全 文 ：HPLC法测定岩白菜素和复方岩白菜素片的含量
杨怀镜　姚宏春　张全望1 (云南省大理州药品检验所　671000;　1 云南白药集团大理药业有限
责任公司)
摘要　本文采用 HPLC法测定岩白菜素及复方岩白菜素片的含量 , 以甲醇-H2O (40∶60)为流动相 , 检测
波长 220nm , 在 0.1670 ～ 0.8352μg 的范围内呈良好的线性关系 , γ=0.9998 , 平均回收率为 99.34% (n=
5), RSD=0.77%。本法操作简便准确 , 可作为岩白菜素及复方岩白菜素片的质量控制方法。
关键词　复方岩白菜素片　岩白菜素　HPLC
中图分类号:R927.2　　文献标识码:A　　文章编号:1002-7777 (2003)03-0171-02
Quantitative Determination of Bergeninum and Compound Bergeninum Tablets by HPLCMethod
Yang Huaijing , Yao Hongchun and Zhang Quanwang1 (Institute for Drug Control of Daku Orefecture , Yunnan Province ,
671000;1Baiyao Group of Dali Pharmaceutical Co., LTD)
ABSTRACT　A HPLC method for the quantitative determination of bergeninum and compound bergeninum tablets was
described.The HPLC system consisted Kromasil C18 column (250mm×4.6mm , 5μm), methanol -water(40∶60)as
mobile phase , and with detection wavelength 256nm.The column temperature is 30℃.The linear correlation was good
in the range of 0.1670 ～ 0.8352μg of bergeninum , correlation coefficient is 0.9998.The average recovery was 99.34%
(n=5)and the RSD was 0.77%.The method is simple , accurate and can be used for quality control of bergeninum
and compound bergeninum tablets.
KEYWORDS　compound bergeninum tablet;bergeninum;HPLC
　　岩白菜素是从虎耳草科植物红花落新妇
[Astilbe chinensis (Max)Fret Sav] 等的根茎中提取
而得的白色针状结晶[ 1] ;复方岩白菜素片是由岩白
菜素与马来酸氯苯那敏制成的复方制剂 , 具有祛痰
镇咳之功效 , 用于治疗慢性支气管炎[ 2] 。现行质量
标准为紫外分光光度 (UV)法[ 2 , 3] 。本文采用
HPLC法对原料药岩白菜素及其复方制剂进行含量
测定 , 现将结果报道如下 。
1　仪器与试药
仪器:CLASS -10AVP 高 效 液相 色 谱 仪
(Shimadzu , CLASS -VP 5.02 Workstation);UV -
2401PC紫外分光光度计 (Shimadzu)。
样品:岩白菜素对照品 (由符合 《中国药典》
2000年版一部的岩白菜素原料 , 经丙酮重结晶制
得。面积归一化法测定 , 含量为 99.2%)。复方岩
白 菜 素 片 (批 号 为 20020210 , 20020418 ,
20020421)、岩白菜素 [ (原料)批号为 20011022 ,
20011024 , 20020401] 均由云南白药集团大理药业
责任公司提供。
试药:甲醇为色谱纯 , 水为经 0.45μm 的微孔
滤膜滤过的纯化水 。
2　实验方法与结果
2.1　色谱条件
色谱柱:Kromasil C18 (5μm , 4.6mm×250mm);
柱温 30℃;流动相:甲醇-H2O (40∶60), 流速:
0.7ml·min-1 , 检测波长:220nm 。
2.2　对照品溶液的制备　精密称取在 105℃干燥至
恒重的岩白菜素对照品 26.1mg , 置 50ml量瓶中 ,
