全 文 ：Modern Practical Medicine, December 2013, Vol.25, No. 12· 1330·
复方藤梨根制剂对 CT26小鼠移植瘤的生长
及瘤体内血管内皮生长因子表达的影响
方红明，郭勇，王辉，蒋一玲，王晓艳，董晶
【摘要】目的 通过建立 Balb/c小鼠 CT26人工种植模型，研究复方藤梨根制剂对肿瘤的抑制作用及对血管
内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法 100只 Balb/c小鼠随机分为 5组，即空白对照组、荷瘤对照组、低
剂量给药组、中剂量给药组及高剂量给药组，各 20只，分别皮下接种造模，造模后第 2天开始连续灌胃 3周。
给药组予低浓度 0.5 g/ml、中浓度 1 g/ml及高浓度 2 g/ml复方藤梨根制剂灌胃，空白对照组及荷瘤对照组每
天以 0.9%氯化钠注射液灌胃。所有小鼠第 22天处死，观察各组的瘤质量、抑瘤率，免疫组化检测各组小鼠
肿瘤 VEGF的表达。结果 中、高剂量给药组的瘤质量、抑瘤率与低剂量组和荷瘤组差异均有统计学意义
（均 ＜ 0.05），中、高剂量给药组的 VEGF的表达与荷瘤对照组差异均有统计学意义（均 ＜ 0.05）。结论
复方藤梨根制剂能抑制肿瘤生长，下调了 CT26瘤体中 VEGF表达，具有抗肿瘤血管生成作用。
【关键词】 复方藤梨根制剂；肿瘤生长；血管内皮生长因子
doi:10.3969/j.issn.1671-0800.2013.12.005
【中图分类号】 R735.2 【文献标志码】 A 【文章编号】 1671-0800(2013)12-1330-03
Compound Tengligen preparation on CT26 tumor growth in mice and in vivo expression of VEGF
【Abstract】Objective To establish Balb/c mice CT26 plantation model, and to investigate the inhibition effect of
compound Tengligen preparation on tumor and its influence on vascular endothelial growth factor (VEGF) ex-
pression. Methods One hundred seven-week-old male and female Balb/cmice were randomly divided into five gro-
ups, namely the control group, tumor-bearing control group, low dose group, medium dose group and high dose group.
Each group was inoculated subcutaneously modeling. Two days after modeling, gavage for three weeks in a row was
given. Concentration of 0.5g/ml, 1g/ml and 2g/ml of compound Tengligen preparations were administered; and blank
control group, tumor-bearing control group were given with saline every day. All mice were sacrificed on the twenty-
second day. The tumor weight and inhibition rate were compared, and VEGF expressions were detected by immuno-
histochemistry. Results Tumor weight and inhibition rate in medium and high dose groups were significantly differ-
ent with those of low-dose group and the tumor-bearing group ( ＜ 0.05）. VEGF expressions showed significant dif-
ferent among medium and high dose groups and tumor-bearing group ( ＜ 0.05）. Conclusions Compound Tengli-
gen preparation can inhibit tumor growth, lowered the CT26 tumor expression of VEGF, and have anti-angiogenic ef-
fect.
