全 文 ：中南药学 2015 年 7 月 第 13 卷 第 7 期　Central South Pharmacy. July 2015, Vol. 13 No. 7
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（收稿日期：2015-06-03；修回日期：2015-06-30）
五指毛桃高效液相色谱指纹图谱研究
何凌云 1 ，陈燕燕 2 （1. 广州市药品检验所四分所，广州 510405；2. 广州市荔湾区骨伤科医院，广州 510140）
摘要：目的　建立五指毛桃药材 HPLC指纹图谱，为科学、合理地实现质量控制提供更为可靠的方法。方法
　采用高效液相色谱法，以Waters Xbridge C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）为色谱柱；甲醇 -0.1%磷酸为
流动相梯度洗脱；检测波长为 250 nm；流速为 0.8 mL·min－ 1；柱温 30 ℃。 结果　建立了五指毛桃药材的
指纹图谱，标示了 22个共有峰，并采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004A版）对 10批五指毛桃药
材 HPLC指纹图谱进行了相似度评价，各五指毛桃样品指纹图谱与对照指纹图谱相似度均较高。结论　所用
方法简便、准确、重复性好，为有效地控制与评价五指毛桃的质量提供了科学依据。
关键词：五指毛桃；高效液相色谱；指纹图谱
中图分类号：R284，O657.7　　　　文献标识码：A　　　　文章编号：1672-2981(2015)07-0681-04
doi:10.7539/j.issn.1672-2981.2015.07.002
HPLC fi ngerprint analysis of Ficus hirta Vahl.
HE Ling-yun1, CHEN Yan-yan2 (1. No.4 Branch of Guangzhou Institue for Drug Control, Guangzhou 510405; 2.
Orthopedics Hospital of Liwan District, Guangzhou 510140)
Abstract: Objective To establish an HPLC fi ngerprint method for the quality control of Ficus hirta Vahl.. Methods

作者简介：何凌云，女，主管药师，主要从事药品的质量控制与检验工作，Tel：15813386680。
Central South Pharmacy. July 2015, Vol. 13 No.7　中南药学 2015 年 7 月 第 13 卷 第 7 期
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2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱Waters Xbridge C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；
流动相为甲醇（A）-0.1%磷酸，梯度洗脱（0～ 30 min，
15% ～ 30%A；30 ～ 55 min，30% ～ 55%A；55 ～ 80
min，55%～ 80%A；80～ 90 min，80%A）；检测波长：
250 nm；柱温：30 ℃；流速：0.8 mL·min－ 1；进样量：
10 μL。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取槲皮素对照品 13.62 mg，芹菜素对照品 5.79
mg，置 50 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，即得
槲皮素 272.4 μg·mL－ 1、芹菜素 115.8 μg·mL－ 1的混
合对照品溶液。
2.3 样品溶液的制备
取五指毛桃样品粗粉各约 2 g，精密称定，置具塞锥
形瓶中，精密加入甲醇 50 mL，称定重量，超声处理 40
min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，
滤过，滤液回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解，转移至 5
mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
表 1 10批样品信息
Tab 1 Information of 10 batches samples
样品编号
（sample No.）
采集（购买）地
（place of purchase）
产地
（place of production）
样品编号
（sample No.）
采集（购买）地
（place of purchase）
产地
（place of production）
S1 广东河源 GAP基地 广东 S6 安徽亳州 河北
S2 广州采芝林药店 广东 S7 广州老百姓大药房 广西
S3 广州杏园药店 广东 S8 广东梅州 广东
S4 广州中芝源医药有限公司 广东 S9 同仁堂药店 广东
S5 广州大森林药店 广东 S10 广州百源堂药店 广西
2.4 方法学考察
2.4.1 精密度 精密吸取“2.2”项下对照品溶液各 10
