全 文 ：陈永杰, 南京中医药大学 江苏省南京市 210046
史仁杰, 江苏省中医院肛肠科 江苏省南京市 210029
陈永杰, 在读博士, 主要从事中医药治疗肛肠疾病的研究.
江苏省2011年度研究生创新计划立项基金资助项目, No. C
XZZ11_0769
作者贡献分布: 此课题由陈永杰与史仁杰设计; 研究过程由陈永
杰操作完成; 数据分析由陈永杰与史仁杰完成; 本论文写作由陈
永杰完成, 史仁杰审核.
通讯作者: 史仁杰, 主任医师, 博士研究生导师, 210029, 江苏省
南京市, 江苏省中医院肛肠科. shirenjietcm@yahoo.com.cn
收稿日期: 2012-04-18 修回日期: 2012-05-18
接受日期: 2012-05-31 在线出版日期: 2012-06-18
Effect of ethanol extract from
radix of Actinidia chinensis
on tumor growth and cell
apoptosis in HT-29 human
colon cancer xenografts in
nude mice
Yong-Jie Chen, Ren-Jie Shi
Yong-Jie Chen, Nanjing University of Chinese Medicine,
Nanjing 210046, Jiangsu Province, China
Ren-Jie Shi, Department of Coloproctology, Jiangsu Pro-
vincial Hospital of TCM, Nanjing 210029, Jiangsu Province,
China
Supported by: the 2011 Graduate Innovation Program of
Jiangsu Province, No. CXZZ11_0769
Correspondence to: Ren-Jie Shi, Chief Physician, Depart-
ment of Coloproctology, Jiangsu Provincial Hospital of
TCM, Nanjing 210029, Jiangsu Province,
China. shirenjietcm@yahoo.com.cn
Received: 2012-04-18 Revised: 2012-05-18
Accepted: 2012-05-31 Published online: 2012-06-18
Abstract
AIM: To explore the regulatory effect of ethanol
extract from radix of Actinidia chinensis (EERAC)
on tumor growth and cell apoptosis in HT-29 hu-
man colon cancer xenografts in nude mice.
METHODS: Forty Balb/c-nu/nu nude mice
were used to prepare xenograft models of HT-29
human colon cancer, and model mice were ran-
domly divided into fi ve groups (n = 8), including
three treatment groups (treated with 5, 10 and 20
mg/kg of EERAC, respectively), normal control
group (treated with normal saline) and positive
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世界华人消化杂志 2012年6月18日; 20(17): 1547-1552
ISSN 1009-3079 (print) ISSN 2219-2859 (online)
研究快报 RAPID COMMUNICATION
藤梨根提取物对HT-29荷瘤裸鼠的抑制及诱导凋亡作用
的影响
陈永杰, 史仁杰
®
■背景资料
大肠癌是最常见
的消化系肿瘤之
一, 对人类健康的
威胁性极大, 中药
藤梨根是大肠癌
术后常用的有效
药物 , 其抗癌的
机制尚未完全明
确; Bcl-2、Bax、
Caspase-3调控肿
瘤增殖与凋亡的
重要调控基因, 可
在一定程度上反
应抗肿瘤药物的
内在机制.
control group (treated with 5-FU, 25 mg/kg).
After 8 d of treatment, spleen index and tumor in-
hibition rate were determined; the degree of NK
cell activity was measured by culturing spleen ef-
fect cells; and the expression of apoptosis-related
proteins Bcl-2, Bax and Caspase-3 in tumor tissue
was determined by immunohistochemistry.
RESULTS: Compared to the control group, EE-
RAC treatment had obvious inhibition on the
growth of HT-29 xenograft tumor. The inhibi-
tion rate for each dose group was 9.12%, 20.13%
and 37.81%, and there is a positive correlation
between tumor growth inhibition and drug
dose. Compared to the saline group and 5-Fu
group, EERAC treatment signifi cantly increased
the spleen index (all P < 0.05) and the activity of
NK cells (all P < 0.05), decreased the expression
of Bcl-2 and Bcl-2/Bax ratio, and up-regulated
the expression of Bax and Caspase-3 in a dose-
dependent manner.
