全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2015，30(4)∶478 ～ 480
基金项目:贵州省教育厅自然科学研究资金项目(No． 20090119) ;黔南民族医学高等专科学校资金项目(No． QNYZ201328)
作者简介:魏学军(1972—) ，男，四川成都，副教授，从事中药及民族药质量控制的研究工作。Email:qndywxj@ 163． com
炮制对铁苋菜止血作用及没食子酸含量的影响
魏学军1，李雪营1，赵鸿宾1，余跃生1，刘文兰2
(1．黔南民族医学高等专科学校，贵州 都匀 558003;2．北京中医药大学，北京 100029)
摘要:目的 考察不同炮制方法对铁苋菜止血作用及没食子酸含量的影响。方法 采用剪尾法及玻片法测定小鼠出血、凝
血的时间，用 HPLC法测定没食子酸的含量。结果 与空白对照比较:生品与炒黄、炒焦、炒炭制品均能显著缩短小鼠的出血
时间;生品、炒炭制品能显著缩短小鼠的凝血时间;与生品比较:炒炭制品能显著缩短小鼠的凝血时间和出血时间。没食子酸
含量的顺序依次为:炒黄 ＞炒焦 ＞生品 ＞炒炭。结论 炒炭能增强铁苋菜的止血作用并与止血成分没食子酸的含量无相
关性。
关键词:铁苋菜;止血作用;炮制方法;高效液相色谱法;没食子酸;含量;出血时间;凝血时间
中图分类号:Ｒ917 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2015)04 － 0478 － 03
DOI:10． 13375 / j． cnki． wcjps． 2015． 04． 032
Influence of processing on the hemostation and the content of gallic acid in Acalypha australis
WEI Xue － jun1，LI Xue － ying1，ZHAO Hong － bin1，YU Yue － sheng1，LIU Wen － lan2
(1． Qiannan Medical College for Nationalities，Duyun，Guizhou，558003 P． Ｒ． China;2． Beijing University of Chinese Medicine，Beijing，
100029 P． Ｒ． China)
Abstract:OBJECTIVE To investigate the impact of processing on the hemostation and the content of gallic acid in Acalypha austra-
lis．METHODS The bleeding and clotting time were determind in mice by the minus tail method and the slide method． The content of
gallic acid was detected by HPLC． ＲESULTS Compared with the blank control:each dose product could shorten bleeding time in
mice． The raw product and fried carbon product could shorten the clotting time in mice at the same time． Compared with the raw prod-
uct，the fried carbon product could significantly shorten the clotting time in mice． The order of the content of gallic acid in A． australis
were:fried yellow ＞ fried coke ＞ raw product ＞ fried carbon． CONCLUSION Fried carbon product can enhance the hemostatic effect
