全 文 ：HPLC法测定复方岩白菜素片的含量
熊佐章
(广西河池地区药品检验所 ,广西 河池 547000)
　　摘要: 目的　采用 HPLC法测定复方岩白菜素片的含量。方法　用 HPLC法 ,检测波长为 275 nm,甲醇 -
水 ( 20∶ 80)溶液以磷酸调 pH2. 5为流动相 ,用外标法进行测定。 结果　岩白菜素的平均回收率为 100. 43% ,
R SD为 1. 49%。 结论　本法结果准确 ,精密度、重现性均好 ,可作为该制剂的含量测定。
　　关键词:复方岩白菜素片 ;岩白菜素 ; HPLC法 ;含量测定。
　　中图分类号: R284. 1　　　　文献标识码: A　　　　文章编号: 1004-2199( 2002) 02-0011-03
　　复方岩白菜素片是临床较好的镇咳祛痰药 ,由
岩白菜素及扑尔敏配伍制成的薄膜衣片 ,具有镇咳
祛痰功效。主要用于慢性支气管炎。 收载于部颁药
品标准 ,化学药品及制剂第一册。标准中收载的含量
测定为分光光度法 ( E1%1cm法 )。 本文采用液相外标法
对复方岩白菜素片进行含量测定 ,并以分光光度法
测定结果作比较。 现报道如下。
1　仪器和试药
1. 1　仪器　日本岛津 LC-10A高效液相色谱仪 ;
SPD-10A紫外检测器 ;威玛通用多媒体色谱工作站
BP211D1 /10万分之一电子天平。
1. 2　试药　岩白菜素对照品 (新疆制药厂提供含量
99. 4% ) ;试剂:甲醇为优质纯 ,磷酸为分析纯 ,水为
离子交换树脂水 ;样品为昆明制药股份有限公司生
产 ,批号: 971018, 980507, 980705, 981021, 981203。
2　色谱条件与系统适应性试验　
用十八烷基硅烷建合硅胶为填充剂 ,甲醇 -水 ( 2
∶ 80)溶液以磷酸调 pH2. 5为流动相: 检测波长为
275 nm;理论板数按岩白菜素峰计应不低于 1 000,
分离度大于 1. 5。
3　方法与结果
3. 1　对照品溶液的制备　精密称取岩白菜素 (经
P2O5干燥 24 h) 10. 06 mp,置 50 nm量瓶中 ,加甲醇
至刻度 ,溶解并摇匀即得。
3. 2　供试品溶液的制备　取本品 20片 ,精密称定 ,
研细 ,精密称出适量 (约相当于岩白菜素 12. 5 mg ) ,
置 50 ml量瓶中 ,加甲醇适量 ,振摇 ,使溶解后 ,加甲
醇至刻度 ,摇匀 ,即得。
3. 3　阴性溶液的制备　按处方量取不含岩白菜素
的其它成分 ,同法配成阴性溶液。
3. 4　测定条件的选择
3. 4. 1　吸收波长的选择　岩白菜素对照品溶液和
供试品溶液 ,紫外光谱在 275 nm ,波长处有一共同
最大吸收 ,而溶剂在 275 nm处无吸收。 本法选择
275 nm波长为检测波长 ,得到满意结果 ,故选择为
本法检测波长。 见图 1、 2。
图 1　岩白菜素对照品图　　　 2　复方岩白菜素片
甲醇溶液紫外吸收图　　　　甲醇溶液紫外吸收图
3. 4. 2　色谱注　用十八烷基硅烷键合硅胶填充剂
的 C18 (日本岛津公司 ) ,色谱柱的塔板数以岩白菜素
峰计不得少于 1 000。
3. 4. 3　流动相　采用甲醇 -水 ( 20∶ 80) ,以磷酸调
pH2. 5。
3. 4. 4　色谱分离　对岩白菜素对照品溶液及供试
品溶液进样得色谱图 ,分离度均大于 1. 5,分离结果
满意。见图 3、 4。
图 3　岩白菜素对照品保留时间　图 4　复方岩白菜素片保留时间
3. 4. 5　空白试验　阴性液在岩白菜素出峰处不干
扰。
·11·基层中药杂志　 2002年　第 16卷　第 2期Prima ry Journal o f Chinese Materia Medica
DOI : 10. 13728 /j . 1673 -6427. 2002. 02. 004
3. 5　标准曲线的制备
精密吸取对照品溶液 4、 8、 12、 16、 20μl,按上述
色谱条件测定峰面积 ,以峰面积为纵坐标 ,岩白菜素
含量为横坐标 ,绘制标准曲线 ,得一不通过原点的直
线。回归方程为 Y= 1 035 789. 875X- 237 210, r=
0. 999 7,结果表明岩白菜素在 0. 8～ 4. 0μg间有良
好的线性关系。见表 1。
表 1　标准曲线结果
序号 1 2 3 4 5
进样量 (μg) 0. 8 1. 6 2. 4 3. 2 4. 0
峰面积 545525 1472545 2244771 3111260 3869327
回归方程 Y= 1 035 789. 875X - 237 210. 1　 r= 0. 999 7
3. 6　稳定性　取对照品溶液和供试品溶液 ,每隔一
定时间测定一次峰面积 ,结果见表 2。
表 2　对照品溶液和供试品溶液稳定性试验结果
测定时间 (h ) 0 1 2 3 4 5 6 x SD R SD (% )
对照品溶液 (峰面积 ) 2229693 2227788 / 2223014 / / 2240508 2230250. 75 7400. 45 0. 33