CONCLUSION: EERAC inhibits tumor growth
and induces cell apoptosis in HT-29 human co-
lon cancer xenografts in nude mice possibly via
mechanisms associated with the inhibition of
Bcl-2 expression, lowering of Bcl-2/Bax ratio, and
up-regulation of Bax and Caspase-3 expression.
Key Words: Ethanol extract from radix of Actinidia
chinensis; HT-29 cells; Transplanted tumors; Prolif-
eration; Apoptosis
Chen YJ, Shi RJ. Effect of ethanol extract from radix of
Actinidia chinensis on tumor growth and cell apoptosis
in HT-29 human colon cancer xenografts in nude mice.
Shijie Huaren Xiaohua Zazhi 2012; 20(17): 1547-1552
摘要
目的: 研究藤梨根提取物(ethanol extract from
radix of Actinidia chinensis, EERAC)对人大肠
癌HT-29荷瘤裸鼠移植瘤的抑制和诱导凋亡
作用.
方法: 提取EERAC, 以大肠癌HT-29细胞对40
只Balb/c-nu/nu裸鼠进行荷瘤造模, 并随机将分
■同行评议者
牛英才 , 研究员 ,
齐齐哈尔医学院
医药科学研究所
1548 ISSN 1009-3079 (print) ISSN 2219-2859 (online) 世界华人消化杂志 2012年6月18日 第20卷 第17期
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■研发前沿
肛肠科常用中药
藤梨根 , 经临床
实践证明 , 有着
较好的抗肿瘤作
用 , 其疗效确切 ,
越来越受到人们
关注藤梨根抗肿
瘤的化学成分和
药理作用虽己有
初步的研究 , 但
其有效部位、作
用机制缺乏系统
的药理跟踪研究.
为3个EERAC处理组(低剂量组5 mg/kg、中剂
量组10 mg/kg、高剂量组20 mg/kg), 空白对照
组(生理盐水)和阳性对照组(5-Fu, 25 mg/kg),
每组8只, 连续用药8 d后, 测定各实验组的肿
瘤抑制率、脾脏指数. 通过脾脏效应细胞培
养, 测定NK细胞的活性度. 免疫组织化学法
测定各组荷瘤裸鼠体内凋亡相关基因Bcl-2、
Bax、Caspase-3的蛋白表达水平.
结果: 与空白对照组相比, EERAC对HT-29移
植瘤均有明显的抑制作用, 各剂量组的抑瘤率
为9.12%、20.13%、37.81%, 与药物剂量呈正
比; EERAC各剂量组对荷瘤裸鼠脾脏指数较
生理盐水组和5-Fu组有显著增加(P <0.05); 不
同剂量的EERAC均可使NK细胞活性度增加
(P<0.05); EERAC作用后, HT-29荷瘤裸鼠体内
的Bcl-2表达减弱, Bax、Caspase-3表达水平
增高, Bcl-2/Bax比值下降, 其作用也呈剂量相
关性.
结论: EERAC对大肠癌细胞HT-29荷瘤裸鼠具
有抑制瘤体生长和诱导癌细胞凋亡的作用, 其
作用机制可能为抑制荷瘤裸鼠体内Bcl-2的表
达, 提高Bax、Caspase-3表达水平, 下调Bcl-2/
Bax. EERAC对荷瘤裸鼠免疫系统无不良影
响, 且能一定程度上提高机体的免疫功能.
