全 文 ：栽培虎舌红与野生品岩白菜素含量比较
罗明华1 ,罗 英1 ,闵佰清2
(1.绵阳师范学院生物制药与分子生物学重点实验室 ,四川绵阳 621000;2.成都中医药大学峨眉学院 ,四川峨眉山 614201)
摘要 [目的]测定驯化栽培的虎舌红与野生品中岩白菜素的含量。[方法]以野生的和驯化栽培的虎舌红及矮地茶为试材 ,采用高效液
相色谱法测定驯化栽培的虎舌红与野生品中岩白菜素的含量 ,并将它们的岩白菜素的含量与矮地茶作了对比实验。色谱条件为:Hyper-
sil C18ODS色谱柱 ,柱温 25 ℃,波长 275 nm ,流动相:甲醇∶水(20∶80),流速 1.0ml/min。[结果] 岩白菜素质量在 0.204～ 1.224μg范围与峰
面积值的线性关系良好(r=0.999 8),平均加样回收率 99.05%, RSD 为 0.4%(n=6);在该条件下 ,虎舌红岩白菜素含量在 0.632%以上。
[结论]在该实验条件下 ,驯化栽培的虎舌红中岩白菜素的含量与野生品几乎相同 ,野生虎舌红可以驯化栽培作药用。
关键词 虎舌红;岩白菜素;高效液相色谱法
中图分类号 S567.1+9 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2008)10-04136-02
Comparison of Bergenin Content in Cultivated and Wild Ardisia mamillata Hance
LUO Ming-hua et al (Key Liboratory of Biopharmaceutics and Molecular Biology ,Mianyang Normal University ,Mianyang ,Sichuan 621000)
Abstract [ Objective] The research aimed to determine the content of bergenin in cultivated and wild Ardisia mamillataHance.[Method] With wild and
cultivated A.mamillata and A.japonica as tested materials , the content of bergenin in cultivated andwild A.mamillata was determined by high-perfor-
mance liquid chromatography.And the content of bergenin in them was compared with that in A.japonica.The chromatographic conditions were as follows:
using Hyersil C18ODS as chromatographic column , with the column temperature of 25 ℃, detecting wavelength at 275 nm , usingmethanol :water(20∶80)
as mobile phase, with the flow velocity of 1.0 ml/min.[ Result] The bergenin mass had a good linear relationship with the peak area value in range of
0.204～ 1.224μg(r=0.999 8)with the average recovery of 99.05% and RSD of 0.4%(n=6).Under these conditions , the content of bergenin in A.
mamillata was over 0.632%.[ Conclusion] Under these test conditions , the content of bergenin in cultivated A.mamillata was almost same with that in
wild A.mamillata , and thewild A.mamillata could be domesticated as medicine materials.The bergenin content between A.mamillata andHerba ardisia
had no obvious difference and Herba ardisia could be taken as medicine resource.
Key words Ardisia mamillata Hance;Bergenin;HPLC
作者简介 罗明华(1964-),男 ,四川眉山人 ,博士 ,副教授 , 从事药用
植物及天然药物化学的教学和研究。
收稿日期 2008-02-21
虎舌红(Ardisia mamillata Hance)又名红毛走马胎 ,为紫
金牛科紫金牛属多年生矮小灌木 ,具有较高的药用和观赏价
值[ 1-2] 。虎舌红被驯化作为观赏植物已有研究[ 3] ,但作药用
研究尚无报道。为此 ,笔者测定了就地驯化栽培虎舌红和野
生品中岩白菜素含量 ,并将它们的岩白菜素含量与矮地茶作
了对比实验 ,为进一步开发利用这一资源提供依据 。
1 材料与方法
1.1 实验材料 在峨眉山海拔 750和 550 m ,采收野生品虎
舌红全株 ,编为样品 1、2号;在同一分布带采矮地茶(A.
