全 文 ：2013 年 2 月第 15 卷第 1 期
February 2013，Vol. 15，No. 1
湖北中医药大学学报
Journal of Hubei University of Chinese Medicine
作者简介:范卫锋(1978 －) ，男，工程师，研究方向:中药质量分析和标准研究。
高效液相色谱法测定广西四方藤中岩白菜素的含量
范卫锋
(广西玉林制药集团有限责任公司，广西 玉林 537001)
摘要:目的 通过不同地区四方藤中岩白菜素的含量的研究，为资源利用提供依据。方法 选用 Agilent TC － C18
柱( 4． 6mm × 250mm，5μm) ，流动相为甲醇 －水( 25∶ 75) ，流速: 1． 0 mL /min，检测波长: 275nm。结果 岩白菜素对照品
在 0. 1082 － 0. 5041μg 范围内呈良好的线性关系，平均回收率为 98． 76%，RSD = 1． 12% ( n = 6) 。结论 定量方法简
便、准确、重复性好。
关键词:四方藤;岩白菜素; 高效液相色谱法
中图分类号:R284 文献标识码:A doi: 10. 3969 / j. issn. 1008 － 987x. 2013. 01. 11
Determination of Bergenin in Cissus Pterolada Hayata by HPLC
FANG Weifeng
(Guangxi Yulin Pharmaceutical Corporation Limited，Yulin 537001)
Abstracts:Objective To analyze and compare the differences of bergenin content in Cissus pterolada Hayata． from different regions
and to supply a basis for the resources exploitation． Methods The chromatographic assay of bergenin was performed on Agilent TC － C18 柱
(4． 6mm × 250mm，5μm)with the flow rate of 1． 0 mL /min． The mobile phase consisted of methanol － water(25∶ 75)． The detection wave-
length was at 275 nm． Results The standard of curves of bergenin showed a good linearity from 0． 1082 to 0. 5041 μg and average recovery
was 98． 76% ． RSD was 1． 12% ． Conclusion The method is simple，accurate and repeatible．
Key words:Cissus pterolada Hayata;bergenin;HPLC
四方藤为葡萄科植物四方藤 Cissus pterolada Hayata． 的干
燥藤茎，别名有宽筋藤、红宽筋藤、脊根藤、伸筋藤、蚂蝗
藤、软筋藤、风藤、方藤、红四方藤，主产于广西、广东。四
方藤中含有黄酮、萜类、芪类、生物碱、香豆素类、甾体等活
性成分，潘保强等［1］从四方藤中分离得到了异香豆素岩白菜
素，文献显示该植物有抗炎镇痛，拮抗内皮素 － 1 (ET － 1)
和蛇毒 (S6b)、抑制胃溃疡、抗骨质疏松症、抗氧化、抗菌、
抗过敏、抗肿瘤、治糖尿病等活性［2］。本研究采用高效液相
色谱法 (HPLC)测定四方藤的主要成分岩白菜素的含量，以
利于四方藤的开发利用。
1 材料
1． 1 仪器
Agilent1200 系列高效液相色谱仪(包括四元泵，自动进样
器，脱气机，紫外可见检测器，柱温箱)。
1． 2 试药
四方藤(广西玉林制药有限责任公司提供，由广西玉林制
药集团有限责任公司蒙毅高级工程师鉴定) ;岩白菜素对照品
(由中国药品生物制品检定所提供，批号:111532 － 200202，纯度
在 98%以上供含量测定用) ;水为重蒸馏水，甲醇为色谱纯，其
余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2． 1 色谱条件
Agilent TC － C18 柱(4． 6mm × 250mm，5μm) ，流动相为甲