关键词: 藤梨根提取物; HT-29细胞; 移植瘤; 增殖;
凋亡
陈永杰, 史仁杰. 藤梨根提取物对HT-29荷瘤裸鼠的抑制及诱导
凋亡作用的影响. 世界华人消化杂志 2012; 20(17): 1547-1552
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0 引言
藤梨根是植物猕猴桃科猕猴桃属中华猕猴桃
(actinidia chinensis planch)的根, 又名阳桃根. 其
味咸、酸、涩, 性凉, 无毒, 主要功效为清热解
毒、祛风除湿、利尿止血, 是常用的治疗大肠
癌的中草药之一. 其抗癌作用符合的中医有关
大肠发病的“癌毒”[1]和“湿热致病”学说的
相关治则. 临床上, 朱秀山等[2]用昭黄散(藤梨
根为主药)治疗不能手术胃癌患者72例, 疗效与
5-Fu相当, 能明显提高生存质量和延长生存时
间, 不良反应明显小于西药对照组. 薛瑞等[3]将
体外培养的人胃腺癌SGC-7901细胞接种于Balb/
c裸鼠的皮下, 建立人胃癌移植瘤模型, 以藤梨根
醇提物大、中、小剂量组、阴性对照组、康力
欣胶囊对照组进行疗效对比观察, 提示藤梨根
乙酸乙酯提取物具有抑瘤作用, 其机制可能与
提高机体的免疫功能有关. 基于上述的研究基
础, 本实验将观察藤梨根提取物(ethanol extract
from radix of Actinidia chinensis, EERAC)对大肠
癌细胞HT-29荷瘤裸鼠的肿瘤抑制作用和诱导
凋亡的影响, 并探讨其可能的作用机制.
1 材料和方法
1.1 材料 藤梨根提取物根据中国科学院化学研
究所公布的藤梨根抗癌有效活性成分醇提取工
艺(专利公开号: CN1977869A), 由中国药科大
学生命科学院实验中心制备; 胎牛血清为上海
尚宝产品; RPMI 1640培养基为Hyclone公司产
品; 0.25%胰酶为天津吉诺生物公司产品; DAB
显色试剂盒; Bcl-2、Bax、Caspase-3抗体(鼠抗
人多抗, 稀释度1∶80)、生物素IgG为南京凯基
产品; MTT、BIOSHARP、Amresco0793; 5-氟
尿嘧啶(5-Fu)注射液为北京舟鼎国公司产品; 倒
置显微镜(LeicaDMIL, Germany); 24孔/96孔培
养板及细胞培养瓶为美国Corning/costar公司产
品; Elx800多功能酶标仪为美国Bioelisa reader公
司产品; Balb/c-nu/nu裸鼠,♂, 7周龄, 40只, 体质
量18-22 g, 购自上海克莱斯动物公司, 许可证号:
SCXK(沪)2003-0003; 裸鼠在中国药科大学中
心实验室, 无特定病原体SPF级动物房饲养, 温
度21 ℃-25 ℃, 湿度45%-55%. 人大肠癌细胞株
HT-29购自中国科学院上海细胞库.
1.2 方法
1.2.1 藤梨根抗癌有效活性成分的制取: (1)称取藤
梨根1 000 g, 溶于5 000 mL乙醇, 回流10 h, 提取3
次, 合并提取液后蒸发, 干燥后进行硅胶柱色谱
分离并利用二氯甲烷、甲醇和乙酸溶液进行梯
度洗脱, 在400 ℃除去溶剂, 收集粉状物, 真空干
燥24 h; (2)蒸馏水100 mL, 加入步骤(1)所制作的
干燥品100 g, 原液稀释成50 mg/L、100 mg/L、
200 mg/L药物浓度, 所得溶液用0.22 m微孔滤膜
无菌过滤, 分装, 置4 ℃冰箱备用.
1.2.2 藤梨根有效活性成分醇提取物的质量控
制: (1)EERAC主要成分的鉴定: EERAC的主要
活性化学成分为三萜皂苷类, 对所提取的EE-
RAC采用醋酐浓硫酸反应和泡沫实验加以鉴定:
醋酐浓硫酸反应(Liebrmann Burchard反应)呈现
红紫色并接着变成污色绿色. 可考虑样品中含
三萜类、皂苷或甾类. 泡沫实验, 若显示两管中
泡沫高度相等, 证实其主要成份为三萜皂苷.