【Key words】 Compound Tengligen preparations; Tumor growth; Vascular erdothelial growth factor
基金项目： 浙江省中医药科学研究基金项目（2012ZA112）
作者单位： 311202杭州，浙江萧山医院（方红明、王辉、蒋一玲、
王晓艳）；浙江中医药大学第一临床医学院（方红明、郭勇、董晶）
通信作者： 郭勇，Email：fanghongmng@zjxsh.com
复方藤梨根制剂是治疗消化道恶性肿瘤的经验
效方，由藤梨根、水杨梅根、虎杖根、党参、白术、茯苓、
炒薏仁及甘草等组成，具有清热解毒，活血化瘀，扶
正祛邪等功效。既往的研究发现，复方藤梨根制剂
作用于很多靶点，具有抗肿瘤作用 [1-3]。本研究通过
建CT26小鼠移植瘤模型，观察复方藤梨根制剂对小
鼠原位移植瘤生长的抑制作用及对血管内皮生长因
子（VEGF）表达的影响，进一步揭示其活体抗肿瘤的
作用机制。报道如下。
1 资料与方法
现代实用医学 2013年 12月 第 25卷 第 12期 · 1331·
1.1 瘤株与动物 小鼠结肠腺癌细胞 Colon-26，浙
江省中医院中心实验室提供。健康 7周龄 BALB/c
小鼠 100只，雌雄各半，中国医学科学院上海实验动
物中心提供，体质量（18±2）g，SPF条件下饲养于浙
江中医药大学动物实验中心。
1.2 药物 复方藤梨根制剂，药量换算方法以陈奇
推荐的换算法为依据，先根据成人每天每 50 kg体质
量药量的 10倍推算出等效剂量为中浓度，5倍为低
浓度，20倍为高浓度。取生药材，经计算后，浓煎制
成低浓度 0.5 g/ml、中浓度 1 g/ml及高浓度 2 g/ml的
复方制剂。
1.3 试剂 免疫组化相关试剂 VEGF 鼠单克隆一
抗（SantaCruz 公司 批号：L0312），Super Picture 3rd
Gen IHC Detection Kit二抗（Invitrogen公司 批号：
1107508A）。
1.4 方法
1.4.1 细胞培养及传代 将CT26细胞株复苏后，于
37℃ CO2培养箱中培养并传 3代，将处于对数生长
期的细胞（密度70%～80%）用0.25%胰酶-EDTA（吉
诺）消化，PBS洗涤后制成 1×107/ml单细胞悬液。抽
吸 0.2 ml接种于小鼠右前肢腋部，2周左右，皮下肿
瘤长成约 1 cm×1 cm×1.5 cm大小的瘤块，选取生长
良好，淡红色、鱼肉状的瘤组织，剪成约 1 mm3大小
的瘤块，匀浆、过滤后用 0.9%氯化钠注射液稀释调
整细胞浓度至 1×107/ml，制成单细胞悬液。
1.4.2 动物分组、造模及给药 将 100只小鼠随机
分为 5组，即空白对照组、荷瘤对照组、低剂量给药
组、中剂量给药组及高剂量给药组，各 20只。除空
白组外，各组分别进行接种造模。小鼠均在造模后
第 2天开始连续灌胃 3周。给药组予相应浓度复方
藤梨根制剂灌胃，空白对照组、荷瘤对照组每天以
0.9%氯化钠注射液灌胃。
1.4.3 动物一般情况观察及检测 观察记录动物活
动、体态、毛色、饮食及排便变化。测定抑瘤率，抑瘤
率=(对照组瘤重－治疗组瘤重)/对照组瘤重×100%。
1.4.4 免疫组化检测 VEGF的阳性判定参照胡雅
兵报道的方法[4]。
1.5 统计方法 数据采用SPSS 19.0统计软件分析
处理，计量资料数据用均数±标准差表示，多组比较
采用 检验，多重比较采用 检验；计数资料以率表
示，采用 2检验。 ＜ 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 一般情况 荷瘤小鼠皮下接种第 7天，右腋下
均可触及米粒大小瘤结节，至第10天瘤块迅速增大，
小鼠遂渐出现饮食量下降，活动减少，毛色干枯等情
况。至第 14天肿块较前明显增大，小鼠活动明显下
降，饮食量少，毛无光泽。至第 21天肿块基本包埋
右前肢，小鼠明显消瘦，蜷缩不活动，竖毛、拱背及反
应迟钝。同一时间各组小鼠活动、进食、毛色变化及
其精神状况对比，见荷瘤对照组与低剂量给药组相
当，中剂量给药组优于低剂量给药组，而高剂量给药
组又优于中剂量给药组。
2.2 小鼠瘤重及给药组抑瘤率 荷瘤对照组瘤质量
为（3.95±0.57）g；低剂量给药组瘤质量为（4.25±0.53）g，
