全 文 ：治疗效果。总之 , 我们体会到 ,食指络脉观察简单 、方便 、且较少
受其他因素(如哭闹等)的影响 , 与其他体检配合应用 , 可以互相
取长补短 , 对婴幼儿肺炎心衰的诊断具有一定参考价值。 通过动
态观察 , 可为临床医生提供病情变化 、治疗效果等较可靠的客观
指标 , 具有一定的临床意义。
参考文献:
[ 1] 　邓铁涛.中医诊断学 [ M].上海:上海科学技术出版社 , 1990:27.
[ 2 ] 　胡亚美 ,江载芳.诸福棠实用儿科学.第 7版 [ M] .北京.人民卫生
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2001, 20(11):663.
药理药化
收稿日期:2007-10-10;　修订日期:2007-11-12
基金项目:湖北民族学院生物资源利用与保护(湖北省)重点实验室资助
项目(No.2006-A03)
作者简介:黄丽亚(1955-),女(汉族),湖北恩施人 ,现任湖北民族学院生
物资源利用与保护(湖北省)重点实验室副教授 ,主要从事生物化学教学
和恩施州道地药材抗衰老作用研究工作.
头顶一颗珠对岗田酸致阿尔彩默病大鼠脑组织
抗氧化酶 、过氧化脂质和 tau蛋白影响的实验研究
黄丽亚 ,罗洪斌 ,张　宏 ,余　洁
(湖北民族学院·生物资源利用与保护湖北省重点实验室 ,湖北 恩施　445000)
摘要:目的 观察头顶一颗珠(TTM)对阿尔彩默病(Alzheimerdisease, AD)模型大鼠海马 、皮质抗氧化酶 、过氧化脂质和
tau蛋白表达的影响。方法 用岗田酸(Okadaicacid, OA)大鼠侧脑室注射造模 , TTM注射液腹腔注射 , 并用维生素 C
(VtiC)腹腔注射作阳性对照。测定正常组 、模型组 、阳性对照组 、药物实验组海马 、皮质超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘
肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)和 tau蛋白的含量。结果 模型组与正常组比较 , SOD, GSH-Px降低(P<0.05
∕ P<0.001), MDA, tau蛋白增高(P<0.001)。药物实验组与阳性对照组比较 , SOD, GSH-Px, MDA和 tau蛋白在 TTM
高 , 中组差异明显(P<0.05),低组差异明显或不明显(P<0.05∕ P﹥ 0.05)。结论 TTM的抗衰老作用 , 与能增强脑组
织 SOD, GSH-Px活性 、减少 MDA蓄积 、降低 tau蛋白水平有关。
关键词:头顶一颗珠;　阿尔彩默病;　岗田酸;　超氧化物歧化酶;　谷胱甘肽过氧化物酶;　丙二醛;　tau蛋白
中图分类号:R285.5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2008)08-1926-01
　　头顶一颗珠系百合科延龄草属头顶一颗珠 (Trillium
tschonoskiiMaxim, TTM)的干燥根状茎及根 , 为传统名贵中药 ,味
甘 , 性温 ,有小毒 [ 1] 。主要成分含甾体皂苷延龄草苷和延龄草二
葡萄糖苷 , 分别为薯蓣皂苷元的葡萄糖苷和二葡萄糖苷 [ 2] 。具
祛风舒肝 、活血止血 、镇痛消肿 、延年益寿等功效。民间用于治疗
头痛眩晕 、跌打损伤 、疔疮肿毒 、神经衰弱等疾病。近年来对其研
究逐渐被重视 , 但限于花粉形态 、组织培养 、化学成分 、遗传多样
性等方面。本研究用大鼠侧脑室注射 OA[ 3] 、腹腔注射 TTM、腹
腔注射 VitC作阳性对照的方法 [ 4] ,观察 OA致 AD大鼠脑组织抗
氧化酶 、过氧化脂质和 tau蛋白表达变化 , 旨在探讨 TTM抗衰老
的作用机理 , 为进一步开发利用提供相关科学依据。
1　器材与方法
1.1　材料 TTM(恩施自治州太山庙药材基地提供 , 用水提醇沉
法制成含生药 30%的注射液), OA(sigma, USA, 批号 2007∕
07), tau蛋白试剂盒(InnogeneticsNV, Belgium, 批号 2007/07),
SOD试剂盒 , 批号 2007423 - 4, GSH-Px试剂盒 , 批号:2007413
-2, MDA试剂盒 , 批号 2007413-2(南京建成生物工程研究所生
产), VtiC(昆明金殿制药有限公司 ,批号 070608), WDF-U型脑
立体定位仪(西安西北光电仪器厂), TL-16型高速低温冷冻离
心机(上海实验仪器厂), 全自动生化分析仪(酶免之星 ELISA-
STAR, 瑞士哈美顿感公司)。
1.2　方法 雄性 Wistar大鼠 60只 , 鼠龄 40 ～ 50周 , 体重 300 ～
350g(华中科技大学同济医学院动物中心提供)。随机分为正常
组(侧脑室注射生理盐水)、模型组(侧脑室注射 OA)、阳性对照
组(侧脑室注射 OA、腹腔注射 VtiC)、药物实验组(侧脑室注射
