全 文 ：云南民族大学学报:自然科学版，2015，24(3):199 － 201 CN 53 － 1192 /N ISSN 1672 － 8513
doi:12． 3969 / j． issn． 1672 － 8513． 2015． 03． 007 http:/ / xb. ynni. edu. cn
收稿日期:2014 － 11 － 02．
基金项目:昆明市西山区产业发展专项资金扶持资助项目．
作者简介:何耀莹(1987 －)，女，硕士，助理工程师． 主要研究方向:药品研发．
通信作者:李俊(1972 －)，女，学士，高级工程师． 主要研究方向:药品研发．
ＲP － HPLC法测定复方岩白菜素片中岩白菜素的含量
何耀莹1，2，刘兴娟1，2，冯 春1，2，李 俊1，2
(1. 昆明振华制药厂有限公司，云南 昆明 650034;2. 云南植物药业有限公司，云南 昆明 650500)
摘要:建立了复方岩白菜素片中岩白菜素含量测定的反相高效液相色谱法．采用色谱柱 Diamon-
sil C18(5 μm，4. 6 mm × 250 mm)，柱温为 30 ℃;流动相为 V(乙腈)∶ V(水)= 15 ∶ 85;流速为
1. 0 mL·min －1;检测波长 272 nm．研究结果表明:岩白菜素在 28. 32 ～ 226. 56 μg /ml的范围内呈
良好的线性关系，样品平均回收率为 100. 86%，ＲSD = 0. 89% ．该方法操作简便，快速，具有良好
的稳定性和重复性，适用于复方岩白菜素片中岩白菜素含量测定．
关键词:岩白菜素;复方岩白菜素片;ＲP － HPLC;含量
中图分类号:Ｒ284. 1 文献标志码:Ｒ284. 1A 文章编号:1672 － 8513(2015)03 － 0199 － 03
复方岩白菜素片是由岩白菜素与马来酸氯苯那
敏制成的复方制剂，对慢性支气管炎具有良好的镇
咳、祛痰、镇痛、镇静作用． 岩白菜素又称岩白菜内
脂，属异香豆素类化合物，是从虎耳草科植物岩白菜
或云南岩白菜以及落新妇和多花落新妇等植物中提
取得到［1］．主要作用是止咳祛痰和慢性支气管炎的
治疗，近年来药理实验发现岩白菜素还具有抗炎、护
肝、抗溃疡、提高免疫等作用［2］． 复方岩白菜素片在
体内吸收快、排泄快，故作用时间短． 且反复使用无
明显耐药性，不良反应较少，较大剂量对心、肾和肝
也无明显毒性［3］．近年来复方岩白菜素片市场的逐
步扩大，消费者、新闻媒体对复方岩白菜素片的品质
要求越来越高，对复方岩白菜素片的质量关注度越
来越强，而复方岩白菜素片现行质量标准为紫外分
光光度法［4］，精确度不高．
目前有部分文献研究了复方岩白菜素片的液相
测定方法．杨怀镜等［5］以 V(甲醇)∶ V(H2O)= 40∶
60 为流动性，检测 220 nm 波长测定了复方岩白菜素
片含量． 熊佐章［6］以检测波长 275 nm，V(甲醇)∶ V
(H2O)= 20∶ 80 溶液以磷酸调 pH 2. 5 为流动相测
定复方岩白菜素片含量． 赵素琴以 V(甲醛)∶ V
(H2O)= 25∶ 75 为流动相，检测波长 274 nm 建立了
西藏产岩白菜中岩白菜素含量测定方法［7］． 本文采
用乙腈 －水为流动相，噪声小，柱压低，所建立的复
方岩白菜素片含量测定的高效液相色谱法简便、快
速、重复性好，适用于岩白菜素含量测定．
1 仪器与试药
1. 1 仪器
BSA224S － CW 分析天平(赛多利斯科学仪器
(北京)有限公司);
UV －2401PC型紫外可见分光光度计(岛津);
LC －10AT vp 型高效液相色谱仪、SPD － 10AT
vp型紫外检测器、CTO － 10AS vp 型柱温箱(日本岛
津公司);威玛龙色谱工作站．
1. 2 试药
岩白菜素对照品(购自中国食品药品检定研究
院，批号 111532 － 200202，含量以 94. 4%计);复方
岩白菜素片供试品由昆明振华制药厂有限公司提供
(批号:20140805);乙腈为色谱纯，水为经 0. 45 μm
的微孔滤膜滤过的纯化水．
2 实验方法与结果
2. 1 色谱条件
色谱柱:Diamonsil C18(5 μm，4. 6 mm ×250 mm);
柱温:30 ℃;流动相:V(乙腈)∶ V(水)= 15∶ 85;流速:
1. 0 mL·min －1;检测波长 272 nm;进样量 10 μL，理论
板数以岩白菜素计算应不低于 4 500．
2. 2 阴性对照溶液制备
按供试品处方工艺制备不含岩白菜素的阴性制
剂，取适量阴性制剂研细，取 23 mg 置于 50 mL容量
瓶中，用流动相溶解并定容至刻度，过滤即得．
2. 3 对照品溶液的制备
准确称取岩白菜素对照品 6. 0 mg 置 10 mL 容
量瓶中，加流动相使溶解，并用流动相稀释至刻度，
摇匀，即得．
2. 4 供试品溶液制备
取复方岩白菜素片 10 片(批号:20140805)，准确
称取，研细，精密称取细粉适量置 50 mL容量瓶中，加
流动相约 30 mL振摇使岩白菜素溶解，用流动相稀释
至刻度，摇匀，滤过．精密量取续滤液 2 mL 置 10 mL
容量瓶中，加流动相定容，过滤即得供试品溶液．
2. 5 系统适应性
按 2. 1 节中色谱条件，精密吸取溶剂空白、阴性
对照、供试品、对照品溶液各 10 μL，分别注入色谱
仪．由图可见供试品色谱中在与对照品色谱图相应
的位置上有一相同的色谱峰，而阴性无干扰． (见图
1 ～ 4)．
2. 6 线性关系考察
准确量取对照品溶液 0. 5、1. 0、1. 5、2. 0、4. 0 mL
置 10 mL 容量瓶中，用流动相定容至刻度． 进样
10 μL，记录峰面积．以岩白菜素质量浓度(ρ)为横坐
标，峰面积(A)为纵坐标，绘制标准曲线．得回归方程
A =1. 606 1 × 104ρ + 5. 932 3 × 104(r = 0. 999 1)．结果
表明岩白菜素质量浓度在 28. 32 ～ 226. 56 μg /mL 范
围内与峰面积呈良好线性系．
