全 文 ：浓度的对照品溶液 , 再加上原储备液 ,分别进样 20 μL, 以进
样量对数为横坐标 、峰面积对数为纵坐标作线性 , 白果内酯 、
银杏内酯 A、银杏内酯 B、银杏内酯 C回归方程分为 Y=
1.613 7X+4.527 8, Y=1.587X+4.411 8, Y=1.634 1X+
4.362 3, Y=1.576X+4.500 2, 相关系数分别为 0.999 6,
0.999 5, 0.999 9, 0.999 5。结果表明白果内酯在 1.160 μg
～ 23.20 μg之间线性关系良好;银杏内酯 A在 1.50 μg～
30.00 μg之间线性关系良好;银杏内酯 B在 0.77 μg～
15.40μg之间线性关系良好;银杏内酯 C在 0.73 μg～
14.6 μg之间线性关系良好。
2.5　精密度试验
取白果内酯 、银杏内酯 A、银杏内酯 B、银杏内酯 C浓度
分别为 0.76, 0.99, 0.50, 0.51 mg/mL混合对照品溶液 , 进样
10 μL,连续进样 6次 , 计算峰面积对数的 RSD, 结果分别为
0.06%, 0.10%, 0.11%, 0.06%。结果表明:本方法精密度
良好。
2.6　稳定性试验
将样品(批号:040919)按供试品溶液制备方法制备后 ,
在第 0, 2, 6, 10, 14, 18 h进样 20 μL, 用液相色谱仪测定 , 计
算溶液的稳定性 , 结果白果内酯 、银杏内酯 A、银杏内酯 B、
银杏内酯 C的峰面积对数 6次结果 RSD分别为 0.44%,
0.32%, 0.55%, 0.50%。结果表明溶液在本项试验的条件
下至少可以稳定 18h。
2.7　重复性试验
将样品按供试品溶液制备方法配制 6份供试品 ,分别进
行检测。白果内酯 、银杏内酯 A、银杏内酯 B、银杏内酯 C含
量及 4种成分的总含量的 RSD分别为 2.84%, 2.62%,
3.67%, 2.05%, 2.57%。结果表明:该含量测定方法的重复
性较好。
2.8　回收率试验
取已知总萜类内酯含量为 21.37 mg/g的银曲胶囊 10
粒 , 除去囊壳 ,取细粉 0.4 g,精密称定 9份 , 分别加入相当含
量 80%, 100%, 120%的对照品 3份 , 按含量测定项下供试品
制备方法制备 , 按测定方法进行检测 , 计算白果内酯 、银杏内
酯 A、B、C的回收率 , 结果回收率分别为 99.5%、 98.7%、
99.0%、 99.4%。结果表明该方法的准确度高。
2.9　样品测定
取另两批样品(040924、 041010), 按含量测定方法进行
检测 ,结果见表 1。
表 1　 成品中萜类内酯的含量测定结果(n=3)
成品批号 萜类内酯含量 /mg平均每粒含量 /mg RSD/%
040924 16.175 4.367 0.97
041010 15.407 4.160 3.51
3　讨论
3.1　提取溶媒的选择
根据萜类内酯的性质 , 选用 70%、80%、90%、100%甲醇
作为溶剂 , 分别取 1.0 g研细的粉末 , 加入 25 mL溶剂超声
提取 30 min后 , 过滤得到提取液 , 减压回收溶剂 , 残渣加甲
醇溶解 ,移至 10mL量瓶中 ,用甲醇定容至刻度 ,结果所测得
的萜类 内酯含量分别为 14.646 mg/g、 15.194 mg/g、
16.082 mg/g、16.365 mg/g,结果表明:100%甲醇提取率高 ,
故采用 100%甲醇作为提取溶媒。
3.2　超声时间的选择
每份取 0.8g研细的粉末 , 分别加入 20 mL甲醇 , 分别
加超声提取 10, 20, 30, 40 min, 滤得提取液 , 回收溶剂 , 残渣
加甲醇溶解 ,移至 10mL量瓶中 ,用甲醇定容至刻度 ,结果所
测得的萜类内酯含量分别为 14.566 mg/g, 15.225 mg/g,
16.353 mg/g, 16.375 mg/g。结果表明:提取 30 min已经完
全。
3.3　由上述含量测定方法学考察结果可以看出本方法的线
性关系 、精密度 、准确度 、稳定性都符合要求 。与药典银杏叶
和银杏叶提取物中萜类内酯含测的方法比较:该方法操作简
单 ,测定结果准确。
参考文献:
[ 1] 　范武峰.银杏叶提取物的发展前景 [ J] .医药导报 , 2003, 22(增
刊):3-4.
