全 文 ：云南大学学报 (自然科学版)，2011，33 (2):206 ～ 209 CN 53 －1045 /N ISSN 0258 －7971
Journal of Yunnan University http:/ /www． yndxxb． ynu． edu． cn
岩白菜素在兔子体内药物代谢动力学
*
郑新宇1，郑丽辉2，谢勇平1，蔡向阳1，王玉林1，吕日新1
(1．福建农林大学 生命科学学院，福建 福州 350002;
2．福建省职业病与化学中毒预防控制中心，福建 福州 350002)
摘要:建立一种简单快速测定兔子血浆中岩白菜素含量的高效液相色谱法，并对岩白菜素在兔子体内的药
代动力学过程进行了研究． 将血浆样品经乙酸乙酯提取后，进行高效液相色谱法分析，以甲醇 －水(体积比
22∶ 78)为流动相，测定不同采血时间点兔子血浆中的岩白菜素浓度，采用 PKS 程序拟合出岩白菜素在兔子体
内代谢的动力学参数．实验结果表明，岩白菜素在兔子血浆中的代谢过程符合二室开放模型特征，是一种吸收
快、消除快的药物．该测定方法操作简便、快速，实验得到的一系列药代动力学参数，为岩白菜素的临床用药提
供依据．
关键词:岩白菜素;高效液相色谱;血药浓度;药代动力学
中图分类号:R 282． 71;R 917． 1 文献标识码:A 文章编号:0258 － 7971(2011)02 － 0206 － 04
岩白菜素(bergenin)是一种白色疏松针状结
晶或结晶性粉末的多元酚类化合物［1 － 2］，主要存在
于虎耳草科的岩白菜属和落新妇属植物中［3］． 岩
白菜素早在 1880 年就被分离出，但直到 1958 年才
完成结构测定［2］，其结构式如图 1． 岩白菜素因其
对咳嗽中枢具有选择性的抑制作用，且具不良反应
小及连续使用不产生耐药性等特点，在临床上主要
用于镇咳祛痰、治疗慢支气管炎［4］． 此外研究还表
明岩白菜素具有抗炎［5］、抗溃疡［6］、护肝［3］和提高
免疫力［7］等药理作用，值得一提的是岩白菜素还
具有良好的抗 HIV 病毒疗效［3］． 虽然岩白菜素生
理活性显著［2］，但是岩白菜素脂溶性低［8］、不稳
定，遇光和热易变色［2］，做成制剂后在体内溶出速
度较慢，不易被吸收，极大地影响药效的发挥．因此
有必要对岩白菜素在体内的代谢、作用机理进行研
究．目前岩白菜素在大鼠体肠的吸收动力学已有报
道［9］，而本文采用高效液相色谱法研究岩白菜素
在兔子体内的药代动力学，为进一步阐明岩白菜素
在人体内药物代谢动力学过程及其临床应用提供
理论依据．
图 1 岩白菜素的分子结构
Fig． 1 Molecular structure of bergenin
1 材料与方法
1． 1 实验仪器 Agilent 1100 HPLC(安捷伦科技
有限公司) ;KQ5200 型超声波清洗器(昆山市超声
仪器有限公司) ;实验室专用超纯水机(四川沃特
尔科技发展有限公司) ;无菌注射器(江苏康友医
用器械有限公司) ;Finnpipette 可调式移液器(上
海热电仪器有限公司) ;HGC － 24A 氮气吹干仪
* 收稿日期:2010 － 10 － 06
基金项目:福建农林大学校青年基金资助项目(08B14)．
作者简介:郑新宇(1977 －) ，男，福建人，硕士，主要从事化学生物学教学与科研工作．
(厦门精艺兴业科技有限公司) ;SK － 1 快速混匀
器(江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司) ;TG16
－ WS台式高速离心机 (长沙湘仪离心机仪器有限
公司) ;电子天平 (北京赛多利斯仪器系统有限公
司)．
1． 2 药品和试剂 岩白菜素对照品购自中国生物
药品检验所;肝素钠注射液(规格 2 mL:12 500 单
位)购自天津生物化学制药有限公司;生理盐水购
自福州海王福药制药有限公司;甲醇为色谱纯，购
自江苏汉邦科技有限公司;乙醇、盐酸、乙酸乙酯均
为分析纯，分别购自上海成海化学工业有限公司、
国药集团化学试剂有限公司;0． 1%盐酸的配制:取
420 μL浓度为 12 mol /L 的盐酸，用蒸馏水定容至
50 mL，摇匀． 所有溶液在放入贮液罐之前均用
0． 45 μm滤膜过滤．
1． 3 实验动物 3 只健康大耳兔，个体质量约为
3． 2 kg，福建医科大学动物饲养中心提供，给药前
禁食 12 h，全程不禁饮水． 实验前耳缘静脉注射
0． 5 mL /kg肝素钠注射液抗凝．
1． 4 标准溶液的配制 准确称取 1 mg 岩白菜素
对照品溶于 1 mL甲醇，配制成 1 mg /mL的母液，并
依次稀释成 600，300，100，25，5 μg /mL质量浓度的
标准液，放置 4 ℃冰箱保存．
1． 5 注射液的配制 取岩白菜素对照品 20 mg 溶
于 1． 5 mL甲醇，然后用过滤后的 0． 9%生理盐水
稀释至 3 mL，配制成 6． 67 mg /mL 的注射液． 每只
大耳白兔耳缘静脉注射岩白菜素，注射剂约为
6． 25 mg /kg．
2 岩白菜素 HPLC测定方法的建立
2． 1 色谱工作条件 色谱柱:Agilent TC － C18
(4． 6 mm × 250 mm，5 μm) ;进样器:六通阀进样
器;脱气装置:在线脱气装置;色谱条件:流动相为
甲醇∶水(体积比 22∶ 78) ，流速为 0． 7 mL /min，温度
为 30 ℃，紫外检测波长为 220 nm，进样量为 20
μL．
2． 2 血浆样品前处理 兔全血于 10 000 r /min 离