of A． australis and it has no correlation with the content of gallic acid which is the hemostatic active ingredient．
Key words:Acalypha australis;Hemostation;Processing method;HPLC;Gallic acid;Content;Bleeding time;Clotting time
CLC number:Ｒ917 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2015)04 － 0478 － 03
大戟科植物铁苋菜 Acalypha australis L．的干燥
全草，具有清热利湿、收敛止血的功能，主含黄酮、生
物碱、鞣质等化学成分［1］。在贵州苗族聚集区被广
泛用于治疗各种出血症候，医院制剂以铁苋菜为君
药的血愈片已用于临床［2］。中药炮制是增强药物
疗效的重要技术手段，有关铁苋菜的炮制方法研究
未见文献报道。现结合当地群众和民医诊所常采用
的铁苋菜烘培后制炭(程度不一)、研末用于止血的
实际应用，选择炒黄、炒焦和炒炭等炮制方法来研究
其止血作用，并测定铁苋菜的止血活性成分没食子
酸的含量［3 － 4］，以探讨铁苋菜止血的适宜炮制方法
及与没食子酸含量的相关性。
1 实验部分
1． 1 仪器与试药
LC －10ATvp高效液相色谱仪(日本岛津)。铁
苋菜药材于 2013 年 7 月采自校内植物园试验地中，
经黔南民族医学高等专科学校朱文仁副教授鉴定为
大戟科植物铁苋菜 Acalypha australis L． 的干燥全
草;没食子酸对照品(中国食品药品检定所，批号:
110831 － 200803) ;云南白药(云南白药集团股份有
限公司，4 g 装，批号:ZJA1306) ;生理盐水(贵州科
伦药业有限公司，批号:A130821N) ;乙腈为色谱纯;
水为重蒸水;其余试剂为分析纯。SPF 级昆明种小
鼠［贵阳医学院实验动物中心，许可证号:SCXK
(黔)2002 － 0001］，体重 18 ～ 22 g，♀♂兼用。
1． 2 方法与结果
1． 2． 1 铁苋菜的制备 摘取新鲜净制的铁苋菜全
叶，切成 5 mm宽的丝;根、茎切成 10 mm长段，晒干
后混匀即得生品。取 100 g 生品，按《中国药典》
2010 年版中附录ⅡD 炮制通则单炒项下的要求，用
文火(锅底温度约 100 ℃)炒至表面较原色加深，取
出，放凉即得炒黄品。取 100 g生品，按《中国药典》
2010 年版中附录ⅡD 炮制通则单炒项下的要求，用
中火(锅底温度约 150 ℃)炒至表面焦褐色，取出，
放凉即得炒焦品。取 100 g 生品，按《中国药典》
2010 年版中附录ⅡD 炮制通则炒炭项下的要求，用
武火(锅底温度约 200 ℃)炒至表面焦黑色，取出，
放凉即得炒炭品。
1． 2． 2 色谱条件 采用 Diamonsil C18色谱柱(250
mm ×4． 6 mm，5 μm) ，流动相为乙腈 － 0． 05%磷酸
(4∶96) ，检测波长 270 nm，柱温为室温，流速1 mL·
min －1，进样量 20 μL，理论板数按没食子酸峰计算
应不低于 6 × 103。色谱图见图 1。
ga
lli
c
ac
id
ga
lli
c
ac
id
ga
lli
c
ac
id
ga
lli
c
ac
id
ga
lli
c
ac
id
0 3.3 6.7 10.0 13.3 0 3.3 6.7 10.0 13.3 0 3.3 6.7 10.0 13.3 0 3.3 6.7 10.0 13.3 0 3.3 6.7 10.0 13.3
t/min
A B C D E
图 1 对照品(A)、生品(B)、炒黄(C)、炒焦(D)和炒炭(E)样品溶液的色谱图
Figure 1 Chromatograms of control solution(A)，raw product solution(B)，fried yellow product solution(C)，fried coke product solution(D)
and fried carbon product solution(E)
