全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2014，29(2)∶196 ～ 198
60 ℃水浴中加热 2 h，经反复试验，可得到峰面积明
显且稳定的降解产物峰。
参考文献:
［1］ Alex K，Casie Ｒ，Kim LＲ，et al． Autocrine activation of the
MET receptor tyrosine kinase in acute myeloid leukemia［J］．
Nature Medicine，2012，18:1118 － 1122．
［2］ Thomas K，Daniel BL，Thomas F． FLT3 as a therapeutic target in
AML:Still challenging after all these years［J］． Blood，2010，
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［3］ Catherine CS，Qi W，Chen － Shan C，et al． Validation of ITD
mutations in FLT3 as a therapeutic target in human acute myeloid
leukemia［J］． Nature，2012，485:260 － 263．
收稿日期:2013 － 03 － 22
作者简介:张亿(1962—) ，男，甘肃兰州，副主任药师，从事化学药品的检验工作。
* 通信作者(Correspondent author) ，Email:Gimy1983@ yeah． net
HPLC测定复方岩白菜素片中的岩白菜素及马来酸氯苯那敏
张 亿，朱 蓉，郑 萍，熊 玲*
(成都市药品食品检测中心，四川 成都 610045)
摘要:目的 同时测定复方岩白菜素片中的岩白菜素及马来酸氯苯那敏。方法 采用 HPLC 法，选用 Kromasil C18色谱柱
(150 mm × 4． 6 mm，5 μm) ，流动相 A为乙腈 － 0． 3%十二烷基硫酸钠溶液 －磷酸(50∶50∶0． 02) ，以三乙胺调 pH3． 4 ± 0． 1、
B相为乙腈，梯度洗脱程序:0→5 min、100% A、流速 0． 5 mL· min －1，5→10 min、80% A、20% B、流速 1． 0 mL·min －1，10→12
min、100%A、流速 1． 0 mL·min －1，柱温 35 ℃，检测波长 260 nm。结果 2． 53 ～ 40． 48 μg岩白菜素与峰面积呈良好的线性关系
(r = 0． 9998) ，平均回收率为 98． 78%，ＲSD = 1． 08%(n = 9) ;0． 0563 ～ 0． 898 μg 马来酸氯苯那敏与峰面积呈良好的线性关系
(r = 0． 9999) ，平均回收率为 98． 31%，ＲSD = 0． 95% (n = 9)。结论 所用方法简单、快速、准确，精密度与重复性均好，可作为
该制剂生产工艺的摸索及质量控制的方法。
关键词:岩白菜素;马来酸氯苯那敏;高效液相色谱法;含量测定
中图分类号:Ｒ917 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2014)02 － 0196 － 03
DOI:10． 13375 / j． cnki． wcjps． 2014． 02． 030
Determination of bergenin and chlorphenamine maleate in Compound bergeninum tablets by
HPLC
ZHANG Yi，ZHU Ｒong，ZHENG Ping，XIONG Ling*
(Chengdu Center for Food and Drug Control，Chengdu，Sichuan，610045 P． Ｒ． China)
Abstract:OBJECTIVE To establish a method for simultaneous determination of bergenin and chlorphenamine maleate in Compound
bergeninum tablets．METHODS HPLC was used，Kromasil C18 column (150 mm × 4． 6 mm，5 μm)was chosed，the mobile phase
was composed of A phase:Acetonitrile － 0． 3% sodium dodecyl solution － phosphate (50∶50∶0． 02)with the pH adjusted to 3． 4 ±
0. 1 by triethylamine;phase B:Acetonitrile． A gradient elution program was used:from 0 min to 5 min，A phase:100%，flow rate of
0. 5 mL·min －1，from 5 min to 10 min，A phase:80%，B phase:20%，flow rate of 1． 0 mL·min －1，from 10 min to 12 min，A phase:
100%，flow rate of 1． 0 mL·min －1 ． Column temperature was 35 ℃，detection wavelength was 260 nm． ＲESULTS Bergenin in the