japonica)编为 5、6号;将引种驯化于山下的栽培品编为 3、4
号。采集量为每个标号 0.5 kg采集时间 2006年 12月;50 ℃
烘干 ,粉碎 ,过筛备用。
1.2 实验方法 采用高效液相色谱法。
1.2.1 仪器。Agilent-1100 高效液相色谱仪 ,Agilent ChemSta-
tion色谱工作站;JY-250B型超声波清洗器(昆山市超声波仪
器厂);1/10万天平(德国 Sartorius 公司 ,BP211D型)。
1.2.2 试剂与试药。岩白菜素对照品(批号:1153-200602 ,购
于中国药品生物制品检定所),甲醇为色谱纯 ,水为双蒸馏
水 ,其余试剂均为分析纯。
1.2.3 色谱条件。色谱柱:以十八烷基硅烷键合硅胶为填
充剂;流动相:甲醇∶水(V/V20∶80);流速:1.0 ml/min;检测
波长 275 nm;进样量 5 μl;柱温 25 ℃。
1.2.4 对照品溶液的制备 。取岩白菜素对照品适量 ,精密
称定 ,加甲醇制成每 1 ml中含岩白菜素 1.02 mg的溶液 ,摇
匀 ,作为储备液;使用时根据《中华人民共和国国药典》[ 4] 的
要求用甲醇稀释成 51.00μg/ml。
1.2.5 供试品溶液的制备。取野生和栽培的虎舌红及矮地
茶细粉约 0.2 g ,精密称定 ,置具塞锥形瓶中 ,精密加入甲醇
20 ml ,称重 ,超声处理 40min ,放冷 ,再称重 ,用甲醇补足损失
的重量 ,摇匀 ,滤过 ,取滤液 ,用 0.45μm微孔滤膜滤过 ,即得 。
2 结果与分析
2.1 系统适应性实验 分别吸取对照品及矮地茶溶液各 5
μl ,注入液相色谱仪 ,测定岩白菜素色谱峰与其相邻组分峰
达到基线分离 ,理论塔板数以岩白菜素计不低于 1 500。
2.2 线性关系的考察 精密称取岩白菜素对照品适量 ,置
容量瓶中 ,用甲醇溶解 ,加甲醇至刻度 ,摇匀 ,制成 1 ml 含
51.00μg 的对照品溶液。吸取对照品溶液 4、8 、12、16、20、24
μl 依次进样 ,按高效液相色谱法测定。以岩白菜素的进样量
(μg)为横坐标 ,峰面积为纵坐标作图 ,为一基本过原点的直
线。岩白菜素在 0.204 ～ 1.224 μg范围内与峰面积值呈线性
关系 ,回归方程:Y=1 406.2X+0.192 3 , r=0.999 8(n=6)。
2.3 稳定性实验 取配制好的岩白菜素对照品溶液(51.00
μg/ml),每 2 h进样 1 次 ,进样 6次 ,每次进样 20 μl , RSD 为
0.326%(n=6)。表明该实验条件稳定 ,岩白菜素在 10 h中
稳定性良好。
2.4 精密度实验 精密吸取岩白菜素对照品(51.00 μg/ml)
溶液每次 5 μl ,连续进样 5次测定峰面积值 ,计算得岩白菜素
的 RSD 为 1.6%(n=5)。表明该实验方法精密度良好。
2.5 加样回收实验 取栽培药材样品 3号 5份 ,各 0.5 g ,精
密称定 ,于每份样品中加入适量岩白菜素对照品溶液 ,按供
试液制备项制备供试液 ,进样分析 ,计算回收率 ,平均回收率
为 99.05%,RSD 为 0.4%,表明该实验方法回收良好(表 1)。
安徽农业科学 , Journal of Anhui Agri.Sci.2008 ,36(10):4136-4137 责任编辑 孙红忠 责任校对 马君叶
DOI :10.13989/j.cnki.0517-6611.2008.10.058
表1 加样回收实验测定结果
Table 1 Results of recovery test
M称样量∥g
Sample weighted
for test
M样品量∥mg
Sample
weight
M加入量∥mg
Addition
amount
M测得量∥mg
Measured
value
回收率∥%
Recovery
rate
0.500 2 3.161 3.002 6.173 100.33
0.500 6 3.164 3.002 6.132 98.87
0.500 8 3.165 3.002 6.094 97.57
0.501 1 3.169 3.002 6.145 99.13
