全 文 ：457※营养卫生 食品科学 2007, Vol. 28, No. 08
藤茶多糖抗肿瘤及免疫调节作用的研究
罗祖友1,2，陈根洪1，陈 业1，吴谋成3
(1.湖北民族学院生物科学与技术学院，湖北 恩施 445000；2.湖北民族学院，湖北省生物资源保护与利用重点实验室，
湖北 恩施 445000；3.华中农业大学食品科技学院，湖北 武汉 430070)
摘 要：研究藤茶多糖的体内抑瘤作用及免疫调节活性。通过制备S180荷瘤小鼠动物模型，随机分组，分别腹膜
注射生理盐水、环磷酰胺和藤茶多糖，连续9d，然后测定小鼠瘤重、脏器指数、免疫能力、血清LDH活性等。
结果表明，25～100mg/kg·d的藤茶多糖(AGP)抑瘤率为5.81%～32.56%；与模型对照组比较，50、100mg/kg·d
的AGP能显著提高荷瘤小鼠迟发性超敏反应、腹腔巨噬细胞吞噬率与吞噬指数、小鼠血清溶血素含量与脾细胞抗
体形成等指标，并显著抑制S180小鼠血清LDH活性和提高红细胞CAT活性(p＜0.05，p＜0.01)。说明，藤茶多
糖具有体内抑制S180小鼠肿瘤生长的作用，其机理可能是通过增强荷瘤小鼠免疫力和抗氧化能力。
关键词：藤茶多糖；抗肿瘤；免疫调节
Study on Antitumor and Immunoregulation Effect of Polysaccharide from
Ampelopsis Grossedentata
LUO Zu-you1,2，CHEN Gen-hong1，CHEN Ye1，WU Mou-cheng3
(1. School of Biological Science and Technology, Hubei Institute for Nationalities, Enshi 445000, China；2.Key Laboratory of
Biological Resources Protection and Utilization of Hubei Province, Hubei Institute for Nationalities, Enshi 445000, China；
3. College of Food Science and Technology, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China)
Abstract：This paper studied the effect of polysaccharide from Amp lopsis Grossedentata (AGP)on S180 tumor growth
inhibition and immunoregulation i v vo. S180cells were implanted into the axilla of normally growing mice by subcutaneous injection
except the normal control mice. The mice were randomly divided into six groups and injected with physiological saline,
cyclophosphamide and AGP into their intra-peritoneal respectively for 9 days , then the mice were killed and the indexes were
detected , including the weight of tumor and immune organ, immune capability and the activity of serum lactic dehydrogenase
(LDH), etc. Results showed that AGP could inhibit tumor growth in vivo and he inhibitio rate was from 5.81% to 32.56% at
25～100 mg/kg·d of AGP. Compared with tumor-bearing control, the AGP at 50 and 100 mg/kg·d could remarkab y enhance
delayed-type hypersensitivity(DTH), macrophage phagocytic rate and phagocytic index, serum hemohysin content and splenic
antibody formation, also, AGP could inhibit the activity of serum LDH, and increase the activity of catalase in erythrocyte
（CAT）of S180-bearing mice(p＜0.05, p＜0.01). The conceivable mechanism of inhibiting tumor growth of AGP in v vois
by increasing the immunity and antioxidative capability of tumor-bearing mice.