1.2.3 HPLC(高效液相色谱)指纹图谱鉴定: 药藤
梨根由南京中医药大学中药与生药重点实验室
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■相关报道
朱秀山等用昭黄
散(藤梨根为主药)
治疗不能手术胃
癌患者72例, 疗效
与5-Fu相当, 能明
显提高生存质量
和延长生存时间,
不良反应明显小
于西药对照组, 证
实昭黄散能明显
抑制胃癌患者的
病情进展.
物进行测定, 标本存放于南京中医药大学标本
馆. 在测定中, 运用HPLC-DAD对10批次的藤梨
根样品进行了分析研究. 结果显示, HPLC-DAD
获得的指纹图谱, 显示本实验使用的中药藤梨
根各批次化学成分稳定均一, 具有可重复性.
1.2.4 HT-29荷瘤裸鼠造模: (1)分组: 随机将40只
Balb/c♂裸鼠, 分为5组: 生理盐水组(空白对照
组)、5-Fu组(阳性对照组)、EERAC高剂量组20
mg/kg、EERAC中剂量组10 mg/kg、EERAC低
剂量组5 mg/kg, 每组8只; (2)造模: 在无菌操作
环境下, 将HT-29传代后, 稳定培养24 h, 在指数
生长期, 调整细胞浓度至1×107个/mL. 加入适量
的生理盐水, 以200 L/只的细胞悬液浓度, 注射
器接种于裸鼠右腋皮下, 操作在1 h内完成; (3)给
药: 分组后, 5-Fu组按25 mg/kg体质量, 腹腔注射;
EERAC组, 按0.2 mL/10 g等容量不等浓度(分别
为EERAC 20 mg/kg、10 mg/kg、5 mg/kg[4,5]), 灌
胃给药, 每天1次, 连续8 d. 生理盐水组灌服相同
体积的生理盐水.
1.2.5 EERAC对荷瘤裸鼠体质量的影响: 造模
后、取材前测量实验裸鼠体质量, 记录差值.
1.2.6 EERAC对裸鼠种植瘤的生长抑制作用: 裸
鼠颈椎脱臼处死, 750 mL/L乙醇浸泡3 min, 取出
裸鼠置于无菌纸上, 取出瘤体和脾脏并称质量.
瘤质量(g). 抑瘤率 = (C-T)/C×100%, T为各处理
组平均瘤质量, C为生理盐水组平均瘤质量.
1.2.7 EERAC对荷瘤裸鼠免疫功能的影响: 前期
处理同实验2.4, 摘取裸鼠脾脏并测量, 脾指数 =
脾脏质量(mg)/裸鼠体质量(g).
1.2.8 MTT法测定NK细胞活性度: (1)HT-29细胞
传代并用RPMI 1640培养液调配细胞终浓度为
4×105个/mL; (2)脾细胞悬液的制备: 无菌取脾,
在完成脾脏测量后, 移入的培养皿中, 进行沉
降, 高速离心, 裂解红细胞后, 用RPMI 1640培养
液调整细胞浓度为2×107个/mL; (3)NK细胞(效
应细胞)分离: 步骤(2)所得溶液取1 mL用RPMI
1640稀释至2×106/mL, 分别按5 mg/L的终浓度
加入ConA, 于37 ℃、50 mL/L CO2孵箱中培养
24 h, 利用贴壁效应去除成纤维细胞、单核巨
噬细胞等基质细胞, 通过尼龙毛柱过滤去除B细
胞, 余液加入rhIL-2, 令NK细胞贴壁生长, 收集
NK细胞; (4)NK细胞活性检测: 取靶细胞和效应
细胞各50 L(效靶比50∶1), 置37 ℃、50 mL/L
CO2培养箱中培养4 h, 在酶标仪490 nm处测定各
孔吸光度(A )值, 以各组A值代表NK细胞活力.
