This method provides an accurate and sensitive
way in detecting hyperin.
Key words Hypericum;Hyperin;HPLC
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·398· 中药材第 27 卷第 6期 2004年 6 月