全 文 ：基金项目:天然药物及仿生药物国家重点实验室(北京大学)开放研究课题(20130215)
作者简介:买尔旦·马合木提(1960 －) ，男(维吾尔族) ，教授，硕士生导师，研究方向:中药民族药，E-mail:maierdan60@ sina． com。
市售新疆紫草药材的质量考察
买尔旦·马合木提1，马 冉2，古丽仙·胡加1
(1新疆医科大学附属肿瘤医院，乌鲁木齐 830011;2天然药物及仿生药物国家重点实验室(北京大学) ，北京 100191)
摘要:目的 考察新疆部分地区市场销售的新疆紫草药材的质量。方法 收集新疆不同地区市场上销售的
新疆紫草药材 10 批，采用紫外分光光度法(药典法)测定羟基萘醌总色素含量，反相高效液相色谱法测定紫草中左
旋紫草素、乙酰紫草素、去氧紫草素、β，β-二甲基丙烯酰紫草素的含量。色谱条件:色谱柱 Scienhome Kromasil C18
(4． 6 mm × 200 mm，5 μm) ，流动相为乙腈-0． 3%磷酸，采用梯度洗脱，流速 1． 0 mL /min，柱温 35℃，检验波长 274，
洗脱时间50 min。结果 紫外分光光度法测得 10 批药材中羟基萘醌总色素含量为 0． 60 ～ 17． 30 mg /g，高效液相
色谱法测得左旋紫草素的含量为 0． 01 ～ 0． 96 mg /g，乙酰紫草素含量为 0． 39 ～ 24． 10 mg /g，去氧紫草素含量为 0． 77
～ 31． 10 mg /g，β，β-二甲基丙烯酰紫草素含量为 0． 25 ～ 13． 20 mg /g。结论 新疆市场流通的新疆紫草药材羟基
萘醌总色素及各成分含量差异很大。
关键词:新疆紫草;高效液相色谱;紫外分光光度法
中图分类号:Ｒ914 文献标识码:A 文章编号:1009-5551(2015)05-0581-05
doi:10． 3969 / j． issn． 1009-5551． 2015． 05． 015
Investigation on quality of Arnebia euchroma(Ｒoyle)Johnst
in Xinjiang medicinal materials markets
Maierdan Mahemuti1，MA Ｒan2，Gulixian Hujia1
(1Affiliated Tumor Hospital，Xinjiang Medical University，Urumqi 830011，China;2Stake Key Laboratory
of Natural and Biomimetic Drugs，Peking University，Beijing 100191，China)
Abstract:Objective To investigate the quality of Arnebia euchroma(Ｒoyle) Johnst circulated in parts of
Xingjian medicinal materials markets． Methods Ten batches of crude materials of Arnebia euchroma (Ｒoyle)
Johnst in different regions of Xinjiang were collected for the total contents measurement of hydroxynaphthoquinones
by UV spectrophotometry and contents measurement of four major naphthoquinones:shikonin，acetylshikonin，de-
oxy shikonin and β，β-dimethylacryl shikonin by Ｒe-HPLC simultaneously with the chromatographic conditions，in
which the Scienhome Kromasil C18 column (4． 6 mm ×200 mm，5 μm) ，acetonitrile － 0． 3% phosphoric acid were