1． 2． 3 溶液的制备 称取不同样品铁苋菜各 5 g，
用 70%乙醇为溶剂，置 90 ℃水浴中，回流提取(30
BV ×4 h × 2)。合并提取液，过滤，离心后减压回收
乙醇至近干，加蒸馏水定容至 100 mL 量瓶中，得供
试品溶液，冷藏备用。精密称取 22 mg 没食子酸对
照品，用流动相定容至 100 mL 量瓶中，作为没食子
酸对照品贮备液。
1． 2． 4 标准曲线的制备 精密移取 1 mL没食子酸
对照品贮备液，置 10 mL量瓶中，用流动相定容。精
密移取不同体积对照品溶液，按“1． 2． 2”项色谱条
件，进样测定。以进样量为横坐标、峰面积为纵坐标
作标准曲线，得线性方程为:Y = 3． 52 × 107X －
4． 28 × 103(r = 0． 9999)。表明 0． 022 ～ 0． 22 μg 对
照品与峰面积呈良好的线性关系。
1． 2． 5 精密度、稳定性和重复性试验 取没食子酸
对照品溶液，连续进样 6 次，按“1． 2． 2”项色谱条
件，进样测定，计算得没食子酸含量的 ＲSD =
2. 12%。取没食子酸对照品溶液，按“1． 2． 2”项色
谱条件，分别在 0、2、4、6、8 h 时测定，计算得没食子
酸含量的 ＲSD = 1. 55%，说明没食子酸在 8 h 内稳
定。取 5 份生品，按“1． 2． 3”项方法制备供试品溶
液，用 0． 45 μm微孔滤膜滤过，按“1． 2． 2”项色谱条
件，进样测定，计算得没食子酸含量的 ＲSD =
2. 09%。
1． 2． 6 加样回收率试验 取 5 份已知没食子酸含
量的生品，加入适量没食子酸对照品，按“1． 2． 3”项
方法制备供试品溶液，并在“1． 2． 2”项色谱条件下，
进样测定，计算得没食子酸平均回收率为 97． 89%，
ＲSD = 2． 43%。
1． 2． 7 样品的含量测定 精密移取不同样品提取
所得供试品溶液，用 0． 45 μm 微孔滤膜滤过，按
“1. 2. 2”项色谱条件测定没食子酸的含量。由表 1
可知:不同样品铁苋菜中没食子酸的含量依次为:炒
黄 ＞炒焦 ＞生品 ＞炒炭。除炒炭品较生品的没食子
酸含量降低外，炒黄及炒焦品均有小幅上升，并以炒
黄品为高，其原因可能与没食子酸作为可水解鞣质
的结构单元及炒制温度有关。炒黄用文火，温度较
低，利于鞣质水解，因而含量小幅上升;随着炒制温
度的升高，水分大量蒸发，鞣质水解受阻，致使炒焦
(中火、温度较高)增加较小而炒炭(武火、温度高)
明显降低。
表 1 不同样品铁苋菜中没食子酸的含量比较(n =3)
Table 1 Comparison of gallic acid content in the different samples
of A． australis(n =3)
样品 没食子酸 /mg·g － 1 ＲSD /% 增加率 /%
生品 7． 83 2． 23 －
炒黄 8． 22 1． 86 4． 98
炒焦 8． 01 1． 64 2． 30
炒炭 5． 73 2． 09 － 26． 82
1． 2． 8 小鼠出血和凝血时间的测定［5］ 空白溶液
为生理盐水。取 1． 3 g 云南白药粉末，加入 100 mL
蒸馏水即得阳性药物溶液。称取不同样品铁苋菜各
20 g，以 70%乙醇为溶媒，置 90 ℃水浴中，回流提取
974第 4 期 魏学军，等。炮制对铁苋菜止血作用及没食子酸含量的影响
(30 BV × 4 h × 2)。合并提取液，过滤、离心后减压
回收乙醇至近干，加蒸馏水定容至 20 mL量瓶中，即
得含原药材 1 g·mL －1的各样品溶液。取 60 只小
鼠，随机分成 6 组，分别 ig 给予各样品溶液、云南白
药和生理盐水，给药体积为 20 mL·kg －1，每天 1 次，
连续 ig 5 d。末次给药 1 h后，用解剖剪距小鼠尾尖
3 mm处横向剪断，待血液自行溢出时计时，每 30 s
用滤纸吸血 1 次，直至血液自然停止，所需的时间即
为出血时间。另取 60 只小鼠，分组与给药剂量、给
药途径同上。末次给药 1 h 后，用毛细管于小鼠左
眼内球后静脉丛取血，滴两滴在玻片上，并同时计
时，每 30 s用清洁大头针在玻片上挑血液 1 次，观