[ 2] 　罗俊芳 ,张全意 ,张树华 ,等.银杏叶制剂的临床应用进展 [ J].
新疆中医药 , 2004, 22(5):67-68.
HPLC测定复方杏香兔耳风胶囊中木犀草素含量
吴立成 , 　周玲娜 , 　朱　克
(浙江省金华市食品药品检验所 ,浙江 金华 321000)
收稿日期:2007-10-27
作者简介:吴立成(1970-),男 ,副主任中药师 ,研究方向:药品质量分析及检验。 Tel:(0579)82301314
关键词:复方杏香兔耳风胶囊;木犀草素;HPLC
中图分类号:R927.2　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2009)02-附 5-01
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第 31卷　第 2期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
February2009
Vol.31　No.2
　　复方杏香兔耳风胶囊收载于国家食品药品监督管理局
标准 YBZ06402006中 , 主要由杏香兔耳风和白术两味药加
工而成 , 具有清热解毒 、祛瘀生新之功 ,用于湿热下注所致慢
性宫颈炎 , 子宫内膜炎等症。杏香兔耳风中主含木犀草素 、
槲皮素等黄酮类成分 , 原标准中仅收载了以芦丁计算的总黄
酮的含量测定 , 而芦丁的来源广泛 , 相对容易得到 ,且作用相
对于杏香兔耳风中其他黄酮类有所区别 ,仅测定总黄酮的含
量对复方杏香兔耳风胶囊的质量控制贡献不大。 本试验建
立了复方杏香兔耳风胶囊中木犀草素的 HPLC测定法 , 为更
好的控制该药质量提供依据。
1　仪器与试药
Agilent1200高效液相色谱仪 , 岛津 UV-2450紫外可见
分光光度计。木犀草素对照品由中国药品生物制品检定所
提供 , 批号为 111520-200201, 含量测定用;复方杏香耳风胶
囊标示为江西银涛药业有限公司生产。水为重蒸水 ,甲醇为
色谱纯(默克公司), 其余为分析纯。
2　方法与结果
2.1　色谱条件
色谱柱:AgilentZorbaxSB-C18 (4.6 mm×250 mm,
5 μm);流动相:甲醇-0.4%磷酸溶液 (50∶50);流速:
1.0 mL/min;检测波长:350 nm;柱温:35 ℃;进样量:5 μL;
外标法。理论板数按木犀草素峰计算不低于 5 000。
2.2　对照品溶液
精密称取木犀草素对照品 5.32 mg,置 25 mL量瓶中 , 加
甲醇溶解并稀释至刻度 , 摇匀 , 即得对照品储备液。再精密
量取对照品储备液 2 mL, 置 10 mL量瓶中 , 加甲醇稀释至刻
度 , 摇匀 ,得对照品溶液(浓度为 42.56μg/mL)。
2.3　供试品溶液
精密称取本品内容物约 0.5 g, 置具塞锥形瓶中 ,精密加
入 2.5 mol/L盐酸甲醇溶液 25 mL, 密塞 , 称定重量 , 置水浴
中加热回流 45 min, 迅速冷却至室温 , 再称定重量 , 用
2.5 mol/L盐酸甲醇溶液补足减失的重量 , 摇匀 , 滤过 , 精密
量取续滤液 2 mL,置 10 mL量瓶中 , 加甲醇稀释至刻度 , 摇
匀 , 微孔滤膜(0.45 μm)滤过 ,作为供试品溶液。
2.4　线性关系考察
分别精密吸取对照品溶液 2, 4, 6, 8, 10, 12 μL注入液相
色谱仪 , 测定峰面积 , 求得回归方程:Y=3 668.77X-