Key words：p ly accharide from Ampelopsis Grossedentata(AGP)；antitumor；im unoregulation
中图分类号：S571.1 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2007)08-0457-05
收稿日期：2007-05-20
基金项目：湖北省自然科学基金项目(2006ABA036)；湖北省“十五”重点科技攻关项目(2001AA204A03)
作者简介：罗祖友(1963-)，女，副教授，博士，研究方向为天然产物与功能食品化学。
恶性肿瘤是以细胞异常增殖及转移为特点的一大类
疾病。研究表明，免疫功能受损，导致机体易患肿瘤,
而当宿主免疫功能恢复和提高时，就能有效地排斥肿
瘤，控制肿瘤的生长和转移[1]。
很多文献报道，植物多糖的抗肿瘤作用与增强机体
免疫功能的活性相关[2-5]；而机体免疫功能与抗氧化能力
存在内在联系，增进机体免疫是抗氧化剂的抗肿瘤机制
之一[6]。本研究在探讨了藤茶多糖体内外抗氧化作用的
基础上[7]，以荷S180小鼠为动物模型进一步探讨藤茶多
糖在体内的抗肿瘤与增强免疫作用，旨在为更有效地开
发利用药食两用的藤茶资源提供依据。
1 材料与方法
1.1材料
2007, Vol. 28, No. 08 食品科学 ※营养卫生458
藤茶多糖AGP 按文献[8]方法制备。
实验动物 昆明种小鼠，雌雄各半，SPF级，体
重20±2g。湖北省医学科学院试验动物中心[SCXK
（鄂）2003-0005]。
肿瘤细胞株 S180细胞株(S180种鼠) 华中科技大学同
济医学院药理研究室。
绵羊红细胞(SRBC) 湖北省医学科学院试验动物中
心；鸡红细胞(CRBC) 鸡翼静脉采血制备；豚鼠血清
湖北省医学科学院试验动物中心。
MDA测定试剂盒 南京建成生物工程研究所；环
磷酰胺(Cy注射剂) 江苏恒瑞医药有限公司；肝素钠 上
海伯奥生物科技有限公司；Wright粉 上海化学试剂公
司；2,4-二硝基氟苯(DNFB) 德国E. Merck公司；其余
均为国产分析纯试剂。
LGR16-W冷冻离心机 北京医用离心机厂；
SCR20BC低速离心机(Hitachi) 日本Hitachi公司；UV-
265FW紫外可见分光光度计 日本Shimadzu公司。
1.2方法
1.2.1S80肿瘤小鼠模型的制备
无菌获取S180种鼠的腹水，以生理盐水配成肿瘤细
胞浓度为1×106个/ml的细胞悬液，接种到小鼠右前腋
下，0.2ml/只。
1.2.2抗肿瘤试验分组与给药途径
接种后24h将小鼠随机分为正常对照组、（肿瘤）
模型对照组、阳性对照组(20mg/kg·d的Cy)、AGP组
(25、 0、100mg/kg·d)共6组，每组10只。除正常
对照组外，其余各组动物均接种S180肿瘤细胞。接种次
日，按试验分组及剂量对小鼠进行腹膜注射给药(ip)，正
常对照组及模型对照组ip等体积生理盐水，连续9d。第
10d结束给药，对小鼠称重、眼眶取血后处死，解剖
摘取小鼠瘤块及免疫器官，进行相关指标的分析测定。
1.2.3抑瘤率及免疫器官指数分析
模型对照组瘤重—给药组瘤重
抑瘤率(%)=—————————————————×100
模型对照组瘤重
胸腺指数、脾指数等分别以器官重/体重(mg/g)表
示。
1.2.4血清乳酸脱氢酶(LDH)活力的测定
参考E. Mihich[9]和李小定[10]的方法测定。定义每分
钟产生1μmol NADH所需的酶量为1个酶活单位(U)，计
算血清LDH酶活的公式：LDH(U/ml)=4.984×ΔA/min。
1.2.5其它指标的分析
红细胞过氧化氢酶(CAT)活力的测定[11-12]，巨噬细
胞吞噬试验[10]，迟发型超敏反应(DTH)[12-13]，脾细胞抗
体形成试验[14]，血清溶血素含量测定[12,15]。
1.2.6统计分析
数据以X±S表示，采用SAS 8.01软件进行显著
性检验。
2 结果与分析
2.1藤茶多糖体内抑瘤作用
组 别 剂量(mg/kg·d)体重增长率(%)瘤重(g)抑瘤率(%)
正常对照组 — 31.75±9.24 — —
模型对照组 — 36.42±7.70.86±0.26—
阳性对照组(Cy)20 31.83±11.05.37±0.15b 6.98
AGP 25 33.11± 0.380.81±0.225.81
AGP 50 28.12±8.770.71±0.13a 17.44
