全 文 ：高效液相色谱法测定抗痨胶囊中岩白菜素的含量
周文枭1 ,崔德斌2
(1.广西壮族自治区药品检验所 ,南宁　530021;2.湖北省新华医院药剂科 ,武汉　430015)
[ 摘　要] 　目的:建立高效液相色谱法测定抗痨胶囊中岩白菜素的含量。方法:采用高效液相色谱法 ,Metachem
Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm , 5 μm);流动相:甲醇-水(15∶85), 检测波长 273 nm。 结果:岩白菜素在 0.051 ～
10.140 μg范围内线性关系良好(r=0.999 9), 平均回收率 99.17%, RSD=2.74%。结论:该方法可用于抗痨胶囊的质量
控制。
[ 关键词] 　抗痨胶囊;岩白菜素;高效液相色谱法
[ 中图分类号] 　R286;R927.2　　　[ 文献标识码] 　A　　　[ 文章编号] 　1004-0781(2004)10-0777-02
　　抗痨胶囊系由矮地茶 、百部 、穿破石 、五指毛桃 、白及 、桑白
皮等药材经提取制成 ,具有散瘀止血 , 祛痰止咳的功效 ,用于肺
虚久咳 ,痰中带血。方中主药矮地茶所含的岩白菜素有镇咳祛
痰作用[ 1] , 与该药的功效一致 , 可以通过测定矮地茶中的有效
成分岩白菜素的含量对该药进行质量控制[ 2] 。 笔者采用高效
液相色谱法对该药中岩白菜素的含量进行测定 , 精密度 、重复
性均较好 ,结果可靠 , 可作为该药质量标准的定量方法。
1　仪器与试药
1.1　仪器　WATERS 515 高效液相色谱仪 ,WATERS 996 二极管
阵列检测器 ,WATERS 717 自动进样器 ,M32色谱管理系统。
1.2　试药　岩白菜素对照品(中国药品生物制品检定所提供 ,
批号:0831-9501 ,纯度为 99.76%);甲醇为色谱纯 , 水为纯化水 ,
其他试剂均为分析纯。抗痨胶囊样品由广西一家药厂提供(批
号:030303 , 030304 , 030305)。
2　方法与结果
2.1　色谱条件　色谱柱为 Metachem Kromasil C18柱(4.6 mm×
250 mm , 5μm);流动相为甲醇-水(15∶85);流速:1.0 mL·min-1;检
测波长 273 nm;柱温 35℃;对照品溶液与供试品溶液分别进样
10 μL ,按外标一点法计算。
2.2　对照品溶液的制备　精密称取岩白菜素对照品适量 ,加甲
醇制成每 1.0 mL含 0.2 mg的溶液 , 即得。
2.3　供试品溶液的制备　取本品的内容物 , 研细 , 混匀 , 取约
0.4 g ,精密称定 , 精密加入甲醇 25 mL , 称定重量 , 超声处理 45
min ,放冷 ,称定重量 , 用甲醇补足减失的重量 ,摇匀 , 用微孔滤膜
(0.45 μm)滤过 ,弃去初滤液 , 取续滤液 ,即得 。
2.4　线性关系考察　精密称取岩白菜素对照品适量 ,用甲醇准
确配制成浓度分别为 0.005 7 , 0.050 7 , 0.101 4 , 0.202 8 , 0.507 ,
1.014 mg·mL-1的对照品溶液系列 ,进样 10μL。分别以岩白菜素
对照品峰面积平均值(Y)对进样量(X)进行线性回归 , 求出回
归方程:Y=7.266 3×105X -2.376 4×104(r=0.999 9)。 表明
岩白菜素进样量在 0.051 ～ 10.140 μg之间呈良好的线性关系。
2.5　稳定性试验　对同一份供试品溶液 , 按上述色谱条件 , 每
隔一定时间测定一次 ,并计算岩白菜素的含量。结果表明被测
[ 收稿日期] 　2004-05-10　　　[ 修回日期] 　2004-07-20
[ 作者简介] 　周文枭(1963-),男 ,回族 ,河北石家庄人 , 主管药师 ,
学士 ,主要从事药品监督管理工作。
物在 18 h 内相对稳定 , RSD=1.15%(n=6)。
