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正交试验设计优选新疆紫草的醇提工艺



全 文 :[收稿日期] 20111213(825)
[基金项目] 北京市科技型中小企业技术创新资金项目
(Z09010200260939)
[第一作者] 董薇薇,在读硕士,从事中药新药研发与中药药理
研 究, Tel: 010-81474122, E-mail: dweiwei89
@ 163. com
[通讯作者] * 张建民,副主任药师,从事医院制剂与新药开发
研究,Tel:010-81472797,E-mail:zjm0515@ yahoo.
com. cn
正交试验设计优选新疆紫草的醇提工艺
董薇薇1,柯木灵2,关晶2,张建民3*
( 1. 安徽中医学院,合肥 230031; 2. 北京首儿药厂,北京 101304; 3. 首都儿科研究所,北京 100020)
[摘要] 目的:优选新疆紫草中总萘醌的提取工艺。方法:采用紫外-可见分光光度法测定吸光度,以总萘醌提取率为指
标,通过正交试验考察提取时间、溶剂用量、提取温度对总萘醌的提取效率的影响。结果:影响新疆紫草中总萘醌提取效果的
因素顺序为溶剂用量 >提取温度 >提取时间。最佳醇提工艺条件为 10 倍量 95%乙醇提取 2 次,每次 1 h,提取温度 55 ℃。结
论:该优选的工艺稳定可行,为总萘醌的后期开发提供实验依据。
[关键词] 新疆紫草;正交试验;提取工艺;总萘醌
[中图分类号] R283. 6 [文献标识码] A [文章编号] 1005-9903(2013)04-0048-03
Optimization of Alcohol Extraction Technology of
Arnebia Euchroma by Orthogonal Design
DONG Wei-wei1,KE Mu-ling2,GUAN Jing2,ZHANG Jian-min3*
(1. Anhui University of Traditional Chinese Medicine,Hefei 230031,China;
2. Beijing Shouer Pharmaceutical Factory,Beijing 101304,China;
3. Capital Institute of Pediatrics,Beijing 100020,China)
[Abstract] Objective:To optimize extraction technology of total naphthoquinone from Arnebia euchroma.
Method: Absorbance was determined by UV-visible spectrophotometer, with extraction ratio of total
naphthoquinone as index,orthogonal test was used to investigate influence of extraction time,solvent consumption
and extraction temperature on extraction efficiency of total naphthoquinone. Result:Factors affecting extraction of
A. euchroma were:solvent consumption > extraction temperature > extraction time. Optimum extraction technology
was as follows:extracted 2 times with 10 times the amount of 95% ethanol at 55 ℃,1 h per time. Conclusion:
This optimized extraction technology was stable and feasible,it could provide experimental basis for developing of
total naphthoquinoe.
[Key words] Arnebia euchroma;orthogonal test;extraction technology;total naphthoquinone
紫草甘寒,归心、肝经,具有清热凉血、活血、解
毒透疹的功效[1],在《神农本草经》和《本草纲目》中
均有记载。紫草作为一种常用中药,疗效确切,但由
于目前临床多以紫草复方制剂(紫草油和紫草
膏)[2 ~ 6]应用,剂型单一,应尝试开发新的剂型[7]。
有研究表明,新疆紫草中主要有效部位为总萘醌色
素[8],目前对其提取工艺的研究较多[9-14]。在此基
础上,本试验以新疆紫草为原料,对其有效部位总萘
醌的醇提工艺进行优选,以便为后期临床试验提供