OA、腹腔注射 TTM)。各组大鼠注射 20%戊巴比妥钠(40 mg/
kg, i.P.)麻醉后 , 固定脑于立体定位仪上 ,颅顶正中矢状切开 , 行
立体定位(前囟后 3.8 mm, 中线旁开 2.5 mm, 颅骨表面下 3
mm)。模型组:5μl注射器取 OA1.5μl(0.392mmol/L), 针进侧
脑室后于 10 min内缓慢注射 , 留针 5 min。正常组:侧脑室注射
等体积生理盐水。药物实验组:侧脑室注射 OA后 , 腹腔 Bid注
射 TTM(分别为 750, 500, 250 mg/kg)15 d。阳性对照组:侧脑室
注射 OA后 ,腹腔 Bid注射 VtiC(3 mg/kg)15 d。术后各组注射青
霉素(8万 U, i.m.)3d抗感染 ,正常喂养。
1.3　标本测定 待 TTM、VtiC注射结束后 , 在清醒状态下断颈
处死大鼠 , 迅速取脑组织分离出海马和皮质 , 制成匀浆并置 -
80℃冰箱。用 SOD, GSH-Px, MDA试剂盒测定 SOD, GSH-Px,
MDA含量。用 lnnogeneticsNV的 Inntest抗人 tau试剂盒 、双抗
体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法 ,测定 tau蛋白浓度 ,全自动酶标
仪 ELISA-STAR读取吸光度 A值 , 求 r=a﹢ bx回归方程 ,依方
程求 tau蛋白值。
1.4　统计处理 检测数据用 x±s表示 , 以方差分析法作统计学
处理。
2 　结果与分析
从表 1、表 2可见:模型组与正常组比较:SOD, GSH-Px均降
低(P<0.05∕ P<0.001), MDA, tau蛋白均升高(P<0.001), 说
明 OA造模是成功的。药物高中低组分别与阳性对照组比较:
SOD, GSH-PX, MDA和 tau蛋白表达 , TTM高 、中组差异明显(P
<0.05), 低组差异明显或不明显(P<0.05或 P﹥ 0.05), 提示
TTM增强 SOD和 GSH-PX活性 、减少 MDA生成 、降低 tau蛋白
水平 , 与 VtiC相比 , 在高 、中剂量时效果更强 , 低剂量时效果
·1926·
时珍国医国药 2008年第 19卷第 8期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2008VOL.19NO.8　
相当。
表 1　皮质 SOD, GSH-PX, MDA和 tau蛋白变化( x±s)
组别 剂量C/mg· kg-1
SOD
C/U· mg-1
GSH-PX
C/U· g-1
MDA
C/nmol· mg-1
tau
C/pg· ml-1
正常 - 234.73±36.85 42.51±13.76 1.41±0.27 43.28±5.72
模型 - 114.98±22.90★ 13.11±1.78△ 5.38±2.76△ 174.97±12.89△
阳性对照 3 177.87±13.23 20.33±2.53 1.95±0.45 63.28±5.73
药物高量 750 225.37±34.64▼ 42.24±8.38▼ 1.49±0.37▼ 45.62±4.01▼
药物中量 500 217.04±32.30▼ 37.92±3.73▼ 1.54±0.29▼ 49.28±5.73▼
药物低量 250 208.10±35.08▼ 22.36±1.62▽ 2.10±1.08▽ 58.35±6.01▽
　　模型组与正常组比较 , ★P<0.05, △P<0.001;药物高中低组分别与阳性对照
组比较 , ▼ P<0.05, ▽ P﹥ 0.05;n=10
3　讨论
现代医学认为 , 氧自由基对人体衰老影响最大。 SOD, GSH
-PX是机体重要的抗氧化酶 , SOD, GSH-PX和 MDA含量变
化 , 为检测衰老最可靠的指标 [ 5] 。据 Andreasen等研究 , 脑脊液
(CSF)Tau蛋白在老年痴呆症状出现前就开始增高 [ 6] 。 tau蛋白
增高是 AD病理改变的基础 , 为 AD重要的生物标记 [ 7] 。 测定
CSFTau蛋白水平 ,对 AD临床诊断很有帮助 [ 8] 。
表 2　海马 SOD, GSH-PX, MDA和 tau蛋白变化( x±s)
组别 剂量C/mg· kg-1
SOD
C/U· mg-1
GSH-PX
C/U· g-1
MDA
C/nmol· mg-1
tau
C/pg· ml-1
正常 - 219.49±34.64 38.90±8.36 1.28±0.70 36.20±5.21
模型 - 159.94±14.67★ 12.25±1.47△ 4.81±1.54△ 148.61±10.77△
阳性对照 3 174.24±15.49 25.62±4.01 1.38±0.13 53.08±4.70
药物高量 750 212.97±29.98▼ 37.67±6.88▼ 1.05±0.06▼ 43.17±3.36▼
