全 文 ：北京农学院学报 ２０１５，３０ （１）：４１－４４
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ
ｈｔｔｐ：／／ｂｎｘｂ．ｃｂｐｔ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ
ｄｏｉ：１０．１３４７３／ｊ．ｃｎｋｉ．ｉｓｓｎ．１００２－３１８６．２０１４．００９２
收稿日期：２０１４－０６－０５
基金项目：北京市教委项目 （ＰＸＭ２０１３０１４２０７００００７７）
第一作者：王明花，硕士研究生，研究方向为野生食用菌驯化栽培，Ｅ－ｍａｉｌ：ｗａｎｇｍｉｎｇｈｕａ０３＠１２６．ｃｏｍ
通信作者：陈青君，博士，教授，主要从事食用菌的教学与科研工作，Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｑｊ３３０５＠１２６．ｃｏｍ
点柄粘盖牛肝菌菌塘中可培养微生物多样性研究
王明花，张举龙，张国庆，程继鸿，陈青君＊
（北京农学院植物科学技术学院，北京１０２２０６，中国）
摘 要：以北京延庆县四海镇黑汉岭油松林中的点柄粘盖牛肝菌（Ｓｕｉｌｌｕｓ ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ）菌塘土为材料，通过微生物
传统培养方法，分离出细菌、真菌、放线菌，并对其中优势菌群的培养性状及形态特征进行观察统计。研究结
果表明，有大量的微生物存在于Ｓｕｉｌｌｕｓ ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ的菌塘中，共分离纯化出１６０株菌株，其中真菌菌株４６株，
优势菌株８种；细菌菌株７２株，优势菌株９种；放线菌菌株４２株，优势菌株３种。这些分离出的微生物为进一
步展开Ｓｕｉｌｌｕｓ ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ人工驯化研究提供了试验材料。
关键词：点柄粘盖牛肝菌；可培养微生物；多样性
中图分类号：Ｓ６４６．３ 文章编号：１００２－３１８６（２０１５）０１－００４１－０４ 文献标志码：Ａ 网络出版时间：２０１４－０７－０１ ７：５０
网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／１１．２１５６．Ｓ．２０１４０７０１．０７５０．００３．ｈｔｍｌ
Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｆ ｔｈｅ ｃｕｌｔｕｒａｂｌｅ ｍｉｃｒｏｂｅｓ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ
ｉｎ ｔｈｅ Ｓｕｉｌｌｕｓ ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ ｓｈｉｒｏ
ＷＡＮＧ Ｍｉｎｇｈｕａ，ＺＨＡＮＧ Ｊｕｌｏｎｇ，ＺＨＡＮＧ Ｇｕｏｑｉｎｇ，ＣＨＥＮ Ｊｉｈｏｎｇ，ＣＨＥＮ Ｑｉｎｇｊｕｎ＊
（Ｃｏｌｅｇｅ ｏｆ Ｐｌａｎｔ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｂｃｉｊｉｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １０２２０６，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｓｏｉｌ ｏｆ Ｓｕｉｌｌｕｓ ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ ｓｈｉｒｏ ｇｏｔ ｆｒｏｍ ｃｈｉｎｅｓｅ ｐｉｎｅ ｆｏｒｅｓｔ ｗａｓ ｕｓｅｄ ａｓ ｍａｔｅｒｉａｌ ｉｎ Ｈｅｉ ｈａｎｌｉｎｇ Ｓｉ ｈａｉ ｔｏｗｎ Ｙａｎ－
ｑｉｎｇ ｃｏｕｎｔｙ Ｂｅｉｊｉｎｇ．Ｆｕｎｇｉ，ｂａｃｔｅｒｉａ ａｎｄ ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ ｗｅｒｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｂｙ ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｔｒａｉｔｓ ａｎｄ ｍｏｒ－
ｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ｄｏｍｉｎａｎｔ ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ａｎｄ ｃｏｕｎｔｅｄ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ａ ｌａｒｇｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｍｉｃｒｏ－
ｏｒｇａｎｉｓｍｓ ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ ｉｎ Ｓｕｉｌｌｕｓ ｇｒａｎｕｌａｔｕｓｓｈｉｒｏ．Ｏｎｅ ｈｕｎｄｒｅｄ ａｎｄ ｓｉｓｔｙ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｗｅｒｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ａｎｄ ｐｕｒｉｆｉｅｄ ｆｒｏｍ ｓｏｉｌ ｓａｍｐｌｅｓ ｉｎ－
ｃｌｕｄｉｎｇ ４６ｆｕｎｇａｌ ｉｓｏｌａｔｅｓ ａｎｄ ８ｄｏｍｉｎａｎｔ ｆｕｎｇａｌ ｓｐｅｃｉｅｓ，７２ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｉｓｏｌａｔｅｓ ａｎｄ ９ｄｏｍｉｎａｎｔ ｓｐｅｃｉｅｓ，４２ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ ｉｓｏｌａｔｅｓ
ａｎｄ ３ｄｏｍｉｎａｎｔ ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ ｓｐｅｃｉｅｓ．Ｔｈｅｓｅ ｍｉｃｒｏｂｅｓ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｐｒｏｖｉｄｅｄ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｍａｔｅｒｉａｌｓ ｆｏｒ ｆｕｒｔｈｅｒ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｎ ａｒｔｉ－
ｆｉｃｉａｌ ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｕｉｌｌｕｓ ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｓｕｉｌｌｕｓ ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ；ｃｕｌｔｕｒａｂｌｅ ｍｉｃｒｏｂｅｓ ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍ；ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ
点柄粘盖牛肝菌（Ｓｕｉｌｌｕｓ ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ），别名为
黄花松茸、栗壳牛肝菌等，属于伞菌目（Ａｇａｒｉｃａｌｅｓ），
牛肝菌科（Ｂｏｌｅｔａｃｅａｅ），粘盖牛肝菌属（Ｓｕｉｌｌｕｓ）［１］。
Ｓｕｉｌｌｕｓ ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ是一种可以与油松共生的菌根
性食用菌［２－３］，具有较高的营养价值、经济价值和药
用价值［４－６］。
目前，Ｓｕｉｌｌｕｓ ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ子实体产生的基础研
究报道不多，尚不可以进行人工栽培，要进行驯化栽
培，深入了解其生长区域的自然环境是很重要的。
有研究表明，土壤中的一些微生物与菌根的形成及
子实体的生长发育有关。Ｃｒｉｓｔｉａｎａ ｅｔ ａｌ．曾将在块
菌（Ｔ．ｂｏｒｃｈｉｉ）菌根上分离得到细菌菌株与块菌接
种培养，发现其中１９％的菌株对Ｔ．ｂｏｒｃｈｉｉ菌丝体
的生长有促进作用［７］。Ｆｏｕｎｏｕｎｅ ｅｔ ａｌ．的研究也证
明从土壤中分离到的某些细菌可促进菌根真菌菌丝
体的生长［８］。董晓雅等将假单胞菌Ｐ２－１０（Ｐｓｅｕｄｏ－
ｍｏｎａｓ ｓｐ．Ｐ２－１０）分别与平菇天达３００、杏鲍菇杏６
