全 文 ：薄层扫描法测定垂阴茶颗粒中岩白菜素的含量
徐　玲　冯海龙
(湖北省药品检验所 ,武汉 430064)
　　摘要　目的:测定垂阴茶颗粒中岩白菜素的含量。方法:薄层扫描法。结果:岩白菜素在 0.505 ～ 3.030μg呈
线性关系 , 平均加样回收率为 97.86%, 精密度实验 RSD=1.58%。结论:本法可以用于该药品的质量控制。
关键词　垂阴茶颗粒;岩白菜素;薄层扫描法;含量测定
　　垂阴茶颗粒原标准收载于 《湖北省药品标准 》
1992年版 ,由垂盆草 、阴行草 、矮地茶等组成 ,临床
上用于急性黄疸型肝炎 、中毒性肝炎。我们选岩白
菜素为质控指标 ,用双波长薄层扫描法测定其含量 ,
提出含量低限 ,以控制其质量。
1 　仪器与试药
CAMAG薄层扫描仪-Ⅲ型;微量进样器(上海医
用激光仪器厂);岩白菜素(中国药品生物制品检定
所 ,批号 1532-200001);垂阴茶颗粒由湖北华琦药
业有限公司提供;水为蒸馏水 ,其余试剂均为分析
纯 。
2 　方法和结果
2.1 　薄层层析和薄层扫描条件 　吸附剂为硅胶
GF254;展开剂为氯仿 -醋酸乙酯 -甲醇(4∶4∶1);扫描
方式:双波长反射法扫描 , λs=275nm, λR=320 nm。
2.2 　对照品溶液的制备　称取岩白菜素对照品
25.25 mg,置 50 ml量瓶中 ,加甲醇溶解并衔释至刻
度 ,制成每 ml含岩白菜素 0.505mg的溶液 ,作为对
照品溶液。
2.3 　供试品溶液的制备　取垂阴茶颗粒 10 g,研
细 ,精密称定 ,置烧瓶中 ,精密加甲醇 50ml,密塞 ,称
定重量 ,置水浴上加热回流 1h,放冷 ,补足减失的重
量 ,滤过 ,精密量取续滤液 25ml,挥干 ,残渣加水 20
ml溶解并转移至分液漏斗中 , 加乙醚振摇提取 2
次 ,每次 20 ml,弃去乙醚液 ,水溶液用醋酸乙酯提取
4次 ,每次 20 ml,合并醋酸乙酯液 ,挥干 ,残渣加甲
醇使溶解 ,转移至 5 ml量瓶中 ,并稀释至刻度 ,摇
匀 ,作为供试品溶液。
2.4 　阴性对照品溶液的制备　按处方比例取除去
矮地茶的其他药材适量 ,依照垂阴茶颗粒的制备工
艺和供试品溶液的制备方法制得不含矮地茶的溶
液 ,作为阴性对照液。
2.5 　线性关系考察 　取岩白菜素对照品溶液
(0.505 mg/ml),精密吸取 1.0 μl、2.0 μl、3.0 μl、
4.0μl、5.0 μl、6.0 μl分别点样于同一硅胶 GF254
薄层板上 ,展开 、晾干 、扫描 ,以峰面积积分值对含量
进行回归处理 , 得回归方程 Y=7595.83X+
3215.93, r=0.9991,表明岩白菜素在 0.505 μg～
3.030 μg范围内呈良好的线性关系 。
2.6　精密度实验　取岩白菜素对照品溶液(0.505
mg/ml),点于同一块薄层板上 ,点样量均为 4μl,按
上述条件层析和扫描 ,结果峰面积基本一致 ,相对标
准偏差 RSD=1.93%。
2.7　稳定性实验　取供试品溶液 ,展开 ,每隔 60
min扫描 1次岩白菜素斑点 ,其峰面积积分值在 4 h
内基本保持稳定 , RSD=1.07%。
2.8　重现性实验　对同一批样品取 5份 ,分别提
取 ,点样 ,层析 ,扫描测定 ,结果表明 ,每 1 g含岩白
菜素平均为 0.92 mg, RSD=3.00%(n=5)。
2.9　空白试验　取除去矮地茶的阴性样品 ,再按
供试品制备的方法提取并展开测定 ,结果空白对照
无干扰。
2.10　回收率实验　精密称取已知含量的垂阴茶
颗粒适量 ,分别加入一定量的岩白菜素对照品 ,按供
试品制备方法项下操作 ,依法测定 ,计算加样回收
率 ,结果平均回收率为 97.86%, RSD=1.58%。
2.11　样品测定　取样品 6批 ,分别按供试品溶液
制备项下的方法提取制备 ,精密吸取供试品溶液 4
μl及上述对照品溶液 1μl, 4μl,交叉点于同一硅胶
GF254薄层板上 ,按上述薄层色谱条件测定(见表
1)。
　表 1 　样品含量测定结果
批号 含量(mg/袋)
030101 3.441
030201 2.091
030202 2.078
040102 1.927
040203 2.148
040301 2.195
　　根据以上含量测定结果 ,按照每袋装 6 g的规
格 ,拟定样品的含量限度为 1.8 mg/袋 。
·343·中药材第 28卷第 4期 2005年 4月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2005.04.035
3 　讨论
