全 文 ：U S HZ IE E D M H N I CE T ED M A A R IN NA IE DE E S M A A R R I C CZ H加 7 O V L.1 O 8 N. 9时珍国医国药 27 00年第 1 8卷第 9期
乌相根皮水提物抗菌活性的初步研究
陈国华 , , 邵 伟 , , 何晓雯2 , 邹冲 ,
( 1
. 天然产物研究与利用湖北省重点实验室 · 化学与生命科学学院 · 三峡大学 ,湖北 宜昌 4 30 2 ;
2
. 湖北省宜昌市中心医院 科30 3)
摘要 : 目的 探讨乌拍根皮水提物的抗菌活性以及不同温度条件下的提取物抗菌活性差异。 方法 采集乌拍根皮 ,在 3 种
不同温度 ( 60 , so , 10 ℃ ) 下用水回流提取 ,提取物浓缩后进行抗菌测试 ,受试菌 : 枯草杆菌 、 大肠杆菌、金黄色荀萄球菌 、
绿脓杆菌和志贫氏杆菌。 结果 水提物对大肠杆菌和志贫氏杆菌具有抑制作用 , 对枯草杆菌、 金黄色荀萄球菌和绿脓杆
菌没有活性 ;不 同温度下的提取物对大肠杆菌和志贺氏杆菌的影响较大 ,提取温度为 10 ℃ 时 ,提取物对这两种细菌的抑
制作用最强 ,抑菌圈直径分别为 ( 9 . 67 土 l . 32) m m 和 ( 1 . 67 士 1 . 0 )~ 。 结论 乌拍根皮在湖南和广西 民间治疗由大肠
杆菌引起的腹泻和志贺氏杆菌引起的痢疾确有很好的疗效 。
关键词 : 乌栖根皮 ; 水提物 ; 抗菌活性
中图分类号 : 2R 85 . 5 文献标识码 : A 文章编号 : 10 8习 8 0 5 ( 2X() 7 ) 09 一 13 9习 1
S tU dy
o n th e A n it ha
c et ir al A e it vi yt o f W a et r E x t ar c st fr o m R阅 t B a kr o f l乳甲亡`拢 s eb 诉爪m
e H E N e u o
一
h u a
l , s H A o w e i l
,
H E x i a o
一
w e n Z
,
z o u K u n l
( 1
.
uH be i eK 少玩bo ar ot yr of Na ut ar l P or d uct R es ea hcr a dn D郡 e lOP me nt ; oC ll塔 e of hC em is勺 & Ldes c ic ~
,
hC ian 几 er 肠咭“ nU沁 sr i yt , h c人a gn , 4 30 2 , hC ian ; 2 . ce nt ar l oH印 iat l of Yic h a gn C i妙 , 丫阮人a gn ,
4 30 3
, 以ian )
A b st ar ct : o bj ec it ve oT
e v al u a t e rh e an t ib
a e t e ir al ac t i
v iyt Of w at e r e x tar c st 加m or t bar k Of aSP i u m seb 诉 rU m ag a in s t 5 ba e t e ir al
s哪 e i e s an d th e e fe e st Of e x actr t t
e m哪 ar t u er o n th e an t i ha e et ir al ac t iv i yt . M e ht o d s Ro t bakr Of aSP i
u o se b诉爪m w as e ol le e t e d
an d
e x
actr
t e d b y w a t e r a r d ife er
n t t e m p e ar t u er s
.
hT
e e x t r a c st w e er e o n e e n t ar t e d in or t呵 e v a OP ar t o o . A n t i b a e t e ir al a e t i v i t i e s o f
th e e o n e e n atr t
e d e x atr
e st w e er t
e s t e d a ga i
n s t 5 b a e r e ir al s ep
e ie s
.