察是否有凝血丝，记录从出血至出现血凝丝的时间
即为凝血时间。由表 2 可知:不同样品的铁苋菜与
空白比较:生品、炒黄品、炒焦品及炒炭品均能显著
缩短小鼠的出血时间(P ＜ 0． 01) ;生品与炒炭品均
能显著缩短小鼠的凝血时间(P ＜ 0． 05，P ＜ 0． 01)。
与生品比较:炒炭品对缩短小鼠出血、凝血时间有显
著性(P ＜ 0． 05) ;炒黄品及炒焦品对缩短小鼠的出
血、凝血时间均无显著性。
表 2 不同样品铁苋菜对小鼠出血、凝血时间的比较(珔x ± s，n =10)
Table 2 Comparison of bleeding and clotting time in mice of the
different samples in A． australis(珔x ± s，n =10)
组别 剂量 / g·kg －1 出血时间 / s 凝血时间 / s
空白 － 224． 0 ± 68． 47 88． 8 ± 21． 34
阳性对照 0． 26 115． 3 ± 19． 36# 54． 0 ± 12． 85#
生品 20 140． 6 ± 34． 63# 70． 8 ± 16． 33##
炒黄 20 161． 0 ± 46． 28# 75． 9 ± 22． 73
炒焦 20 167． 0 ± 48． 19# 76． 4 ± 20． 66
炒炭 20 118． 7 ± 13． 54#* 55． 1 ± 13． 97#*
与空白组比较:#P ＜ 0． 01，##P ＜ 0． 05;与生品组比较:* P ＜ 0． 05
1． 2． 9 数据统计分析 采用 SPSS17． 0 统计软件包
对数据进行处理。计量资料以 珋x ± s 表示，组间比较
采用 t检验，P ＜ 0． 05 表示有显著性差异。
2 讨论
文中结果表明:铁苋菜炒炭能增强生品的止血
作用，验证了该民族地区将铁苋菜制炭用于止血是
切实可行的。而炒黄、炒焦亦能显著缩短小鼠的出
血时间(P ＜ 0． 01) ，具有一定的止血作用，该结果可
部分解释当地群众在应用铁苋菜制炭止血时，虽存
在烘制程度不一的现象，而仍用于出血症状治疗的
原因。没食子酸为铁苋菜止血的有效成分［6］。铁
苋菜经炒炭后，没食子酸的含量降低，而止血作用较
生品显著增强，炒黄、炒焦后的含量小幅上升，而止
血作用与生品无显著差异，说明铁苋菜炒炭增强的
止血作用与没食子酸含量无相关性，其增强止血作
用的物质基础还可能与制炭过程中其他物质的产生
有关，如炭素和游离钙的形成等，因此，其炒炭止血
的作用机制需深入研究。叶是铁苋菜的重要入药部
位，其产量约占全草的 1 /2，且没食子酸的含量较其
他部位高［7］。叶切制干燥后质地轻脆，炒制过程中
易随火力的增加变成粉末或灰化，此结果必然影响
实际应用中药材取样的均一性，进而影响其止血的
效果。
参考文献:
［1］ 卫生部药典委员会． 卫生部颁药品标准(中药材第 1 册)
［M］．北京:卫生部药典委员会出版社，1992:71．
［2］ 邱德文，杜江． 中华本草(苗药卷) ［M］．贵阳:贵州科技出版
社，2005:456 － 457．
［3］ 南京中医药大学． 中药大辞典［M］．第 2 版．上海:上海科学
技术出版社，2006:2601 － 2602．
［4］ Kimura Y，Okuda H，Okuda T，et al． Studies on the activities to
tannins and related compounds on arachidonate metabolism in
human polymorph on uclear leukocytes［J］． J Nat Prod，1987，50
(3) :392 － 399．
［5］ 李仪奎．中药药理实验方法学［M］．上海:上海科学技术出版
社，2006:684．
［6］ 熊茉君，毛兴荣，李峰，等． HPLC测定三味蔷薇胶囊中的没食
子酸［J］．华西药学杂志，2010，25(5) :597 － 598．
［7］ 魏学军，林先燕，李雪营，等． 不同采收期和部位的黔产铁苋
菜中没食子酸和总黄酮的含量比较［J］． 华西药学杂志，
2014，29(5) :580 － 582．
收稿日期:2014 － 09 － 09
084 华 西 药 学 杂 志 第 30 卷