8.966 7, r=0.999 98。实验结果表明 , 木犀草素进样量在
0.085 12 ～ 0.510 72 μg范围内有良好的线性关系。
2.5　稳定性试验
取同一供试品溶液分别在 0, 4, 8, 16, 24, 32 h进样 , 测定
木犀草素含量 RSD为 1.08%,表明样品溶液在 32 h内稳定。
2.6　精密度试验
取供试品溶液 , 重复进样 5次 , 测得木犀草素峰面积的
RSD为 0.79%。
2.7　重复性试验
取同一批号样品 6份 , 按 “ 2.4”项下操作 , 依上述色谱
条件测定 , 测得样品平均含量为 2.14 mg/g, RSD为 1.13%,
表明本方法精密度较好。
2.8　回收率试验
称取已知木犀草素含量为 2.14 mg的样品内容物约
0.25g, 加入适量的木犀草素对照品 , 按 “ 2.4”项下操作 , 依
上述色谱条件测定 ,结果见表 1,加样回收率为 98.31%, RSD
=1.15%(n=6), 说明本方法准确度较好。
表 1　 加样回收率试验结果
取样
量 /g
样品中
含量 /mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收
率 /%
平均回收
率 /%
RSD
/%
0.234 7 0.502 3 0.43 0.921 6 97.52
0.235 8 0.504 6 0.42 0.923 1 99.64
0.251 2 0.537 6 0.51 1.042 1 98.93 98.43 1.33
0.265 9 0.569 0 0.56 1.109 6 96.53
0.258 2 0.552 5 0.61 1.162 2 99.94
0.261 1 0.558 8 0.67 1.215 4 98.01
2.9　样品测定
分别精密称取 3批供试品按 “ 2.4”项下操作 ,按上述色
谱条件测定 ,计算样品中木犀草素的含量 ,结果见表 2。
表 2　 样品测定(n=4)
批号 木犀草素含量 /(mg/g) RSD/%
01 2.14 1.31
02 3.10 0.95
03 2.64 1.73
3　讨论
3.1　方法专属性试验 , 取除杏香兔耳风外的其他辅料按标
准制备方法制成阴性对照样品 , 按 “ 2.4”项下操作 , 按上述
色谱条件测定 ,结果阴性对照样品无干扰 ,见图 1,方法专属
性很好。
图 1　兔耳风颗粒 HPLC色谱图
A.木犀草素对照品　B.兔耳风胶囊　C.阴性对照　 1.木犀草素
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第 31卷　第 2期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
February2009
Vol.31　No.2
收稿日期:2008-02-25
作者简介:于海波(1973-),男 ,硕士 ,主治医师 ,研究方向:心力衰竭的发病机制及治疗。 Tel:(0454)6517572 E-mail:yu118119@ 163.com
＊通讯作者:赵晓莲。
3.2　方法耐受性
　　试验过程中曾进行回流提取时间 、盐酸甲醇溶液浓度及
用量进行优化选择 , 结果以 2.5 mol/L盐酸甲醇溶液 25 mL
加热回流提取 45 min水解提取效果最好;流动相选择参考
中国药典方法 [ 1] , 并对其比例进行优化 ,选出文中的分离度
好 、柱效高 、分析时间快的最佳方法。
参考文献:
[ 1] 　中国药典 [ S] .一部.2005:541.