2.6　精密度试验　取同一份供试品溶液 , 按上述色谱条件 , 连
续测定 5 次。结果岩白菜素峰面积平均值为 3 665 647 , RSD =
0.97%(n=5)。
2.7　重复性试验　取同一份抗痨胶囊供试品 , 按上述方法平行
测定 5 份 , 计算 , 结果测得岩白菜素含量的平均值为 13.37
mg·g-1 , RSD=1.59%(n=5)。
2.8　阴性干扰试验　取缺矮地茶的阴性对照样品 , 按“2.3”项
下供试品溶液制备方法制成缺矮地茶的阴性对照溶液 , 按上述
色谱条件进样测定。结果表明 , 阴性对照在岩白菜素出峰处无
色谱峰出现。色谱图见图 1。
A　阴性对照品　　B　抗痨胶囊样品　　C　岩白菜素对照品
图 1　高效液相色谱法测定对照品及样品色谱图
2.9　回收率试验　精密称取已测定含量的同一供试品(批号:
030305)5份 , 分别精密加入岩白菜素对照品一定量 , 按上述方法
提取 、测定 , 计算回收率。结果平均回收率 99.17%, RSD =
2.74%,见表 1。
表 1　岩白菜素回收率测定结果
序号 样品含量 mg
加入量
mg
测得量
mg
回收率
%
1 4.726 4 2.122 5 6.777 1 96.62
2 4.680 5 2.122 5 6.722 6 96.21
3 4.741 2 2.122 5 6.903 0 101.85
4 4.781 7 2.122 5 6.927 0 101.07
5 4.749 3 2.122 5 6.874 4 100.12
2.10　样品含量测定　取上述 3 个批号的样品 , 分别按“ 2.3”项
下方法处理后 , 依法测定 ,按外标一点法计算含量 ,结果批号为
030303 , 030304 , 030305 的抗痨胶囊每粒含岩白菜素分别为1.98 ,
5.59 , 6.73 mg。
·777·医药导报 2004年 10月第 23卷第 10期
·新药介绍·
抗乙型肝炎病毒新药 ———阿德福韦酯
姜维苓1 ,贺秀丽2
(1.山东省烟台市传染病医院药剂科 , 264001;2.山东省烟台市东方医院药剂科 ,264000)
[ 摘　要] 　阿德福韦酯是新型核苷类似物抗病毒药 ,治疗乙型肝炎病毒(HBV)感染的研究结果表明 , 在肝组织学改
善 、丙氨酸氨基转移酶(ALT)复常 、病毒水平下降及血清 HBeAg 转阴等方面疗效显著 ,未发现耐药变异株 , 成为新的治疗
HBV感染的药物。
[ 关键词] 　阿德福韦酯;抗乙肝药
[ 中图分类号] 　R978.7　　　[ 文献标识码] 　C　　　[ 文章编号] 　1004-0781(2004)10-0778-02
　　2002年 , 美国食品与药品管理局(FDA)总共批准了 78 项新
药申请 ,有 17 种属于新分子实体药物 , 其中包括抗乙型肝炎病
毒(HBV)感染药物———阿德福韦酯(adefovir dipivoxil , ADV-dpv ,
GS-840)。现对阿德福韦酯作一介绍。
1　药理作用
阿德福韦(adefovir , ADV)由 Gilead Sciences 公司开发 , 临床
研究证明有抗 HBV 活性(包括对拉米夫定耐药性 HBV)。 ADV
属于开环腺嘌呤磷酸核苷 ,化学结构为 6-氨基嘌呤-9-乙氧基甲
基磷酸 ,口服利用度低 ,变态反应重。阿德福韦酯是 ADV 的二
吡呋酯是ADV 的前体药物 , 亲脂性强 , 实验显示比 ADV 的肠上
皮穿透能力增加 10倍 , 生物利用度高于 ADV , 在组织和血浆中
迅速转化为 ADV , 继由细胞摄取 , 或自尿中排泄。因 ADV 分子
结构中有一个磷酸基 ,可经宿主细胞腺苷激酶作用后再次磷酸
化 ,所得三磷酸盐具有抗病毒作用。能抑制 HBV-DNA 多聚酶
的活性而进入合成中的病毒的 DNA 链中 , 终止病毒 DNA 链的
延长 , 抑制病毒复制[ 1] 。另外 , 该药还可通过促进干扰素的生