AGP 100 38.96± .820.58±0.23b 2.56
表1 藤茶多糖对体内S180肉瘤生长的影响 (X±S,n=10)
Table 1 Effects of polysaccharides from Ampelopsis
Grossedentata on S180 tumor growth in v iv o (X± S, n=10)
注：与模型对照组比较：a p＜0.05, b p＜0.01。
藤茶多糖体内抑瘤结果如表1所示。在本实验剂量
范围内，藤茶多糖AGP表现了一定的抑瘤效果，对体
内S180的抑制率在5.81%(32.56%，呈现一定的剂量－效
应关系，但低剂量组抑瘤效果未达到显著水平。AGP
抑瘤效果均低于阳性对照组(Cy)。说明藤茶多糖具有一
定的抑瘤作用。
各实验组小鼠体重增重率与正常对照组相比，没有
显著变化。
2.2藤茶多糖对荷瘤小鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)活力的
影响
组 别 剂量 (mg/kg·d) LDH 酶活力(U/ml)
正常对照组 — 0.4096± .0713
模型对照组 — 0.7934±0.1140B
阳性对照组(Cy) 20 0.7740±0.1134B a
AGP 25 0.5706±0.1430B b
AGP 50 0.5838±0.2285B b
AGP 100 0.5482±0. 411B b
表2 藤茶多糖对S180小鼠血清乳酸脱氢酶活力的影响(X± S, n=10)
Table 2 Effects of polysaccharides from Ampelopsis
Grossedentata on the activity of serum lactic dehydrogenase(LDH)
in S180-bearing mice(X± S, n =10)
注：与模型对照组比较：ap＜0.05，bp＜0.01；与正常对照组比较：
Bp＜0.01。
由表2可知，各荷瘤组小鼠的血清中乳酸脱氢酶活
力(LDH)皆极显著高于正常对照组。LDH是糖酵解途径
中的关键酶，肿瘤细胞代谢的独特性使肿瘤细胞利用葡
萄糖的能力较正常组织细胞高出若干倍，多数转变为乳
酸盐，引起血清LDH活性升高[16]。
与模型对照组比，Cy及AGP各组LDH活性有显
著或极显著降低，但LDH活性下降幅度与AGP浓度之
间没有表现剂量－效应关系。这可能与环磷酰胺及多糖
459※营养卫生 食品科学 2007, Vol. 28, No. 08
对血清LDH活性表现出两方面的影响有关：一方面对
肿瘤组织细胞生长的抑制作用而降低LDH活性，另一
方面对机体免疫功能的影响而导致LDH活性的升高或降
低，因为LDH被认为是巨噬细胞的标志酶之一，它是
由单核巨噬细胞分泌到血液中的胞外酶，血液中LDH
的高低与巨噬细胞的功能有关[17-18]。其确切的机理有待
进一步研究。
2.3藤茶多糖对荷瘤小鼠红细胞过氧化氢酶(CAT)活力
的影响
正常对照组，多数达到显著水平(Ap＜0.05)，表明荷瘤
小鼠在病理状态下脾脏指数出现代偿性增大；与模型对
照组相比，AGP组脾脏指数表现为随剂量增加而下降的
趋势，高剂量组向正常对照组靠近，与正常对照组间
差异不显著；所有荷瘤组胸腺指数均低于正常对照组，
而高剂量多糖组高于荷瘤对照组，但除Cy组外，各多
糖组胸腺指数与正常对照及模型对照间没有显著性差
异。Cy组的脾脏指数与胸腺指数都极显著降低，抑制
肿瘤的同时显示了Cy的免疫抑制剂效果[19]。
脾脏、胸腺均是动物体内重要的免疫器官，通过
淋巴细胞和巨噬细胞参与机体免疫反应，而机体免疫器
官的重量是反应机体非特异性免疫功能的重要而直观的
指标，免疫促进剂可使免疫器官重量恢复致正常水平
[12]。提示，藤茶多糖一定程度上表现了免疫促进剂的
作用，但合适的剂量尚需探讨。
荷瘤小鼠各组的肝脏指数与正常对照组之间差异不
显著。
2.5藤茶多糖对荷瘤小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响
组 别 剂量 (mg/kg·d) CAT 酶活力(×10－4U/ml)
正常对照组 — 7.53±0.59
模型对照组 — 5.46±0.63B
阳性对照组(Cy) 20 6.13±0.73B
AGP 25 5.82±0.40B
AGP 50 6.66±0.49A b
AGP 100 7.02±0.57b
表3 藤茶多糖对S180小鼠红细胞过氧化氢酶活力的影响
(X± S, n=10)