0.500 4 3.163 3.002 6.152 99.57
表2 各样品岩白菜素含量
Table 2 The content of bergeninum in samples
样品编号
Sample number
样品名称
Sample name
含量∥%
Content
RSD∥%
1 野生虎舌红 0.652 1.0
Ardisia mamillata(wild)
2 野生虎舌红 0.648 0.8
Ardisia mamillata(wild)
3 栽培虎舌红 0.632 0.7
Ardisia mamillata(cultivar)
4 栽培虎舌红 0.638 1.2
Ardisia mamillata(cultivar)
5 矮地茶 0.684 1.0
A.Japonicae
6 矮地茶 0.675 1.4
A.Japonicae
2.6 样品岩白菜素的测定 按上述色谱条件 ,精密吸取各
供试样品 5 μl ,依次分别进样(n=3),测定样品中岩白菜素
的含量 ,结果见表 2 。经方差分析 ,栽培虎舌红与野生品及矮
地茶之间岩白菜素含量差异不显著(P<0.01)。
3 结论与讨论
(1)就地驯化栽培的虎舌红与野生品之间岩白菜素含量
差异不明显 ,可以驯化栽培作药用。
(2)虎舌红和矮地茶是近缘种 ,比较峨眉山产的虎舌红
与矮地茶中岩白菜素的含量 ,其差异不明显 ,可以进一步研
究 ,扩大资源 。在峨眉民间将它用于止咳 ,可能与其岩白菜
素含量较高有关。
(3)虎舌红和矮地茶的岩白菜素含量几乎一致 ,均符合
《中华人民共和国药典》[ 4]矮地茶药材要求:岩白菜素含量不
低于 0.50%。而在药材性状上矮地茶茎和叶无毛或毛很稀
少 ,叶缘锯齿较小;虎舌红的幼枝及叶的背腹两面都有红褐
色的卷缩分节毛 ,叶缘具粗锯齿等 ,应区别药用。
参考文献
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(上接第 4112页)
表1 LOEC与《地表水环境质量标准》(GB3838-2002)比较结果 mg/ L
Table 1 Comparison between LOEC and
重金属
Heavy metal
Ⅰ类
Class Ⅰ
Ⅱ类
Class Ⅱ
Ⅲ类
Class Ⅲ
LOEC
摄食
Feeding
behavior
摄食反应
Feeding
response
铜 Cu2+ ≤0.01 ≤1.0 ≤1.0 0.014 0.03
锌Zn2+ ≤0.05 ≤1.0 ≤1.0 0.51 0.56
铬(六价)Cr6+ ≤0.01 ≤0.05 ≤0.05 6×10-5 8×10-5
注:地表水质量标准分类Ⅰ类主要适用于源头水 、国家自然保护区;
Ⅱ类主要适用于集中式生活饮用水地表水源地一级保护区 、珍
稀水生生物栖息地 、鱼虾类产场 、仔稚幼鱼的索饵场等;Ⅲ类主
要适用于集中式生活饮用水地表水源地二级保护区 、鱼虾类越
冬场 、洄游通道 、水产养殖区等渔业水域及游泳区。
罗氏沼虾[ 1] 、金鱼[ 2] 、青蛤[ 3] 、黑斑蛙[ 4]等为材料 ,王莹[ 5] 、
欧小兵[ 12] 、Wanchamai[ 6] 等以不同种的水螅做重金属微毒
毒性检测 ,在不同浓度重金属离子的培养液中浸泡动物 ,得
出 24 、48 h等的半致死浓度(LC50),以此描述重金属离子的
毒性 ,其方法耗时长。另外 ,水螅的出芽繁殖速率很快 ,试
验周期长 ,使试验统计工作量大 ,效率低 ,管理不便。而该
试验包括事先准备时间 ,少则 10 min(摄食反应试验),多则
1 h(摄食试验)便可检测出重金属离子的毒性。Holdway等
使用锌和铜对普通水螅 96 h LC50浓度分别是 2.3与 0.013
mg/L[ 13] ,后者结果与该试验的铜离子抑制水螅摄食的
LOEC接近;前者约为该试验的 2.5 倍 ,这与不同物种水螅
特性上的差异有关[ 13] 。对应于传统的测定半致死浓度的
浸泡法 ,该试验方法确是一种高效率的实用技术。
参考文献
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413736卷 10期 罗明华等 栽培虎舌红与野生品岩白菜素含量比较