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两种粤产粉孢牛肝菌抗氧化活性



全 文 :食用菌学报2012.19(2):91~94
收稿日期:2012-03-12原稿;2012-03-29修改稿
基金项目:国家基金项目(编号:30970023)、广东省科学院人才基金[编号:粤科优(2008)01]、广东省科学院野外台
站项目(编号:sytz201008)的部分研究内容
作者简介:张 明(1985-),男,吉林农业大学在读硕士,主要从事大型真菌资源与应用研究。
*本文通讯作者 E-mail:junwusuo@126.com
文章编号:1005-9873(2012)02-0091-04
两种粤产粉孢牛肝菌抗氧化活性
张 明1,2,闫文娟2,李泰辉2,宋 斌2,图力古尔1*
(1吉林农业大学,吉林长春130118;2广东省微生物研究所,广东省菌种保藏与应用重点实验室,
广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地,
广东省微生物应用新技术公共实验室,广东广州510070)
摘 要:研究两种产自广东的粉孢牛肝菌(Tylopilus)———类铅紫粉孢牛肝菌(T.plumbeoviolaceoides)和花
盖粉孢牛肝菌 (GDGM27210)的子实体水提液和75%乙醇提取液的体外抗氧化活性。结果表明,在实验浓度
范围内,两种牛肝菌的子实体水提液和75%乙醇提液有不同程度的抑制亚油酸自氧化和清除自由基DPPH·、
羟自由基·OH的作用。其中水提液对抑制亚油酸自氧化作用效果较好,最大抑制率分别可达95.74%和
92.79%;而75%乙醇提取液对清除DPPH·效果较好,最大清除率分别可达86.68%和94.03%。
关键词:牛肝菌;抗氧化活性;自由基
  人体生理代谢过程都伴有氧自由基的生成,
它与人体健康密切相关,许多疾病如心血管病、
肺病、肝脏疾病、癌症、皮肤及眼睛疾病等都与产
生大量的自由基干扰人体生理代谢活动,使免疫
力下降有关[1]。因此,直接或间接抑制自由基的
产生或清除自由基的研究具有重要意义。
许多大型真菌具有清除氧自由基和抗氧化
的作用[2,3]。牛肝菌含有多种丰富的氨基酸、维
生素、矿质元素、碳水化合物、蛋白质、活性多糖
等物质[4-6],同时有些种类已被证明多糖类和总
酚类成分是其主要的抗氧化活性物质[7-9]。
前期研究中发现了2种广东省特有的野生
牛肝菌,一种是类铅紫粉孢牛肝菌(Tylopilus
plumbeoviolaceoides)[10],另一种是新发现有待
正式发表命名的花盖粉孢牛肝菌 GDGM27210。
笔者对其子实体水提液和75%乙醇提取液进行
抗氧化生物活性研究,希望为其开发利用提供
参考。
1 材料与方法
1.1材料
  类铅紫粉孢牛肝菌(T.plumbeoviolaceoides)
(A)和花盖粉孢牛肝菌(GDGM27210)(B)的野生
子实 体,留 样 标 本 号 分 别 为:GDGM20311 和
GDGM27210,标本保存于广东省微生物真菌标本
馆内,均由广东省微生物研究所真菌资源研究组采
集并鉴定。将子实体清理干净后,60℃干燥,粉碎
后过60目筛得样品粉末。
1.2水提液和75%乙醇提取液的制备
  A和B的子实体水提液和75%乙醇提取液
的制备方法同参考文献[11]。
1.3自由基DPPH·清除试验
  试验方法同参考文献[11],设3次重复,每
个重复测3次。
1.4羟自由基·OH清除试验
  采用邻二氮菲-Fe2+-H2O2法清除羟自由基,方
法同参考文献[12],稍有改动,即采用1mmol/L的
邻二氮菲溶液,在510nm处测定;设3次重复,
每个重复测3次。
1.5抗脂质过氧化试验
  采用硫氰酸铁法测定脂质过氧化程度,方法
同参考文献[11],设3次重复,每个重复测3次。
2 结果与分析
2.1水提液的抗氧化活性
  水提液的抗氧化结果见表1~3。当两样品
DOI:10.16488/j.cnki.1005-9873.2012.02.006
食 用 菌 学 报 第19卷
浓度达到10mg/mL时,对DPPH·清除率分别
可达89.70%和96.24%;由IC50值可知,样品B
的水提液对DPPH·的清除作用较样品 A强。样
品A的水提液对·OH的清除作用以及对亚油酸
自氧化抑制作用比样品B强。
2.2 75%乙醇提取液的抗氧化活性
  75%乙醇提取液活性见表4~6。按IC50值
显示,样品B对DPPH·的清除作用强于样品A,
样品A对·OH的清除作用以及对亚油酸自氧化
的抑制作用强于样品B。
表1 水提液对DPPH·的清除率
Table 1 DPPH·radical scavenging activity of aqueous extracts of two Tylopilus strains
样品
Sample
浓度 Concentration(mg/mL)
0.5  1.0  2.0  4.0  6.0  8.0  10.0
IC50
(mg/mL)
A  38.10±0.42 47.18±0.27 88.48±0.31 88.26±0.65 88.59±0.32 88.37±0.27 89.70±1.18  0.65