Res ul st hT
e w a t e r e x atr
e t s i
n h i b i t e d th e wt
o b a e et ir a
, 及`触成入ia
e o li a n d hs
己g ae s o ne i
,
b u t d i d n o t in h ib i t e d th e 脚们 h Of ht e o ht e r ther e b a e t e ir a , B ac il lo s ubt 以肠 , tS 叩 hyl oc oc o a u er us an d几 e “ d乞noz 码 ae n堵己no s a . M o er o v e r , ht e an t i bac t e ir al ac t iv ity w as i n u e n e e d b y e x atr e t t e m pe ar t u er , an d at et m pe ar t眠 Of
10 ℃ , ht e e x actr st d i
s
lP
a y e d th e la 飞 e s t in h ib it i o n z o n e ( 9 . 6 7 士 1 . 32 ) nu (鳍ia s t .E e o li ) an d ( 11
.
67
土 1 . 0 ) m m (昭苗 s t hs .
s o n
ne i )
.
C o n e lius
o n I
n
H
u n a n
Pm v in e e an d G
u
an 幼 A u t o n om ou s R e ig o n , or t bakr for m .5 se b诉ur o w as u s ed e fe e t i v e ly as e ht -
n ie m e d ie in e ag
a i n s t d l a r h e a e a u s e d b y .E co li an d ag 山 n s t Sh i g e l lo s i s e au s e d by s h ig a e .
K e y w o r ds : Ro t bakr
o f s
.
s e b诉ur m ; W a t e r ex tar e t s ; A n it bac t e ir al a e t iv ity
乌柏 S aP iu m s eb 诉。 m 别名柏子树 ,属大戟科落叶乔木 ,为亚
热带树种 。 对乌柏叶和茎皮的药用价值及抗菌活性已经有人研
究过 [ ’ .z] ,乌柏根皮具有泻热毒 ,通二便等功能 [ ’ 〕 ,而对乌柏根皮
的抗菌研究相对较少 。 为了弥补这方面的不足 ,对乌柏根皮水提
物的抗菌活性进行初步研究 。
1 材料与方法
1
.
1 药材 乌柏根皮采自湖北省宜昌市狭亭区 ,时间为 2 (x兀 年
7 月 , 8 月和 12 月 。 乌柏根皮洗净后 , 在通风橱内晾干 ,备用 。
1
.
2 提取方法 称取 200 9 干燥的乌柏根皮 ,将其粉碎 , 加水
1 20 耐 ,分别在 60 ℃ , 80 ℃和 10 ℃时回流提取 l h ,过滤 ,收集
滤液 。 向滤渣中加 s o ml 水再回流提取 30 m in , 过滤 ,合并两次
滤液 。 将滤液依次用 0 . 45 闪和 0 . 2 闪过滤后真空浓缩至浸膏 。
保存在 4℃冰箱内待用 。
1
.
3 菌种及培养 病原菌 : 金黄色葡萄球菌 、 绿脓杆菌 、 大肠杆
菌由湖北省宜昌市中心医院从临床分离所得 , 志贺氏杆菌由湖北
省宜昌市疾病预防控制中心提供 ,枯草杆菌由本校化生学院微生
物学实验室提供 。 普通肉汤培养基购 自广东环凯微生物科技有
限公司 。
实验菌种经传代纯培养后 ,取 1 接种环菌种接种于普通肉汤
培养基中 , 37 ℃恒温箱培养 12 h , 使受试菌处在对数生长期即对
药物最敏感期 。
1
.
4 抑菌实脸的方法 抑菌测试采用 肠her 等 t’] 的双层琼脂纸
片方法 ,略有改变。 下层琼脂培养基凝固后 ,再倒人上层琼脂培
养基 ( 内含有实验菌株 10 e ll『 inl ) 。 不同温度水提物的浓缩浸
膏用水稀释至 20 m岁ml ,将灭过菌的小滤纸片 (直径 6 m m )分别
浸透不同的药液 ,用浸泡灭菌水的滤纸片作对照 。 用不锈钢镊子
将滤纸片放置于培养皿中 ,每皿 (培养皿直径 or c m ) 7 片。 每组
实验重复 3 次。 抗菌强弱以抑菌圈直径大小 (除去滤纸片直径 )
表示 。
一 5 数据处理 采用 SPS S 12 . 0 fo r W in d o w s ( o n e 一 Wa y A N O -
V A )软件对多次抗菌测试结果进行均值分析 ,实验数据以 无士 :
表示 。
2 结果
将培养皿置于 37 ℃培养 24 h ,观察抑菌效果 ,记录各个抑菌
圈直径 ( m m ) , 然后用 SPS S 12 . 0 for W ind o ws 软件分析 。 结果见
表 1 。
表 1 提取物对受试菌的抑菌效果
收稿日期 : 2的7孤伪 ; 修订日期 二2 00 7扔 一 16
签金项目 : 湖北省三峡大学人才建设基金资助项 目 ( No .肠 2 沁`印 1 13 ) ;
国家科技部 “ 97 3 ” 资助项 目 ( No . Zo lC B4 0 7 07 )
作密简介 : 陈国华 ( 19 7 0一 ) , 男 (汉族 ) ,湖 南人永州 ,现任三峡大学化生学
院创教授 ,博士学位 , 主要从事病原徽生物的防治研究工作 .