及鸡腿菇瑞７混合接种培养，可显著提高这些食用
菌菌丝的生长速度，诱导并促进子实体的形成和
发育［９］。
４２ 北 京 农 学 院 学 报 第３０卷
菌塘是菌根菌与植物根系、土壤以及腐殖质等
形成的复杂群落结构，是菌根菌子实体产生的场所。
深入研究和揭示菌根真菌与菌塘微生物的关系，将
有助于更好的利用和调控土壤微生物来促进菌根的
合成及子实体的产生，从而提高野生菌产量。本研
究以点柄粘盖牛肝菌出菇期的菌塘土为试验材料，
对分离出的可培养的微生物数量及形态特征进行初
步统计，为探索点柄粘盖牛肝菌菌塘微生物群落结
构以及人工驯化提供理论依据和技术支撑。
１ 材料与方法
１．１ 试验材料
点柄粘盖牛肝菌菌塘土，取自北京市延庆县四
海镇黑汉岭油松林地。
１．２ 试验方法
１．２．１ 土壤样品采集 在点柄粘盖牛肝菌出菇高
峰期（８月中下旬），选择具有代表性的菌塘，以Ｓ型
随机采样法选定５个采样点。去除土壤表面的植被
及枯枝落叶等地表覆盖物，以土壤剖面法采集０～
１０ｃｍ的土层样品，装入准备好的无菌取样袋中，带
回实验室。将各份土壤样品等量混合均匀，过２
ｍｍ筛子，４℃冰箱保存，于１４ｄ内分离完毕。
１．２．２ 培养基选择 真菌的分离和培养采用马丁
氏（Ｍａｒｔｉｎ）琼脂培养基和马铃薯葡萄糖琼脂（ＰＤＡ）
培养基；细菌的分离和培养使用牛肉膏蛋白胨琼脂
培养基；放线菌的分离与培养采用高氏（Ｇａｕｓｅ）１号
培养基［１０］。
１．２．３ 土壤菌悬液制备 称取１０ｇ土壤样品，放
入装有９０ｍＬ灭菌的０．８５％生理盐水并放有小玻
璃珠的三角瓶中，于摇床上，以２００ｒ／ｍｉｎ振荡３０
ｍｉｎ，使土壤样品与生理盐水充分混合，静置２０～３０
ｓ，此为１０－１土壤悬液；吸取１ｍＬ的１０－１土壤悬液移
入装有９ｍＬ无菌生理盐水的试管中，制成１０－２土壤
悬液；以此类推依次制成１０－３、１０－４、１０－５、１０－６等不同
稀释度的土壤悬液。
１．２．４ 微生物的分离培养 采用稀释分离法。吸取
稀释梯度为１０－２～１０－４的土壤菌液０．１ｍＬ，接种到凝
固的马丁氏培养基上；将稀释梯度为１０－４～１０－６的土
壤菌液接种到牛肉膏蛋白胨培养基上；将稀释梯度为
１０－３～１０－５的土壤菌液接种到高氏（Ｇａｕｓｅ）１号培养基
上。用无菌涂布器涂抹均匀。每梯度设３个重复。
真菌于２８℃恒温培养箱中培养３～５ｄ；细菌于
３０℃恒温培养箱中培养１～３ｄ；放线菌于３０℃恒
温培养箱中培养５～７ｄ。
１．２．５ 微生物优势菌群纯化培养 从每个稀释梯
度合适的平板上尽可能多的挑取单菌落划线纯化。
依据菌落培养性状和形态特征对菌株进行归类并统
计数量，进行编号［１１］。所有菌株送华大基因研究中
心分析测定，真菌进行ＩＴＳ鉴定，细菌、放线菌进行
１６ＳｒＤＮＡ测序。以序列长度相同，并出现２次以
上的菌株确定为优势菌株。
１．３ 数据处理
１．３．１ 微生物菌落计数统计 选取稀释梯度合适
的平板进行统计计数：平板上菌落数相差不太悬殊
的同一稀释梯度；真菌每皿１０～１００个菌落；细菌与
放线菌每皿３０～３００个菌。统计结果按以下算式计
算［１２］：每克样品的菌数（ｃｆｕ）＝同一稀释梯度几次
重复的菌落平均数×稀释倍数×１０
１．３．２ 微生物优势菌株单菌落培养特征观察 对
优势菌群单菌落的培养性状进行观察记录。真菌菌
落主要观察：菌落形状，大小，颜色，表面状况，菌丝
日生长量；细菌菌落主要观察：菌落形状，大小，颜
色，边缘，表面状况，湿润度，光泽度，透明度等；放线
菌菌落主要观察：菌落形状，大小，质地，正面颜色、
背面颜色，表面状况及边缘等。
２ 结果分析
２．１ 可培养微生物数量统计
根据微生物计数统计公式，分别得到每克土壤
中不同种类的可培养微生物的数量（ＣＰＵ／ｇ），如表
１所示。在本次试验中，细菌的最佳稀释梯度为
１０－５，同一稀释梯度下３次重复的菌落平均数为４３
个，每克土壤（湿重）中可培养的细菌数量为４３×
１０６ＣＰＵ／ｇ；真菌在稀释梯度为１０－３时，各重复的菌
落数相差不大且符合每皿菌落数在１０～１００个之
间，菌落平均数为３７个，每克土壤（湿重）中可培养
的真菌数量为０．３７×１０６ ＣＰＵ／ｇ；选择１０－４作为放
线菌的最佳稀释梯度，菌落平均数为６３个，每克土
壤（湿重）中可培养的放线菌数量６．３×１０６ ＣＦＵ／ｇ。
由结果可知，点柄粘盖牛肝菌菌塘中细菌的数量最
多，放线菌其次，真菌最少，符合微生物种群在土壤
生态系统中的数量规律。
２．２ 可培养优势真菌的培养性状