range of 2. 53 － 40． 48 μg(r = 0． 9998)showed a good linear relationship，the average recovery was 98． 78%，ＲSD = 1． 08%(n = 9) ，
chlorpheniramine maleate in the range of 0． 0563 － 0． 898 μg (r = 0． 9999)showed a good linear relationship，the average recovery rate
was 98. 31%，ＲSD = 0． 95%(n = 9)． CONCLUSION The method is simple，rapid and accurate，the precision and reproducibility
are good，and it can be used as the analysis method of production processes and quality control of the preparation．
Key words:Bergenin;Chlorphenamine maleate;HPLC;Determination
CLC number:Ｒ917 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2014)02 － 0196 － 03
复方岩白菜素片由岩白菜素与马来酸氯苯那敏
组成的复方制剂，用于治疗慢性支气管炎，收载于部
颁药品标准化学药品及制剂第一册［1］中。收载标
准中采用紫外分光光度法测定岩白菜素的含量，而
未检测复方岩白菜素片中的马来酸氯苯那敏。而在
实际生产中因生产工艺的差异，可能导致不同厂家
的产品中马来酸氯苯那敏的含量及含量均匀度相差
悬殊，因此，现采用 HPLC外标法同时测定了处方中
的岩白菜素和马来酸氯苯那敏的含量及马来酸氯苯
那敏的含量均匀度。
1 实验部分
1． 1 仪器与试药
高效液相色谱仪(美国 Waters)。岩白菜素(含
量 100%，置五氧化二磷干燥器中减压干燥 24 h，批
号:111532 － 200202)、马来酸氯苯那敏(99． 7%，置
105 ℃干燥 3 h，批号:100047 － 200606)对照品(中
国药品生物制品检定所);供试品(药品监督检验样
品，批号:110401、110703、120401) ;乙腈为色谱纯;
水为超滤系统制备水;其余试剂为分析纯。
1． 2 方法与结果
1． 2． 1 色谱条件 采用 Kromasil C18色谱柱(150
mm × 4． 6 mm，5 μm) ，柱温 35 ℃，PDA检测器波长
为 200 ～ 280 nm;流动相 A 为乙腈 － 0． 3%十二烷
基硫酸钠溶液 －磷酸(50∶50∶0． 02，以三乙胺调
pH3． 4 ± 0． 1)、B 为乙腈，梯度洗脱程序为:0→5
min、100%A、流速 0． 5 mL·min －1，5→ 10 min、80%
A、20%B、流速 1． 0 mL·min －1，10→12 min、100%A、
流速 1． 0 mL·min －1。供试品的 HPLC 中出峰按先
后顺序分别为马来酸峰(t = 2． 36 min)，岩白菜素峰
(t = 2． 88 min)、氯苯那敏峰(t = 8． 48 min)、马来酸
峰与岩白菜素峰的分离度为 2． 9，岩白菜素峰的理
论板数 ＞ 3． 5 × 103，氯苯那敏峰的理论板数 ＞ 1 ×
104，无辅料干扰(图 1)。从 HPLC － 3D 图谱中分别
提取 3 种成分的紫外扫描图谱，可见岩白菜素在
217、274 nm处有最大吸收，而氯苯那敏在 223、260
nm处都有吸收峰，故选择 260 nm为检测波长。
0 5 10
马
来
酸
马
来
酸
岩
白
菜
素
氯
苯
那
敏氯
苯
那
敏
0 5 10 0 5 10
A B C
t/min
岩
白
菜
素
图 1 马来酸氯苯那敏对照品(A)、岩白菜素对照品(B)、供试品(C)溶液的色谱图
Figure 1 Chromatograms of chlorphenamine maleate control solution(A)，bergenin control solution(B)and sample solution(C)
1． 2． 2 溶液的制备 精密称取 11． 26 mg 马来酸氯
苯那敏对照品，置 200 mL量瓶中，加流动相 A 溶解
并定容，作为对照品贮备液。精密称取 25． 30 mg 岩
白菜素对照品，置 50 mL量瓶中，加入 10 mL马来酸
氯苯那敏对照品贮备液，用流动相 A 溶解并定容，
即得混合对照品溶液。
1． 2． 3 线性关系及标准曲线 精密吸取 5、10、20、
40、80 μL 混合对照品溶液，按“1． 2． 1”项色谱条件
进样，测定峰面积。以进样量(μg)为横坐标、峰面
积为纵坐标，绘制标准曲线。回归方程分别为:
Y岩白菜素 = 1． 861 × 10
6X + 1． 328 × 105(r2 = 0． 9998)、
Y马来酸氯苯那敏 = 8． 814 × 10
5X + 3． 555 × 103 (r2 =
0. 9999)。结果表明:2． 53 ～ 40． 48 μg 岩白菜素、
0. 0563 ～ 0． 898 μg 马来酸氯苯那敏与峰面积呈良
好的线性关系。
1． 2． 4 精密度与稳定性试验 精密吸取 40 μL 混