μL，连续进样 6次，以 13号峰补骨脂素为参照峰，计算
各共有峰的相对保留时间和相对峰面积 RSD均＜ 2%，
表明仪器精密度良好。
2.4.2 稳定性 精密吸取同一样品溶液（S1）各 10 μL，
分别于制备后 0、3、6、9、12、24 h进样，以 13号峰补
骨脂素为参照峰，计算出各共有峰的相对保留时间和对
峰面积 RSD均＜ 2%，表明供试品溶液在 24 h内稳定。
2.4.3 重复性 取同一批次五指毛桃样品（S1），分别精
密称取 6份，按“2.3”项下方法制备样品溶液，以 13号
补骨脂素为参照峰，计算出 1～ 22号共有峰的相对保留
时间和对峰面积的RSD均＜ 2%，表明该方法重复性良好。
2.5 指纹图谱的建立
采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004A版）
对 10批五指毛桃药材 HPLC图谱进行处理，选取时间窗
宽度为 0.1 min，以平均数生成对照谱图，经过自动校正
后进行色谱峰匹配，结果见图 2，所得对照指纹图谱见图
3。据文献研究显示，补骨脂素、芹菜素、佛手柑内酯等
五指毛桃 Radix Fici Hirtae为桑科植物粗叶榕 Ficus
hirta Vahl. 的干燥根，又名五爪龙、五指榕、五指香、土
北芪等，为华南地区习用药材，始载于《生草药性备要》，
味甜辛，性平，归肺、脾、胃、大肠、肝经，该药长于
益气健脾、祛痰化湿、舒筋活络，可用于肺虚痰喘、脾
胃气虚、肢倦无力、食少腹胀、水肿、带下、风湿痹痛、
腰腿痛等。目前《广东省中药材标准》[1]仅对五指毛桃
的性状及薄层鉴别提出了要求，本试验收集了 10批五指
毛桃药材，建立 HPLC指纹图谱，以期为五指毛桃药材
的质量控制提供更全面的评价。
1 材料
1.1 仪器
Waters e2695-2998高效液相色谱仪（美国Waters公
司），Waters Xbridge C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，
Mettler-Toledo XS205DU电子分析天平（瑞士梅特勒托利
多公司，精度：0.1 mg），KQ5200DE型数控超声波清洗
器（昆山舒美超声仪器有限公司），MilliPore Advantage
A10自动纯水机（美国默克密理博公司），HH-6数显恒
温水浴锅（上海梅香仪器有限公司）。
1.2 试药
五指毛桃样品为广东市售，经广东省中医药研究所
刘法锦研究员鉴定为桑科植物粗叶榕 Ficus hirta Vahl.的
干燥根。补骨脂素对照品（批号：100080-200406，纯度：
100%）、芹菜素对照品（批号：111901-201001，纯度：
100%）（中国食品药品检定研究院）；样品来源信息见
表 1。甲醇为色谱纯（默克），水为超纯水，其他试剂均
为分析纯（广州市化学试剂厂）。
The chromatographic fi ngerprints were obtained by HPLC with Waters Xbridge C18 column (4.6 mm×250 mm, 5 μm).
Methanol-0.1% phosphoric acid was used as the mobile phase with gradient at 0.8 mL·min － 1. The wavelength was
250 nm; The column temperature was maintained at 30 ℃ . Results Twenty-two main common peaks were selected
from the fi ngerprint peaks and good similarities with correlation coeffi cients were shown. Conclusion The method
with good reproducibility is simple and accurate, which can be used effectively for the quality control and evaluation
of Ficus hirta Vahl..
Key words: Ficus hirta Vahl.; HPLC; fi ngerprint
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香豆素及黄酮类为其主要有效活性成分 [2-5]，其中又以补
骨脂素含量最高，从图 3中可以看出补骨脂素的色谱峰
分离度理想，峰面积所占比例较大且相对稳定，故以 13
号峰补骨脂素为参照峰确定 22个共有峰构成五指毛桃指
t/min
图 3 指纹图谱共有模式
Fig 3 Reference fi ngerprints of Ficus hirta Vahl.
纹图谱的特征峰，样品共有峰的相对保留时间及相对峰
面积分别列于表 2～ 3。10批五指毛桃与对照指纹图谱
相似度计算结果分别为 0.998、0.968、0.917、0.996、0.983、
0.984、0.998、0.995、0.981、0.994。
图 2 10批样品指纹图谱
Fig 2 HPLC fi ngerprint for 10 batches of Ficus hirta Vahl.
t/min
图 1 五指毛桃样品 HPLC
Fig 1 HPLC chromatogram of Ficus hirta Vahl.
