全 文 ：106
内蒙古地区白刺属植物
主要活性成分含量比较研究
薛 焱1，王同智2，薛永志1，刘欣媛1，张 东1，李月玲1，高洪波1
(1.包头医学院基础学院，包头 014060;2.内蒙古大学生命科学学院，呼和浩特 010021)
摘 要:目的:比较内蒙古分布的 4 种白刺果实和叶总黄酮和总生物碱的含量。方法:以索氏提取法提取总黄酮类成
分，以硝酸铝－亚硝酸钠分光光度法测定总黄酮含量。采用酸碱提取法提取总碱，以硫酸阿托品为对照品，酸性染料比
色法测定白刺总生物碱的含量。结果:4 种白刺果实和叶总黄酮和总生物碱的含量差异显著(p ＜ 0.05) ，其中果实中小
果白刺总黄酮含量最高，叶中球果白刺的中总黄酮含量最高，而唐古特白刺总生物碱含量最高。结论:本研究可为白
刺属种质资源筛选及质量评价提供一定的参考依据。
关键词:白刺属植物，总黄酮，总生物碱
Comparison study of main active compounds
in Nitraria from inner Mongolia
XUE Yan1，WANG Tong－zhi2，XUE Yong－zhi1，LIU Xin－yuan1，
ZHANG Dong1，Li Yue－ ling1，GAO Hong－bo1
(1.School of Basic Medicine，Baotou Medical College，Baotou 014060，China;
2.College of Life Science，Inner Mongolia University，Hohhot 010021，China)
Abstract:Objective:To compare the content of flavonoids and total alkaloids in the seed of Nitraria from Inner
Mongolia.Methods:The total flavonoids were extracted by soxhlet extraction，and were determined by Al(NO3)3 －
NaNO2 spectrophotometry method.Total alkaloids in Nitraria was extracted by acid－base and the content of total
alkaloids was determined by the acidic dye colorimetry.Ｒesults:It showed the content of flavonoids and total
alkaloids in fruits and leaves of Nitraria was significantly different(p ＜ 0.05).Fruits of Nitraria sibirica Pall.and leaves
of Nitraria sphaerocarpa Maxim had the highest content of flavonoids，and Nitraria tangutorum Bobr. had the
highest content of total alkaloids.Conclusion:The research provided some reference for screening alopecuroides
and quality evaluation of the germplasm resources.
Key words:Nitraria;flavonoids;total kaloids
中图分类号:TS275.5 文献标识码:A 文 章 编 号:1002－0306(2014)05－0106－04
收稿日期:2013－06－25
作者简介:薛焱(1974－) ，女，博士，主要从事药用植物有效成分提取
和药理机制的研究。
基金项目:内蒙古自治区高等学校科学技术研究项目(NJ09164) ;内蒙
古自然科学基金资助项目(2011BS0501)资助。
白刺属(Nitraria L.)是蒺藜科(Zygophyllaceae)
的一个古老小属［1］，全世界约有 13 种，分布广泛，分
布于亚洲、欧洲、非洲和澳大利亚的荒漠。我国有 8
种［2］，主要分布于我国西北部及北部各省区。在内蒙
古地区白刺资源十分丰富，分布有唐古特白刺
(Nitraria tangutorum Bobr.)、西伯利亚白刺(Nitraria
sibirica Pall)(即小果白刺)、齿叶白刺(Nitraria
roborowskii Kom.)(即大果白刺)和球果白刺(Nitraria
sphaerocarpa Maxim.) (即泡泡刺)等四种［3－4］。白刺果
营养价值很高，其味甜带酸，兼有葡萄和樱桃香味，
形状、大小都类似樱桃，故有“沙漠樱桃”之美称。白
刺果实中含有黄酮、生物碱、氨基酸、维生素和矿物
质元素等成分，药理学研究表明白刺除具有调血脂
作用外，还有调节免疫、抗疲劳、抗氧化、抗疲劳、保
肝及抗肿瘤抗癌等作用，其所含黄酮类和生物碱类
化合物是其重要活性成分［4－6］。迄今未见对 4 种白刺
