全 文 ：表 4　洗脱剂用量的影响
水洗脱
洗脱体积编号 多酚含量(%)
30%乙醇洗脱
洗脱体积编号 多酚含量(%)
1 32.4 1 73.0
2 50.7 2 77.6
3 52.9 3 84.0
4 59.4 4 83.9
5 62.3 5 88.3
6 71.8
7 40.3
8 33.5
3　讨论
在对葫芦茶根杀软体动物实验中发现其具有较强的杀软体
动物作用 , 经化学成分分析发现其富含多酚类成分 [ 9] ,因此我们
对葫芦茶根中富含的多酚类成分的提取和富集工艺进行了优化。
确定了最佳提取工艺条件为 30℃, 50%丙酮 , 8倍溶剂提取 3次 ,
4.5h/次 , 此条件下总多酚收率大于 6%。以 D101型大孔树脂对
总多酚进行富集 , 最佳工艺条件为 2BV/h流速 ,收集 6 BV30%
乙醇洗脱液 , 总多酚含量为 77.2%, 收率为 32.3%。 D101树脂
对葫芦茶多酚的吸附容量大 , 吸附性能稳定 , 吸附柱可按比例放
大用于工业富集葫芦茶多酚。
参考文献:
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收稿日期:2009-11-10;　修订日期:2010-02-08
基金项目:广西教育厅科研项目(No.200809MS124;200911MS195)
作者简介:王晓平(1968-),女(汉族),广西玉林人 ,现任玉林师范学院
化学与生物系副教授 ,学士学位 ,主要从事药理学和生理学研究工作.
五指毛桃水提液体外抗菌作用的实验研究
王晓平 1 ,段丽菊2 ,陈晓白 1 ,李丽梅 3 ,陆奇丰3 ,李鉴清 3
(1.玉林师范学院 化学与生物系 ,广西 玉林　537000;　
2.郑州大学 公共卫生学院 ,河南 郑州　450001;　
3.玉林师范学院 化学与生物系 本科生 ,广西 玉林　 537000)
摘要:目的 研究五指毛桃水提液体外抗菌作用 , 为其在临床的应用提供依据。方法 制备五指毛桃水提液 , 采用圆滤纸
片法测定其对大肠杆菌 、枯草芽孢杆菌 、金黄色葡萄球菌 、黑曲霉 、黄曲霉的抗菌效果;采用圆滤纸片 -二倍连续稀释法
测定其最低抑菌浓度。结果 在一定的浓度下 , 五指毛桃水提液对大肠杆菌 、枯草芽胞杆菌 、金黄色葡萄球菌均具有抑制
作用 , 最低抑菌浓度均为 1g/ml, 而对黑曲霉 、黄曲霉没有抑制作用。结论 五指毛桃水提液对细菌具有较强的抑制作用 ,
具有良好的开发前景。
关键词:五指毛桃;　体外抗菌;　最低抑菌浓度
DOI标识:doi:10.3969 /j.issn.1008-0805.2010.07.058
中图分类号:R285.5　　文献标识码:B　　文章编号:1008-0805(2010)07-1692-02
　　五指毛桃 RadixficiHirtae为桑科植物粗叶榕 Ficushirta
Vah1.的干燥根 , 又名 “南芪” “五爪龙”“五指牛奶” “土北芪” [ 1] 。
五指毛桃味辛 、甘 ,性平 , 具有健脾利湿 、益肺止咳 、舒筋通络的功
效 , 在临床上主要用于治疗脾虚浮肿 、食少无力 、肝炎 、风湿痹痛 、
肺痨咳嗽等症 [ 2] 。原植物分布在我国南部及西南部地区 , 因疗
效独特而在华南地区较为广泛地应用。 五指毛桃具有抗炎镇痛
作用 , 在临床上用来治疗慢性盆腔炎 、慢性支气管炎 、肝炎 、膀胱
炎 、肺结核等病 [ 3 , 4] 。但其药理研究报道较少 , 本文初次对其水
提液的抗菌作用进行了研究 ,为其在临床的应用提供实验依据。
1　材料
1.1　实验菌种 金黄色葡萄球菌 Staphylococcusaureus, 枯草芽胞
杆菌 Bacillussubtilis, 大肠杆菌 Escherichiacoli, 黑曲霉 Aspergillus
niger, 黄曲霉Aspergillusflavus均由本系微生物与制药工程实验室
提供。
1.2 　试剂和仪器 五指毛桃购于玉林市中药材市场。牛肉膏蛋
白胨培养基 ,查氏培养基。细菌培养箱 、低温离心机等。
2　方法
2.1　五指毛桃水提液的制备 称取五指毛桃 200g, 加蒸馏水 10
倍 , 浸泡 1h, 加热煮沸后文火煎煮 2h,趁热滤取药液。药渣再加
5倍水 , 煎煮 1h后取滤液。 2次滤液合并后 ,加热浓缩 , 药液浓缩
至 4g/ml。 115℃灭菌 30 min,置 4℃冰箱保存备用 [ 5] 。
2.2　细菌悬液的制备 将菌种分别接种到相应斜面培养基上 , 置
