全 文 ：松塔景天组织培养与快速繁殖的研究
胡颖慧１，马春祥１，梁孝莉２
（１．黑龙江省农业科学院牡丹江分院，黑龙江 牡丹江 １５７０４１；２．牡丹江市种子管理处）
摘 要：以松塔景天幼嫩叶片作为外植体，利用含有不同浓度配比植物生长调节剂的培养基分别进
行愈伤组织的诱导、不定芽的诱导、生根培养及驯化移栽，建立了松塔景天组织培养和快速繁殖体
系。试验结果表明：诱导愈伤组织的最适培养基为 ＭＳ＋６－ＢＡ ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．０５ｍｇ／Ｌ，愈伤
组织诱导率达８７．７８％；诱导不定芽的最适培养基为 ＭＳ＋６－ＢＡ １．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ，不定
芽诱导率达８８．８９％；组培苗最佳生根培养基为１／２ＭＳ＋ＩＢＡ ０．３ｍｇ／Ｌ，生根率达９１．３３％；组培
苗的移栽成活率达８４％。
关键词：松塔景天；组织培养；植物生长调节剂
Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｒａｐｉｄ Ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｅｄｕｍ ｎｉｃａｅｅｎｓｅ
Ｈｕ Ｙｉｎｇｈｕｉ １，Ｍａ Ｃｈｕｎｘｉａｎｇ１，Ｌｉａｎｇ Ｘｉａｏｌｉ ２
（１．Ｍｕｄａｎｊｉａｎｇ Ｂｒａｎｃｈ ｏｆ Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍｕｄａｎｊｉａｎｇ，Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ １５７０４１；
２．Ｍｕｄａｎｊｉａｎｇ Ｃｉｔｙ Ｓｅｅｄ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｌｅａｖｅｓ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ａｓ ｔｈｅ ｅｘｐｌａｎｔｓ ａｎｄ ｔａｋｉｎｇ ＭＳ ａｓ ｔｈｅ ｂａｓｉｃ ｍｅｄｉｕｍ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄ
ｓｏｍｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐｌａｎｔ ｇｒｏｗｔｈ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ｔｈｅ ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ ｒａｐｉｄ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｓｙｓ－
ｔｅｍ ｏｆ Ｓｅｄｕｍ ｎｉｃａｅｅｎｓｅ Ａｌ．ｔｈｒｏｕｇｈ ｉｎｉｔｉａｌ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ，ｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，ｒｏｏｔｉｎｇ ｃｕｌｔｕｒｅｄ
ａｎｄ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｃａｌｕｓ ｗａｓ ＭＳ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄ
ｗｉｔｈ ０．５ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ ａｎｄ ０．０５ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ，ａｎｄ ｔｈｅ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｃａｌｕｓ ｒｅａｃｈｅｄ ８７．７８％；Ｔｈｅ
ｓｕｉｔａｂｌｅ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｓｈｏｏｔ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｗａｓ ＭＳ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄ ｗｉｔｈ １．０ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ ａｎｄ ０．１ｍｇ／Ｌ
ＮＡＡ，ａｎｄ ｔｈｅ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｓｈｏｏｔ ｒｅａｃｈｅｄ ８８．８９％；Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｒｏｏｔｓ ｉｎｄｕｃｅ－
ｍｅｎｔ ｗａｓ １／２ＭＳ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄ ｗｉｔｈ ０．３ｍｇ／Ｌ ＩＢＡ ａｎｄ ｔｈｅ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｒｏｏｔｓ ｒｅａｃｈｅｄ
９１．３３％；Ｔｈｅ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｒａｔｉｏ ｏｆ ｐｌａｎｔｌｅｔｓ ｒｅａｃｈｅｄ ８４％．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｓｅｄｕｍ ｎｉｃａｅｅｎｓｅ Ａｌ．；Ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ；Ｐｌａｎｔ ｇｒｏｗｔｈ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ
松塔景天（Ｓｅｄｕｍ ｎｉｃａｅｅｎｓｅ Ａｌ．），又名松叶景
天，为景天科景天属多年生常绿肉质草本植物，植株
基部分蘖能力较强，而成丛状，株高１０～２０ｃｍ，全株
呈灰绿色［１］。叶短针状，三岀轮生，排列紧密，
櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐櫐
顶部
开发及新药生产提供了一种新途径。
参 考 文 献
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ｓｕｂｓｔｒａｔｅ－ｔｏｌｅｒａｎｔ Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ ｂａｉｎｉｅｒ ２２９－７［Ｊ］．
Ｂｉｏｒｅｓｏｕｒｃｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１０，１０１：７８７２－７８７６．
作者简介：逄世峰（１９８３－），男，研实员，主要从事药用
植物质量评价研究，Ｅ－ｍａｉｌ：ｐｓｆ５２９５＠ｓｏｈｕ．ｃｏｍ；＊通讯作
者：王英平（１９６７－），男，博士生导师，从事药用植物资源与
评价研究，Ｅ－ｍａｉｌ：ｙｉｎｇｐｉｎｇｗ＠１２６．ｃｏｍ。
３
第２期（总第１２９期） 中 国 林 副 特 产 Ｎｏ．２（ＧＳＮＯ．１２９）
２０１４年４月 Ｆｏｒｅｓｔ Ｂｙ－Ｐｒｏｄｕｃｔ ａｎｄ Ｓｐｅｃｉａｌｉｔｙ ｉｎ Ｃｈｉｎａ Ａｐｒ．２０１４
DOI:10.13268/j.cnki.fbsic.2014.02.016