总黄酮和生物碱类化合物的含量的比较研究，本研
究以 4 种白刺为材料，通过其总黄酮和生物碱类化
合物的含量的测定、比较和分析，希望为白刺活性物
质及白刺资源开发利用的研究提供更多的科学
依据。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
白刺于 2010 年 7 月分别采自内蒙古临河境内，
经内蒙古大学生命学院植物教学研室鉴定为唐古特
白刺、西伯利亚白刺、小果白刺和的球果白刺果实和
叶片。每个区域选 4 种白刺分别选取 20～30 株生长
良好的植株，在其中、上部位的东、南、西、北 4 个方
107
表 1 精密度实验
Table 1 Precision of the measured results
组分名称
测定值(mg /mL)
1 2 3 4 5 6
平均值
(mg /mL)
ＲSD
(%)
芦丁 0.0603 0.0598 0.0619 0.0603 0.0624 0.0609 0.0609 1.66
表 2 重复性实验
Table 2 Ｒeproducibility of the measured results
组分名称
测定值(mg /mL)
1 2 3 4 5
平均值
(mg /mL)
ＲSD
(%)
芦丁 0.7048 0.6920 0.6979 0.6742 0.6821 0.6902 1.77
向分别采集果实和叶，自然风干后干燥，粉碎并过 50
目筛备用;芦丁标准品 中国药品生物制品鉴定所
(批号:100080－200707 和 100040－200710) ;硫酸阿
托品标准品 中国药品生物制品鉴定所(批号:
100080－ 200707 和 100040 －200710);乙醇、亚硝酸
钠、氢氧化钠、溴甲酚绿、邻苯二甲酸氢钾、碳酸钠、
硫酸、氯仿 均为分析纯。
UV－3010 紫外分光光度计 日本岛津;BS110S
型电子分析天平 德国 Startorius公司。
1.2 实验方法
1.2.1 白刺总黄酮的测定 4 种白刺果实总黄酮的
测定，以芦丁为标准品，利用紫外分光光度计进行测
定，具体方法如下:
1.2.1.1 对照品溶液的制备 精密称取 120℃干燥至
恒重的芦丁对照品 6.05mg，置 25mL 容量瓶中，加
70%乙醇 20mL，密塞，超声使其溶解，冷却后加 70%
乙醇定容至刻度，摇匀，获得浓度为 0.242mg /mL 芦
丁标准溶液［7－8］。
1.2.1.2 标准曲线的绘制 精确量取 0.0、0.2、0.5、
1.0、2.0、2.5、3.0、4.0mL 对照溶液，分别置于 10mL 容
量瓶中，加入 5%的亚硝酸钠溶液 0.4mL，摇匀，放置
6min，再加入 10%的硝酸铝溶液 0.4mL，摇匀，放置
6min，最后加入 4%的氢氧化钠溶液 4mL，振摇并加水
至刻度，放置 15min。在 200～600nm 波长范围进行吸
收光谱扫描，以不加标准品同法制备空白对照，显示在
503nm处有最大吸收，因此选择 503nm为测定波长。
1.2.1.3 样品溶液的制备及测定 精密称取 2.5g 白
刺样品，以料液比 1∶7 加入 70%的乙醇，浸泡 12h，加
热回流提取 3 次，每次 2h，抽滤、合并 3 次滤液，并用
少量 70%乙醇洗涤，洗液并入滤液中，定容至 50mL
的容量瓶中，摇匀，作为待测原溶液。依 1.2.1.2 项中
方法显色，测定。
1.2.2 白刺总生物碱含量测定
1.2.2.1 溴甲酚绿缓冲液的配制及对照品溶液的配
制 称取溴甲酚绿 125mg，用 0.2mol /L 的 NaOH
12.5mL溶解后，加入邻苯二甲酸氢钾 2.55g，加少量
蒸馏水溶解，转移至 250mL容量瓶中，用蒸馏水稀释
至刻度，摇匀，调 pH4.42，备用。称取在 120℃干燥至
恒重的硫酸阿托品对照品 25.0mg，置于 25.0mL 容量
瓶中，加水溶解至刻度，摇匀。精密量取 5.0mL 置于
100mL量瓶中，加水稀释至刻度，即得 50.0μg /mL 对
照品溶液［9］。
1.2.2.2 供试品溶液制备和测定 称取 4 种白刺果
实和叶片样品各 50.0g 于 500mL 圆底烧瓶中，加
300mL 95%乙醇，置于 80℃水浴回流提取 3h，滤出提
取液，再加 300mL 95%乙醇同法提取 1 次，过滤，合
并滤液，旋转蒸发仪浓缩至糖浆状。提取物用 2%硫
酸溶解，合并酸水液，过滤。滤液以 5%碳酸钠碱化
至 pH9～10，用氯仿萃取 3 次，每次 20mL，合并氯仿液
并挥干，残留物以 2%硫酸溶解，将 pH调为 7.0，加水
定容于 100mL容量瓶中，即得供试品溶液［10］。
1.2.2.3 标准曲线的绘制 分别量取对照品溶液
0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL 置于 25mL 分液漏斗
中，各加水至 7.0mL，加入溴甲酚绿溶液(pH4.42)
4.0mL，摇匀。再分别加入氯仿 15.0mL，密塞瓶口振
摇 3min，静置 1h后取澄清的氯仿液，置于 25mL容量
瓶中，定容，摇匀。按 1.2.2.2 制备方法操作制备对照
液、供试液和空白液，移至 1cm 比色池中，在 200 ～