供试品溶液标示量 (% ) 90. 64 93. 86 / 93. 97 94. 57 93. 75 91. 86 92. 94 1. 485597 1. 60
　　从上表可知: 对照品溶液和供试品溶液在 6 h
内稳定。
3. 7　精密度试验　取同一供试品溶液 ,重复测定 5
次 ,结果见表 3。
表 3　精密度测定结果
编号 1 2 3 4 5 x SD R SD
(% )
含量 (% ) 93. 86 93. 97 94. 57 92. 75 91. 86 93. 402 1. 0839 1. 16
　　重复性试验取同一批样品 5份 ,按供试品溶液
制备项下方法制备并测定 ,结果见表 4。
表 4　重复性试验结果
编号 1 2 3 4 5 x SD RSD
(% )
含量 (% ) 94. 44 94. 44 92. 87 95. 40 92. 25 93. 88 1. 28594 1. 37
3. 8　加样回收试验　精密称取已知含量的同一样
品一定量 ,分别加入岩白菜素对照品 (对照品 19. 96
mg ,配成每 0. 798 4 mg /ml ,精密加入 4 ml,即加入
3. 193 6 mg) ,按拟定方法配制成 25 ml,进样 12μl,
测定峰面积 ,计算回收率。结果见表 5。
表 5　回收率测定结果
样品中含岩白菜素量
( mg /25 ml )
加入岩白菜素量
( mg /25 m l)
测得岩白菜素量
( mg /25 ml )
回收率 (% ) 平均回收率 (% ) SD R SD (% )
3. 0887 6. 2193 98. 03
3. 1825 6. 3921 100. 50
3. 0323 3. 1936 6. 2925 102. 09 100. 43 1. 501 1. 49
3. 1450 6. 3747 101. 13
3. 1638 6. 3697 100. 39
3. 9　样品含量测定
精密吸取供试品溶液 12μl及对照品溶液 12μl
和 16μl,注入高效液相色谱仪 ,依法测定 ,按二点法
计算含量 ,并与分光光度法测定结果作比较。结果见
表 6、 7。
表 6　样品含量测定结果 ( HPLC法 ) n= 5(样品由昆明制药股份有限公司提供 )
样品及批号 标示量 (% )
1 2 3 4 5
x SD R SD (% )
复方岩白菜素片 ( 971018) 94. 70 91. 70 94. 30 92. 30 93. 00 93. 20 1. 280625 1. 37
复方岩白菜素片 ( 980507) 93. 20 96. 60 95. 30 94. 60 94. 80 94. 90 1. 22882 1. 29
复方岩白菜素片 ( 980705) 92. 66 95. 70 94. 16 94. 30 94. 08 94. 18 1. 07768 1. 14
复方岩白菜素片 ( 981020) 95. 20 92. 02 94. 12 93. 20 93. 51 93. 61 1. 172007 1. 25
复方岩白菜素片 ( 981203) 94. 44 94. 44 92. 87 95. 40 92. 25 93. 88 1. 28594 1. 37
表 7　样品含量测定结果 ( E1%1cm ) n= 5 (样品由昆明制药股份有限公司提供 )
样品及批号 标示量 (% )
1 2 3 4 5
x SD R SD (% )
复方岩白菜素片 ( 971018) 93. 2 98. 0 96. 2 95. 2 95. 4 95. 6 1. 73781 1. 81
复方岩白菜素片 ( 980507) 94. 2 98. 8 97. 6 95. 5 96. 4 96. 5 1. 78885 1. 85
复方岩白菜素片 ( 980705) 94. 3 98. 1 95. 2 97. 4 96. 0 96. 2 1. 55724 1. 61
复方岩白菜素片 ( 981020) 93. 2 98. 2 96. 5 94. 9 95. 7 95. 7 1. 85607 1. 94
复方岩白菜素片 ( 981203) 94. 4 98. 4 97. 7 95. 8 96. 2 96. 4 1. 50333 1. 56
4　小结与讨论 4. 1　本实验采用 HPLC法测定复方岩白菜素片中
·12· 基层中药杂志　 2002年　第 16卷　第 2期Primary Journal of Chinese Mate ria M edica
岩白菜素含量 ,结果准确精密度、重现性好 ,平均回
收率为 100. 43% ,RSD为 1. 49%。
4. 2　文献报道 , HPLC法测定岩白菜素含量 ,用流
动相为甲醇 -水 ( 25∶ 75) ,应用于测定本品中岩白菜
素含量 ,结果分离效果不佳 ,峰形也不好。经改为 20
∶ 80比例并以磷酸调节 pH2. 5时 ,分离效果较好 ,