提取 测 试 菌种
温度 介℃ 枯草杆菌 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌
0 X() 土 0 X() 4
.
11 士 0
.
7 8 0
.
X() 士 0
.田
0
.
0 土 0
.
0 6
.
0 士 0
.
87 0 0 土 0
.田
0
.印 土 0 . X() 9 . 67 士 1 . 32 0 . X() 士 0 . X()
绿脓杆菌
0
. 《刃 土 0 . (幻
0
. 《洲) 土 0 . 月刀
0
. 以) 士 0 . 《犯
志贺氏杆菌
5
.
1 1 土 0
.
78
7
.
3 3 土 1
.
(洲)
! 1
.
67 士 1
. 砚洲)
印5010
2
.
1 乌柏根皮水提物对受试菌的抑制作用 由表 1 可知 , 根皮
·
2 13 9
·
时珍国医国药 2X() 7 年第 18 卷第 9 期 L IS H IZ H EN M E D I CI N E A N D M A I ,E RI A M E D IC A RE S E A R C H ZX() 7 V O L . 1 8 N0 . 9
水提物对大肠杆菌和志贺氏杆菌具有抑制作用 ,而对金黄色葡萄
球菌 、 枯草杆菌和绿脓杆菌没有抑制活性 。 这就证明了在湖南和
广西民间能够用乌柏根皮来治疗腹泻和痢疾的道理 ` ,
2
.
2 不同沮度的水提取物对受试菌的抑制作用 由表 l 还可
以得知 ,对于不同温度的水提物 ,抑菌圈的直径变化较大。 随着
提取温度从 60 ℃ 升至 10 ℃ ,根皮水提物的抑菌活性增强 , 在
10 ℃提取时 ,水提物对大肠杆菌和志贺氏杆菌的抑制作用最强 ,
抑菌圈直径分别为 : ( 9 . 6 7 土 1 . 32 ) nu 和 ( 11 . 6 7 土 1 . X() )mnz 。 这说明民间使用乌柏根皮治疗腹泻和痢疾时 ,用水煮的方法比较
合适 。
3 讨论
随着耐药菌株的不断增加 ,寻找新型的抗菌药更加显得重
要 ,所以许多科技工作者投身于这方面的研究 51[ 。 乌柏根皮作
为民间药材 ,发掘其药用潜力具有一定的应用意义 。 本文所涉及
的工作只是乌柏根皮药用成分研究的开端 ,抗菌活性物质的进一
步分离纯化及其结构解析将有助于人们更好地利用这一植物
资源 。
参考文献 :
【1 1 张世琏 , 刘建超 , 杨光忠 , 等 . 从植物中寻找农药活性物质 一 乌柏
化学成分的研究 ( n ) 【J〕. 华中师范大学学报 ( 自然科学版 ) ,
19 5
,
2 9 ( 4 )
: 4 7 7
.
【2 ] 霍光华 , 高荫愉 . 陈明辉 . 乌柏叶抑菌活性功能成分的研究【J] .
食品与发醉工业 , 20 5 , 31 ( 3) : 52 .