800nm波长范围内进行光谱扫描，对照品溶液和样品
溶液显色后在 418nm 处均有最大吸收值，故选定
418nm 作为测定波长。以浓度为横坐标，吸光度为
纵坐标绘制标准曲线。
2 结果与分析
2.1 白刺总黄酮的测定
2.1.1 精密度实验 取芦丁标准溶液 2.5mL，按照
“标准曲线”操作方法连续测定 6 次，结果见表 1。
ＲSD为 1.66%。
2.1.2 重复性实验 按照 1.2.1.3 方法，对同一供试
品溶液样品进行 5 次平行实验，结果见表 2。测得
ＲSD为 1.77%，表明此方法有良好的重复性。
2.1.3 稳定性实验 在室温条件下，将供试品溶液放
置 0、2、4、6、8、12h，按照上述方法进行测定，结果见表
3。ＲSD为 1.42%，说明供试品溶液在 12h内稳定。
表 3 稳定性实验
Table 3 Stability of the measured results
T(h) 吸光值 A 吸光值的平均值 ＲSD(%)
0 0.1794
2 0.1722
4 0.1750
6 0.1777
8 0.1751
12 0.1756
0.1758 1.42
2.1.4 加样回收率实验 采用加样回收法取已知含
108
表 6 精密度实验
Table 6 Precision of the measured results
组分名称
测定值(μg /mL)
1 2 3 4 5
平均值
(mg /mL)
ＲSD(%)
硫酸阿托品 3.8035 3.8132 3.7957 3.8361 3.7940 3.8085 0.45
表 7 重复性实验
Table 7 Ｒeproducibility of the measured results
组分名称
测定值(μg /mL)
1 2 3 4 5
平均值
(mg /mL)
ＲSD
(%)
硫酸阿托品 6.7725 6.6394 6.9763 6.7782 6.8106 6.7954 1.77
量的供试品溶液 6 份(三组) ，分别加入标准品溶液，
依 1.2.1.2 项中方法显色、测定总黄酮的含量。结果
见表 4，显示平均回收率为 98.84%，ＲSD =1.99%。
表 4 总黄酮加样回收率测试结果
Table 4 Ｒecoveries of the measured results
实验号 加入标准品 检测值
回收率
(%)
平均值
(%)
ＲSD
(%)
1 0.2420 0.2369 97.91
2 0.2420 0.2372 98.03
3 0.1210 0.1241 102.56
4 0.1210 0.1175 97.12
5 0.0605 0.0608 99.43
6 0.0605 0.0593 98.01
98.84 1.99
2.1.5 四种白刺总黄酮含量得比较 根据在 503nm
波长处测定其吸光度值，计算得标准回归方程 C =
3.9067A +0.0031，r = 0.9996，显示在 0～96.8μg /mL范
围内呈良好的线性关系。测得 4 种白刺果实和叶中
总黄酮含量如表 5，经单因素方差分析，果实中，唐古
特白刺和小果白刺总黄酮含量差异显著，小果白刺
总黄酮含量最高为 1.587%，唐古特白刺含量最低为
1.376%;叶中 4 种白刺总黄酮含量差异显著，球果白
刺叶的中总黄酮含量最高为 1.772%，唐古特白刺和
小果白刺次之，大果白刺含量最低。
表 5 4 种白刺果实和叶中总黄酮含量的比较
Table 5 The content of total flavonoids in leaves and fruits of
N.tangutorum、N.sibirica、N.roborowskii and N.sphaerocarpa
种类
总黄酮含量(%)
果实 叶
唐古特白刺 1.376 ± 0.002a 1.668 ± 0.004a
小果白刺 1.587 ± 0.003b 1.627 ± 0.012b
大果白刺 1.494 ± 0.001ab 1.321 ± 0.006c
球果白刺 1.425 ± 0.004ab 1.772 ± 0.005d
注:同一列数据右上角字母不同表示差异显著(p ＜ 0.05)。
下同。
2.2 白刺总生物碱含量测定
2.2.1 精密度实验 取对照品溶液 2.0mL，按 1.2.2.3
测定方法进行测定，在 418nm波长处重复测定 5 次，
结果见表 6。结果 ＲSD = 0.45%，表明本实验使用的
仪器精密性良好。
2.2.2 重复性实验 按照 1.2.2.2 方法，对同一供试
品溶液样品进行 5 次平行实验，结果见表 7，测得
ＲSD为 1.77%，表明重现性良好。
2.2.3 稳定性实验 在室温条件下，将供试品溶液
放置 0、2、4、6、8、12h，按照上述方法进行测定，结果
见表 8，ＲSD 为 1.40%，结果表明供试品溶液在 12h
内稳定。
表 8 稳定性实验
Table 8 Stability of the measured results
T(h) 吸光值 A 吸光值的平均值 ＲSD(%)
0 0.3565
2 0.3492
4 0.3496
6 0.3472
8 0.3597
12 0.3497
0.3520 1.40