1.2.9 免疫组织化学法测定凋亡相关基因Bax、
Bcl-2、Caspase-3的蛋白表达变化: (1)组织处理:
取厚度<0.2 cm的组织块, 10%的中性缓冲甲醛
液固定10-12 h; (2)组织脱水、透明、浸蜡: 组织
经固定后进行无水酒精脱水l h×3次、二甲苯
透明化处理l h×2次, 65 ℃以下进行浸蜡及包埋;
(3)切片: 切片厚度为5 m, 切片在60 ℃温箱中
60 min, 垂直烤片; (4)免疫组织化学染色: 切片常
规脱蜡至水; 加入3%H2O2于室温下10 min灭活
内源性酶; 0.01 mol/L枸橼酸盐缓冲液(pH 6.0)进
行热修复抗原; 5%BSA封闭液; 滴加Caspase-3、
Bcl-2、Bax抗体, 用PBS(pH 7.4)洗2 min×3次; 滴
加IgG, PBS(pH 7.4)洗2 min×3次; 再滴加SABC,
37 ℃ 20 min. PBS(pH 7.4)洗5 min×4次; DAB显
色: 室温显色, 时间为5-30 min; HE染色, 脱水, 透
明, 封片. 显微镜观察, 摄片. 采用Image-Pro Plus
6.0图像分析系统, 计算积分吸光度(IA)值.
统计学处理 SPSS17.0分析, 数据以mean±
SD表示, 计量资料用t检验, 计数资料用2检验分
析, 多组间比较用方差分析, 百分数用U检验.
2 结果
2.1 EERAC对荷瘤裸鼠体质量的影响 实验进行
过程到第4天, 5-Fu组出现1只裸鼠死亡, 症状表
现为极度瘦弱, 其原因可能与5-Fu所导致的不
良反应有关. 与生理盐水组比较, 除EERAC低
剂量组能明显增加荷瘤裸鼠的体质量(P <0.05)
外, EERAC中、高剂量组对荷瘤裸鼠的体质量
均无明显影响, 而5-Fu组裸鼠体质量明显下降
(P <0.05, 表1).
2.2 EERAC对裸鼠种植瘤生长抑制作用 与生理
盐水组比较, EERAC中、高剂量组和5-Fu组能
显著降低荷瘤裸鼠的瘤体质量(P <0.05 vs 中剂
量组, P <0.01 vs 高剂量组和5-Fu组), 与5-Fu组比
较, 而EERAC高剂量组无明显差异(P >0.05); 在
肿瘤抑制率上, EERAC实验组随着剂量的增加,
抑瘤率不断上升, 而EERAC各剂量组均与5-Fu
组有明显差异(高剂量组为P <0.05, 中、低剂量
组为P <0.01, 表1).
2.3 EERAC对荷瘤裸鼠免疫器官的影响 脾脏指
数高剂量组为6.14±0.42、中剂量组为6.67±
0.59、低剂量组为3.98±0.45、5-Fu组为3.98±
0.45、生理盐水组为4.91±0.38. 与生理盐水组
比较, EERAC各剂量组均能非常显著增加荷瘤
裸鼠的脾脏指数(P <0.01), 而5-Fu组则非常显著
降低荷瘤裸鼠的脾脏指数(P <0.01).
2.4 EERAC对NK细胞活性的影响 NK细胞活
陈永杰, 等. 藤梨根提取物对HT-29荷瘤裸鼠的抑制及诱导凋亡作用的影响 1549
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性高剂量组为0.924±0.041、中剂量组为1.067
±0.082、低剂量组为0.958±0.129、5-Fu组为
0.642±0.061、生理盐水组为0.812±0.027. 与
生理盐水组比较, E E R A C各剂量组均能明显
增加荷瘤裸鼠体内NK细胞的活性度(P <0.05或
0.01), 而5-Fu组则显著降低荷瘤裸鼠的NK细胞
的活性(P <0.05).
