全 文 ：【论著】
4 种鲜牛肝菌急性毒性研究
刘蓓1 , 吴素蕊1 , 朱萍1 , 丁晓雯2 , 程静2 , 桂明英1
【摘要】　目的　研究新鲜美味牛肝菌 、 华美牛肝菌 、 美柄牛肝菌 、 绒柄牛肝菌的急性毒性。方法　小鼠急性毒
性实验。结果　美味牛肝菌 、 华美牛肝菌对小鼠急性经口 MTD>13.3 g/ kg bw , 属实际无毒级;美柄牛肝菌对小鼠急
性经口MTD>20.0 g/ kg bw , 属无毒级;加热处理后的绒柄牛肝菌对小鼠急性经口 MTD>10.0 g/kg bw , 属实际无毒级。
结论　上述 4 种牛肝菌无明显的急性毒性 , 经处理后可安全地食用。
【关键词】　牛肝菌;急性毒性;热处理
Studies on the Acute Toxicity of 4 Kinds of Fresh Boletus　LIU Bei ＊, WU Su-rui , ZHU Ping , et al.＊All China Federation of
Supply and Marketing Cooporatives Kunming Edible Fungi Institute , Yunnan 650223 , China
【Abstract】　Objective　To study the acute toxicity of fresh Boletus speciosus Frost、 Boletus Calopus Fr、 Boletus edulis Bull Fr
and Boletus tomentipes Earle.　Methods　The oral acute toxicity test in rats was carried out.　Results　The MTD values of Boletus
speciosus Frost and Boletus Calopus Fr were more than 13.3 g/kg bw by the rats mouth , so the two kinds of Boletus were actual no
poison.The MTD of Boletus edulis Bull Fr.was more than 20.0 g/ kg bw by the rats mouth , it was no poison.The MTD of Boletus to-
mentipes Earle by heated was more than 10.0 g/kg bw by rats mouth , it also belonged to actual no poison.　Conclusion　The acute
toxicity of the 4 kinds of Boletus was not observed in the study.So they could be consumed safely after treated by heat.
【Key words】　Boletus;Acute toxicity;Heat treatment
　　牛肝菌大部分为可食用菌 , 少部分为毒菌。华美
牛肝菌 (Boletus speciosus Frost)、 美柄牛肝菌 (Boletus
Calopus Fr)、 美味牛肝菌 (Boletus edulis Bull:Fr.)、
绒柄牛肝菌 (Boletus tomentipes Earle)属伞菌目 、 牛
肝菌科 、 牛肝菌属的真菌 , 它们是外生菌根菌 , 夏秋
季生长于混交林地 , 主要分布在我国的云南 、 四川 、
贵州 、西藏等地〔1-4〕 , 是我国重要的野生菌资源 。
目前国内外对牛肝菌引起的中毒都有报道〔5-7〕 ,
对真菌毒素及脱毒方法也有报道〔8 ,9〕。上述 4 种牛肝
菌在我国西南地区特别是在云南省产量大 , 食用普