加甲醇 20ml使溶解 , 并用流动相稀释至刻度 , 摇
匀 , 精密量取 2ml , 置 25ml量瓶中 , 用流动相稀释
至刻度 , 摇匀 , 即得。
2.3　线性关系考察
精密量取上述对照品溶液 4 、 8 、 12 、 16 、
20μl , 注入液相色谱仪 , 测定峰面积 , 以岩白菜素
进样量 (μg)为横坐标 , 峰面积为纵坐标 , 绘制标
·171·中国药事 2003年第 17卷第 3期
DOI :10.16153/j.1002-7777.2003.03.021
准曲线 。回归方程为 C=1.271×10-7A-7.498×
10
-3 (γ=0.9998)。结果表明岩白菜素在 0.1670 ～
0.8352μg范围内呈良好的线性关系。
2.4　精密度与溶液稳定性试验
取2.6项下的样品溶液重复进样测定峰面积 ,
RSD =0.62%(n=5)。于配制后 2 、 4 、 6 、 8 、 10 、
24h 分别精密进样 10μl , 测定峰面积 , RSD =
1.08%(n=6)。结果表明该方法的精密度与样品
溶液的稳定性良好。色普图见图 1。
图 1　对照品色谱图
2.5　回收率试验
按处方组成 , 分别称取辅料 [药用淀粉:硬脂
酸镁∶糊精∶马来酸氯苯那敏 (14∶4∶6∶0.2)的混合
物] 约 5 、 10 、 15 、 20 、 25mg , 精密称定 , 分置
50ml量瓶中 , 各精密加入在 105℃干燥至恒重的岩
白菜素对照品约 25mg , 混匀 , 加甲醇 20ml , 照 2.6
项下的方法测定 。平均回收率为 99.34%, RSD =
0.77%(n=5), 且样品中含有的辅料量对回收率
无明显的影响。结果见表 1。
表 1　样品回收率结果 (n=5)
辅料
(mg)
加入量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均
回收率(%)
RSD
(%)
5.1 24.5 24.534 100.14
10.0 24.3 24.334 100.14
15.2 24.5 24.179 98.69 99.34 0.77
20.0 26.2 26.124 99.71
25.3 26.0 25.623 98.55
2.6　样品测定
精密称取供试品 (原料药)约 25mg 或取供试
品20 片 , 精密称定 , 研细 , 精密称取细粉适量
(约相当于岩白菜素 25mg), 置 50ml量瓶中 , 加甲
醇约 20ml , 振摇使岩白菜素溶解 , 用流动相稀释
至刻度 , 摇匀 , 滤过 , 精密量取续滤液 2ml , 置
25ml量瓶中 , 用流动相稀释至刻度 , 摇匀;精密
吸取对照品溶液与供试品溶液各 10μl , 注入液相色
谱仪 , 记录色谱图 , 按外标法以峰面积计算 。本法
与法定方法测定结果见表 2 , 色谱图见图 2 、 3。
3　讨论
3.1　流动相的选择
本试验选用甲醇-H2O (40∶60)为流动相 ,
岩白菜素峰的理论板数较高 (4966)且保留时间适
宜 (5.403min)。
表 2　两种方法测定结果(n=4)
批　号 含量(%)
UV法 HPLC法 RSD(%)
20011022 101.2 99.4 0.76
20011024 101.2 100.0 0.64
20020401 99.2 98.6 0.73
20020210 96.5 98.6 0.76
20020418 99.0 98.3 0.94
20020421 97.6 97.7 0.56
　图 2　岩白菜素色谱图　　图 3　复方岩白菜素片色谱图
3.2　检测波长的选择
对每 1ml中含岩白菜素约 20μg 的甲醇溶液进
行紫外扫描 , 结果见图 4 , 岩白菜素在 220nm 与
275nm的波长处有最大吸收 。本试验分别考察了以
220nm 、 275nm 为检测波长测定样品含量的情况 ,
结果显示以 220nm为检测波长时 , 岩白菜素峰的理
论板数比以 275nm为检测波长时的理论板数高 , 所
以本试验选择220nm作为检测波长 。
图 4　紫外吸收光谱
3.3　根据色谱柱的状况 (柱长与柱压), 可适当调
整流动相两组分的比例 , 不影响分析结果 。
综上所述 , 本方法具有简便 、快速 、 准确 、专
属性强的特点 , 可作为产品有效的质量控制方法。
参考文献
1 沈克温等编.实用药物分离鉴定手册.北京:人民军医出版社 ,
1986:267
2 卫生部药品标准.化学药品及制剂.第一册 , 1989:89
3 中国药典.一部 , 2000:169
·172· 中国药事 2003年第 17卷第 3期