抑瘤率为—7.05%；中剂量给药组瘤质量为
（3.04±0.49）g，抑瘤率为 23.03%；高剂量给药组质量
为（2.65±0.62）g，抑瘤率为 32.91%。3组瘤质量差异
有统计学意义（ =18.13，＜ 0.05），中剂量给药组及
高剂量给药组瘤质量较荷瘤对照组差异均有统计学
意义（ ≥5.32，均 ＜ 0.01）。
2.3 VEGF的免疫组化检测结果 荷瘤对照组、低
剂量给药组、中剂量给药组及高剂量给药组 VEGF
阳性表达率分别为 90%（18/20）、80%（16/20）、40%
（8/20）及 30%（6/20），呈梯度递减趋势（封四彩图 1
～ 5）。中剂量给药组及高剂量给药组 VEGF 阳性
表达率与荷瘤对照组差异均有统计学意义
（ 2≥21.67，均 ＜ 0.05）。
3 讨论
肿瘤的发生、生长、浸润及转移是一个多步骤的
复杂过程，其中肿瘤血管生成的促进因子和抑制因
子的调控失衡起着非常重要的作用 [5]。VEGF是目
前所知促使血管内皮细胞生长作用最强，特异性最
高的调控因子之一[6]，通过抑制VEGF的表达可起到
控制肿瘤生长转移的作用，针对 VEGF的靶向治疗
药物以广泛应用于临床，并取得实质性的疗效[7]。近
年来，中药抗肿瘤血管生成的研究己成为热点，大量
的临床及实验研究发现，许多中药提取物及复方制
(下转第 1418页)
Modern Practical Medicine, December 2013, Vol.25, No. 12· 1418·
的标准，是护理质量管理始终处在一个良
性的循环轨道[5]。FOCUS-PDCA程序旨
在更仔细地了解和分析程序中的环节，通
过发现问题，成立组织找出原因，探讨并
选择改进方案，制定并实施改进计划，在
实施过程中不断检查评估，最终达到持续
改进护理质量的目的。本研究结果显示，
改进后烫伤发生率明显小于改进前。
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收稿日期：2013-04-17
（本文编辑：钟美春）
中的重金属成分生物利用度低，不易被
吸收，不产生毒副作用，能更大程度保证
组织血液流量，减少组织缺氧，改善神经
细胞修复，达到治疗功效。本文治疗组
与对照组治疗前后 NIHSS 评分及临床
疗效比较，差异均有统计学意义（均 ＜
0.05），说明安宫牛黄丸对治疗急性脑梗
死患者具有确切疗效；此结果提示，对临
床上大部分不能行溶栓治疗的患者，可
在抗血小板聚集、控制脑梗死危险因素
的基础上，加用安宫牛黄丸，改善预后。
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收稿日期：2013-08-06
（本文编辑：姜晓庆）
(上接第 1344页)
剂具有抗肿瘤转移和抗血管生成的作用[8]。
本实验研究的复方藤梨根制剂是依据中医理论
“扶正祛邪”治则的指导下研制出临床经验方，方中
藤梨根、虎杖根及水杨梅根具有清热解毒作用，虎杖
根及水杨梅根兼具活血化瘀作用，党参、茯苓及白术
具有补气健脾作用，薏苡仁具有健脾及利水渗湿作用。
诸药合用，共奏清热解毒、活血化瘀及补气健脾等功
效。从药理成分分析，藤梨根含有猕猴桃碱、熊果酸
等，虎杖根含有白藜芦醇等成分，水杨梅根含有水杨
梅甲素及生物碱等化合物，均为有效的抗癌成分。
本实验使用Balb/c小鼠 CT26人工种植模型探
讨了复方藤梨根制剂对肿瘤的抑制及其抗肿瘤血管
生成的作用。中、高剂量的复方藤梨根制剂能改善
荷瘤小鼠的生存质量，抑制肿瘤生长。通过下调了
CT26瘤体中 VEGF 表达，达到抗肿瘤血管生成作
用。低剂量组考虑未达到有效地药物浓度，故抗肿
瘤作用不明显，高剂量未能取得更好的作用，故推荐
中剂量（常规剂量）使用。
复方藤梨根制剂可能通过抑制肿瘤亢进的促血
管生成因子，恢复其与抑制因子之间的平衡，抑制肿
瘤血管生成，从而有助于减少肿瘤组织局部血供，通
过缺血、缺氧等饥饿方式限制肿瘤的增殖并阻断其
入血扩散的途径，控制肿瘤的增殖和转移。因此，复
方藤梨根制剂在抗血管生成的靶点上有活体动物实
验依据，值得临床推广应用。
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收稿日期：2013-04-11
（本文编辑：钟美春）
(上接第 1331页)