2.2.4 加样回收率实验 采用加样回收法取已知含
量的供试品溶液 6 份(三组) ，分别加入标准品溶液，
依 1.2.2.3 项中方法，在 418nm处测定其吸光度，结果
显示平均回收率为 99.31%，ＲSD =1.99%(见表 9)。
表 9 总生物碱加样回收率测试结果
Table 9 Ｒecoveries of the measured results
编号 加入标准品 检测值
回收率
(%)
平均值
(%)
ＲSD
(%)
1 50.0 49.3813 98.7626
2 50.0 48.8278 97.6556
3 25.0 24.9626 99.8505
4 25.0 25.7435 102.974
5 12.5 12.2093 97.674
6 12.5 12.3685 98.948
99.31 1.99
2.2.5 四种白刺总生物碱含量得比较 根据绘制的
标准曲线，计算出回归方程是:A = 0.0543C－0.0117，
r = 0.9992，结果显示，当硫酸阿托品溶液浓度在 2.0～
12.0μg /L时，浓度与吸光值有良好的线性关系。4 种
白刺果实和叶中总生物碱含量如表 10 所示，经方差
分析，4 种白刺果实和叶中的总生物碱含量有显著差
异，叶的总生物碱含量显著高于果实的。果实和叶
中，都显示唐古特白刺总生物碱含量最高为 0.058%
和 0.152%，小果白刺次之，大果白刺和球果白刺含
量低。
(下转第 117 页)
117
aldo － hexose， suppresses development of salt － induced
hypertension in dahl rats［J］. Journal of Hypertension，2005，23
(10):1887－1894.
［8］Gao DK，Kawai N，Tamiya T.The anti－inflammatory effects of
D － allose contribute to attenuation of cerebral ischemia －
reperfusion injury ［J］. Medical Hypotheses，2011，76 (6) :
911－913.
［9］Sui L，Nomura Ｒ，Dong Y，et al.Cryoprotective effects of D－
allose on mammalian cells［J］.Cryobiology，2007，55:87－92.
［10］Ueki M，Asaga T，Chujo K，et al.D－ allose protects against
endotoxemic acute renal injury ［J］. Journal of Bioscience and
Bioengineering，2008，105(5) :481－485.
［11］Hoshikawa H，Indo K，Mori T，et al. Enhancement of the
radiation effects by D－allose in head and neck cancer cells［J］.
Cancer Letters，2011，306(1) :60－66.
［12］Yamaguchi F，Kamitori K，Sanada K，et al. Ｒare sugar
D－allose enhances anti － tumor effect of 5 － fluorouracil on the
human hepatocellular carcinoma cell line HuH－7［J］. Journal of
Bioscience and Bioengineering，2008，106(3) :248－252.
［13］Lim Y Ｒ，Oh D K.Microbial metabolism and biotechnological
production of D － allose ［J］ . Applied Microbiology and
Biotechnology，2011，91(2) :229－235.
［14］沐万孟，张龙涛，江波，等 .D－阿洛糖的功能及生物转化
生产研究进展［J］.安徽农业科学，2007，35(32) :10192
－10193.
［15］Park C S，Yeom S J，Kim H J，et al.Characterization of ribose
－5－ phosphate isomerase of clostridium thermocellum producing
D－ allose from D － psicose［J］. Biotechnology Letters，2007，29
(9) :1387－1391.
［16］Yoon Ｒ Y，Yeom S J，Kim H J，et al.Novel substrates of a
ribose－ 5 － phosphate isomerase from clostridium thermocellum
［J］. Journal of Biotechnology，2009，139(1) :26－32.