成来激活体内的自然杀伤细胞(NK 细胞)和免疫应答。体外药
敏试验 , 对拉米夫定耐药的 HBV YMDD变异株 ,有很强的抑制
作用。国外有一组随机 、双盲安慰药对照的临床试验 , 治疗 515
例慢性乙肝患者 , 应用阿德福韦酯 30 mg(173 例), 10 mg(172
例)和安慰药(170例)对照治疗 , qd , 疗程 48 周 ,治疗前后均作肝
组织学检查。 48 周后 , 治疗组和安慰药组患者血清 HBV-DNA
阴转率(HBV-DNA<400 Copies·mL-1)分别为 55%, 48%和 16%
(P <0.01);HBeAg 阴转率分别为 33%, 23%和 7%(P<0.01);
丙氨酸氨基转移酶(ALT)复常率分别为 54%, 51%和 27%(P<
[ 收稿日期] 　2003-12-10　　　[ 修回日期] 　2004-01-20
[ 作者简介] 　姜维苓(1967-),女 ,山东烟台人 ,副主任药师 , 执业
药师 ,学士 ,现从事医院药学工作。
0.01);治疗后肝组织病变改善(Knodell积分下降≥2)率分别为
59%, 53%和 25%(P <0.01);血清 HBeAg 转阴率分别为 14%,
12%和 6%(P<0.05)[2] 。提示阿德福韦酯对 HBV的复制有抑
制作用且能改善肝功能和肝组织病变。 目前多项研究证明 , 对
拉米夫定治疗出现 YMDD变异而耐药的患者 , 应用阿德福韦酯
治疗可获得良好疗效。两药联用能否提高抗 HBV的疗效 ,防止
和治疗 YMDD变异的发生和耐药引起的病情恶化 ,值得进一步
研究。在一项试验中 ,HBeAg 阳性的慢性乙肝患者 63 例 , 随机
化分别接受 5 , 30 , 60 mg·d-1阿德福韦酯或安慰药治疗 12 周 , 治
疗结束时 , 大剂量组阿德福韦酯导致 HBV-DNA水平呈 104 下降
和 ALT水平复常 , 6 个月后随访 , 20%患者出现 HBeAg血清学转
阴 , 接受 5 mg·d-1的患者抗病毒疗效差。治疗组和对照组均有
相似比例的不良反应出现 , 无一例发生中毒性肾损害[ 3] 。在另
一项试验中 , 17 例拉米夫定耐药患者 , 接受 10 ～ 30 mg·d-1阿德
福韦酯治疗 , 所有患者血清 HBV-DNA水平很快下降 ,在 12 个月
内 ,HBV-DNA阴转。大剂量(60 ～ 120 mg·d-1)阿德福韦酯治疗
≥20周将出现明显中毒性肾损害 , 立即停药后 , 肾小管损害可
以恢复[ 4] 。
2　药物相互作用
该药与其他肾毒性药物 , 如环孢素 、他克莫司 、氨基苷类抗
生素 、万古霉素和非类固醇类抗炎药(NSAIDS)长期合用时可增
加肾毒性产生的危险性 , 与治疗 HIV 感染的抗逆转录病毒药物
合用时可增加肝脂肪变性和乳酸性酸中毒出现的机会 , 与其他
肾小管竞争性分泌药物(如二甲双胍等)合用时 , 两者的血清浓
度均有可能升高。 咖啡因 、乙醇 、尼古丁等均可能影响该品的
安全性和有效性。
3　不良反应
在临床试验中发现的不良反应包括衰弱无力 、头痛 、腹痛 、
恶心 、胃肠胀气 、腹泻 、肝功能衰竭和咳嗽增加等。
3　讨论
岩白菜素可溶于甲醇 , 而在水及乙醇中微溶[ 2] , 所以笔者
采用甲醇来提取抗痨胶囊中的岩白菜素。 本研究报道的抗痨
胶囊中岩白菜素的含量测定方法简便可行 , 结果可靠 , 可对含
岩白菜素的中药材及制剂的岩白菜素含量测定方法提供参考。
[ 参考文献]
[ 1] 　国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[ Z] .北京:化学工
业出版社 , 2000.170.
[ 2] 　王宝琴.中成药质量标准与标准物质研究[ M] .北京:中国医药科
技出版社 , 1994.489.
·778· Herald of Medicine Vol.23 No.10 October 2004