used as mobile phase by gradient eluting，at 35℃ with the flow rate of 1． 0 mL /min for 50 min，detecting at 274
nm． Ｒesults The total contents of hydroxynaphthoquinones in different samples were 0． 6 － 17． 3 mg /g by UV
spectrophotometry，the content of shikonin，acetylshikonin，deoxy shikonin and β，β-dimethylacryl shikonin were
0． 01 － 0． 96 mg /g，0． 39 － 24． 1 mg /g，0． 77 － 31． 1 mg /g and 0． 25 － 13． 2 mg /g，respectively． Conclusion
There were great differences in contents of total hydroxyl naphthoquinone and four major naphthoquinones in
Arnebia euchroma (Ｒoyle)Johnst circulated in different parts of Xinjiang．
Key words:Arnebia euchroma (Ｒoyle)Johnst;HPLC;UV Spectrophotometry
紫草为紫草科 (Boraginaceae)多年生草本植物 ，其主要有效成分为紫草素 (shikonin) ，产于新疆
第 38 卷 第 5 期 新 疆 医 科 大 学 学 报 Vol． 38 No． 5
2015 年 5 月 Journal of Xinjiang Medical University May． 2015
等地的紫草为软紫草［Arnebia euchroma (Ｒoyle)
Johnst］［1］，其主要有效成分为阿卡宁 (alkannin) ，
为紫草素的对映异构体［2］。中医中药认为紫草味
苦、性寒 ，有凉血、活血、解毒和透疹等功能，长期
用于疮疡、淋浊、热症等，其为《中华人民共和国药
典》收载的临床常用中药 ［3］。紫草素及其衍生物
作为紫草的主要有效成分，已经被证实具有抗肿
瘤［4］、抗炎［5］、止血［6］、保肝护肝等［7］多种药理活
性。紫草的化学成分包括紫草萘醌类、酚酸类、生物
碱类、苯酚及苯醌类、三萜酸及甾醇类、黄酮类以及
多糖类等物质［8］。对其研究较多的成分主要集中
在萘醌类，包括紫草素(shikonin)、乙酰紫草素(ace-
tylshikonin)、β，β-二甲基丙烯酰紫草素(β，β-dim-
ethylacryl shikonin)、去氧紫草素(Deoxy Shikonin)
等［8］。我们在研究工作中发现，标示为新疆紫草的
不同批号及不同来源的新疆紫草药材样品的实验结
果有常有一定的差异，造成这些差异的原因可能与
所用的新疆紫草药材的质量差异有关。因此本研究
分别采用紫外分光光度法(药典法)和 HPLC 法测
定购买于新疆不同地区的新疆紫草中总萘醌及 4 种
主要萘醌类成分紫草素(shikonin)、乙酰紫草素
(acetylshikonin) ，β，β-二甲基丙烯酰紫草素(β，
β-dimethylacryl shikonin)、去 氧 紫 草 素 (Deoxy
Shikonin)的含量，为科学评价新疆紫草药材质量提
供参考依据。
1 材料与方法
1． 1 仪器与试药 仪器:Waters 2487 型高效液相
色谱仪(美国Waters公司) ，岛津 C18色谱柱(日本岛
津公司) ，HWS26 型电热恒温水浴锅(上海一恒科学
仪器有限公司) ，N-1001 型旋转蒸发仪(上海爱朗仪
器有限公司) ，真空干燥箱(上海一恒科学仪器有限
公司) ，KQ-500DE 型数控超声波清洗器(昆山市超
声仪器有限公司) ，HH-S4 数显恒温水浴锅(金坛市
医疗仪器厂) ，多功能电子天平(DT-200 型) ，紫外-
可见分光光度计(日本岛津公司) ，薄层色谱数码成
像系统(Cama-greprostar3) ，半自动点样仪(Caamgli-