遍 , 而对它们的毒性目前未见任何研究报道 。利用动
物实验 , 对美味牛肝菌 、 华美牛肝菌 、美柄牛肝菌 、
绒柄牛肝菌的急性毒性进行系统研究 , 目的是为了充
分保障食用者的安全 , 也为这 4 种菌的出口创汇提
供安全保障的数据支持。现将实验结果报道如下 。
1　材料和方法
1.1　实验样本
美味牛肝菌 、华美牛肝菌 、美柄牛肝菌 、绒柄牛
肝菌由昆明食用菌研究所在昆明 、 楚雄等地采集 , 由
作者单位:1.中华全国供销合作总社昆明食用菌研究所 , 云南　
650223;2.西南大学食品学院
通讯作者:桂明英
昆明食用菌研究所鉴定。冷冻保存备用 。
称取一定量的冷冻保藏的美味牛肝菌 、 华美牛肝
菌 、美柄牛肝菌 、 绒柄牛肝菌样品 , 在冰水浴中用
5 倍体积的蒸馏水提取 3次 , 每次 30 min , 过滤 , 得
滤液。将上述牛肝菌的水提液经冷冻干燥制成干粉 ,
真空包装 , 冰箱保存备用 。
1.2　实验动物
昆明种清洁级小白鼠 , 体重 18 ～ 22 g , 由重庆市
中药研究院实验动物中心提供 , 许可证号 SCXK
(渝)20020004。购回后先观察 3 d看有无异常 , 无异
常 , 用于实验。饲养室温度 20℃左右 , 相对湿度
60%～ 70%。
1.3　实验方法
参照 GB15193.3-2003 急性毒性试验〔10〕进行。
实验前动物隔夜禁食不禁水。
先进行预试 。将上述 4 种牛肝菌的冷冻干燥粉
用蒸馏水配成可吸入的最大浓度 , 按动物最大可灌胃
量进行灌胃 , 每种样本用小鼠各 10 只 (4 个样本 ,
共计用 40 只), 雌雄各半 , 每日灌胃 2 次进行预试 ,
观察 2 d , 未见实验动物出现明显异常 , 进行正式
实验 。
采用最大耐受计量法 (MTD)进行正式实验。每
种样本用小鼠各 20 只 (4 个样本 , 共计用 80 只),
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雌雄各半 , 按最大允许灌胃量进行灌胃 (灌胃量分别
按美 味 牛 肝 菌 6.67 g/kg bw;华 美 牛 肝 菌
6.67 g/kg bw;美柄牛肝菌 10.0 g/kg bw;绒柄牛肝菌
10.0 g/kg bw), 每日灌胃动物 2 次 , 间隔时间 4 h ,
2 次剂量合并为 1 次计 (剂量:美味牛肝菌为
13.3 g/kg bw;华美牛肝菌为 13.3 g/kg bw;美柄牛
肝菌为 20.0 g/kg bw;绒柄牛肝菌为 20.0 g/kg bw)。
观察实验动物中毒情况及一般情况 、 死亡情况至
14 d , 记录实验结果。
2　结果和讨论
将新鲜的美味牛肝菌 、 华美牛肝菌 、 美柄牛肝
菌 、 绒柄牛肝菌用水提取并经冷冻干燥后用于急性毒
性实验。从灌胃开始到实验结束共计 14 d , 实验结果
见表 1。
由实验结果可知 , 用美味牛肝菌 、 华美牛肝菌 、
表 1　4 种牛肝菌急性毒性实验结果
样品 性别 浓度
(g/ml)
剂量
(g/ kg bw)
动物数
(只)
观察情况 死亡数 死亡率
(%)
美味牛肝菌 雄 0.33 13.3 10 除灌胃当日食欲下降外 , 未见异常 0 0
雌 13.3 10 除灌胃当日食欲下降外 , 未见异常 0 0
华美牛肝菌 雄 0.33 13.3 10 除灌胃当日食欲下降外 , 未见异常 0 0
雌 13.3 10 除灌胃当日食欲下降外 , 未见异常 0 0
美柄牛肝菌 雄 0.50 20.0 10 除灌胃当日食欲下降外 , 未见异常 0 0
雌 20.0 10 除灌胃当日食欲下降外 , 未见异常 0 0
绒柄牛肝菌 雄 0.50 20.0 10 灌胃 5 min后少数动物竖尾 , 约半小时出现瘫软 , 个别
动物俯卧不能站立 , 约 8 h 后陆续恢复正常。
0 0
　
雌 20.0 10 灌胃 5 min后少数动物竖尾 , 约半小时出现瘫软 , 个别