参考。
1 材料
JA2003 型分析天平(上海天平仪器厂) ,UV-
1601 型紫外分光光度计(SHIMADZU公司) ,新疆紫
草购于北京首儿饮片厂,经北京市药检所中药室鉴
定为紫草科植物新疆紫草紫草 Arnebia euchroma
·84·
第 19 卷第 4 期
2013 年 2 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 19,No. 4
Feb.,2013
(Royle)Johnst的干燥根,将新疆紫草用粉碎机粉碎
成粗粉三号筛,待用。试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 提取率测定 参照 2010 年版《中国药典》一
部中紫草含量测定方法。准确吸取 1. 00 mL提取滤
液置于 50. 00 mL量瓶中,加 95%乙醇定容至刻度,
用 95%乙醇作空白对照,于 523. 5 nm 波长处测定
吸光度。
2. 2 提取次数考察 预试验研究表明,新疆紫草提
取次数对其有效部位提取率影响较小,综合成本及
生产实际考虑,确定提取数为 2 次。
2. 3 正交试验优选 在预试验基础上,选取提取时
间、提取温度及溶剂用量为考察因素,以吸光度为指
标,精密称取 25 g 新疆紫草置于锥形瓶中,精密量
取一定体积 95%乙醇按正交试验设计条件进行浸
提,过滤,合并滤液,加 95%乙醇稀释至 1 L,待测。
因素水平见表 1,试验安排及结果见表 2,方差分析
见表 3。
表 1 新疆紫草中总萘醌醇提工艺优选正交试验因素水平
水平
A
提取时间 /h
B
溶剂用量 /倍
C
提取温度 / ℃
1 1 6 45
2 2 8 55
3 3 10 65
表 2 新疆紫草中总萘醌醇提工艺优选正交试验安排
No. A B C D 吸光度
1 1 1 1 1 0. 249
2 1 2 2 2 0. 279
3 1 3 3 3 0. 276
4 2 1 2 3 0. 263
5 2 2 3 1 0. 276
6 2 3 1 2 0. 267
7 3 1 3 2 0. 245
8 3 2 1 3 0. 263
9 3 3 2 1 0. 286
K1 0. 268 0. 252 0. 260 0. 270
K2 0. 269 0. 273 0. 276 0. 264
K3 0. 265 0. 276 0. 266 0. 267
R 0. 004 0. 024 0. 016 0. 006
由表 2 可知,各因素对总萘醌提取率的影响顺
序为 B > C > A,即溶剂用量 > 提取温度 > 提取时
间。方差分析表明,溶剂用量、提取温度及提取时间
表 3 方差分析
方差来源 SS f F P
A 2. 8 × 10 -5 2 0. 41 > 0. 05
B 1. 0 × 10 -3 2 14. 99 > 0. 05
C 4. 1 × 10 -4 2 6. 12 > 0. 05
D(误差) 6. 7 × 10 -5 2
注:F0. 05(2,2)= 19. 00。
对试验结果均无显著性影响,结合生产效率和成本
考虑,确定最佳提取工艺为 A1B3C2,即溶剂用量 10
倍,提取温度 55 ℃,提取时间 1 h。
2. 4 验证试验 称取新疆紫草 25 g,按最佳工艺条
件进行 3 批重复试验,分别测定其吸光度,结果平均
吸光度 0. 287,RSD 1. 47%,说明优选的醇提工艺稳
定可行。
3 讨论
新疆紫草于 65 ℃提取时,其吸光度会明显降
低,说明温度对紫草有效成分的影响较大,可能温
度 > 65 ℃时部分成分会被破坏,故在生产或试验过
程中,应尽量避免使用较高温度提取。
总萘醌色素可溶于石油醚、乙醇等有机溶剂。
在选用有机溶剂时,优先考虑有机溶剂的环保问题,
确定选用乙醇作为提取溶媒。同时预试验中发现总
萘醌提取率与乙醇体积分数成正比,故最终确定采
用 95%乙醇。
[参考文献]
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典.一部[S].北
京:中国医药科技出版社,2010:320.
[2] 沈静,魏翠兰.紫草油治疗新生儿红臀 189 例疗效观
察及护理体会[J].中国实用乡村医生杂志,2008,15
(7) :27.
[3] 王睿芝,王国军. 紫草油治疗新生儿尿布皮炎 35 例
疗效观察[J].中国健康月刊,2010,29(11) :63.
[4] 陈彩霞,王凤轩. 紫草生肌膏治疗慢性皮肤溃疡 40
例[J].中医外治杂志,2010,20(6) :47.
[5] 朱力.紫草油治疗皮肤瘙痒症 104 例[J]. 吉林中医
药,2008,28(12) :899.
[6] 苏玉珂.紫草软膏处方筛选及其体外渗透性[J].中
国实验方剂学杂志,2001,17(21) :36.
[7] 李娜,买尔丹,马合木提. 新疆紫草提取物凝胶剂的
制备及质量考察[J].中国实验方剂学杂志,2011,17
(1) :14.