nomat5)。试药:新疆紫草对照药材(中国食品药品
检定研究院，批号:121430-201103) ，新疆紫草，经新
疆医科大学药学院天然药物化学 /生药学教研室帕
丽达·阿布力孜教授鉴定为紫草属植物新疆紫草
［Arnebeiaeuchroma (Ｒoyle)Johnst］，具体来源见表
1。所有样品经粉碎后，过筛(10 目筛)备用。左旋
紫草素对照品(中国药品生物制品检定所，批号:
110769-200405) ，乙酰紫草素对照品(德瑞试剂公
司，批号:20130507-2) ，去氧紫草素对照品(德瑞试
剂公司，批号:20130513-3) ，β，β-二甲基丙烯酰紫
草素对照品(中国药品生物制品检定所，批号:
111689-200503) ，硅胶板 G(青岛海洋化工厂) ，水为
蒸馏水，甲醇、乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。
表 1 新疆紫草样品来源
样品号 购买地 购买日期 样品号 购买地 购买日期
S1 喀什市惠生堂药店 2013． 8． 16 S6 福海百草堂药店 2013． 8． 9
S2 阿勒泰哈萨克医院 2013． 8． 9 S7 北屯百草堂药店 2013． 8． 9
S3 哈密红星医院 2013． 8． 20 S8 甘肃:安徽药材市场 2013． 9． 1
S4 乌市百草堂药店 2013． 4． 10 S9 拜城县康宇大药房 2013． 6． 19
S5 乌市百草堂药店 2013． 8． 6 S10 石河子普济堂 2013． 6． 9
1． 2 方法
1． 2． 1 供试品的制备
1． 2． 1． 1 对照品溶液 分别精密称取左旋紫草素、
乙酰紫草素、去氧紫草素、β，β-二甲基丙烯酰紫草
素标准品适量，置 10 mL容量瓶中，加适量甲醇溶解
后，制成每 1 mL含 1 mg的对照品贮备液，备用。量
取各贮备液适量于同一 5 mL 容量瓶中，用甲醇稀
释，配制成含左旋紫草素、乙酰紫草素、去氧紫草素、
β，β-二甲基丙烯酰紫草素分别为 0． 028、0． 4、6、0．
4 mg /mL的混合对照品溶液。
1． 2． 1． 2 紫草对照药材供试品 称取对照药材新
疆紫草粉 1． 0 g，置具塞锥形瓶中，加入 95%乙醇
12 mL，避光处理，冷浸提取 8 h 后，过滤，取滤液干
燥箱干燥，挥干溶剂，再加入 5 mL 甲醇，超声溶解，
作为对照药材溶液。
1． 2． 1． 3 样品溶液 分别称取 10 批药材样品粉末
适量，精密称取 1． 0 g，同上处理，作为药材样品。
1． 2． 2 薄层色谱鉴别 分别取上述对照品溶液、对
照药材溶液、样品溶液各 4 μL，分别点于同一硅胶
G薄层板上，以环己烷-甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5∶ 5∶
0． 5 ∶ 0． 1)为展开剂展开，取出，晾干。紫外光灯
(366 nm)检视。
1． 2． 3 HPLC 色谱鉴别 分别取上述对照品溶液、
对照药材溶液和各样品溶液适量，甲醇稀释，用微孔
滤膜(0． 22 μm)滤过，按以下色谱条件进样 10 μL，
测定 HPLC图谱。
1． 2． 4 总萘醌的含量测定 取上述供试品溶液，依
照《中国药典》(2010 版)萘醌的含量测定方法，照
紫外-可见光光度法，在 516 nm波长处测定吸光度，
按左旋紫草素(C16H16O5)的吸光系数为 242 nm，计
285 新 疆 医 科 大 学 学 报 第 38 卷
算即得。
1． 2． 5 HPLC法测定总萘醌各组分的含量
1． 2． 5． 1 色谱条件 色谱柱为 Scienhome Kromasil
C18(4． 6 mm ×200 mm，5 μm)及预柱，流动相为乙腈
(A)-0． 3%磷酸水(B) ，梯度洗脱过程(A 梯度)0 ～
10 min 70%，10 ～ 30 min 70% ～ 75%，30 ～ 31 min
75% ～ 95%，31 ～ 36 min 95%，36 ～ 37 min 95% ～
70%，37 ～ 50 min 70%。检测波长 274 nm，柱温
30℃，流速 1． 0 mL /min，理论板数计不低于 3 000。
1． 2． 5． 2 标准曲线的制备 分别精密量取左旋紫