[医院药房 ]
参附注射液对心力衰竭环核苷酸及 NO的影响的研究
于海波 1 , 　李　晶 2 , 　贺兆发3 , 　赵晓莲 2＊ , 　毕　胜 2 , 　孙志奇 3
(1.佳木斯大学附属第一医院 ,黑龙江 佳木斯 154002;2.佳木斯大学基础医学院 ,黑龙江 佳木斯 154007;
3.大庆油田总医院 ,黑龙江 大庆 163000)
关键词:参附注射液;心力衰竭;cAMP;cGMP;NO
中图分类号:R287　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2009)02-附 7-02
　　慢性心力衰竭(chronicheartfailure, CHF)是许多心血管
疾病的严重或终末阶段 ,其发病机制复杂。近年来研究发现
细胞内环核苷酸 、NO的异常变化与某些心血管疾病发病机
理有关 , 目前 ,中药的心脏保护作用越来越受到重视。本实
验旨在探讨参附注射液对 CHF患者血浆中 cAMP、cGMP、
NO含量的影响及作用机制。
1　资料与方法
1.1　病例选择
心衰患者 60例(男 39例 , 女 21例),年龄 35 ～ 80岁 , 均
符合 Framingham诊断标准 [ 1] , 包括冠心病(30例)、高血压
病(21例)、风心病(9例)。按美国纽约心脏病学会(NY-
HA)心功能分级标准 , 其中 , 心功能Ⅱ级 19例 、心功能Ⅲ级
24例 、心功能Ⅳ级 17例。随机分为常规治疗组与参附组各
30例。正常组 30例(男 17例 ,女 13例), 年龄 40 ～ 60岁 , 选
自门诊体检健康者。 参附组在常规治疗基础上加用参附注
射液 50mL入液静滴 ,每日 1次 , 连用 14 d。
1.2　治疗方法
正常组不给药;常规治疗组给予强心 、利尿 、扩血管基础
治疗。
1.3　检测指标
所有受试者均取空腹静脉血 , 血浆 cAMP、cGMP的检测
用放射免疫法;NO的检测用硝酸还原酶法 , 操作严格按试剂
盒说明书进行。
1.4　疗效标准
根据 NYHA分级标准 ,心功能无改善为无效;改善 1级
为有效;改善 2级以上为显效。
1.5　统计学处理
所有资料采用 SPSS软件进行分析处理 , 计量资料以均
数 ±标准差( x±s)表示 , 采用单因素方差分析 、t检验与 χ2
检验。
2　结果
2.1　两治疗组临床疗效比较
参附组疗效优于常规治疗组(P<0.05),见表 1。
表 1　 两治疗组临床疗效比较(n=30)
组别 显效 /例 有效 /例 无效 /例 显效率 /% 总有效率 /%
常规组 8 15 7 26.67 76.67
参附组 12 16 2 40.00＊ 93.33＊
　　注:两组比较, ＊P<0.05。
2.2　各组血浆 cAMP、cGMP、NO含量的比较
心衰组血浆 cAMP、cGMP、NO含量明显高于正常组
(P<0.05),治疗后血浆 cAMP、cGMP、NO含量均显著下降
(P<0.05),见表 2。
表 2　各组血浆 cAMP、cGMP、NO含量的比较( x±s, n=30)
组别 cAMP/(nmol/L) cGMP/(nmol/L) NO/(umol/L)
正常组 17.82±3.38 2.31±0.27 54.57±3.59
心衰组 61.29±5.76■ 3.73±0.29■ 134.39±8.13■
常规组 25.01±2.41 3.01±0.33 86.63±7.95
参附组 19.20±2.30# 2.88±0.44# 75.37±3.42#
　　注:与正常组比较 , ■P<0.05;与心衰组比较;#P<0.05。
3　讨论
cAMP、cGMP在心脏发挥着相反的功能作用 , cAMP与
7附
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