3.1 　鉴于岩白菜素易溶于甲醇的特点 ,采用甲醇
回流 ,取甲醇液挥干后 ,加水溶解 ,用乙醚除去脂溶
性成分 ,然后用醋酸乙酯提取 。此方法能有效提取
岩白菜素 ,且背景干扰少 ,有利于定量测定 。
3.2　试验中曾选用氯仿 -醋酸乙酯 -甲酸 (5∶4∶2)
为展开剂 ,喷新制的 2%三氯化铁与 2%铁氰化钾等
容混合液显色 。结果展开后色带较深 ,且主斑点易
变色 ,不便于操作。
(2004-10-19收稿)
HPLC-ELSD测定消痔灵片中胆酸的含量
司徒少金 1　罗建明 1　马玲云 2　马双成 2
(1.广州明兴制药有限公司 ,广州 510250;2.中国药品生物制品检定所 ,北京 100050)
　　消痔灵片由五倍子 、白蔹 、牛羊胆酸等组成 ,具
有收敛止血 、解毒敛疮的功效 ,用于内外痔疮的治
疗 。目前该制剂质量标准采用薄层扫描法测定胆酸
含量 ,薄层扫描法分离效果不理想 ,背景噪音大 ,且
操作繁琐。为提高准确度 ,笔者采用高效液相色谱-
蒸发光散射检测法〔1〕测定胆酸含量 ,结果表明该方
法分离度高 ,重现性好 ,结果令人满意 。
1 　仪器与试药
1.1 　仪器　HP1100高效液相色谱仪 (美国 Agi-
lent),蒸发光散射检测器(Altech2000);电子天平
(METTLERAE240瑞士)。
1.2 　试药　胆酸对照品(中国药品生物制品检定
所提供);消痔灵片样品(广州明兴制药有限公司生
产 ,批号:MC2801、MC2802、MC2803);冰醋酸为分
析纯 ,水为 Mili-Q超纯水 ,甲醇为色谱纯。
2 　方法与结果
2.1 　色谱条件与系统适用性　色谱性:HIQsilC18
(4.6 mm×250 mm, 5μm);流动相 ∶甲醇 -水(75∶
25),冰醋酸调 pH值至 3.1;流速:1 ml/min;用蒸发
光散射检测器检测 ,漂移管温度:90℃;气体流速:
2.5ml/min;进样量:10 μl。理论塔板数按胆酸峰计
算应不低于 3000。
2.2 　溶液的制备
2.2.1　对照品溶液的制备:精密称取胆酸对照品
9.05mg,置 25 ml量瓶中 ,用甲醇溶解并稀释至刻
度 ,摇匀 ,即得(每 1ml含 0.362 mg胆酸)。
2.2.2　供试品溶液的制备:取本品 10片 ,精密称
定 ,研细 ,取粉末 0.2g,精密称定 ,置 50 ml量瓶中 ,
加甲醇 40 ml,超声处理 30min,放冷 ,加甲醇稀释至
刻度 ,摇匀 ,微孔滤膜(0.45 μm)滤过 ,即得 。
2.2.3　阴性样品溶液:按处方组成 ,取除牛羊胆酸
外的其余药味 ,按工艺要求制成不含牛羊胆酸的消
痔灵片 ,再按供试品溶液的制备项下的方法操作 ,得
阴性样品溶液 。
2.3　空白实验 　按上述仪器和实验条件 , 取
MC2801批供试品溶液 、阴性样品溶液 、胆酸对照品
溶液分别注入液相色谱仪 ,测定 。结果供试品色谱
图中 ,呈现与对照品保留时间相同的色谱峰 ,且基线
平稳 ,分离度好 ,而阴性样品在此保留时间无色谱
峰。
2.4　线性关系考察　分别精密吸取对照品溶液 4
μl、8 μl、10 μl、15 μl、20 μl,注入液相色谱仪 ,测得
峰面积。以峰面积对数值为纵坐标 ,胆酸对照品进
样量(μg)对数值为横坐标 ,绘制标准曲线 ,计算回
归方程:lgY=1.6689 lgX+1.5207, r=0.9995, 在
1.45 μg～ 7.24 μg范围内 ,胆酸对照品进样量对数
值与峰面积对数值呈良好的线性关系。
2.5　精密度试验　取 MC2801批供试品溶液 10
μl,按上述色谱条件重复进样 5次 ,测定峰面积 ,其
RSD为 1.19%,说明仪器精密度好 。
2.6　稳定性试验　取 MC2801批供试品溶液 10
μl,按上述色谱条件分别于 0 h、2 h、6 h、10 h测定
峰面积 ,其 RSD为 2.05%,说明样品在 10 h内测定
稳定 。
2.7　重复性试验　取消痔灵片(批号:MC2801)10
g,研细 ,混和均匀 。精密称取样品 5份 ,每份 0.2 g。
按供试品溶液制备方法操作 ,依上述色谱条件测定
含量 ,结果 RSD为 1.43%(n=5)。
2.8　加样回收率试验　精密称取消痔灵片(批号:
MC2801)细粉约 0.1 g各 5份 ,分别精密加入浓度
为 1.2034mg/ml的胆酸对照品溶液 5 ml,按供试品
溶液制备方法处理得供试品溶液 ,按上述色谱条件
测定 , 计算回收率 , 结果平均加样 回收率为
99.72%, RSD为 2.8%(n=5)。
·344· 中药材第 28卷第 4期 2005年 4月