Table 3 Effects of polysaccharides from Ampelopsis
Grossedentata on the activity of catalase in erythrocyte (CAT) of
S180-bearing mice (X± S, n =10)
注：与模型对照组比较：b p＜0.01；与正常对照组比较：Ap＜0.05,
Bp＜0.01。
CAT是机体重要的抗氧化酶之一，在体内可催化
H2O2降解生成H2O，从而保护机体免受氧化损伤、抑
制肿瘤。细胞发生癌变时，抗氧化酶的活性通常会降
低。由表3可见，与正常对照组比较，各荷瘤组小鼠
红细胞CAT活性均表现为下降。与模型对照组比较，
AGP组CAT活性均有所提高，并随剂量呈一定的递增
趋势，AGP中、高剂量组极显著高于模型对照组； Cy
组CAT活性与肿瘤对照组差异不显著。结果提示，藤
茶多糖能够提高荷瘤组小鼠体内红细胞CAT活性，但
需要达到一定剂量才表现显著水平；环磷酰胺Cy不能
提高小鼠红细胞中CAT活性。
2.4藤茶多糖对荷瘤小鼠内脏指数的影响
组别
剂量 胸腺指数 脾指数 肝指数
(mg/kg·d)(mg/g)(mg/g)(mg/g)
正常对照组 — 3.92±0.436.63±1.1948.15±4.32
模型对照组 — 2.99±0.528.64±1.31A 50.20±4.19
阳性对照组(Cy)20 1.84±0.39B b5.44±0.84A b 9.53±4.92
AGP 25 2.77±0.249.35±1.31A 51.58±3.95
AGP 50 2.98±0.498.10±1.70A 51.32±5.02
AGP 1003.09±0.297.86±2.349.63±4.96
表4 藤茶多糖对S180小鼠内脏指数的影响 (X± S, n=10)
Table 4 Effects of polysaccharides from Ampelopsis
Grossedentata on bo wel index of S180-bea ring m ice
(X± S, n=10)
注：与模型对照组比较：bp＜0.01；与正常对照组比较：Ap＜0.05，
Bp＜0.01。
由表4可见，荷瘤小鼠脾脏指数除Cy组外均高于
组 别 剂量 (mg/kg·d) 吞噬率(%) 吞噬指数
正常对照组 — 44.69±4.742.47±0.33
模型对照组 — 31.81±4.48B 1.74±0.24B
阳性对照组(Cy) 20 29.27±4.31B 1.57±0.52B
AGP 25 34.61±3.25B 1.98±0.45A
AGP 50 40.42±6.15b 2.32±0.36b
AGP 100 45.93±5.19b 2.42±0.28b
表5 藤茶多糖对S180小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响(X± S, n=10)
Table 5 Effects of polysaccharides from Ampelopsis
Gros sedentata on macrophage phagocytos is in S180-be arin g mi ce
(X± S, n=10)
注：与模型对照组比较：ap＜0.05, bp＜0.01；与正常对照组比较：
Ap＜0.05, Bp＜0.01。
AGP对S180小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响如由表5所
示。荷瘤各组小鼠巨噬细胞吞噬率与吞噬指数与正常对
照组相比，整体表现为下降的趋势，但AGP高剂量组
可恢复两项指数至正常水平附近；与模型对照组比，
AGP各剂量组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率与吞噬指数均表
现为提高，其中AGP中、高剂量组极显著高于模型对
照组；Cy组两项指标低于荷瘤对照组，但差异不显著。
2.6藤茶多糖对荷瘤小鼠迟发型超敏反应(DTH)的影响
迟发型超敏反应(DTH)的大小与机体免疫能力一致。
表6显示，所有荷瘤组小鼠DTH均不同程度地低于正常
对照组。与模型对照组相比，AGP有提高荷瘤小鼠DTH
的作用，其中，高剂量组DTH值极显著高于荷瘤对照
组，中剂量组达显著水平。提示，S180肿瘤导致小鼠
迟发型超敏反应下降，藤茶多糖可以不同程度增强荷瘤
小鼠迟发型超敏反应，有增强荷瘤小鼠免疫功能的效