于恒温箱中活化 , 细菌和霉菌的活化条件分别为 28℃下培养
48h、37℃下培养 24h。 经活化后的菌种用生理盐水稀释到
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时珍国医国药 2010年第 21卷第 7期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2010VOL.21NO.7
106CFU/ml。
2.3　体外抗菌实验
2.3.1　抑菌圈的测定 采用圆滤纸片法。取已灭菌的 6 mm圆
滤纸片 , 浸入五指毛桃水提液中浸泡 2h后取出 ,放到无菌操作台
中晾干。将 5种菌悬液各取 0.1 ml分别涂布于相应的培养基
中 , 制成含菌平板。 用灭菌镊子夹取圆滤纸片置于含菌平板表
面 , 每个平板放 3片 ,各滤纸片的距离大致相等 , 纸片距平板边沿
大于 1 cm, 用灭菌蒸馏水设阴性对照 ,每个菌种做 3个平行。将
平板置于恒温箱中培养(细菌 37℃下培养 24h, 霉菌 28℃下培养
48 h)。用游标卡尺测其抑菌直径 , 取 3个平行的平均值 [ 6] 。
2.3.2　最低抑菌浓度的测定 采用圆滤纸片 -二倍连续稀释法。
取五指毛桃水提液原液 5ml, 二倍递减浓度稀释 , 即将药液依次
按 1∶2, 1∶4, 1∶8, 1∶16, 1∶32的比例进行稀释 , 最终药液的
质量浓度依次为 2, 1, 0.5, 0.25, 0.125 g/ml。取已灭菌的圆滤纸
片分别浸入上述提取液中浸泡 2h,置于无菌操作台晾干。其余
操作同 “ 2.3.1”项。以有抑菌圈的最低浓度为五指毛桃的最低
抑菌浓度 [ 7] 。
3　结果
3.1　抑菌圈测定结果 五指毛桃对金黄色葡萄球菌 、大肠杆菌 、
枯草芽孢杆菌 、黑曲霉和黄曲霉这 5株菌种的抑菌圈直径测定结
果见表 1。
表 1　五指毛桃水提液对 5株菌种的抑菌圈直径 mm
实验菌种 抑菌圈直径
金黄色葡萄球菌 16.3
大肠杆菌 15.8
枯草芽孢杆菌 16.1
黑曲霉 0
黄曲霉 0
由表 1可知 , 五指毛桃水提液对金黄色葡萄球菌 、大肠杆菌 、
枯草芽孢杆菌均有明显的抑制作用 , 而对黑曲霉 、黄曲霉无抑制
作用。
3.2　最低抑菌浓度的测定结果 不同浓度五指毛桃水提液对金
黄色葡萄球菌 、大肠杆菌 、枯草芽孢杆菌的最低抑菌浓度测定结
果见表 2。
表 2　五指毛桃水提液对 3株菌种最低抑菌浓度的测定结果
五指毛桃水提
液浓度 C/g· ml-1
金黄色葡
萄球菌
大肠
杆菌
枯草芽
孢杆菌
2 ++ ++ ++
1 + + +
0.5 - - -
0.25 - - -
0.125 - - -
　　“ ++”表示抑菌圈较大 , “ +”表示有抑菌圈 , “ -”表示无抑菌圈
由表 2可知 , 不同浓度五指毛桃水提液对金黄色葡萄球菌 、
大肠杆菌 、枯草芽孢杆菌的抑菌效果相似 , 最低抑菌浓度均为 1g
/ml。
4　讨论
近年来 , 由于抗生素的不合理使用 , 临床耐药菌株不断增加 ,
致使临床感染死亡率不断增高 ,减少耐药菌株的生成和研制新的
抗菌药物已成为 21世纪医学界的重要课题。中药几千年来为中
国人的健康作出了重大贡献 ,在现代预防和控制细菌性感染疾病
方面也发挥了积极作用。由于中药的特殊性 ,细菌较少对中药产
生耐药 ,而且中药具有来源广泛 , 费用低廉等优势。因此 ,研究和
开发抗菌中药对解决耐药菌株的产生和抗生素短缺问题具有重
要意义 。
五指毛桃是华南地区常用的中药材之一 ,在民间和临床运用
广泛。尤其是广东河源五指毛桃生产基地建立以后 ,以五指毛桃
为原料的多种产品相继进入市场。本文对五指毛桃水提液进行
体外抗菌实验研究 ,初步证明五指毛桃对大肠杆菌 、枯草芽孢杆
菌 、金黄色葡萄球菌 3种细菌有较强的抑制作用 , 其抑菌主要机
理为:干扰细胞壁合成 , 损伤胞浆膜 , 影响细胞蛋白合成 , 影响核
酸合成 ,干扰遗传密码复制等 [ 8] 。对五指毛桃化学成分的研究
表明 [ 9] , 五指毛桃含有丰富的多糖 、生物碱 、香豆素等生物活性
物质 , 具有抗菌 、抗病毒 、抑制肿瘤 、抗凝 、免疫调节 、激素样作用
和影响药物代谢等功效 [ 4] 。 五指毛桃作为一种地道民族用药 ,
在两广地区资源丰富 ,具有广阔的发展前景。
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