2. 7 精密度试验
配制质量浓度为 84. 96 μg /mL的岩白菜素对照
品溶液，连续进样 6 次． 计算岩白菜素峰面积 ＲSD
值为 0. 38% ．
2. 8 稳定性试验
取复方岩白菜素片供试品溶液，室温保存．分别
于 0、2、4、6、8、12、24 h 进样测定． 结果岩白菜素峰
面积值 ＲSD为 0. 57% ． 表明供试品溶液在 24 h 内
稳定性良好．
2. 9 重复性试验
取同一批复方岩白菜素片 6 份，按供试品溶液
的制备方法制备并依法测定含量． 结果岩白菜素含
量的 ＲSD 为 0. 55% (n = 6)． 表明该方法重现性
较好．
2. 10 加样回收试验
精密称取岩白菜素对照品适量配制成含量为
2. 45 mg /mL的标准储备液．精密称取已知含量的复
方岩白菜素片适量置 50 mL容量瓶中，平分 9 份．分
别加入岩白菜素对照品标准储备液 4 mL(3 份)，5
mL(3 份)、6 mL(3 份) ，按供试品溶液同法制备，测
定含量，测定结果见表 1．
2. 11 样品含量测定
取不同批次复方岩白菜素片 10 片，按供试品溶
液制备方法制备 6 批样品溶液． 各取 10μL，注入液
相色谱仪，测定，结果见表 2．
002 云南民族大学学报(自然科学版) 第 24 卷
表 1 回收率测定结果
样品 样品加入量 /mg 加入量 /mg 实测量 /mg 回收率 /% 平均回收率 /% ＲSD /%
1 11. 53 9. 8 21. 3 99. 64
2 11. 45 9. 8 21. 27 100. 20
3 12. 02 9. 8 22. 07 102. 56
4 12. 5 12. 25 24. 81 101. 08
5 11. 86 12. 25 24. 15 100. 32 100. 86 0. 89
6 12. 26 12. 25 24. 53 100. 14
7 11. 85 14. 71 26. 64 100. 55
8 11. 77 14. 71 26. 70 101. 50
9 12. 25 14. 71 27. 22 101. 76
表 2 样品测定结果(昆明振华制药厂) %
批号 标示含量
20140804 95. 26
20140805 95. 83
20140806 95. 86
20140901 96. 48
20140902 94. 96
20140903 95. 57
注:本品含岩白菜素为标示量的 93% ～107% ．
3 结果与讨论
本实验对岩白菜素对照品溶液进行了全波长扫
描，结果显示岩白菜素在 220 nm 和 272 nm 波长处
有最大吸收峰，但由于在 220 nm 处干扰较大，故选
定 272 nm为检测波长．
在 HPLC法测定时，以岩白菜素作为指标，经过
方法学考察，选用流动相 V(乙腈)∶ V(H2O)=15∶ 85，
岩白菜素峰的理论板数较高，为5 300，吸收峰峰型较
好且保留时间适宜．平均回收率为 100. 86%，ＲSD 为
0. 89% ．在系统耐受性实验中，考察不同分析柱，适当
改变流动相 2组分比例以及柱温，不影响分析结果．
综上所述，所建立的液相方法条件线性良好，稳
定性好重复性高．本方法具有简便、快速、准确、专属
性强的特点，可作为产品有效的质量控制方法．
参考文献:
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Determination of the content of bergeninum
in compound bergeninum tablets by ＲP-HPLC
HE Yao-ying1，2，LIU Xing-juan1，2，FENG Chun1，2，LI Jun1，2
(1． Kunming Zhenhua Pharmaceutical Co．，Ltd．，Kunming 650034，China;
2． Yunnan Phytopharmaceutical Co．，Ltd．，Kunming 650500，China)
Abstract:This research aims to establish a ＲP － HPLC method for the determination of the content of bergeninum in
compound bergeninum tablets． The column used is Diamonsil C18(5μm，4． 6mm ×250mm)and its temperature is 30℃．
The mobile phase is acetonitrile －water(15:85)with a flow rate of 1． 0 mL·min －1． The detection wavelength is 272nm．
The experiment result shows that bergeninum has a good linear correlation in the range of 28． 32 μg /mL—226． 56 μg /
mL． The average recovery is 100． 86% and the ＲSD is 0． 89%． The method is simple and quick with good stability and
repeatability，and suitable for the determination of the content of bergeninum in compound bergeninum tablets．
Key words:bergeninum;compound bergeninum tablets;ＲP － HPLC;content
(责任编辑 王 琳)
102第 3 期 何耀莹，刘兴娟，冯 春，等:ＲP － HPLC法测定复方岩白菜素片中岩白菜素的含量