草素(2． 8 μg /mL)、乙酰紫草素(400 μg /mL)、去氧
紫草素(6 000 μg /mL)和 β，β-二甲基丙烯酰紫草
素(400 μg /mL)标准品溶液适量，分别用甲醇倍量稀
释，制成系列浓度，微孔滤膜过滤，照色谱条件进样 10
μL。以峰面积积分值(Y)对浓度(X)进行线性回归。
1． 2． 5． 3 精密度试验 分别量取左旋紫草素(0． 7 μg /
mL)、乙酰紫草素(100 μg /mL)、去氧紫草素(1 500 μg /
mL)和 β，β-二甲基丙烯酰紫草素(100 μg /mL)的
标准品溶液，分别于 1 d内连续进样 6 次，计算日内
精密度;取同一浓度的各溶液，连续测 3 d ，计算日
间精密度。
1． 2． 5． 4 重现性试验 称取新疆紫草药材样品
(S4，下同)6 份，按供试品溶液制备项下方法平行制
备样品溶液 6 份，分别测定，计算含量的 ＲSD值。
1． 2． 5． 5 稳定性试验 取药材样品溶液 1 份，分别
于 0、2、4、6、8、12、24 h 进样测定，计算 ＲSD值。
1． 2． 5． 6 加样回收率试验 取已知含量的药材样
品溶液 3 份，分别加入高、中、低浓度的对照品混合
溶液，依法测定，计算各组分的加样回收率。
1． 2． 6 紫草药材中各组分的含量测定 分别取各药
材粗粉约 1． 0 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入
95%乙醇 12 mL，避光处理，冷浸提取 8 h，滤过，滤液浓
缩挥干，精密加入 5 mL 甲醇，超声溶解，用微孔滤膜
(0． 22 μm)滤过，按前述色谱条件进样 10 μL分析。
2 结果
2． 1 薄层色谱鉴别 药材各样品色谱图中，在与标
准品和对照品药材色谱图相应的位置，显现相同的
颜色的斑点。左旋紫草素比移值为 0． 27，乙酰紫草
素比移值为 0． 38，去氧紫草素比移值为 0． 21，β，β-
二甲基丙烯酰紫草素比移值为 0． 50 ，见图 1。
2． 2 HPLC色谱鉴别 对照品、对照药材及药材样
品的 HPLC图谱见图 2 ～ 4。
1-标准品混合溶液(从原点起依次为去氧紫草素，左旋紫草素，乙酰紫草素和 β，β-二甲基丙烯酰紫草素) ，2-S1，3-S2，4-
S3，5-S4，6-S5-，7-S6，8-S7，9-S8，10-S9，11-S10，12-对照药材
图 1 新疆紫草对照药材及样品的 TLC色谱图
1:左旋紫草素;2:乙酰紫草素;3:
去氧紫草素;4:β，β-二甲基丙烯
酰紫草素
图 2 对照品 HPLC色谱图
1:左旋紫草素;2:乙酰紫草素;3:
去氧紫草素;4:β，β-二甲基丙烯
酰紫草素
图 3 对照药材 HPLC图谱
1:左旋紫草素;2:乙酰紫草素;3:
去氧紫草素;4:β，β-二甲基丙烯
酰紫草素
图 4 药材样品 HPLC图谱
由以上图谱可看出，对照品、对照药材和药材样
品在本色谱条件下各主要色谱峰的保留时间相同，
说明样品的主要成分与对照药材一致。
2． 3 总萘醌的含量 10 批新疆紫草羟基萘醌总色
素含量差异较大，与药典规定的萘醌总色素以左旋
紫草素(C16 H16 O5)计，不得少于 0． 80%的标准相
比，有 1 个批样品的含量偏低。药材各样品中总萘
醌含量见表 2。
385第 5 期 买尔旦·马合木提，等:市售新疆紫草药材的质量考察
表 2 不同来源紫草药材总萘醌含量(-x ± s)
样品号 总萘醌质量分数均值 /(mg /g) ＲSD /%
S1 8． 51 ± 0． 06 0． 8
S2 12． 2 ± 0． 05 0． 4
S3 17． 3 ± 0． 1 0． 7
S4 2． 17 ± 0． 02 0． 9
S5 1． 96 ± 0． 02 1． 1
S6 1． 91 ± 0． 02 0． 9
S7 1． 63 ± 0． 01 0． 7
S8 12． 6 ± 0． 05 0． 4
S9 1． 52 ± 0． 01 0． 6
S10 0． 60 ± 0． 004 0． 7
2． 4 HPLC法测定总萘醌各组分的含量
2． 4． 1 标准曲线的制备 左旋紫草素、乙酰紫草素、
去氧紫草素和 β，β-二甲基丙烯酰紫草素的线性范
围及标准曲线见表 3。
