全 文 ：白芷中欧芹属素乙的高效液相色谱分析
上海中医学院制药厂 黄新生 蔡金莲 .
提典 : 本文采用反相高效液相色谱法测定了白芷中生物活性成分欧芹属素乙的含量 。 该法分
离度好 , 灵敏度高 , 平均回收率达9 . 2% , 且方法简便 , 分析快速 , 结果准确 , 可用予白芷生药
的质盆评价 。
1
. 标准溶液的配制 : 准确称取欧芹属
素 乙标准品 l m g , 置于 10 m l 容量瓶 中。 用
甲醇溶介并稀释至刻度 , 配成 0 . l m g / m l 浓
度的标准溶液 。
2
. 标准 曲线的绘制: 用微量进样器 分
别精密抽取 5 、 2 0 、 2 5 、 2 0 、 2 5料1标准 溶 液
进样分析 。 以标准品的峰面积积分值为纵座
标 , 以标准 品的进样量为横座标 , 绘 制标准
曲线 。 见图 2 。 图上显示 , 在 5~ 25 川 之间标
准品的峰面积积分值和进样量呈线性关系 。
经回归分析 , 计算得到标准曲线方程 : y =
9 5 0 7 0 4x 一 1 0 6 2 3 4 0 , 相关系数 : r = 0 . 9 9 9 2。
:
0 5 10 ! 5 2 0 器 亩
, 七气
圈 2
3
. 精密度 试 验 :
抽取相 同量 的 标准 溶
液 , 连续进样多次 。 测
得结果一致 , 重现性好 。
五 、 回收率试验
取白芷生药二份 , 其中
一份加入欧芹属素 乙标
准品。 用同样方法制备成样品液 , 然后进样
测定 , 计算得回收率 。 见表 1。
衰 1 白芷加样回收率浦定衰
率)收多回`
白芷根中所含的欧芹属素 乙 ( Im p e r a -
t o r in )为生物活性物质 , 有抑菌消炎作用 ,
对银屑病有显著疗效 。 本文采用反相高效液
相色谱法分离并测定白芷中香豆精类成分欧
芹属素乙的含量 , 报道如下 。
一 、 仪 . 与药昌 W at er s 高效液相 色
谱仪 , 5 10 型输液泵 , 4 81 型可变波长检测
器 , 680 型梯度控制器 , 730 型数据处理机 ,
U 6K 型进样器 , S C 69 一02 型水份快速 测定
仪 。 杭白芷 : 上海市药材公司提供 。
二 、 标准品的制备 杭白芷经粉碎 , 过
12 目筛 , 然后用 乙醚渗摘 。 再用硅胶柱层析
法反复层析分离 , 精制 , 最后用甲醇重结晶 ,
得针状结晶 。 经光谱鉴 定 : 欧芹 属素 乙 ,
C
: . H :
`
O ;
,
m
.
p
.
l o o
。
~ 2 0 1℃ (显微镜熔点测
定 仪 、 文 献 值 1 0 2 。 ~ 1 0 2℃ ) , u v 人盘黔 n m
2 19
、
2 4 5
、
2 e 4
、
5 0 1
, 有 黄绿 色 荧光 。
I R r毖忠c m 一 ` 1 7 2 3 (内醋 ) 。 m / e 2 7 0 . 2 ( M + )
(与文献报道一致 ) 。
三 、 色讼分析条件
色谱柱 : 拼一 B o n d a p a k C : 。 ( R a d i a l ,
P A K 8 m m x 10 C m )
。流动相 : 醇 : 水 ( 6 5: 3 5 ) 。
减压抽气过滤脱气 。 柱温 、 室温 : 15 ℃ , 检
测波长 : 2 4 8 n m 。 流速 : 2 m l / m i n 。 柱压 : 编 号 {礁蟋 {恶睿潺
7 0 0 P S ,
。 量
程 : 0 . 05 A 一
U F S
。纸速 :
l e m / m i
n 。
见图 1 。
四 、 标
准曲线
牛阵翌婴l妙琴!一 }夏 =赫一止一 }牛导{半}止燮竺 } 兰生 }SD “ ` ’ 。 2一二 }止坐竺土}止兰竺 .卜~些二 {c V = ` · ’ 万止一 l二竺竺二l二坐望 ~ }一兰生 !一上一上二塑些; } 7 5 16 7 1 3 1 `。 2 · , }
日 1 白芷生蔺扭取液色份圈
舀0
六 、 生药分析
中 成 药 研 究
导数光谱法刚定感冒咳嗽冲剂
中绿原酸的含量
广西柳州地区制药厂 卢日刚
提要 : 应用一阶导数光谱法测定中成药感冒咳嗽冲剂中绿原酸的含量。 测定结果表明 , 其它
组分对测定无干扰 , 方法回收率为 9 . 75 % 。
导数光谱法在消除无关吸收的干扰具有
其独特的长处 。 一阶导数光谱是零阶导数光
谱对波长的变化率 d A / d入, 若吸收光谱服从
B e r 定律 , 即 : A 二 。 · C · 1。 当待测租 分与
一次干扰组分共存时 , 根据吸收加和性 , 有 ,
A 二 .e O I + a 入+ b 。 将其关 于 入求一 阶导
数得 :
d A d e ~
.