果，但适合的剂量还有待进一步摸索。Cy组与肿瘤对
2007, Vol. 28, No. 08 食品科学 ※营养卫生460
照组间的DTH没有明显差异。
2.7藤茶多糖对荷瘤小鼠脾细胞抗体形成的影响
要由IgG和IgM组成，可以通过溶血过程中释放的血红
蛋白来测定，其中以IgM溶血效率大大高于IgG[12]。由
表8可见，各荷瘤组的IgG和IgM含量均低于正常对照
组，Cy 组IgM含量极显著低于正常对照组。与模型对
照组相比，AGP各组IgM含量有提高，但只有高剂量
AGP达到差异显著水平；Cy 组IgM含量极显著低于荷
瘤对照组。提示，藤茶多糖可以提高荷瘤小鼠机体体
液免疫功能。
3 讨 论
3.1机体免疫功能包括非特异性免疫与特异性免疫两大
方面。胸腺、脾组织是动物体内主要的免疫器官，胸
腺，脾脏指数的高低能够较为客观地反映机体非特异性
免疫能力的一个方面。巨噬细胞是体内具有吞噬功能的
各种细胞的总称，属于非特异性免疫的另一个方面，其
中，小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率与吞噬指数的高低常用于
反映其非特异性免疫能力[11]。迟发型超敏反应(DTH)与
机体细胞免疫功能一致，是衡量特异性免疫能力的指
标。血清溶血素水平和脾细胞体形成能力反映机体的体
液免疫功能[21]。
本研究通过荷瘤小鼠巨噬细胞的吞噬功能、迟发性
超敏反应、血清溶血素含量、脾细胞体形成能力以及
小鼠免疫器官指数，一定程度上综合反映了机体的细胞
免疫、体液免疫和非特异性免疫能力，体现整个机体
免疫系统的功能水平。结果表明，藤茶多糖具有增强
荷瘤小鼠免疫能力的作用。关于藤茶多糖对小鼠体内对
相关的一些细胞因子如IL、TNF和IFN等的影响，需
要进一步研究。
3.2对荷瘤小鼠体内相关生化指标分析表明，藤茶多
糖具有提高荷瘤小鼠体内红细胞CAT酶活性、抑制LDH
活性的能力；前期研究表明，AGP具有一定的抗氧化
作用[7]。结果提示，藤茶多糖的抑瘤作用可能与其抗氧
化活性有关。
3.3许多研究表明，具有抗肿瘤作用的活性多糖，尤
其是植物源的中药多糖都具有免疫促进剂的功效，通过
增强机体免疫而实现抗肿瘤作用。国际上普遍认为最理
想的抗癌药物是那些通过刺激机体自身免疫系统而发挥正
常防癌功能的药物[9-22]。目前应用于临床的抗肿瘤化疗药
物多数对机体免疫能力起抑制和破坏作用，在杀灭机体
内癌细胞的同时也损伤机体正常组织，副作用大。藤茶
多糖来源于药食两用植物，具有一定的免疫增强、抗氧
化和抑瘤作用，存在着作为免疫促进剂开发的潜力。
参考文献：
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组别 剂量 (mg/kg·d) DTH (mg)
正常对照组 — 12.24± .75
模型对照组 — 6.95±1.84B
阳性对照组(Cy) 20 5.61±1.74B
AGP 25 6.88±1.90B
AGP 50 8.55±1.61B a
AGP 100 11.34±2.43b
表6 藤茶多糖对S180小鼠迟发型超敏反应的影响(X± S, n=10)
Table 6 Effects of polysaccharides from Ampelopsis
Grossedentata on DTH in S180-bearing mice (X± S, n=10)
注：与模型对照组比较：ap＜0.05, bp＜0.01；与正常对照组比较：
Ap＜0.05, Bp＜0.01。
组 别 剂量 (mg/kg·d) A413
正常对照组 — 0.824±0.024
模型对照组 — 0.609± .019B
阳性对照组(Cy) 20 0.714±0.033B
AGP 25 0.701± .035B
AGP 50 0.731±0.028B b
AGP 100 0.809± .041b
表7 藤茶多糖对S180小鼠脾细胞抗体形成的影响(X± S, n=10)
Table 7 Effects of polysaccharides from Ampel psis Grossedentata n plenic
antibody formation in S180-bearing m ce(X±S, n=10)
注：与模型对照组比较：bp＜0.01；与正常对照组比较：Bp＜0.01。
脾细胞抗体的形成，反应脾脏中B 细胞分泌抗体的
能力, 是反应动物整体体液免疫功能的指标之一[20]。由
表7可见，各荷瘤组小鼠脾细胞抗体形成能力与正常对