A.对照品（standard）；B.样品（sample）；13.补骨脂素（psoralen）；
16.芹菜素（apigenin）；1～ 22. 10批样品共有峰（common peaks
of 10 batches of samples）
t/min
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90
A
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90
t/min
B
13
16
1
16
1817
14
15
13
19 20
12
101198
7
6
5
4
2 3
22
21
表 2 10批样品共有峰的相对保留时间
Tab 2 Relative retention time of common peaks for the 10 batches
峰号
（No.）
样品相对保留时间 （relative retention time of samples）
S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10
1 0.189 0.188 0.189 0.189 0.190 0.187 0.188 0.189 0.189 0.191
2 0.201 0.202 0.200 0.200 0.200 0.202 0.203 0.200 0.201 0.202
3 0.219 0.218 0.218 0.217 0.216 0.218 0.214 0.219 0.218 0.220
4 0.306 0.306 0.307 0.305 0.305 0.308 0.305 0.308 0.307 0.306
5 0.377 0.378 0.378 0.375 0.374 0.374 0.376 0.377 0.377 0.377
6 0.416 0.415 0.415 0.417 0.416 0.418 0.417 0.418 0.415 0.416
7 0.642 0.645 0.643 0.643 0.644 0.642 0.643 0.644 0.645 0.644
8 0.751 0.750 0.750 0.752 0.752 0.751 0.753 0.753 0.752 0.750
9 0.770 0.771 0.771 0.770 0.772 0.769 0.768 0.769 0.770 0.771
10 0.816 0.813 0.814 0.815 0.815 0.815 0.816 0.817 0.815 0.815
11 0.834 0.835 0.834 0.833 0.833 0.838 0.836 0.836 0.836 0.835
12 0.982 0.983 0.983 0.982 0.980 0.985 0.980 0.981 0.981 0.982
13 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000
14 1.129 1.128 1.128 1.127 1.130 1.131 1.130 1.128 1.128 1.129
15 1.153 1.152 1.151 1.154 1.152 1.154 1.153 1.154 1.155 1.155
16 1.226 1.227 1.225 1.225 1.226 1.224 1.228 1.227 1.223 1.225
17 1.460 1.461 1.461 1.462 1.462 1.460 1.459 1.461 1.458 1.460
18 1.516 1.517 1.515 1.517 1.514 1.514 1.518 1.518 1.514 1.516
19 1.686 1.685 1.683 1.685 1.684 1.685 1.687 1.687 1.685 1.686
20 1.726 1.723 1.725 1.725 1.723 1.724 1.725 1.724 1.725 1.727
21 1.763 1.765 1.768 1.764 1.764 1.765 1.762 1.760 1.761 1.763
22 1.883 1.885 1.882 1.881 1.885 1.882 1.881 1.884 1.883 1.883
Central South Pharmacy. July 2015, Vol. 13 No.7　中南药学 2015 年 7 月 第 13 卷 第 7 期
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表 3 10批样品共有峰的相对峰面积
Tab 3 Relative area of common peaks for the 10 batches of Ficus hirta Vahl.
峰号
（No.）
样品相对峰面积 （relative area of samples）
S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10
1 0.015 0.023 0.017 0.021 0.026 0.034 0.037 0.051 0.053 0.048
2 0.010 0.017 0.008 0.019 0.024 0.052 0.017 0.030 0.013 0.025
3 0.015 0.021 0.028 0.036 0.039 0.025 0.058 0.044 0.043 0.027
4 0.145 0.208 0.273 0.179 0.181 0.252 0.267 0.233 0.234 0.259
5 0.084 0.091 0.103 0.089 0.095 0.093 0.135 0.108 0.123 0.158
6 0.026 0.033 0.031 0.017 0.058 0.055 0.062 0.083 0.071 0.062
7 0.015 0.011 0.010 0.002 0.025 0.025 0.026 0.013 0.018 0.017
8 0.019 0.028 0.023 0.021 0.038 0.035 0.046 0.052 0.033 0.017
9 0.031 0.026 0.051 0.044 0.037 0.038 0.045 0.046 0.031 0.034
10 0.052 0.027 0.045 0.045 0.031 0.038 0.036 0.048 0.069 0.052
11 0.034 0.055 0.039 0.036 0.027 0.065 0.082 0.063 0.058 0.024
12 0.135 0.213 0.172 0.169 0.145 0.231 0.089 0.096 0.122 0.178
13 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000
14 0.076 0.091 0.078 0.045 0.071 0.082 0.086 0.085 0.093 0.096
15 0.191 0.177 0.253 0.267 0.193 0.138 0.156 0.152 0.189 0.204
16 0.288 0.313 0.317 0.305 0.281 0.265 0.322 0.368 0.401 0.258
17 0.023 0.052 0.028 0.037 0.045 0.046 0.021 0.082 0.056 0.054
18 0.030 0.031 0.032 0.056 0.048 0.031 0.035 0.038 0.046 0.058
19 0.044 0.017 0.028 0.069 0.035 0.038 0.042 0.048 0.045 0.059
20 0.021 0.033 0.017 0.028 0.036 0.044 0.045 0.081 0.021 0.029
21 0.092 0.108 0.083 0.096 0.082 0.177 0.152 0.073 0.118 0.105
22 0.061 0.093 0.058 0.060 0.097 0.082 0.087 0.078 0.133 0.102
3 讨论
本试验采用 HPLC技术建立了五指毛桃药材的指纹
图谱，确定了 22个共有峰，指认出 13号峰为补骨脂素、
16号峰为芹菜素，并通过相似度评价软件计算各批次样
品与共有模式之间的相似度，以补骨脂素为参照峰，确
定了 22个共有峰的峰位和大致比例关系，作为一个共有
整体，清楚地表达了指纹图谱的专属性。样品之间的差
异没有影响到五指毛桃药材指纹图谱的整体面貌和共同
特征。本试验结果均较理想，10批样品相似度计算结果
均＞ 0.9，对照图谱提供较丰富的质量信息。由于目前对
五指毛桃药材的化学成分研究还处于初级阶段，许多成
分尚不明了，《广东省中药材标准》也仅对定性鉴别作
出规定，故本课题的研究为五指毛桃药材的质量评价提
供了更科学的方法，更有效地控制药用资源质量的真实
性、优良性及稳定性。

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