动物俯卧不能站立 , 约 8 h 后陆续恢复正常。
0 0
　
美柄牛肝菌灌胃实验小鼠 , 除灌胃当日食欲下降外 ,
未见异常 , 参照 GB15193.3-2003的急性毒性剂量分
级标准 , 美味牛肝菌 、 华美牛肝菌对小鼠急性经口
MTD>13.3 g/kg bw , 属实际无毒级;美柄牛肝菌对
小鼠急性经口 MTD>20.0 g/kg bw , 属无毒级。
新鲜绒柄牛肝菌冷冻干燥提取物对小鼠经口
20.0 g/kg bw 灌胃 , 5 min 后少数小鼠表现出一定的
异常 , 约 8 h 后陆续恢复正常。从实验小鼠表现的症
状观察 , 可能这种牛肝菌中含有一定量的对神经系统
有一定刺激作用的物质。如果这种物质不破坏 , 将可
能对食用该菌的人员也表现出这种毒副作用 , 虽经一
定的时间可能恢复正常 , 但对食用者的健康有一定的
不利影响 。
为了充分保障食用者的安全 , 探讨烹调加热等一
般的处理方式是否能将绒柄牛肝菌中引起实验小鼠瘫
软的化学成分破坏 , 将新鲜的绒柄牛肝菌加水煮沸
30 min , 然后于 95℃烘干 , 将该菌打成细粉再对小
鼠按经口 10.0 g/kg bw 灌胃 , 进行急性毒性实验 。实
验结果见表 2。
实验结果表明:经加热处理后的绒柄牛肝菌 , 虽
表 2　加热处理后绒柄牛肝菌急性毒性实验结果
性别 剂量 (g/kg bw) 动物数 (只) 观察情况 死亡数 死亡率 (%)
雄 10.0 15 灌胃后动物出现拱窝 、 挠嘴 、 神差。 0 0
雌 10.0 15 约 4 h出现拉黑稀便 , 8 h 后恢复正常。 0 0
然也使实验小鼠表现出一定的异常 (主要是对胃肠功
能有一定的影响), 但较未处理前对神经系统的影响
有较大的改善 , 其中引起实验小鼠瘫软的化学成分可
能被基本破坏。加热处理后的绒柄牛肝菌对小鼠急性
经口 MTD>10.0 g/kg bw , 参照急性毒性剂量分级标
准 (GB15193.3-2003)属实际无毒级。
动物实验结果表明 , 新鲜美味牛肝菌 、 华美牛肝
菌 、 美柄牛肝菌 、加热处理后的绒柄牛肝菌无明显的
急性毒性 , 是较安全的可食用菌。
参　考　文　献
〔1〕 　卯晓岚 , 主编.中国经济真菌.北京:科学出版社 , 1998.336.
〔2〕 　应建浙 , 卯晓岚 , 马启明, 等.中国药用真菌图鉴.北京:科
学出版社 , 1987.382-383.
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〔3〕 　卯晓岚 , 主编.中国大型真菌.郑州:河南科学技术出版社 ,
2000.305-338.
〔4〕 　臧穆 , 皮特逊.亚洲热带牛肝菌的研究.云南植物研究 ,
2004, 26:619-627.
〔5〕 　徐忠萍 , 杨涵铭.牛肝菌中毒并发多脏器功能障碍综合征的
救治措施探讨.上海医学 , 2002 , 25:787-788.
〔6〕 　Ennamany R , Bingen A , Creppy EE , et a1.Aspirin and heparin pre-
vent hepatic blood stasis and throm bosis induced by the toxic glyeopro-
tein Bolesatine in mice.Hum Exp Toxieol , 1998 , 17:620-624.
〔7〕 　胡学琼 , 胡映.急性红牛肝菌中毒 86例治疗分析.中国药物
与临床 , 2004 , 4:548.
〔8〕 　刘翊中.真菌毒素与食物中毒.西北民族大学学报 (自然科学
版), 2003, 24:49-51.
〔9〕 　孙建和 , 陆苹 , 顾红香.真菌毒素的微生物脱毒技术.微生物
学通报 , 2003, 30:60-63.
〔10〕 　GB15193.3-2003.急性毒性试验.