心 15 min，取上清血浆 300 μL，加入 0． 1 mol /L 盐
酸 0． 03 mL，涡旋混匀，再加入乙酸乙酯 700 μL，涡
旋混匀，5 000 r /min 离心 10 min，取上清液 550 μL
于另一试管，用氮气流吹干，残渣用 300 μL甲醇溶
解，然后于 0． 45 μm有机相针头式滤器过滤，取 20
μL进样．
3 岩白菜素兔子体内药代动力学研究
3． 1 给药和取样 在给药之前，抽取 5 mL 全血．
耳缘静脉注射 0． 5 mL /kg肝素钠注射液，然后注射
6． 25 mg /kg的岩白菜素注射液(用 0． 9%生理盐水
配制)．
3． 2 药代动力学参数计算 家兔静脉给药后分别
于 1，3，5，7，10，15，20，30，60，90，120 min 由耳缘静
脉各取血 2 mL，按 2． 2 血浆样品的制备方法进行
血样处理，经液相色谱法测定不同采血点的血药质
量浓度(n = 3) ，并利用标准曲线计算各峰面积对
应的质量浓度，血药质量浓度 －时间数据经 PKS
药代动力学计算程序(上海宏能软件有限公司开
发，版本号:V1． 0)进行曲线拟合(模型算法:单纯
形法;模型选择:自动选择;权重:w = 1;精度:
0． 000 01;迭代次数:500) ，得出岩白菜素在兔子血
浆中的主要药代动力学参数．
4 结果与分析
4． 1 岩白菜素在家兔血浆中的线性范围和检测限
家兔给药前，抽取约 5． 0 mL 血样，制备体积为
270 μL的空白血浆 5 份． 向兔子空白血浆中分别
加入 30 μL 质量浓度分别为 600，300，100，25，5
μg /mL岩白菜素对照品溶液，然后按照血浆样品
前处理方法处理标准含药血浆，配制质量浓度范围
为 0． 5 ～ 60． 0 μg /mL的标准含药血浆，在最优化条
件下进行高效液相色谱分析，并对其线性关系进行
研究．以标准含药血浆中的质量浓度(μg /mL)对
峰面积作图，得到回归方程分别为:
y = 7． 9156x + 0． 198(R2 = 0． 999 9) ，
y为峰面积 (mAU) ;x为质量浓度(μg /mL)．
岩白菜素在 60． 0 ～ 0． 5 μg /mL 的范围内呈现
良好的线性关系，在最佳条件下采用 0． 5 μg /mL的
岩白菜素进行空白测定，测得标准偏差 (σ)为
0． 528，从而计算出岩白菜素检测限 D(置信度
95% ，D = 3σ /K)为 0． 20 μg /mL．
4． 2 精密度实验 制备体积为 270 μL 的空白血
浆 3 份．向兔空白血浆中分别加入 10，200，500 μg /
mL岩白菜素对照品溶液 30 μL，然后按 2． 2 血浆
样品的制备方法进行血样处理，得到质量浓度分别
为 1，20，30 μg /mL的岩白菜素血浆样品．每一质量
浓度样品连续进样 5 次，连续进行 5 d，由线性方程
计算其检测质量浓度，求算方法的日内 RSD 和日
702第 2 期 郑新宇等:岩白菜素在兔子体内药物代谢动力学
间 RSD，该方法的日内 RSD、日间 RSD 分别为
2． 64% ～ 4． 45%和 2． 65% ～ 3． 73% ． 说明实验建
立的方法重现性良好，满足药代动力学研究对方法
的要求．
4． 3 回收率实验 按前述精密度实验方式配制浓
度为 1，20，30 μg /mL的岩白菜素血浆样品，得到 3
种质量浓度的平均回收率分别为 94． 1%、100． 6%
和 102． 5% ．说明采用此方法检测到的岩白菜素的
血药浓度是准确、可靠的．
4． 4 血药浓度和时间的关系 血药质量浓度 －时
间数据经 PKS 药代动力学计算程序进行曲线拟
合，岩白菜素在兔体内的动力学行为符合二室开放
模型，如图 2，空白血浆及血浆中含有岩白菜素的
HPLC谱图见图 3．
4． 5 药代动力学参数 取岩白菜素血药质量浓度
平均值经 PKS 药代动力学计算程序拟合，其主要
动力学参数见表 1．单剂量静脉注射二室模型表达
式:中央室药量表达式
ρ = Ae －αT + Be －βT =
43． 794 e －0． 355 63T + 6． 262 2e －0． 0108 04T，
外周室药量表达式
ρ =
K12C0
V2(α － β )
(e －αT － e －βT)=
0． 241 26 × 37． 36
0． 698 30(0． 355 63 － 0． 010804)·
(e －0． 355 63T － e －0． 010 804T) ，
初始血药质量浓度 ρ0 = 37． 36 μg /mL．
图 2 兔子口服浓度为 6． 25 mg /kg 的岩白菜素后血
药质量浓度和时间的关系图
Fig． 2 Plasma concentration － time curve of bergenin in
rabbit after iv administration of 6． 25 mg /kg
A:空白血浆;B:空白血浆加岩白菜素对照品的色谱图
(10． 0 μg /mL) ;C:兔子给药 10 min 后血浆样品色谱图
(6． 58 μg /mL)
图 3．兔子血浆中岩白菜素样品色谱图
Fig． 3 Chromatograms of bergenin in rabbit plasma
表 1 岩白菜素的主要药代动力学参数a
Tab． 1 The main pharmacokinetics parameters of bergenina
参数 参数名称 参数值 参数 参数名称 参数值