2.5 HT-29荷瘤裸鼠体内Bcl-2、Bax、Caspase-3
的表达变化 经过HE染色后, 吸光度测量的IA值
显示, EERAC高剂量组为Bcl-2: 0.308±0.024,
Bax: 0.341±0.006, Caspase-3: 0.331±0.008; EE-
RAC中剂量组为Bcl-2: 0.319±0.011, Bax: 0.322
±0.008, Caspase-3: 0.325±0.014; EERAC低剂
量组为Bcl-2: 0.329±0.021, Bax: 0.314±0.037,
Caspase-3: 0.308±0.048; 5-Fu组为Bcl-2: 0.255
±0.097, Bax: 0.353±0.012, Caspase-3: 0.338±
0.031; 生理盐水组为Bcl-2: 0.354±0.018, Bax:
0.309±0.023, Caspase-3: 0.309±0.023; 与生理
盐水组比较, 5-Fu组、EERAC高剂量组的Bax、
Caspase-3的表达水平均有明显升高(P <0.01, 其
中EERAC中剂量组也能显著增强Caspase-3的表
达, P <0.01), 从Bax表达图像可见, 随着EERAC
剂量的增加, 蓝染颜色变深, 蓝染细胞的数量增
多; 而5-Fu组、EERAC高剂量组均能明显降低
Bcl-2的表达(P <0.05). EERAC对Bcl-2、Bax、
Caspase-3蛋白表达的影响呈剂量相关性(图1).
3 讨论
肿瘤的发生是一个多因素、整体病变的过程,
其过程涉及机体多方面的改变[6], 其中免疫监控
的失效或功能状态的低下是其重要的发病因素.
既往研究表明[7], 癌细胞移植造模后, 能引起裸
鼠脾脏指数下降, NK细胞活性度低下, 免疫功能
抑制的紊乱状态. 机体内的NK细胞是早期肿瘤
表 1 EERAC对HT-29裸鼠体质量、平均瘤重和肿瘤抑制率的影响

分组 剂量 [mg/(kg•d)]
n 体质量(g)
平均瘤质量(g) 肿瘤抑制率(%)始 末 始 末
高剂量组 20 8 8 19.53±1.08 22.73±0.52 1.02±0.10b 37.81d
中剂量组 10 8 8 19.97±1.10 23.21±0.46 1.31±0.12a 20.13c
低剂量组 5 8 8 20.04±1.21 25.87±1.16a 1.53±0.25 9.12c
5-Fu组 25 8 7 19.82±1.12 21.68±1.33a 0.86±0.14b 46.84
生理盐水组 8 8 19.73±1.03 24.21±0.29 1.71±0.18
aP<0.05, bP<0.01 vs 生理盐水组; cP<0.05, dP<0.01 vs 5-Fu组.
A B
ED
C
图 1 Balb/c裸鼠瘤组织在不同剂量EERAC作用下Bax的表达(×200). A: 生理盐水组; B: 5-Fu组; C: EERAC高剂量组; D:
EERAC中剂量组; E: EERAC低剂量组.
■应用要点
本研究为中药藤
梨根治疗大肠癌
的临床应用和新
剂型的开发, 提供
客观的实验依据.
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陈永杰, 等. 藤梨根提取物对HT-29荷瘤裸鼠的抑制及诱导凋亡作用的影响 1551
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免疫的重要效应细胞, 具有广谱的抗肿瘤性, 既
能直接杀伤肿瘤细胞, 又可以通过细胞毒性作
用间接抑制癌细胞增殖[8,9]. 本研究结果显示, 荷
瘤裸鼠NK细胞的活性处于明显低下的状态, 脾
指数降低, 表明其免疫功能紊乱, 而EERAC实验
组荷瘤裸鼠的脾脏, NK细胞的活性度明显升高,
提示EERAC能在一定程度纠正荷瘤裸鼠免疫失
衡状态, 提高免疫功能, 从而实现肿瘤生长的调
控. 在实验过程中发现, EERAC对大肠癌细胞荷
瘤裸鼠的瘤体生长具有明显抑制作用, 与剂量
呈正相关作用, 虽然EERAC实验组的抗肿瘤作
用要弱于5-Fu组, 但5-Fu组荷瘤裸鼠脾脏指数和
NK细胞活性度显著下降, 对免疫系统有较强的
不良反应, 而EERAC无免疫抑制作用, 还能一定
程度地增加裸鼠的免疫力, 体现出其药物的安
全性. 在EERAC低剂量时, 有明显增加荷瘤裸鼠
体质量的作用(P <0.05), 该现象的原因初步估计
为低剂量EERAC作用时, 与诱导肿瘤细胞的分
化有关, 有待今后的实验进一步验证.