【3 」 罗献瑞 . 实用中草药彩色图集(第三册 )【M ] . 广州 :广东科技出版
社 , 2X( 抖 : 12 .8
【4 ] 肠映 r R I , R , amn M
,
H一 g s s S L . U l t r . 记 ins it v e 曰助曰 y s ofr e n -
do g e n o us an it而 c orb ial 州yeP 西 des 【J 〕. oJ u栩司 of Ilnm un o l哈司
M e ht 记 s , 19 1 , 13 7 : 16 7 .
【5 〕 朱 明 , 熊元君 , 马秀敏 , 等 . 毛金丝桃提取物的体外抗菌实验
【J] . 时珍国医国药 , 2仪拓 , 17 ( 9 ) : 169 3 .
免疫性肝损伤小鼠
外周血淋巴细胞亚群变化及大蒜多糖 C 的干预作用
郑 敏 , , 梅贤臣 , , 赵 骥 , , 欧阳昌汉 , , 张明霞2
( 1
. 咸宁学院 ,湖北 咸宁 4 371 0 ; 2 . 湖北省阳新县人民医院 4 352 0 )
摘要 : 目的 观察免痊性肝损伤小鼠外周血淋巴细胞亚群变化并研究大蒜多格 c 的干预作用 。 方法 来用尾静脉注射卡
介苗加脂多精 ( BCG + L p S )建立免疫性肝损伤模型 , 应用流式细胞术浏童小鼠外周血淋 巴细胞亚群的百分比和 CD . 今 /
CD :
` 比值。 结果 模型组 T 淋巴 细胞 、 C D : ` T 细胞百分比值较正常对照组明显升高 ( 尸 < 0 . 01 ) , B 淋巴 细胞百分比值 、
C 4D
`
/ CD :
+ 比值明显下降 (尸 < 0 . 01 ) , CD ; ` T 细胞百分比也有减少 (尸 < 0 . 05 ) , N KI . 1 ` T 细胞百分比无显著变化 。 大
蒜多糖 C ( s o m『 kg 19 , q d x 1 2 ) 治疗能使 B CG + L PS 免疫性肝损伤小鼠外周血 T , B , C乌 ` T 和 CD 。 令 T 淋 巴细胞百分 比
显著下降 , 而 C几 ` / C D。 ` 比值显著上升 , 恢复到正常水平 , 对 N KI . 1 ` T 细胞百分含量则无明显影响 。 结论 大蒜多枪 C
能全面抑制免疫性肝损伤 小鼠的免疫功能 ,并促使机体建立新的免疫平衡 ,从而对免疚性肝损伤产生保护作用 。
关键词 : 免疫 ; 肝损伤 ; 淋巴细胞亚群 ; 大蒜多糖 C ; 流式细胞术
中图分类号 : 2R 85 . 5 文献标识码 : A 文章编号 : 10 8刁 80 5 ( 2X() 7 ) o 一 14 0刁2
C h a n g es of L加m hP oc y t e S ub s e st in ht e eP ir Ph e alr B I以心 of 随 c e 初ht Im m un o lo ig al L iv e r坷 u口 a n d 玩 t e vr e n it o n o f G a ir ic P O】ys a e hc a ir d e C
z HE Ne M i n l
,
M Ex x ian
一 e h e n
l ,
z H A o Ji l
,
o u y ^ N e e h an g
一
han l
,
z H ^ N e M i n g
一 x i a Z
( 1
. 万必 n n ign oC lleg e
, 万她 n n i叮 , uH b e i 4 3 7 1X() , hC ian ; 2 . aY l l召义 i n HbsP iat l , aY n召义 i n , 劲叻 e i 4 3 50() 2 , hC i -
n a
)
A b s tar c t : o bj ec “ v e T。 。场 e vr e ht e 。 han 罗 5 o f l ym p hoc y t e s u ha e st in 山e eP 石p h e alr b lod of m ie e 衍ht i m m u n ol o ig e al liv e r in
-
j
u叮 an d i n t e vr e n t io n o f Gar li e OP ly s ac e h面 d e C . M e ht o d s hT e an i m al i m m u n o l o ig e al il v e r dam哪 m od e l w as er p odr u e ed by in -
j
e e t i
o n v
i
a ht e 面 1 v e i n Of BCG ( B ac i l i C a】m e t t e Gu e i n ) an d 11卯即 ly s ac e h iar d e ( I J PS ) in t o m ie e . hT e 伴 ir p h e alr 一 bl 侧洲』ly m p h ,
e y t e s u bse 肠 ’ 伴 cr e n tag e s an d th e C D。 十 / CD: 辛 ar 一10 w as m e as u er d by ht e l ow e y t o m e ytr . R es ul st C o m四 de 衍 ht n o mr 目 e o n回
脚 u p , th e 伴cr e n t a g e s Of th e T l ym p h o e y t e an d t h e CD : ` T ly m p hco yt e in th e 伴ir p h e alr 一 blo 峨x l i n inmr u n o ligo e al l iv e r dam哪
m ie e s iig
n
iif e an Uy i
n e er as e d ( p
< 0
.