合对照品溶液，记录连续 6 次的峰面积。计算得岩
白菜素峰面积的 ＲSD = 0． 40%，马来酸氯苯那敏峰
面积的 ＲSD = 0． 44%。取此溶液于配制后不同时间
(0、2、4、6、8、24 h)，分别进样 40 μL，测定峰面积。
计算得岩白菜素平均峰面积的 ＲSD = 0． 72%，马来
酸氯苯那敏平均峰面积的 ＲSD = 0． 86% 。表明方
法的精密度与测定溶液的稳定性均良好。
1． 2． 5 重复性试验 取同一批号样品，平行制备 5
份供试品溶液，分别按“1． 2． 7”项方法测定。计算
得岩白菜素、马来酸氯苯那敏的平均含量分别为
98. 48%、98． 40% ，其 ＲSD分别为 1． 67%、0． 27%。
1． 2． 6 加样回收率试验 分别精密称取适量岩白
菜素及马来酸氯苯那敏对照品，制备含 2． 46 mg·
mL －1岩白菜素、0． 058 mg·mL －1马来酸氯苯那敏的
混合对照品溶液。精密称取适量已知含量的同一样
品，精密加入 1、3、5 mL 混合对照品溶液，每个浓度
791第 2 期 张 亿，等。HPLC测定复方岩白菜素片中的岩白菜素及马来酸氯苯那敏
各 3 份。按“1． 2． 7”项下的方法配制成溶液，进样，
测定峰面积，计算回收率。计算得 9 份样品中岩白
菜素的平均回收率为 98． 78%，ＲSD = 1． 08%;马来
酸氯苯那敏的平均回收率为 98． 31%，ＲSD =
0. 95%。
1． 2． 7 样品含量的测定 取 20 片样品，精密称定，
研细，精密称取适量(约相当于 125 mg 岩白菜素、
2 mg马来酸氯苯那敏)，置 50 mL 量瓶中，加入 10
mL 0． 3% 十二烷基硫酸钠溶液，振摇 10 min，加入
适量流动相 A，超声 30 min，使溶解，加流动相 A 定
容，得供试品溶液。同法制备对照品溶液(含 2． 5
mg·mL －1岩白菜素、0． 04 mg·mL －1马来酸氯苯那
敏)。精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 8 μL，
进样，记录色谱图。按外标法以峰面积计算，其中马
来酸氯苯那敏按氯苯那敏峰计算。将 3 批样品的测
定结果及与紫外分光光度法的测定结果比较，HPLC
法与 UV法测定结果一致性较好(表 1)。
表 1 样品的测定结果及与紫外分光光度法的比较
Table 1 Contents of three batches by HPLC method compared
with UV method
批号 被测成分 HPLC /% UV /%
110401 岩白菜素 98． 9 99． 7
马来酸氯苯那敏 98． 6
110703 岩白菜素 98． 5 99． 3
马来酸氯苯那敏 98． 4
120401 岩白菜素 99． 0 100． 2
马来酸氯苯那敏 96． 5
1． 2． 8 样品含量的均匀度测定 取 10 片供试品，
分置 50 mL量瓶中，加入 10 mL 0． 3%十二烷基硫酸
钠溶液，振摇 10 min，使崩解，再加入流动相 A 超声
30 min，使溶解，按“1． 2． 7”项下方法测定。3 批样
品含量的均匀度测定结果见表 2。该厂家生产的 3
批样品的工艺较稳定，可以考虑将标准制定为 A +
1. 8S≤15． 0。
表 2 3 批样品的含量均匀度测定结果
Table2 Content uniformity of three batches by HPLC method
批号 均值 S A + 1． 8S
110401 96． 63 2． 75 8． 3
110703 96． 84 3． 40 9． 3
120401 97． 25 2． 30 6． 9
2 讨论
岩白菜素是从新疆虎耳草科植物厚叶岩白菜中
提炼精制得到的异香豆精类化合物，对慢性支气管
炎具有良好的镇咳、祛痰作用。马来酸氯苯那敏具
有较强的组胺 H1 受体阻断作用，可减轻过敏引起
的呼吸道其他症状，对中枢神经系统也有轻度抑制
作用。该复方制剂中马来酸氯苯那敏的含量极微，
工艺不稳定，易致给药过量、嗜睡、口渴、多尿、咽喉
痛等不良反应。文中的 HPLC 法可快速、准确地检
测出复方制剂中两组份的含量，并可对其中马来酸
氯苯那敏的含量均匀度进行检测，有利于全面地控
制制剂的质量，确保疗效及用药安全。利用 PDA 检
测器可以很好地筛选出两种组分同时测定的最佳吸
收波长。岩白菜的最大吸收波长 274 nm，检测器对
氯苯那敏的响应过低，而选择氯苯那敏的最大吸收
波长 223 nm为测定波长时，检测器对于岩白菜素的
响应过高。当选择 260 nm作为测定波长时，含量较
高的岩白菜素和含量较低的氯苯那敏均可被兼顾在
紫外光谱线性范围内。文献所报道的 HPLC 法同时
测定两种成分时，马来酸和岩白菜素的保留时间接
近，分离度较差［2］。采用梯度洗脱方式时，先采用
较低流速，使马来酸和岩白菜素得到较好分离，再
采用增加流动相中有机相的比例并提高流速，缩短
了氯苯那敏的保留时间。岩白菜素对湿热稳定，在
水中溶解度低［3］，故超声提取的时间在 30 min 以
上。进行含量均匀度样品的制备时，直接采用流动
相 A作为提取溶剂，药片不易崩解，故先加入 10 mL
0. 3%十二烷基硫酸钠溶液，振摇 10 min，使崩解，再
用流动相 A进行提取。
参考文献:
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收稿日期:2013 － 03 － 12
891 华 西 药 学 杂 志 第 29 卷