2． 4． 2 精密度试验 左旋紫草素、乙酰紫草素、去
氧紫草素和 β，β-二甲基丙烯酰紫草素日内和日间
ＲSD值分别为 0． 9%、1． 2%、0． 6%、1． 6%及 0． 8%、
0． 6%、0． 5%、1． 2%，符合要求。
2． 4． 3 重现性试验 结果左旋紫草素、乙酰紫草素、
去氧紫草素，β，β-二甲基丙烯酰紫草素含量的 ＲSD
值分别为 1． 4%、1． 6%、1． 9%和 1． 1%，符合要求。
2． 4． 4 稳定性试验 左旋紫草素、乙酰紫草素、去
氧紫草素和 β，β-二甲基丙烯酰紫草素在不同时间
点的 ＲSD 值分别为 1． 6 %，1． 4%，1． 9%，1． 3%，表
明供试品溶液在 24 h稳定。
2． 4． 5 加样回收率 各组分加样回收率见表 4。
2． 4． 6 紫草药材中各组分的含量测定 10 批新疆
紫草中 4 种主要成分的含量差异较大，左旋紫草素
的含量为 0． 01 ～ 0． 96 mg /g，乙酰紫草素含量为 0．
39 ～ 24． 1 mg /g，去氧紫草素含量为 0． 77 ～ 31． 1 mg /
g，β，β-二甲基丙烯酰紫草素含量为 0． 25 ～ 13． 2
mg /g，结果见表 5。
表 3 标准曲线及线性范围
对照品 线性方程 Ｒ 线性范围 /(mg /g)
左旋紫草素 Y = 9 × 107 X + 2 930． 9 0． 999 8 0． 125 ～ 2． 8
乙酰紫草素 Y = 6． 63 × 106 X + 16 012 0． 999 8 25 ～ 400
去氧紫草素 Y = 802 238 X + 14 629 0． 999 8 375 ～ 6 000
β，β-二甲基丙烯酰紫草素 Y = 5 × 106 X － 9 589． 2 0． 999 8 25 ～ 400
表 4 加样回收率
化合物 样品含量 /mg 加入量 /mg 平均测得量 /mg 平均回收率 /% ＲSD /%
左旋紫草素 0． 01 0． 01 0． 03 105． 07 ± 1． 7 1． 6
乙酰紫草素 0． 20 0． 20 0． 40 101． 96 ± 2． 1 2． 0
去氧紫草素 3． 02 2． 99 6． 00 99． 70 ± 2． 1 2． 1
β，β-二甲基丙烯酰紫草素 0． 20 0． 20 0． 40 101． 41 ± 1． 9 1． 9
注:各组分加样回收率均 ＞ 95%，说明该方法准确。
表 5 10 批不同来源紫草供试品中各成分含量(mg/g，-x ± s)
产地 左旋紫草素 乙酰紫草素 去氧紫草素 β，β-二甲基丙烯酰紫草素
S1 0． 15 ± 0． 002 24． 1 ± 0． 100 5． 90 ± 0． 0700 8． 22 ± 0． 090
S2
0． 01 ± 0．
000 1
0． 32 ± 0． 002 8． 78 ± 0． 070 7． 01 ± 0． 100
S3
． 01 ± 0．
000 2
0． 40 ± 0． 009 8． 64 ± 0． 100 0． 31 ± 0． 006
S4 0． 13 ± 0． 001 15． 9 ± 0． 200 7． 01 ± 0． 050 10． 9 ± 0． 100
S5 0． 21 ± 0． 003 30． 8 ± 0． 200 9． 16 ± 0． 100 13． 2 ± 0． 100
S6 0． 15 ± 0． 001 20． 1 ± 0． 200 0． 77 ± 0． 010 7． 78 ± 0． 100
S7 0． 96 ± 0． 02 6． 00 ± 0． 090 4． 79 ± 0． 100 5． 19 ± 0． 100
S8 0． 08 ± 0． 001 8． 93 ± 0． 100 30． 4 ± 0． 600 5． 56 ± 0． 100
S9 0． 01 ± 0． 0001 0． 39 ± 0． 006 9． 16 ± 0． 100 13． 2 ± 0． 200
S10 0．01 ± 0．0001 0． 60 ± 0． 003 31． 1 ± 0． 60 0． 25 ± 0． 003
3 讨论
中药的质量控制是保证中药的安全、有效、质量
稳定可靠的必要条件。采用经典的单一成分定量分
析药材的质量的优劣，缺乏科学性和全面性。本研
究采用紫外分光光度法和 HPLC法分别测定了购于