［17］Yeom S J，Seo E S，Kim Y S，et al. Increased D － allose
production by the r132e mutant of ribose－5－phosphate isomerase
from clostridium thermocellum［J］. Applied Microbiology and
Biotechnology，2011，89(6) :1859－1866.
［18］Zhang ＲG，Andersson CE，Skarina T，et al.The 2.2 angstrom
resolution structure of rpib /alsb from Escherichia coli illustrates a
new approach to the ribose－5－phosphate isomerase reaction［J］.
Journal of Molecular Biology，2003，332(5) :
檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾
1083－1094.
(上接第 108 页)
表 10 4 种白刺果实和叶中总生物碱含量的比较
Table 10 The content of total alkaloids in leaves and fruits of
N.tangutorum、N.sibirica、N.roborowskii and N.sphaerocarpa
种类
总生物碱含量(%)
果实 叶
唐古特白刺 0.058 ± 0.004a 0.152 ± 0.006a
小果白刺 0.042 ± 0.002b 0.131 ± 0.005b
大果白刺 0.021 ± 0.001bc 0.058 ± 0.002c
球果白刺 0.019 ± 0.001c 0.038 ± 0.011d
3 结论
以硝酸铝－亚硝酸钠分光光度法测定总黄酮含
量，采用酸碱提取法提取总碱，以硫酸阿托品为对照
品，酸性染料比色法测定白刺总生物碱含量的方法，
通过方法学考察，这两种方法操作简便，准确，适合
于白刺总黄酮和总生物碱含量的测定。
生物碱和黄酮类化合物是在植物体内通过次生
代谢途径合成的次生代谢产物，是药用植物的重要
有效成分。在自然生长条件下，植物的种质和遗传
适应性是影响植物次生代谢物含量的关键因素［11］。
所以，不同种质必将导致植物次生代谢物含量的变
化。通过对 4 种白刺的果实和叶总黄酮和总生物碱
含量比较，叶中总黄酮和总生物碱的含量较高，而果
实中含量较少，说明总黄酮和生物碱的积累和贮存
主要是在叶中进行。小果白刺果实总黄酮含量最
高，球果白刺叶的中总黄酮含量最高，而唐古特白刺
总生物碱含量最高;其中小果白刺和唐古特白刺在
内蒙古分布广泛，资源极为丰富，可选择作为提取白
刺总黄酮和生物碱的原料。本研究仅对内蒙古临河
地区分布的 4 种白刺的果实和叶总黄酮和总生物碱
含量进行初步测定的结果，对这 4 种白刺不同地域、
不同生长期和其它部位总黄酮和总生物碱的积累规
律还需进一步的研究。
参考文献
［1］王彦阁，杨晓晖，于春堂，等 .白刺属植物现状、生态功能
及保护策略［J］.水土保持研究，2007，6(14):75－79.
［2］努尔巴衣·阿布都沙力克，潘晓玲 .白刺属植物化学成分
分析及系统学意义［J］.新疆大学学报:自然科学版，2003，20
(1):50－54.
［3］索有瑞，王洪伦，汪汉卿 .柴达木盆地唐古特白刺果实降
血脂和抗氧化作用研究［J］.天然产物研究与开发，2004，16
(1):54－58.
［4］Liu B P L，Chong E Y Y，Cheung F W K，et al.Tangutorine
induces p21 expression and abnormal mitosis in human colon
cancer HT29 cells［J］.Biochemical Pharmacology，
2005，70(2) :287－299.
［5］贾忠建，朱广军，王继和 .唐古特白刺黄酮类化合物的研
究［J］.植物学报，1989，31(3) :241.
［6］程江华，任琪，丁之恩 .石榴皮和石榴叶的总黄酮含量及
变化研究［J］.食品工业科技，2010(4) :68－70
［7］朱金霞，刘萍 .不同生境苦豆子种子中氧化苦参碱和总黄
酮含量的比较研究［J］，时珍国医国药，2012，23 (4) :
848－850.
［8］邹慧琴，刘勇，闫永红，等 .砂仁不同部位总黄酮的含量测
定［J］.中华中医药学刊，2013，31(2):376－378.
［9］李惠芬，卢继新 .五种不同产地天仙子总生物碱的含量分
析［J］.中草药，1999，30(8):582－583.
［10］李方群，刘金荣，王鲁石 .维药白刺总生物碱的含量测定
［J］.上海中医药杂志，2007，41(6):76－78.
［11］ Spitale Ｒ Ｒ，Schlorhaufer P D，Ellmere Ｒ E P，et
al.Altitudinal variation of secondary metabolite profiles in
flowering heads of Arnica montana cv.［J］.Phytochemistry，2006，
67(4) :409－417.