(收稿日期:2007-02-13)
【经验交流】
结核菌素纯蛋白衍生物试验阳性伴不明原因哮喘一例报道
付延琨 , 韩同春
　　结核菌素纯蛋白衍生物 (TB-PPD)试验是目前检测机体
对结核杆菌免疫水平的主要手段 , 是监测人群结核杆菌感染
状况的重要措施。2006 年 11 月 , 我们在对昌邑一中 3 000 余
名学生进行 TB-PPD 试验时 , 发现 1 名试验阳性并伴不明原
因哮喘病例 , 现予报道。
1　事件过程
为了摸清高中在校学生结核杆菌感染水平 , 以采取相应
措施控制和预防结核疫情的发生和发展 , 2006 年 11 月 7 日 ,
昌邑市防疫站采用北京祥瑞生物制品有限公司生产的 TB-
PPD 对昌邑一中 3 000 余名在校学生进行了一次 TB-PPD 试
验。其中 1 例被试者于下午 15 时 28 分接种 TB-PPD试剂 0.1
ml(采用孟都氏法注射于前臂掌侧皮内), 20 min 后出现头晕 、
恶心 、 出冷汁等症状 , 给予白糖水 500 ml 饮用后症状不减 ,
随至市人民医院就诊。病人表现:呼吸急促 、 每分钟 28 次 ,
胸闷 、 血压 16/10 kPa , 心率 69 次/min , 体温 36.1℃, 心电
图 、 胸透未见异常。给予抗过敏治疗症状好转。 8 日下午 16
时患者到市结防所就诊 , 病人除表现气喘 、 胸闷外 , 无其他
异常 , 继续给予抗过敏治疗。9 日上午 8 时许 , 患者自觉气喘
加重 , 伴头晕 、 恶心 , 再次至人民医院就诊 , 体温 36.2℃,
呼吸频率 32 次/min , 血压 21/ 12 kPa , 心率 62 次/min , 左臂三
角肌处皮肤可见 “卡疤” 一个 , TB-PPD 注射部位硬结横径
9 mm 、 无水泡及浸润现象 , 头部发际内发现陈旧性 “白癫疯”
疾患 , 双肺呼吸音清 、 未闻及明显哮鸣音 , 肋间无凹陷 , 心
电图 、 胸透未见异常 , 以哮喘待诊收住入院。给予对症处理
及抗过敏治疗后 , 于 12 日痊愈出院。
2　讨　论
(1)TB-PPD 试验是监测结核菌感染及卡介菌接种后机
作者单位:昌邑市卫生防疫站 , 山东　261300
体免疫反应的常用方法 , 一般无不良反应 , 亦未见引起过敏
性哮喘的相关报道。按照生产单位的技术资料 , 该试剂对急
性传染病 、 广泛性皮肤病及过敏体质者禁用 , 但是没有更为
详细的说明其机制 , 本例患者虽有皮肤疾患 , 但无明确过敏
史 , 其注射部位没有发生强烈阳性反应 , 因此不能确定其哮
喘现象与 TB-PPD 本身的关系 , 也不能判定其对 TB-PPDR
过敏反应。由此笔者认为 , 本例患者的哮喘现象与本次 TB-
PPD 试验偶合的可能性较大。
(2)有实验证明 , TB -PPD 有 Th1 类免疫调解作用 ,
TB-PPD试验阳性与变应性发生率呈负相关〔1〕;哮喘患者的
TB-PPD阴性率明显高于阳性率 , PPD的正向刺激作用可能在
哮喘患者中受到抑制〔2〕。本例患者 TB-PPD 实验阳性 , 应当
具有正常的免疫状态 , 而且哮喘状态的发生是在注射行为的
20 min 后出现的 , 并且患者呼吸频率与心率 、 体温的关系明显
不符合生理规律 , 因此不能排除心因性反应的可能性。患者
阳性的实验结果推断为曾感染过结核杆菌或接种卡介苗后的
正常反应。
(3)从本案的整个过程分析 , 我们对患者的处理是正确
的 , 但在试验中存在查体不细和既往病史不清的问题 , 其皮
肤疾患是在入院查体时发现的。由此提醒我们 , 在今后的
TB-PPD试验中 , 要严格覆行查体程序 , 摸清既往病史 , 防
止意外事故的发生。
参　考　文　献
〔1〕 　李孟荣 , 陈小芳 , 李昌崇 , 等.结核菌素纯蛋白衍生物对哮喘
儿童外周单个核细胞 IL-12 , IFN-γ/ IL-4表达的影响.基础
医学与临床 , 2005, 12:321.
〔2〕 　范亚可 , 张廷熹 , 李孟荣.PPD 反应与发作期哮喘患儿 ECPIgE
及细胞因子表达的关系。中国当代儿科杂志 , 2003 , 1:48.
(收稿日期:2007-04-27)
·409·中国自然医学杂志 2007年 10 月第 9卷第5 期　Chin J Nat Med , October 2007 , Vol.9 No.5