点柄粘盖牛肝菌菌塘土壤中共分离得到４６株
真菌菌株，根据菌落培养性状、分类编号以及ＩＴＳ
鉴定，有８种优势真菌，如表２所示，编号分别为：
ＦＵＧＭ－０２、ＦＵＧＭ－１２、ＦＵＧＦ３－０４、ＦＵＧＦ３－０８、
ＦＵＧＦ３－０９、ＦＵＧＦ３－１２、ＦＵＧＦ３－１７、ＦＵＧＦ１－０５。
２０１５年第１期 王明花 等：点柄粘盖牛肝菌菌塘中可培养微生物多样性研究 ４３
表１ 点柄粘盖牛肝菌菌塘可培养微生物的数量
Ｔａｂ．１ Ｔｈｅ ｃｕｌｔｕｒａｂｌｅ ｍｉｃｒｏｂｅｓ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｕｉｌｌｕｓ ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ ｓｈｉｒｏ
微生物类型 最佳稀释浓度梯度 平板中菌落平均数／个 每克土壤中微生物数量／（１０６ ＣＦＵ·ｇ－１）
细菌 １０－５ ４３ ４３．００
真菌 １０－３ ３７ ０．３７
放线菌 １０－４ ６３ ６．３０
表２ 优势真菌的培养性状
Ｔａｂ．２ Ｃｕｌｔｕｒａｌ ｏｆ ｄｏｍｉｎａｎｔ ｆｕｎｇｉ
菌株编号 菌落形状 大小 颜色 表面状况 日生长量／ｍｍ
ＦＵＧＭ－０２ 圆形 中等 内青绿外白 同心圆，网状 ４．２ＣＤｅｆ
ＦＵＧＭ－１２ 圆形 中等 内青灰外白 辐射状沟纹，网状 ３．５Ｄｆ
ＦＵＧＦ３－０４ 不规则 小 内粉外白 放线状皱褶，绒毛状 ４．５ＣＤｄｅ
ＦＵＧＦ３－０８ 圆形 大 内灰外浅灰 辐射状沟纹，绒毛状 ５．２Ｃｄ
ＦＵＧＦ３－０９ 圆形 小 内青外白 辐射状沟纹，网状 １．１Ｅｇ
ＦＵＧＦ３－１２ 圆形 大 内白外白 同心圆，絮状 １１．６Ａａ
ＦＵＧＦ３－１７ 圆形 大 内草绿外黄 同心轮纹，网状 ７．３Ｂｂ
ＦＵＧＦ１－０５ 圆形 大 内灰外白 同心圆，绒毛状 ６．４Ｂｃ
注：小写字母表示５％显著水平，大写字母表示１％显著水平
Ｎｏｔｅ：Ｓｍａｌ ｌｅｔｔｅｒｓ ｍｅａｎｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ａｔ ５％ｌｅｖｅｌ，ｃａｐｉｔａｌ ｌｅｔｔｅｒｓ ｍｅａｎｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ａｔ １％ｌｅｖｅｌ
根据培养结果观察，每一种真菌都有其独特的
菌落特征，大多数形状为圆形，质地较疏松、外观干
燥且不透明，菌落与培养基间连接紧密，不易挑取，
菌落正反面、边缘与中心的颜色通常不一致，多有霉
味。菌落表面特征分别为绒毛状、棉絮状，有的菌落
表面产生同心轮纹，有的则为放射状的沟纹。从生
长速度看，ＦＵＧＦ３－１２最快，日均生长量达到１１．６
ｍｍ，其次是ＦＵＧＦ３－１７为７．３ｍｍ，生长最慢的是
ＦＵＧＦ３－０９，日均生长量仅有１．１ｍｍ，各个菌株之
间生长速度差异显著。
２．３ 可培养优势细菌的培养性状
点柄粘盖牛肝菌菌塘土壤中共分离得到７２株
细菌菌株，根据菌落培养性状和分类编号等，有９种
优势细菌，其编号与培养性状如表３所示。
表３ 优势细菌的培养性状
Ｔａｂ．３ Ｃｕｌｔｕｒａｌ ｏｆ ｄｏｍｉｎａｎｔ ｂａｃｔｅｒｉａｌ
菌株编号 菌落形状 大小 菌落表面颜色 表面状况 湿润度 边缘状况 光泽度 透明度
ＡＣＢ１－０８ 点状 小 白色 光滑，球状隆起 湿润 完整 有 不透明
ＢＡＣＢ１－１９ 圆形 中等 淡黄色 光滑，扁平稍隆起 湿润 完整 有 透明
ＢＡＣＢ１－３１ 不规则 大 乳白色 粗糙，扁平状 干燥 线状 无 不透明
ＢＡＣＢ３－１０ 圆形 中等 浅黄色 光滑，稍隆起 干燥 完整 有 半透明
ＢＡＣＢ３－１４ 钝圆形 中等 白色 粗糙，扁平 干燥 不规则 无 不透明
ＢＡＣＢ３－１９ 圆形 小 乳黄色 光滑，球状隆起 湿润 完整 有 透明
ＢＡＣＢ３－２５ 不规则 中等 淡黄色 光滑，扁平 干燥 波状 无 半透明
ＢＡＣＢ３－３３ 钝圆形 小 乳白色 光滑，稍隆起 湿润 完整 有 透明
ＢＡＣＢ３－３４ 圆形 中等 黄色 光滑，球状隆起 湿润 完整 有 透明
培养观察结果表明，优势细菌菌落特征各不相
同，菌落大多中等或小，有点状、圆形、辐射状，部分
形状不规则，颜色由白至浅黄和黄色，多数菌落与培
养基间连接不是很紧密，易于挑取，菌落正反面颜色
或边缘颜色基本一致。菌落表面多数光滑，多数表
面有隆起，表面有湿润和干燥两种情况，多数菌落表
面具有光泽，呈现半透明或透明。