呈密集的开裂松果状，花黄色。生长习性耐旱、极耐
寒，喜光，不耐荫。对土壤要求不严，但以排水良好、
富含腐殖质的砂壤土更为适宜。可用于庭院作地被
栽植，或作花坛镶边，或配置模纹花坛，也可盆栽作
观叶植物置于室内，或用于屋顶绿化［２］，在生态城市
建设中有着极为广阔的应用前景。
松塔景天成活率高、观赏性状优良，目前其栽培
繁殖已逐步进入市场化，繁殖方式以扦插繁殖为主，
但此法繁殖率较低，且耗时耗力。通过组织培养，在
短时期内获得大量植株，是经济有效的快速繁殖方
法，也是工厂化育苗的主要途径，此外也可以为合理
开发利用和保存野生植物资源提供有价值的参考，
因而对松塔景天离体快繁的研究在生产上有重大意
义。
目前，对松塔景天的研究主要集中在引种栽
培［３］以及抗逆生理响应［４－７］等方面，对组织培养的研
究鲜有报道，仅有邢苗苗等以茎段为外植体，研究了
松塔景天和粗壮景天的组培快繁［８］，而本研究是以
幼嫩叶片为外植体，通过器官发生途径建立松塔景
天的高效快繁体系，相同方法的研究还未见报道。
１ 材料方法
１．１ 材料
供试植物材料为松塔景天（Ｓｅｄｕｍ ｎｉｃａｅｅｎｓｅ
Ａｌ．），外植体选择发育正常的幼嫩叶片。
１．２ 培养条件
培养基以 ＭＳ培养基为基础培养基，蔗糖３０ｇ／
Ｌ、琼脂７．８ｇ／Ｌ、ｐＨ值为５．８、培养温度（２５±２）℃、
光照强度１５００～２０００ｌｘ。
１．３ 方法
１．３．１ 外植体处理。取松塔景天植株幼嫩叶片作
为外植体，经清水冲洗１０ｍｉｎ后，用７５％的酒精浸
泡１０～１５ｓ表面消毒；再浸入１０％次氯酸钠溶液３
～５ｍｉｎ；随后，用灭菌蒸馏水淋洗３次。将其平放
在高压灭菌过的滤纸上，用灭菌刀将叶片切成
０．５ｃｍ长的小块。
１．３．２ 愈伤组织诱导。将外植体接种于含基本培
养基附加不同浓度的６－ＢＡ（０、０．１、０．５、１．０ｍｇ／Ｌ）
和ＮＡＡ（０、０．０５、０．１、０．１５ｍｇ／Ｌ）的培养瓶中，每
处理接种３０个外植体，重复３次，置于培养室内先
进行暗培养１４ｄ后再进行光照培养，观察不同激素
配比培养基中愈伤组织的生长状态，统计愈伤组织
诱导率。
１．３．３ 芽分化及再生。将诱导出的松塔景天愈伤
组织，切分后分别继代培养于附加不同浓度６－ＢＡ
（０．１、０．５、１．０ｍｇ／Ｌ）和 ＮＡＡ（０．０５、０．１、０．１５ｍｇ／
Ｌ）的培养瓶中进行光照培养，每处理接种３０个愈
伤组织，重复３次，３０ｄ后比较不同浓度植物生长调
节剂组合下愈伤组织芽分化情况、统计芽分化率。
１．３．４ 生根培养。将诱导的不定芽切下接种于附
加不同浓度ＩＢＡ的生根培养基上。生根培养基以
１／２ＭＳ为基本培养基，附加４种浓度梯度的ＩＢＡ
（０．１、０．３、０．５、１．０ｍｇ／Ｌ），每处理接种５０个不定
芽，重复３次，３０ｄ后观察生根情况，统计不定芽生
根率。
１．３．５ 驯化移栽。待组培苗的根长达到３～５ｃｍ
时即可进行驯化移栽，首先松动培养基的瓶盖１～
２ｄ，然后将瓶盖完全打开，倒入少量无菌水，在培养
室中炼苗６～７天后轻轻夹出小苗，洗净培养基，并
避免根部损伤。移栽到混合基质（草炭土∶蛭石∶
珍珠岩＝２∶１∶１）中，喷雾或浇水加盖塑料薄膜以
保持水分平衡，提高小苗周围空气湿度（９０％～
１００％），减少叶面蒸腾。
１．３．６ 数据处理。所有试验数据采用ＳＰＳＳ数据
统计软件进行方差分析，０．０５检测水平。
２ 结果与分析
２．１ 不同浓度的植物生长调节剂配比对愈伤组织
诱导的影响
将松塔景天外植体接种于不同植物生长调节剂
配比培养基中，培养７～１０ｄ，切口处开始膨大（图１－
Ａ），经过３０ｄ培养，会有不同程度的愈伤组织长出，
但在不同浓度梯度下，愈伤组织的诱导率明显不同，
愈伤组织的色泽、松散程度及生长状态也有所差别
（见表１）。
试验结果表明，在不添加任何植物生长调节剂
及只添加一种植物生长调节剂的培养基中，愈伤组