醇 －水(25:75) ;流速:1． 0 mL /min;检测波长:275nm;柱温:
30℃;进样量:5μL。理论塔板数按岩白菜素计算应不低于
1500［3］。
2． 2 溶液制备
对照品溶液的制备:精密称取岩白菜素对照品适量，加甲醇
制成含岩白菜素 0. 1082mg /mL的溶液，作为对照品溶液。
供试品溶液的制备:取四方藤粉末 (过 50 目筛)适量，
精密称定 0. 1g，置具塞三角瓶中，加入甲醇 50mL，称定重
量，超声 30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重
·13·
湖北中医药大学学报
Journal of Hubei University of Chinese Medicine
2013 年 2 月第 15 卷第 1 期
February 2013，Vol. 15，No. 1
量，摇匀，滤过，滤液用微孔滤膜 (0. 45μm)滤过，取续滤
液，作为供试品溶液。见图 1。
图 1 HPLC色谱图
2． 3 线性关系考察
分别精密吸取岩白菜素对照品溶液(0. 1082mg /mL)1、2、3、
4、5mL，置于 5mL的容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，各进样
5μL，连续进样 2 次，测定峰面积，以对照品进样量为横坐标，峰
面积为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程:Y = 1． 3896 × 103X
+ 30. 1897，r = 0. 9997，在 0. 1082 － 0. 5041μg 范围内呈良好的
线性关系。
2． 4 精密度试验
取岩白菜素对照品溶液，各重复进样 6 次，测定峰面积，结
果岩白菜素峰面积 RSD = 0. 93%。
2． 5 重现性试验
取同一批的样品 6 份，按制备供试品溶液，测定四方藤中岩
白菜素含量，结果 RSD = 1． 16%。
2． 6 稳定性试验
取同一供试品溶液，分别于配制后 0、4、8、12h，依法测定峰
面积，结果岩白菜素的 RSD 为 0. 75%，表明样品溶液在 12h 内
基本稳定。
2． 7 加样回收率试验
取已知岩白菜素含量的四方藤粉末，取约 0. 05g，分别精密
称定，平行称取 6 份，各加入一定量的岩白菜素对照品，制备供
试品溶液，在所确定的 HPLC 条件下进行测定。根据上述色谱
条件测定峰面积，计算回收率。岩白菜素的平均加样回收率均
在 98． 76%之间，且 RSD均小于 2%，说明该方法准确可靠。结
果见表 1。
表 1 岩白菜素回收率测定结果
样品含量
(mg)
加入量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
1． 1651 0. 8155 1． 9795 99． 86
1． 1784 0. 8155 1． 9812 98． 44
1． 1363 1． 1650 2． 3001 99． 90
1． 1595 1． 1650 2． 3029 98． 14
1． 1271 1． 5145 2． 6402 99． 17
1． 1842 1． 5145 2． 6537 97． 03
7． 76 1． 12
2． 8 样品测定
取 3 批四方藤，进行含量测定，结果见表 2。
表 2 样品测定结果 (n = 3)
产地 岩白菜素含量(%)
上林 2． 3
马山 1． 8
金秀 2． 1
都安 2． 4
贺州 1． 8
忻城 2． 0
3 讨论
检测波长的选择:应用紫外可见分光光度计 UV1100 在 190
－ 400 nm范围内对岩白菜素进行紫外扫描，并结合三维图，发
现该化合物有两个吸收峰，分别位于 220 nm和 275 nm，考虑流
动相中甲醇在 220 nm波长处对基线有影响，故实验中检测波长
选为 275 nm。
曾经以 10、20、30、60 min 超声提取测定岩白菜素的含量，
结果超声 30 和 40 min 超声提取效率基本一致，故供试品溶液
制备采用超声 30 min。
考察广西主产的四方藤，以都安产的四方藤质量最佳，未对
其他产区的四方藤进行研究，故需进一步加强研究。
参考文献:
［1］ 潘保强，濮全龙．四方藤化学成分研究简报［J］． 中草药，1981，12
(6) :45．
［2］ 张叶青，谢一辉，黄丽萍．白粉藤属植物化学成分及生理活性的研
究进展［J］．时珍国医国药，2006，17(1) :107 － 109．
(收稿日期:2012 －09 －10 编辑:林飞)
·23·