B  55.60±0.17 80.18±2.16 77.96±1.10 80.73±1.24 94.91±1.03 96.46±0.32 96.24±1.72  0.39
数据(百分数)为3次试验平均值±标准误
Values are expressed as percentages and represent the means of three replicates±SD
A:T.plumbeoviolaceoides;B:Tylophilus,strain GDGM27210
表2 水提液对·OH的清除率
Table 2 ·OH radical scavenging activity of aqueous extracts of two Tylopilus strains
样品
Sample
浓度 Concentration(mg/mL)
0.1  0.2  0.4  0.6  0.8  1.0
IC50
(mg/mL)
A  12.56±2.46  23.67±1.81  52.66±5.27  71.01±6.60  84.54±5.47  84.54±2.98  0.35
B  8.22±2.98  14.97±1.32  32.85±1.81  43.48±2.05  47.83±2.36  53.14±1.81  0.83
表注同表1 Values as in Table 1
表3 水提液对亚油酸自氧化的抑制率
Table 3 Inhibition of linoleic acid peroxidation by aqueous extracts of two Tylopilus strains
样品
Sample
浓度 Concentration(mg/mL)
0.1  0.2  0.4  0.6  0.8  1.0
IC50
(mg/mL)
A  45.51±1.23  53.48±1.09  69.87±1.20  92.83±1.73  95.74±1.05  94.78±1.37  0.15
B  26.20±0.35  43.42±0.14  46.16±1.21  62.70±0.93  91.46±0.76  92.79±2.10  0.26
表注同表1 Values as in Table 1
表4 75%乙醇提取液对DPPH·的清除率
Table 4 DPPH·radical scavenging activity of aqueous ethanolic extracts of two Tylopilus strain
样品
Sample
浓度 Concentration(mg/mL)
0.1  0.2  0.4  0.6  0.8  1.0  2.0
IC50
(mg/mL)
A  21.27±0.08 44.04±0.46 71.43±0.45 84.22±0.17 85.40±0.15 86.57±0.26 86.68±0.30  1.24
B  48.72±0.18 74.63±0.11 92.76±0.43 93.43±0.37 94.03±0.77 93.39±0.23 92.86±0.34  0.53
表注同表1 Values as in Table 1
表5 75%乙醇提取液对·OH的清除率
Table 5 ·OH radical scavenging activity of aqueous ethanolic extracts of two Tylopilus strain
样品
Sample
浓度 Concentration(mg/mL)
0.1  0.2  0.4  0.6  0.8  1.0
IC50
(mg/mL)
A  17.39±2.36  23.67±1.81  38.65±4.48  47.35±1.32  57.49±2.98  71.50±3.41  0.56
B  9.66±3.81  12.56±2.46  15.94±1.18  16.91±1.79  17.87±2.47  40.58±3.55  5.54
表注同表1 Values as in Table 1
表6 75%乙醇提取液对亚油酸自氧化的抑制率
Table 6 Inhibition of linoleic acid peroxidation by aqueous ethanolic extracts of two Tylopilus strain
样品
Sample
浓度 Concentration(mg/mL)
0.1  0.2  0.4  0.6  0.8  1.0
IC50
(mg/mL)
A  80.11±0.32  87.99±0.66  92.88±0.84  97.92±0.51  97.01±0.70  97.60±0.79  0.03
B  41.36±0.07  59.78±0.80  85.05±0.90  82.94±0.08  85.25±0.26  88.31±0.45  0.12
表注同表1 Values as in Table 1
29
第2期 张 明,等:两种粤产粉孢牛肝菌抗氧化活性
3 小结
  本试验从对自由基 DPPH·、羟自由基·OH
的清除作用及对亚油酸自氧化的抑制作用三个
方面来评价两种牛肝菌类铅紫粉孢牛肝菌(T.