新疆部分地区市场流通的 10 批新疆紫草中总萘醌
和左旋紫草素、乙酰紫草素、去氧紫草素及 β，β-二
甲基丙烯酰紫草素 4 种成分的含量，以了解评价新
疆市场流通的紫草的质量情况。结果显示，10 批新
疆紫草羟基萘醌总色素及 4 种主要成分的总含量差
485 新 疆 医 科 大 学 学 报 第 38 卷
异较大。药典法测得萘醌总色素的含量为 0． 6 ～
17． 3 mg /g，与药典规定的萘醌总色素以左旋紫草素
(C16H16O5)计，不得少于 0． 80%的标准相比，有 1
个批样品的含量不符合要求。含量大小顺序为 S3
(哈密)＞ S8(甘肃)＞ S2(阿勒泰)＞ S1(喀什市)＞
S4(乌市)＞ S5(乌市)＞ S6(福海)＞ S7(北屯)＞ S9
(阿克苏拜城)＞ S10(石河子)。其中 S1(喀什市)、
S2(阿勒泰)、S3(哈密)和 S8(甘肃)的含量较为接
近，S4(乌市)、S5(乌市)、S6(福海)、S7(北屯)和 S9
(阿克苏拜城)接近。
HPLC法测得 4 种成分的结果显示，左旋紫草
素的含量为 0． 01 ～ 0． 96 mg /g，除 S7(北屯)较高外，
其余样品的含量基本接近。乙酰紫草素的含量为
0． 39 ～ 24． 1 mg /g，其中 S1(喀什市)、S4(乌市)、S5
(乌市)、S6(福海)较接近，S2(阿勒泰)、S3(哈密)、
S9(阿克苏拜城)、S10(石河子)较接近，S7(北屯)
和 S8(甘肃)较接近。去氧紫草素的含量为 0． 77 ～
31． 1 mg /g，其中 S1(喀什市)、S2(阿勒泰)、S3(哈
密)、S4(乌市)、S5(乌市)S7(北屯)和 S9(阿克苏拜
城)接近，S8(甘肃)和 S10(石河子)较接近。β，β-
二甲基丙烯酰紫草素的含量为 0． 25 ～ 13． 2 mg /g，
除 S3(哈密)和 S10(石河子)的含量较低以外，其余
样品的含量均接近。另外药典规定 HPLC 法测定
β，β-二甲基丙烯酰紫草素(C21 H22 O6)的含量不得
少于0． 30%，因该法与本实验采用的色谱条件和样
品的前处理方法不同，其结果无可比性。本研究结
果说明市场流通的新疆紫草各成分含量差异很大。
造成这种差异的因素复杂，与药材种植及生长环境、
采收时间、生长年限、采收过程、加工炮制、储藏保
管、包装、检测标准等一系列因素有关。因此，按照
GAP标准，健全和完善从种植到加工炮制的全过
程，同时提高紫草药材的质量评价标准，对保证药材
的安全、有效、质量稳定具有现实意义。
(致谢:本论文得到天然药物及仿生药物国家
重点实验室开放基金资助) (Supported by the State
Key Laboratory of Natural and Biomimetic Drugs)
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［收稿日期:2014-03-03］
(本文编辑 施洋
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3 讨论
本实验测定结果表明，不同产地小茴香成分差
异较大，如博乐小茴香指纹峰达 43 个，而阿克苏小
茴香指纹峰仅为 15 个。湖北小茴香与新疆小茴香
主要成分相同;活性成分反式茴香脑含量高(＞
50%) ，未鉴别出松烯、香叶烯、α-非兰烯、反式-β-罗
勒烯、茴香醛等成分［4］，这可能与茴香生长的生态
环境有关。
小茴香挥发油 GC-MS共鉴定 8 个成分，分别为
(1S)-(-)-α-蒎烯、邻伞花烃、α-蒎烯、(1S)-(+)-3-
蒈烯、D-柠檬烯、葑酮、爱草脑、反式茴香脑。未检
出松烯、香叶烯、α-非兰烯等成分。与高莉等［4 － 7］报
道的结果一致。建立的指纹图谱中指纹峰具有多种
活性作用，如反式茴香脑和柠檬烯具有抗菌、提高免
疫和抗肿瘤等作用。因此，所建立指纹图谱能够更
好地控制小茴香的质量，为小茴香药材的质量控制
提供新的方法。
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［收稿日期:2014-12-01］
(本文编辑 施洋)
585第 5 期 买尔旦·马合木提，等:市售新疆紫草药材的质量考察