一 ;二~ ~ 二 一二二 - . 七 , l + a
a 人 d 人
当△入较小时 , d入二 △久, 在两个适 当的
波长处建立方程组 。 可解得 : C 二 (△ A : 一△
A
: ) / (△ e : 一△ e : ) , 于是 C a (△ A ; 一△ A : ) ,
从而提供了定量测定组分的依据 , 而一次曲
线中无关吸收不干扰 。
感冒咳嗽冲剂由金银花 、 批把叶 、 百部、
桔梗 , 天花粉等组成 。 用于感冒 、 发热 , 头
痛和咳嗽等症 。 我们用导数光谱法测定其绿
原酸的含量 , 效果满意 。
一 、 仪器 与试剂
7 5 2。 型数字分光光度计 (上海分析仪器
厂 ) 。绿原酸对照品 ( 自金银花中提取分离 , 经
薄层检验为单一斑点 , m . p 二 2 06 . 5~ 2 0 7 · 5
℃ ) 。 感冒咳嗽冲剂样品 (广西柳州地区制药
厂产品 ) 。
二 、 实验 条件的选择
1
. 绿原酸及各组分吸收光谱 的 绘 制 :
按生产工艺要求的比例 . 取中药金银花 、 百
部 、 批把叶 、 桔梗 、 天花粉 、 白糖 , 以70 %
的乙醇分别提取。 蒸去 乙醇 。 残渣 以少量水
溶解 , 用乙酸 乙醋 50 m l 萃取数次 。 吸 定 萃
取液适量 , 蒸去溶剂 , 加 0 . 2 N H C I 1 0m l ,
在 3 0 ~ 4 0 0 n m 测定吸收度 。 绘制吸收光谱 。
在 3 0 ~ 3 5 0 n m 之间 , 金银花提取物 (或绿原
酸 ) 的吸收为二次曲线吸收住。 a : “ 3 2 4 n m ) ;
其余的为一次曲线 (或近似一次曲线 ) 。 对零
阶光谱求一阶导数 , 可以消除其它中药组分
对测定的干扰 , 见图 1 。
2
. 稳定性实验 : 上述各试液分别在 自
1
. 白芷的提取 : 取通过 12 目筛的生药
白芷 10 9 , 准确称定 , 置于磨 口三角烧瓶中 。
加入 2 5 m l 乙醚 , 浸泡 2 4 h r , 共三次 。 用滤
纸抽滤入 10 Om l 圆底烧瓶中 , 再用乙醚分次
洗涤生药残渣及漏斗 。 洗液和滤液合并 , 减
压抽千一 。 残渣用甲醇溶解 , 移入 10 m l 容量
瓶中 , 稀释至刻度 , 制备成样品液 。
2
. 白芷的含量测定 : 精密抽取 样 品液
即时进样分析 , 外标法定量 , 由色谱数据处
理机计算出含量 。 见表 2 。
七 、 讨论
裹 2
编 号
欧芹属亲乙含盈测定
{ 含 量 (` ) {”
0
.
0 6 7 69 I X = 0
.
06 5 5 2
0
.
0 6 4 7 1 S D 二 0
.
0 0 1 8 0
06 4 45 { C V
= 2
.
7书
1
. 杭白芷经水份快速测定仪分析 , 其含
水量为 17 % 。
2
. 为消除色谱分析条件的变化 带来 的
测定误差 , 每次测定时 , 同时用标准对照品
溶液校正 。
. 上海中医学院仪器测试中心。
j s s . 年琳 10 期