细胞凋亡是在凋亡刺激信号作用下, 激活
细胞内部的程序变性和死亡机制, 并经过各种
凋亡信号和转导途径协同完成, 而细胞表面死
亡受体通路和线粒体通路是目前公认的两条重
要的调节细胞凋亡的途径[10]. Bcl-2家族蛋白在
细胞凋亡中具有重要作用, 其主要功能为调控
线粒体凋亡途径. Bcl-2属于Bcl-2家族中抑制细
胞凋亡的重要基因, 在大肠癌的发生发展中具
有重要意义[11,12], Bax是Bcl-2家族中最重要的凋
亡促进基因, 同时也对凋亡抑制基因Bcl-2起着
主要调控作用[13,14], 其表达水平的变化, 能反映
肿瘤的发生发展和预后及肿瘤细胞对治疗药物
的敏感性[15]. 在线粒体凋亡途径中, Caspase蛋白
家族处于细胞凋亡信号转导的中心位置, 而Cas-
pase-3是信号转导通路中的核心效应分子, 他能
导致细胞发生一系列凋亡形态和生化改变[16,17].
本研究发现, 经EERAC作用后, 裸鼠肿瘤
组织中Bax蛋白表达水平较空白对照组增高, 而
Bcl-2蛋白的表达降低, Bcl-2/Bax比值显著低于
对照组(P <0.05), 其中以增强Bax的表达为主;
在Caspase-3的表达上也显著高于空白对照组
(P <0.01), 提示EERAC的抗癌机制可能是通过
抑制Bcl-2的表达, 下调Bcl-2/Bax的比值, 增强
Bax、Caspase-3的表达, 从而激活线粒体凋亡途
径来实现的. 从EERAC对HIT-29荷瘤裸鼠机体
免疫功能的提高, 抑制肿瘤增殖和诱导肿瘤细
胞凋亡方面, 说明中药藤梨根的抗肿癌作用具
有多靶点、多中心的效应, 其应用和开发前景
良好.
4 参考文献
1 程海波, 吴勉华. 周仲瑛教授从癌毒辨治恶性肿瘤病
机要素分析. 中华中医药学刊 2010; 28: 313-315
2 朱秀山, 许继平, 黄德辉, 黄国荣, 应栩华. 壁虎藤梨
根治疗胃癌临床及实验研究. 中国民间疗法 1999; 7:
43-44
3 薛瑞, 王小平. 藤梨根提取物对裸鼠移植瘤的抑制作
用研究. 陕西中医 2008; 29: 632-633
4 郑树. 结直肠肿瘤-基础研究与临床实践. 北京: 人民卫
生出版社, 2006: 3-4
5 Chung-Faye GA, Kerr DJ, Young LS, Searle PF.
Gene therapy strategies for colon cancer. Mol Med
Today 2000; 6: 82-87
6 董张丽, 杨丽娟, 赖东梅. 免疫对肿瘤的负向调控. 现
代免疫学 2011; 31: 428-431
7 Jachimowicz RD, Fracasso G, Yazaki PJ, Power BE,
Borchmann P, Engert A, Hansen HP, Reiners KS,
Marie M, von Strandmann EP, Rothe A. Induction
of in vitro and in vivo NK cell cytotoxicity using
high-avidity immunoligands targeting prostate-
specific membrane antigen in prostate carcinoma.