能使峰形尖锐 ,近基线分离。其原因是否与岩白菜素
属异香豆精类化合物 ,具有酚羟基结构 ,在酸性环境
下 ,酚羟基中 H+ 不易解离有关 ,有待进一步研究。
4. 3　部颁标准 ( 3)采用分光光度法 ( E1%1cm法 )测定复
方岩白菜素片中岩白菜素含量 ,从测定 5批样品含
量与 HPLC法比较 ,含量均偏高 ,约高出 2个百分
点左右。 其原因可能是某些杂质干扰所致。 通过高
效液相的 C18进一步分离后 ,纯度提高 ,干扰减少 ,以
致含量较之为低 ,但能反映其真实含量 ,避免生产厂
家偷工减料 ,影响疗效。另外从两法的 RSD%来看 ,
HPLC法均少于分光光度法 ( E1%1cm法 ) ,说明 HPLC
法较为准确 ,优于分光光度法 ( E1%1cm法 ) ,因此建议本
品含量测定修订时 ,改用 HPLC法。
参考文献
[1 ]　国家卫生部药典委员会编 .国家卫生部药品标准·化学药品及
制剂 (第二册 ) [S ] . 1989. 89.
[ 2 ]　张　艺 ,赖光荣 ,孟显丽 .紫金牛属药用植物中岩白菜素的
HPLC测定及资源利用 [ J ] ,中国中药杂志 , 1996, 21( 8): 458.
(收稿日期: 2001-12-05)
Determination Content of Compound Bergenini Tablets by HPLC
XION G Zuozhang
( Hechi Insti tute fo r Drug Control , Guangxi Hechi 547000, China)
　　 Abstract: Objective　 To determine the content o f compound bergenini tablets by HPLC.Methods　
By using HPLC, detection w aveleng th at 275nm and the mobile phase is a mix ture solution o f methanol-
w ater ( 20∶ 80) adjusted to pH 2. 5 wi th pho spho ric acid, determina tion the content using the liquid ex ter-
nal standa rdization. Results　 The average recovery of berg enini is 100. 4% and RSD is 1. 49% . Conclu-
sion　 The method is accurate, high sensi tivity w ith a good reproducibility. It can be used fo r the determi-
nation of th e contents in this preparation.
　　Key Words: compound berg enini tablet , bergenini, HPLC, determination content
高效液相色谱法测定参菊血压贴中黄芩苷的含量
颜晓航 ,金　斌
(安徽省药品检验所 ,安徽 合肥 230061)
　　摘要:目的　建立用 HPLC法测定参菊血压贴中黄芩苷含量的方法。方法　采用聚酰胺柱纯化去杂的方
法制备供试品溶液。以 C18柱作为色谱柱 ,甲醇 -水-冰醋酸 ( 45∶ 55∶ 1)为流动相 ,检测波长为 277 nm。结果　
黄芩苷进样量在 0. 072 8～ 0. 364 0μg范围内线性关系良好 ( r= 0. 999 9) ,样品平均加样回收率为 100. 18% ,
R SD为 1. 13%。 结论　本法简便、准确、重复性好 ,可用于参菊血压贴的质量控制。
　　关键词:参菊血压贴 ;黄芩苷 ; HPLC
　　中图分类号: R284. 1　　　　文献标识码: A　　　　文章编号: 1004-2199( 2002) 02-0013-03
　　参菊血压贴是由玄参、黄芩、天麻等 20味中药
组成的外用液体制剂 ,具有补肝益肾、育阴潜阳、宁
心安神之功效 ,适用于阴虚阳亢引起的高血压病 ,症
见头痛眩晕、腰膝酸软、血压升高等辅助治疗。 原标
准收载于安徽省药品标准 [ 1]中 ,缺少有效成分的定
量控制指标。此次按新药上报 (健转准 ) ,需对该制剂
的质量标准修订提高。 我们采用高效液相色谱法测
定了参菊血压贴中黄芩苷的含量 ,为该制剂的质量
控制提供了快速、准确的测定方法。
1　仪器与试药
LC-10AT高效液相色谱仪、 SPD-10A检测器、
C-R6A数据处理仪、 UV260紫外可见分光光度计 ,
均为日本岛津公司生产 ;黄芩苷对照品购自中国药
品生物制品检定所 ( 0715-9708,供含量测定用 ) ;参
·13·基层中药杂志　 2002年　第 16卷　第 2期Prima ry Journal o f Chinese Materia Medica