作 者 ： 林兰意;谢青;王晖;姜山;周霞秋;刘芸野;俞红;郭清;金由辛;
期 刊 ：中华传染病杂志 2007年 02期 页码： 67-71
关键词：内质网应激；细胞凋亡；半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶；RNA干扰；
摘 要 ： 目的构建小鼠半胱天冬氨酸蛋白酶-12(Caspase-12)基因特异性小干扰RNA (siRNA)表达载体并检测其表达。方法参照siRNA模板设计原则,设计并合成3对针对caspase- 12不同位点的siRNA,分别在脂质体介导下转染小鼠肝癌细胞株Hepal-6,24 h收集细胞;RT-PCR分析不同位点siRNA对靶基因mRNA表达的抑制,筛选出抑制效率最高的位点;将此位点siRNA模板序列插入质粒pRNAT-H1.1Neo中,PCR分析及基因测序进行鉴定;构建成功的重组质粒转染Hepal-6细胞48 h和72 h后,实时荧光定量PCR分析caspase-12 mRNA表达;Western...