0 1 )
,
h o w e v e r
, th e p e cr e n t a罗5 Of ht e B I帅 p hoc y t e , C氏 今 T I帅hP oc yt e an d th e 时10 o f
CD ;
十
/ C D :
十
d ec er as
e d (尸 < 0 . 仍 o r 尸 < 0 . 0 1 ) . Galr ie pol y s ac e hiar d e C a t d o s e o f sX() m扩 kg ( 19 , q d x 12 ) dce er as de ht e 详-r
e e n t a g e s Of T
,
B
,
C4D
`
T an d CD
。 `
T l y m p hoc y t
e
i
n ht e 伴 ir hP e司 一 bl od i n m ie e ter a ed[ w iht B CG + L巧 , h o w e v e r , ht e CD 。 今 /
CD .
今
ar t i o in e er as de t
o t h e n o mr al l
e v e l
.
hT
e 谬 cr e n t a g e s o f ht e N K I . l 十 T Iy m p hco yt e s h o w e d n o o b v io u s d i fe er n e e 玩 tw e e n
e o n
otr l
,
B C G + LPS l i
v e r
inj
u 尽 m de e l an d Gar li e OP l y s a e e h iar d e C gY’O u P s . C o n cl ius on G alr ie OP ly s a e e h iar d e C e an in h ib it 一h e
im m u n o lo ig
e a e
it
v
i ty
,
an d
e s
abt l
is h a n e w im m u n o lo ig
e
bal an
e e , ht e er by Pdor
u e e P rD t
e e t iv e e fe
e st o n inu
u n ol o ig
e al li v e r inj
u yr
.
K ey w o r ds : Im m
u n i ty ; u v e : inj
u 叮 : yL m v hco yt e s u bs e t : Galr i e 卯 ly s ac e h颐 d e C ; Fl o w e yot m e卿
收稿日期 : 2以巧供一 13 ; 修订日期 : 2X() 7刁 5 一 16
荃金项目 : 湖北省教育厅重点资助项 目 ( N o . Zo 3 A仪” ) ;
湖北省 自然基金资助项 目 ( N o . 2以沁 AB 3A 3 5 ) ;
湖北省优秀青年基金资助项 目 ( N o . QZ以拓28 侧巧 )
作者简介 : 郑 敏 ( l% 8 一 ) .女 ( 汉族 ) , 湖北 阳新人 ,现任成宁学院副教授 ,
博士学位 , 主要从事心脑血管药理 、 中药药理研究工作 .
病毒性肝炎的损害与机体的免疫应答有密切的关系〔’ 〕。 卡
介苗联合脂多糖 ( B C C + LSP )诱导的免疫性肝损伤是研究病毒
性肝炎发病机制及药物防治的有效实验模型 .z[ 3〕 ,此模型中小鼠
外周血淋巴细胞亚群的变化特征尚无定论。 大蒜药食同源 , 近来
我们从大蒜球根中提取分离出新的安全低毒有效成分大蒜多糖
C
,并证实大蒜多糖 C 在体外有抗乙型肝炎病毒作用 ,对四氛化
碳所致化学性及 B C C + LP S 诱导的免疫性肝损伤小鼠肝功能均
2 14 0
·