织的诱导率显著低于２种激素不同浓度配比的培养
基（表１），说明６－ＢＡ及ＮＡＡ对松塔景天诱导愈伤
组织都起着至关重要的作用。
由表１可以看出，在 ＭＳ＋６－ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋
ＮＡＡ０．０５ｍｇ／Ｌ培养基上诱导培养的愈伤组织不仅
诱导率高达８７．７８％，显著高于其他几种浓度配比
的培养基，且生长速度快，质量最好，外观呈浅绿色
的颗粒状（图１－Ｂ），质地较为疏松，生长速度快。一
般认为，这种愈伤组织为具有分化能力的愈伤组
４
２０１４年 中 国 林 副 特 产 第２期
织［９］。
表１ 不同浓度植物生长调节剂对
松塔景天愈伤组织诱导的影响
植物生长调节剂
／（ｍｇ·Ｌ－１）
６－ＢＡ ＮＡＡ
愈伤组织诱导率
／％
愈伤组织生长状态
０ ０ ０ｇ 外植体全部褐化死亡
０ ０．０５ ６．６７±１．９３ｅｆｇ
几乎不产生愈伤组织，
易褐化死亡
０ ０．１ ３．３３±３．８５ｆｇ
几乎不产生愈伤组织，
易褐化死亡
０ ０．１５ ７．７８±２．９３ｅｆ
几乎不产生愈伤组织，
易褐化死亡
０．１ ０ ８．８９±２．２２ｅｆ
几乎不产生愈伤组织，
易褐化死亡
０．１ ０．０５ ５２．２２±２．９３ｃ
愈伤组织结构较为紧密，
呈白色或淡黄色
０．１ ０．１ ４８．８９±３．８５ｃ
愈伤组织结构较为紧密，
呈白色或淡黄色
０．１ ０．１５ ３７．７８±２．９３ｄ
愈伤组织呈玻璃化，
透明或白色
０．５ ０ ８．８９±１．１１ｅｆ
几乎不产生愈伤组织，
易褐化死亡
０．５ ０．０５ ８７．７８±２．９３ａ
愈伤组织质地疏松，颜色呈
淡绿色，颗粒状，易于分开
０．５ ０．１ ７３．３３±１．９３ｂ
愈伤组织结构较为松散，
颜色呈浅黄色，半透明
０．５ ０．１５ ５１．１１±２．９４ｃ
愈伤组织结构较为紧密，
呈白色或淡黄色
１．０ ０ １２．２２±２．２２ｅ
仅有少量愈伤组织形成，
质地紧密，呈黄色，不易分开
１．０ ０．０５ ６８．８９±１．１１ｂ
愈伤组织结构较为松散，
颜色呈浅黄色，半透明
１．０ ０．１ ４７．７８±４．０１ｃ
愈伤组织结构较为紧密，
呈白色或淡黄色
１．０ ０．１５ ３８．８９±２．９４ｄ
愈伤组织呈玻璃化，
透明或白色
注：同一行数据后标不同小写字母表示差异显著（Ｐ＜０．０５）
２．２ 不同浓度的植物生长调节剂配比对愈伤组织
芽分化的影响
将长势良好的愈伤组织切割后，接种于不同植
物生长调节剂配比培养基中诱导芽分化，培养３０ｄ
后，统计芽诱导率见表２，试验结果表明，在不同植
物生长调节剂浓度配比中，ＭＳ＋６－ＢＡ １．０ｍｇ／Ｌ＋
ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ培养基中愈伤组织芽分化率显著高
于其他培养基，为８８．８９％，１４ｄ时愈伤组织表面开
始出现的绿色芽点（图１－Ｃ），随后淡绿色芽点渐渐
密集（图１－Ｄ），３０ｄ后迅速诱导产生丛生芽（图１－
Ｅ），将丛生芽切分后进行继代培养，１４ｄ后形成不定
芽（图１－Ｆ）。
表２ 不同浓度植物生长调节剂对松塔景天
愈伤组织芽分化的影响
植物生长调节剂
／（ｍｇ·Ｌ－１）
６－ＢＡ ＮＡＡ
芽诱导率／％ 不定芽生长状态
０．１ ０．０５ ６．６７±１．９３ｆ 仅形成少量不定芽，且不易成活
０．１ ０．１ １７．７８±４．０１ｅ 不定芽细小，叶色发黄，无分化
０．１ ０．１５ ３２．２２±２．９４ｄ
不定芽细弱，叶色偏黄，长势缓
慢，分化少
０．５ ０．０５ ４８．８９±１．１１ｃ
不定芽较为细弱，黄绿色，，不
定芽较高，分化较少
０．５ ０．１ ６２．２２±５．８８ｂ
不定芽较为粗壮，绿色，分化较
多，长势一般
０．５ ０．１５ ４３．３３±３．８５ｃ
不定芽较为细弱，黄绿色，，不
定芽较高，分化较少