Mol Cancer Ther 2011; 10: 1036-1045
8 Mondal B, Saha S. Inhibition of subcutaneous
growth of Ehrlich ascites carcinoma (EAC) tumor
by post-immunization with EAC-cell gangliosides
and its anti-idiotype antibody in relation to tumor
angiogenesis, apoptosis, cell cycle and infiltration
of CD4+, CD8+ lymphocytes, NK cells, suppressor
cells and APC-cells in tumor. Indian J Exp Biol 2011;
49: 574-584
9 Dowell AC, Oldham KA, Bhatt RI, Lee SP, Searle
PF. Long-term proliferation of functional human
NK cells, with conversion of CD56(dim) NK cells to
a CD56 (bright) phenotype, induced by carcinoma
cells co-expressing 4-1BBL and IL-12. Cancer Immu-
nol Immunother 2012; 61: 615-628
10 Xu YZ, Zheng RL, Zhou Y, Peng F, Lin HJ, Bu Q,
Mao YQ, Yu LT, Yang L, Yang SY, Zhao YL. Small
molecular anticancer agent SKLB703 induces apop-
tosis in human hepatocellular carcinoma cells via the
mitochondrial apoptotic pathway invitro and inhib-
its tumor growth invivo. Cancer Lett 2011; 313: 44-53
11 Zhang H, Li Y, Huang Q, Ren X, Hu H, Sheng H, Lai
M. MiR-148a promotes apoptosis by targeting Bcl-2 in
colorectal cancer. Cell Death Differ 2011; 18: 1702-1710
12 Zhang MS, Hu AH, Qiu H, Xiong HH, Chen Y. The
correlation between IGF-II and Bcl-2 expression
in colorectal adenocarcinoma. Med Oncol 2012; 29:
928-932
13 Anvari K, Seilanian Toussi M, Kalantari M, Naseri S,
Karimi Shahri M, Ahmadnia H, Katebi M, Sedighi
Pashaki A, Dayani M, Broumand M. Expression of
Bcl-2 and Bax in advanced or metastatic prostate
carcinoma. Urol J 2012; 9: 381-388
14 Zhong ZG, Wu DP, Huang JL, Liang H, Pan ZH,
Zhang WY, Lu HM. Progallin A isolated from the
acetic ether part of the leaves of Phyllanthus em-
blica L. induces apoptosis of human hepatocellular
carcinoma BEL-7404 cells by up-regulation of Bax
expression and down-regulation of Bcl-2 expres-
sion. J Ethnopharmacol 2011; 133: 765-772
15 Wang W, Lu J, Zhu F, Wei J, Jia C, Zhang Y, Zhou L,
Xie H, Zheng S. Pro-apoptotic and anti-proliferative
effects of mitofusin-2 via Bax signaling in hepato-
■同行评价
本研究选题新颖,
结论可靠, 具有一
定的学术价值.
www.wjgnet.com
cellular carcinoma cells. Med Oncol 2012; 29: 70-76
16 Sabine VS, Faratian D, Kirkegaard-Clausen T,
Bartlett JM. Validation of activated caspase-3 an-
tibody staining as a marker of apoptosis in breast
cancer. Histopathology 2012; 60: 369-371
17 Li S, Tian D, Fei P, Gao Y, Chen Z, Wang Q, Tong Q.
A cyclooxygase-2 inhibitor NS-398-enhanced apop-
tosis of esophageal carcinoma cell EC9706 by ad-
justing expression of survivin and caspase-3. Cancer
Invest 2011; 29: 102-106
编辑 李军亮 电编 鲁亚静
ISSN 1009-3079 (print) ISSN 2219-2859 (online) CN 14-1260/R 2012年版权归世界华人消化杂志
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1552 ISSN 1009-3079 (print) ISSN 2219-2859 (online) 世界华人消化杂志 2012年6月18日 第20卷 第17期