[8] 刘虹,陈海生.新疆紫草化学成分与药理作用的研究
进展[J].药学实践杂志,2009,27(3) :161
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董薇薇,等:正交试验设计优选新疆紫草的醇提工艺
檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶
[9] 朱斌,陈晓光,徐友辉. 用四川紫草提取紫草素的工
艺优化研究[J].时珍国医国药,2010,21(3) :642.
[10] 于黎鑫,刘军锋,刘珂. 新疆紫草羟基萘醌有效部位
制备工艺研究[J]. 中国中医药信息杂志,2010,17
(9) :54.
[11] 吴学渊,刘萍. 正交试验设计优选紫草的醇提工艺
[J].中国医院用药评价与分析,2008,8(10) :750.
[12] 白研,宋粉云,毋福海,等.正交试验优选紫草提取工
艺[J].中药新药与临床药理,2006,17(4) :288.
[13] 王阳,朱燕霞,孙殿甲,等.均匀设计研究紫草的提取
工艺[J].西北药学杂志,2003,18(4) :157.
[14] 杨秀芳.紫草提取工艺的优化[J].陕西科技大学学
报,2004,22(4) :35.
[责任编辑 仝燕]
[收稿日期] 20120928(005)
[基金项目] 浙江省科技计划基金项目(2011C23100) ;浙江省自然科学基金项目(Z2101201,LR12H27001) ;浙江省中医药重点学科建设
计划(2012-XK-A06)
[第一作者] 项慧慧,在读硕士,从事方剂配伍研究,E-mail:xhh5767@ 126. com
[通讯作者] * 杨洁红,教授,博士生导师,从事方剂配伍研究,E-mail:yjhong@ zjtcm. net
正交试验法优选赶黄草的提取工艺
项慧慧1,杨洁红1* ,傅旭春2,张宇燕1,万海同1
( 1. 浙江中医药大学,杭州 310053; 2. 浙江大学城市学院,杭州 310015)
[摘要] 目的:优选赶黄草的提取工艺。方法:以槲皮苷提取量为指标,采用正交试验考察乙醇用量、提取时间、提取次
数和乙醇体积分数对提取工艺的影响。HPLC测定槲皮苷含量。结果:提取次数对赶黄草提取工艺的影响最大,最佳提取工
艺为加 10 倍量 80%乙醇提取 2 次,每次 0. 5 h。结论:优选的提取工艺稳定可行。
[关键词] 赶黄草;槲皮苷;提取工艺;正交设计
[中图分类号] R283. 6 [文献标识码] A [文章编号] 1005-9903(2013)04-0050-03
Optimization of Extraction Technology of Penthorum chinense
by Orthogonal Test
XIANG Hui-hui1,YANG Jie-hong1* ,FU Xu-chun2,ZHANG Yu-yan1,WAN Hai-tong1
(1. Zhejiang Chinese Medical University,Hangzhou 310053,China;
2. Zhejiang University City College,Hangzhou 310015,China)
[Abstract] Objective: To optimize extraction technology of Penthorum chinense. Method:With
extraction amount of quercitrin as index, influence of ethanol amount,extraction time,extraction times and
ethanol concentration on extraction technology was investigated by orthogonal test. The content of quercitrin was
determined by HPLC. Result:Extration times had significant effect on extraction technology of P. chinense,
optimum extraction technology was as following:extracted 2 times with 10 times the amount of 80% ethanol,0. 5
h per time. Conclusion:This optimized extraction process was stable and feasible.
[Key words] Penthorum chinense;quercitrin;extraction technology;orthogonal design
赶黄草分布于海拔约 1 000 m的乌蒙山麓原始
森林,是四川古蔺的道地药材[1-3]。其全草性平,味
苦,微辛,无毒,具有清热解毒、退黄化湿、活血散瘀、
利水消肿之功效,临床广泛用于治疗黄疸、水肿、经
闭、血崩、带下、跌打损伤,以及各型肝炎、胆囊炎、脂
肪肝等症[4]。文献报道赶黄草中黄酮类化合物具
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第 19 卷第 4 期
2013 年 2 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 19,No. 4
Feb.,2013