１．０ ０．０５ ６２．２２±２．９３ｂ
不定芽较为粗壮，绿色，分化较
多，长势一般
１．０ ０．１ ８８．８９±２．９４ａ
不定芽粗壮，绿色，分化较多，
丛状生长
１．０ ０．１５ ４３．３３±３．８５ｃ
不定芽较为细弱，黄绿色，，不
定芽较高，分化较少
２．３ 不同浓度的植物生长调节剂对组培苗生根的
影响
图１ 松塔景天组培快繁过程
５
２０１４年 胡颖慧等：松塔景天组织培养与快速繁殖的研究 第２期
注：Ａ：外植体伤口膨大；Ｂ：愈伤组织；Ｃ：愈伤组织表面形成芽
点；Ｄ：芽点增多；Ｅ：丛生芽；Ｆ：不定芽的伸长；Ｇ：生根培养；Ｈ：驯化
移栽
选择在最适芽分化培养基中继代培养的松塔景
天组培苗，接种到１／２ＭＳ培养基，附加不同浓度的
ＩＢＡ，３０ｄ后统计生根情况（见表３）。
表３ 不同浓度ＩＢＡ对松塔景天组培苗生根的影响
ＩＢＡ／（ｍｇ·Ｌ－１） 生根率／％ 根部生长状态
０．１ ４１．３３±１．７６ｃ 根细，主侧根难以区分
０．３ ９１．３３±４．０６ａ 根粗壮，主侧根明显，有须根
０．５ ６４．６７±３．５３ｂ 根比较壮，主侧根较为明显
１．０ ４３．３３±２．４０ｃ 根较细，主侧根不太明显
由表３可以看出，松塔景天组培苗在几个不同
处理培养基中均能生根，但生根率及根部长势有所
不同，在添加０．３ｍｇ／Ｌ ＩＢＡ的培养基中生根率达
９１．３３％，显著高于其他浓度处理，且根部长势粗壮，
主侧根能够明显区分（图１－Ｇ），因此１／２ＭＳ＋０．３
ｍｇ／Ｌ ＩＢＡ为松塔景天组培苗最适生根培养基。组
培苗生根后获得完整的再生植株，待根部长至３～
５ｃｍ后，进行驯化移栽，３０ｄ后松塔景天组培苗成
活率达８４％（图１－Ｈ）。
３ 讨论与结论
由于植物细胞在离体状态下缺乏合成生长素和
分裂素的能力，因此，在组织培养过程中往往需要添
加适当的外源植物生长调节剂（ＰＧＲｓ）以促进细胞
的生长和分化［１０］。ＰＧＲｓ又称植物激素，包括细胞
分裂素、生长素等。细胞分裂素和生长素搭配使用
可诱导植物脱分化形成愈伤组织，被广泛应用于植
物组织培养。但不同的植物对植物生长调节剂的种
类和浓度的反应不尽相同［１１］。
本试验以松塔景天幼嫩叶片为外植体，通过器
官发生途径，即诱导愈伤组织、愈伤组织芽分化、生
根培养的途径研究松塔景天的高频再生体系，试验
结果表明松塔景天最适愈伤组织诱导培养基为 ＭＳ
＋６－ＢＡ ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．０５ｍｇ／Ｌ，愈伤组织诱导
率达８７．７８％，愈伤组织颜色淡绿色，生长较快，质
地疏松。关于芽分化培养有研究结果表明，６－ＢＡ／
ＮＡＡ的比值高时有利于不定芽的分化［１２－１３］，本试
验筛选出的最适芽分化培养基为 ＭＳ＋６－ＢＡ
１．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ，其６－ＢＡ／ＮＡＡ 的比值
为１０，这与前人研究结果相一致。关于植物组织生
根培养，大多数试验已得出结论，以１／２ＭＳ作为生
根培养的基本培养基效果较好［１４］，因此本试验也使
用这种配方，邢苗苗［８］认为ＮＡＡ抑制根的生长，而
ＩＢＡ适合景天类植物生根，并发现１／２ ＭＳ附加
ＩＢＡ ０．５ｍｇ／Ｌ为最佳的生根培养基，而本试验筛
选出的最适生根培养基为１／２ＭＳ＋ＩＢＡ ０．３ｍｇ／Ｌ，
这可能是由于不同外植体自身的生理结构、分化状
态以及脱分化能力存在的差异造成的。长势良好的
组培苗经驯化移栽后成活率达８４％。
本试验建立了松塔景天快速繁殖体系，可大量
提供优质松塔景天组培苗，此外还可为松塔景天的
种植资源保存、品种改良等提供一定的指导意义。
参 考 文 献
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ｃｏｍ。
６
２０１４年 中 国 林 副 特 产 第２期