照组相比呈表现为下降；与模型对照组相比，AGP可
以促进荷瘤小鼠脾细胞抗体的形成，中、高剂量组均
极显著高于模型对照组。随AGP剂量的提高，脾细胞
抗体形成能力向正常对照组靠近，高剂量组与正常对照
组间差异不显著。提示，藤茶多糖可以通过促进荷瘤
小鼠脾细胞抗体的形成而表现对免疫功能的促进作用。
2.8藤茶多糖对荷瘤小鼠血清溶血素含量的影响
组 别 剂量(mg/kg·d) HCIgG HCIgM
正常对照组 — 229.6±33.7525.2±79.2
模型对照组 — 198.4±21.0414.3±6 .0
阳性对照组(Cy) 20 188.7±18.7215.5±57.6B b
AGP 25 192.0±12.6474.7±72.6
AGP 50 178.5±23.4449.5±62.4
AGP 100 189.1±20.4515.4±71.4a
表8 藤茶多糖对S180小鼠血清溶血素含量的影响(X± S, n=10)
Table 8 Effects of polysaccharides from Ampelopsis
Gros sedent ata on serum hemo lysin conte nt in S180-be arin g mi ce
(X± S, n=10)
注：与正常对照组比较：Bp＜0.01；与模型对照组比较：ap＜0.01，
bp＜0.01。
血清溶血素引起的相关免疫属于体液免疫，反映特
异性体液免疫功能[21]。免疫动物体内血清溶血素含量主
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叶黄素酯在体内消化吸收过程中水解的研究
张 艳1，惠伯棣2,*，张凌霄2
(1.首都师范大学生命科学学院，北京 100037；2.北京联合大学应用文理学院，北京 100083)
摘 要：叶黄素已经证实具有对视网膜黄斑衰退症的防治作用，被认为是一种在食品或药品中有前景的功能因子。
叶黄素的制备原料为万寿菊的花，并以叶黄素酯的形式存在。在本研究中，首先从万寿菊干花颗粒中制备叶黄素
酯，然后与食用油配制成灌胃液，给SD雄性大鼠一次灌胃，2h后采血，萃取其中的类胡萝卜素，HPLC分析萃
取物。分析结果显示：在血清中只能检测到叶黄素单体。这个结果证实：叶黄素酯在消化和吸收过程中被水解成
单体，客观上证明了在功能性食品和药品中直接应用叶黄素酯的可能性。
关键词：叶黄素酯；水解
Hydrolysis of Lutein Ester during Its Digestion and Absorption in vivo
ZHANG Yan1，HUI Bo-di2,*，ZHANG Ling-xiao2
(1.College of Life Science, Capital Normal University, Beijing 100037, China；
2.College of Applied Arts and Science, Beijing Union University, Beijing 100083, China)
Abstract ：Lutein was proved to have macular degeneration (MD) protection and therapy activities and therefore considered
as a functional factor applied in food and pharmaceutical products with a bright future. Lutein was prepared from the flower of
marigold. In the flower, lutein exists in ester form. In this study, lutein esters were prepared from marigold flower and then mixed
with dietary oil. SD rat was fed with the mixture by gastric administration. After 2 h, blood was collected. Carotenoids were extracted
收稿日期：2007-06-12 *通讯作者
基金项目：北京市教育委员会科技发展计划面上项目(200411417003)
作者简介：张艳(1982-)，女，硕士研究生，研究方向为细胞生物学。