A 分布相的零时截距 43． 794 μg /mL K10 中央室消除的速率常数 0． 071 228 min －1
B 消除相的零时截距 6． 262 2 μg /mL K12 从中央室向外周室转运速率常数 0． 241 26 min －1
α 分布速率常数 0． 355 63 min －1 Vd 表观分布容积 0． 823 16 L /kg
β 消除速率常数 0． 010 804 min －1 V1 一室分布容积 0． 124 86 L /kg
T1 /2α 分布相半衰期 1． 949 1 min V2 二室分布容积 0． 698 30 L /kg
T1 /2β 消除相半衰期 64． 157 min CL 消除率 8． 89 ×10 －3L /(kg·min －1)
K21
从外周室向中央室转运
速率常数
0． 053 942 min －1 AUC∞
血药质量浓度 －时间曲线下
面积
702． 77 μg·min /mL
a(dose:6． 25 mg /kg，three rabbits)
802 云南大学学报(自然科学版) 第 33 卷
5 结 论
药代动力学处理结果表明，岩白菜素在兔血中
的代谢过程符合二室开放模型特征，由表 1 可知岩
白菜素在兔子体内的分布相生物半衰期 T1 /2 α为
1． 949 1 min，说明岩白菜素在 1． 5 ～ 2． 5 min 内就
可分布在各组织中，且分布量高． K12为 0． 241 26
min －1，K21为 0． 053 942 min
－1，说明岩白菜素由中
央室向外周室的转运速度大于外周室返回中央室
的转运速度． 消除相生物半衰期 T1 /2 β为 64． 157
min，属于短效半衰期药物，说明岩白菜素在兔子血
浆中仅能保持较短时间．血药质量浓度 －时间曲线
下面积 AUC 值为 702． 77 μg·min /mL，表明岩白
菜素的吸收程度好． 表观分布容积 Vd 为 0． 823 16
L /kg，说明岩白菜素排泄较快，在体内存留的时间
较短．
综上所述，岩白菜素是一种快速吸收、排泄快
的药物．
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Pharmacokinetics of bergenin in rabbits
ZHENG Xin-yu1，ZHENG Li-hui2，XIE Yong-ping1，CAI Xiang-yang1，WANG Yu-lin1，LV Ri-xin1
(1． College of Life Sciences，Fujian Agriculture and Forestry，Fuzhou 350002，China;
2． Fujian Center for Prevention and Control of Occupational Diseases and Chemical Poisoning，Fuzhou 350002，China)
Abstract:Aim:A simple and rapid method for analysis of bergenin in rabbit plasma with high performance
liquid chromatography (HPLC)was established，and then the pharmacokinetic of bergenin was studied further in
rabbits． Methods:Plasma samples which were extracted by ethyl acetate were used for analysis by HPLC． And
methanol － water ( (22∶ 78)was used as the mobile phase． After the bergenin was injected intravenously into rab-
bits，the blood concentration of drug can be detected，thus blood concentration time curves as well as pharmacoki-
netics parameters were worked out according to the PKS pharmacokinetics program． Conclusion:The experimental
results indicated that the pharmacokinetiecs characteristics were fitted with the two － compartment model． The
bergenin was absorbed into blood and eliminated quickly． The developed method was simple and rapid and then a
series of pharmacokinetics parameters were obtained，these findings could provide reference for clinical rational
administration．
Key words:bergenin;HPLC;plasma concentration;pharmacokinetics
902第 2 期 郑新宇等:岩白菜素在兔子体内药物代谢动力学