plumbeoviolaceoides)和 花 盖 粉 孢 牛 肝 菌
(GDGM27210)子实体的水提液、75%乙醇提
取液体外抗氧化活性,结果表明:在试验浓度
范围内,两样品的水提液和75%乙醇提液对
DPPH·都具有很高的清除率,均可达到85%以
上;类铅紫粉孢牛肝菌75%乙醇提取液在低浓
度0.1mg/mL时对亚油酸的抑制作用即达到
80.11%,随浓度的增加抑制作用亦增强,其水
提液和75%乙醇提液对·OH 的清除作用和抑
制亚油酸自氧化的作用均强于花盖粉孢牛
肝菌。
本研究结果表明,两样品的水提液和75%乙
醇提取液均具有较好的抗氧化活性,而两种提取
液中活性物质的种类仍需要进行深入研究。
参考文献
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Antioxidant Activityof Aqueous and Aqueous-Ethanolic
Extracts of Two Tylopilus Species Endemic
in GuangdongProvince,China
ZHANG Ming1,2,YAN Wenjuan2,LI Taihui 2,SONG Bin2,BAU Tolgor1*
[1Jilin Agriculture University,Changchun,Jilin 130118,China;2 Guangdong Provincial Key Laboratory of
Microbial Culture Colection and Application,State Key Laboratory of Applied Microbiology(Ministry-
Guangdong Province Joint Breeding Base),South China,Guangdong Open Laboratory of Applied
Technology,Guangdong Institute of Microbiology,Guangzhou,Guangdong 510070,China]
Abstract:Aqueous and 75%ethanolic extracts of fruit bodies of two Tylopilus species endemic in Guangdong
Province were evaluated for in vitro antioxidant activity using free-radical scavenging-and lipid peroxidation-
based assays.Extracts of Tylopilus plumbeoviolaceoides and Tylopilus sp. GDGM27210 inhibited
autoxidation of linoleic acid and exhibited DPPH·and·OH scavenging activity.Aqueous extracts of T.
plumbeoviolaceoides and Tylopilus sp.GDGM27210inhibited linoleic acid oxidation by approximately 45%-
95%and 26%-93%,respectively over the concentration range 0.1-1.0mg/mL,while the corresponding
39
食 用 菌 学 报 第19卷
values for 75%ethanolic extracts were 80%-98%and 41%-88%.Over the same extract concentration range,
·OH radical scavenging activity of aqueous extracts of T.plumbeoviolaceoides and Tylopilus sp.
GDGM27210ranged between 12.5%-85%and 8.0%-54%respectively,whereas the corresponding values for
75%ethanolic extracts were 17%-72%and 10%-41%.DPPH·radical scavenging activity of aqueous extracts
(0.5-10.0mg/mL)of T.plumbeoviolaceoides and Tylopilus sp.GDGM27210ranged between 38%-90%
and 55%-97%,respectively.DPPH·radical scavenging activity of 75% aqueous ethanolic extracts(0.1-
2.0mg/mL)of T.plumbeoviolaceoides and Tylopilus sp.GDGM27210ranged between 21%-87% and
48%-94%,respectively.
Key words:Tylopilus;antioxidant activity;free radical scavenging activity
[本文编辑] 王瑞霞
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