２．４ 可培养优势放线菌的培养性状
点柄粘盖牛肝菌菌塘土壤中共分离得到４２株
放线菌菌株，根据菌落培养性状和分类编号等，只有
３种优势放线菌，其编号与菌落培养性状如表４
所示。
表４ 优势放线菌的培养性状
Ｔａｂ．４ Ｃｕｌｔｕｒａｌ ｏｆ ｄｏｍｉｎａｎｔ ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ
菌株编号 菌落形状 大小 质地 正面颜色 背面颜色 表面特征 边缘特征
ＡＣＴＡ１－０４ 圆形 较大 致密 暗红色 红褐色 皱褶隆起，绒毛致密 边缘菌丝辐射状
ＡＣＴＡ１－１８ 圆形 中等 致密 白色 黄褐色 球状隆起，绒毛致密 边缘菌丝辐射状
ＡＣＴＡ１－２３ 圆形 小 致密、稍硬 粉色 红色 皱褶凸起，绒毛致密 边缘菌丝辐射状
４４ 北 京 农 学 院 学 报 第３０卷
根据培养观察，分离出的放线菌菌落多圆形，较
小而不蔓延，表面质地致密、坚硬干燥、多皱褶，与培
养基结合紧密，不易用针挑起，边缘具有辐射状菌
丝。大多有鲜艳的颜色，而且菌落的正面与反面，中
央与边缘常常颜色不同。３种优势放线菌的颜色、
大小、表面特征差异都较大。
３ 讨 论
点柄粘盖牛肝菌是一种重要的食、药兼用的菌
根性食用菌，也是针叶林土壤根际的优势菌群，在森
林生态系统养分循环中起到重要作用。目前，与
Ｓｕｉｌｌｕｓ ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ相关的报道比较少，研究人员曾
对其发生规律［２－３］、生物学分类、子实体内含物抗性
成分［６］、分子鉴定、菌丝培养条件［１３］进行过研究，而
对菌塘的微生物区系研究未见报道。
实验室条件下的微生物传统培养方法有其固然
的局限性［１４］，只能从土壤中分离出微生物总数的
０．１０／１～１０％［１５］，但该方法可以快速简单的分离培
养出活的、异养类型的微生物种群，其得到的微生物
结构没有被破坏，生理功能可以继续发挥，具有较高
的实用价值。
本试验对Ｓｕｉｌｌｕｓ ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ菌塘微生物进行
分离与统计，结果表明，有大量的微生物存在于
Ｓｕｉｌｌｕｓ ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ的菌塘中。本次样本中分离到
真菌菌株４６株，优势菌株８种；细菌菌株７２株，优
势菌株９种；放线菌菌株４２株，优势菌株３种。这
些菌株在Ｓｕｉｌｌｕｓ ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ子实体产生高峰期存
在，表明它们可能与Ｓｕｉｌｌｕｓ ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ子实体的
产生存在着一定的相关性，有可能是促进子实体产
生的一些伴生菌。明确这些微生物的分类地位，并
进行与Ｓｕｉｌｌｕｓ ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ生存的相关性研究，将
有利于阐明Ｓｕｉｌｌｕｓ ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ生长的机理和人工
培育的方法。
有试验表明，一些有益微生物分泌的次生代谢
产物，可能会是孢子萌发或子实体形成的重要因
子［１６］，Ｒａｉｎｅｙ ｅｔ ａｌ．曾报道菌根食用菌子实体的形
成需要腐生菌的诱导［１７］。本试验分离出的可培养
微生物与Ｓｕｉｌｌｕｓ ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ菌丝生长的关系如
何，将继续作进一步的研究。分离出的微生物种类
鉴定已另文发表。
由于自然界能够在人工培养基上进行分离和培
养的微生物仅占总类群的极少数，９０％以上的微生
物种类目前无法在人工培养基上生长。通过常规分
离培养的手段，还难以全面评估土壤菌根菌的多样
性与群落稳定性，必须借鉴各种分子生物学手段，如
ＰＣＲ－ＤＧＧＥ、宏基因组学、ＲＦＬＰ等技术，对Ｓｕｉｌｌｕｓ
ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ菌塘的微生物多样性进行深入的研究。
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