药物中量 500 209.58±27.05▼ 35.30±5.41▼ 1.13±0.17▼ 45.50±3.87▼
药物低量 250 180.24±45.46▽ 26.03±1.98▽ 1.42±0.57▽ 49.12±6.05▽
　　模型组与正常组比较 , ★P<0.05, △P<0.001;药物高中低组分别与阳性对照
组比较 , ▼ P<0.05, ▽ P﹥ 0.05;n=10
本实验在无商品化 AD转基因动物模型的情况下 , 参照国内
外研究 AD的有关报道 , 用大鼠侧脑室注射 OA的方法建立 AD
动物模型。在此基础上 ,用传统名贵中药 TTM制成注射液作模
型大鼠腹腔注射 ,并用强氧化剂 VtiC作阳性对照 , 观察 TTM对
OA致 AD大鼠海马和皮质 SOD, GSH-PX, MDA, Tau蛋白含量
的变化 。
结果显示:TTM对 OA诱导的 AD大鼠脑组织 , 有明显增强
SOD, GSH-PX活性 、减少 MDA生成 、降低 Tau蛋白表达的作
用。和 VitC相比 , TTM在高 、中剂量时效果更强(P<0.05), 低
剂量时效果相当(P<0.05或 P﹥ 0.05)。提示TTM的抗衰老作
用机理 ,有比 VitC抗氧化 、降 tau蛋白作用更强的效果有关。
参考文献:
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收稿日期:2007-12-14;　修订日期:2007-12-30
基金项目:四川省教育厅重点科研资助项目(No.2005A071)
作者简介:唐　灿(1967-),男(汉族),四川广安人 ,现任泸州医学院药学
院副教授 ,硕士学位 ,主要从事中药制备工艺与质量标准研究工作.
不同采收期对江西栀子熊果酸含量的影响
唐　灿 , 李云鹏 , 张彦燕 , 罗早文 , 蒲清荣 , 赵　剑
(泸州医学院·药学院 ,四川 泸州　646000)
摘要:目的 确定江西栀子最佳采收期 ,保证江西栀子的质量。方法 采用高效液相色谱法 , 以熊果酸为化学对照品 , 固
定相为 UltimateTM C18键合硅胶柱(4.6 mm×250 mm, 5 μm), 流动相为甲醇∶水∶冰醋酸∶三乙胺(90∶10∶0.03∶
0.06), 流速 0.6 ml· min-1 ,温度 25℃, 波长 210nm测定江西栀子熊果酸含量。结果 熊果酸在 0.1 ～ 3.0μg范围内峰面
积 A与其质量 M呈现良好的线性关系 ,其回归方程为:A=-12 954.88+452 850.96 M, r=0.999 6, n=7;3批江西黄栀
子中熊果酸的含量分别为(0.591 0±0.003 944)mg· g-1药材 , RSD=0.667 8%, n=3;(0.576 0±0.005 033)mg· g-1药
材 , RSD=0.873 7%, n=4;(0.544 4±0.010 96)mg· g-1药材 , RSD=2.039%, n=3;3批江西红栀子中熊果酸的含量分
别为(0.361 6±0.000 360)mg· g-1药材 , RSD=0.100%, n=3;(0.355±0.006 250)mg· g-1药材 , RSD=1.763%, n=5;
(0.381 6±0.002 835)mg· g-1药材 , RSD=0.743 1%, n=3;精密度实验 RSD=1.754%, 仪器精密度良好;稳定性实验
RSD=2.493%,在 3.5 h测定熊果酸的含量是稳定的;江西黄栀子重复性实验 RSD=0.941 1%, 江西红栀子重复性实验
RSD=0.779 2%, 平均回收率 101.9%。结论 江西黄栀子中熊果酸含量显著高于江西红栀子 ,选择合理的采收期对于江
西栀子质量非常重要 , 可为其他产地栀子确定最佳采收期提供借鉴 , 具有非常重要的推广价值。
关键词:江西栀子;　采收期;　熊果酸;　高效液相色谱法
中图分类号:R282.71;R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2008)08-1927-02
　　栀子为茜草科植物栀子 GardeniajasminoidesEllis的干燥果
实。主产于江西 、四川 、重庆 、湖北 、浙江 、贵州 、湖南 、福建等省。
栀子具有泻火除烦 、清热 、凉血解毒之功效 ,用于热病心烦 、黄疸
尿赤 、血淋涩痛 、血热吐衄 、目赤肿痛 、火毒疮痈等症。熊果酸为
栀子的有效成分之一 ,具有显著而迅速降低谷丙转氨酶 , 消退黄
疸 , 增进食欲和恢复肝功能的作用 , 这在茵栀黄注射液 ,茵陈蒿汤
等方剂中得到广泛的应用 , 表明栀子治疗黄疸型肝炎 、病毒性肝
炎主要是通过其有效成分熊果酸实现的。栀子熊果酸还具有显
著的抗炎 、抗动脉粥样硬化 、解热降温 、抗菌 、抗肿瘤 、抗惊厥等作
·1927·
LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008VOL.19NO.8 时珍国医国药 2008年第 19卷第 8期