全 文 ：2015 年 3 月 第 17 卷 第 3 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine Mar. 2015 Vol. 17 No. 3
·健康产业·
△［基金项目］ 国家自然科学基金面上项目(81274188) :四种别样茶改善胰岛素抵抗的物质基础和作用机制研究
*［通信作者］ 许利嘉，副研究员，博士，研究方向:别样茶的物质基础研究;TEL:010-57833165
E-mail:xulijia@ hotmail. com
藤茶主要成分对胰岛素抵抗 HepG2 细胞内
氧化应激水平的影响
△
潘慧敏1，2，姜保平1，2，乐亮1，肖伟1，2，许利嘉1，2* ，肖培根1，2
(1. 中国医学科学院 北京协和医学院 药用植物研究所 北京 100193;
2. 国家教育部中草药物质基础与资源利用重点实验室 北京 100193)
［摘要］ 目的:探讨藤茶主要成分，二氢杨梅素、没食子酸、二氢槲皮素、杨梅素及杨梅苷对胰岛素抵抗
HepG2 细胞糖消耗及细胞内活性氧(ＲOS)、丙二醛(MDA)、乳酸(LD)、三磷酸腺苷(ATP)含量以及超氧化物歧
化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性的影响。方法:将 HepG2 细胞分为正常对照组、胰岛素抵抗模型组和样品干
预组。用高糖(55 mmol·L －1)诱导 HepG2 细胞，建立胰岛素抵抗模型，用 MTT 法检测样品对 HepG2 细胞增殖的
影响;用葡萄糖氧化酶法检测上清中葡萄糖的含量;用分光光度法检测细胞内 MDA、LD含量及 SOD、CAT活性;
用荧光酶标仪检测细胞内 ＲOS和 ATP水平。结果:五个化合物在有效浓度范围内对 HepG2 细胞增殖无显著影响;
样品干预组葡萄糖消耗量较模型组显著升高;与模型组相比，五个化合物某个或某几个浓度组显著降低细胞内
MDA含量，提高 SOD、CAT活性及 ATP水平;没食子酸、二氢槲皮素和杨梅苷显著降低细胞内 ＲOS 水平;除二
氢杨梅素外，其余四个化合物均能降低细胞内 LD含量。结论:胰岛素抵抗 HepG2 细胞与对照组细胞相比有较高
的氧化应激水平，抗氧化能力减弱。藤茶主要成分能通过降低细胞的氧化应激水平，增加细胞的抗氧化能力，从
而预防胰岛素抵抗。
［关键词］ 藤茶;HepG2 细胞;胰岛素抵抗;氧化应激
Effects of main compounds from Ampelosis grossedentata on oxidative stress in
insulin-resistant HepG2 cells
PAN Huimin1，2，JIANG Baoping1，2，LE Liang1，XIAO Wei1，2，XU Lijia1，2* ，XIAO Peigen1，2
(1. Institute of Medicinal Plant Development，Chinese Academy of Medical Sciences，
Peking Union Medical College，Beijing 100093，China;
2. Key Laboratory of Bioactive Substances and Ｒesources Utilization of Chinese Herbal Medicine，
Ministry of Education，Beijing 100193，China)
［Abstract］ Objective: To investigate the influence of the main compounds: dihydromyricetin， gallic acid，
dihydroquercetin，myricetin and myricitrin from Ampelopsis grossedentata on glucose consumption，ＲOS，MAD，SOD，CAT，
LD and ATP in insulin-resistant HepG2 cells. Methods:HepG2 cells were divided into control group，model group and
sample groups. Insulin-resistant cells model was induced by high concentration of glucose (55 mmol·L －1). The proliferation of
cells were detected by 3-(4，5-dimethylthiazol-2-yl)-2，5-diphenylterazolium bromide (MTT)assay. The contents of glucose
in culture supematant were measured by the glucose oxidase peroxides (GOD)method． The contents of MDA，SOD，CAT and
LD were observed by spectrophotometric method. The contents of ＲOS and ATP were analyzed on a fluorescence
microplate. Ｒesults:The five compounds had little impact on the cells proliferation within the range of effective
concentration. The five compounds increased the glucose consumption significantly in insulin-resistant cells. After treated with
the five compounds， the contents of SOD， CAT and ATP increased significantly， while that of MDA
·762·
2015 年 3 月 第 17 卷 第 3 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine Mar. 2015 Vol. 17 No. 3
decreased. Dihydroquercetin， gallic acid and myricitrin were able to reduce the contents of ＲOS and LD
significantly. Meanwhile，the content of LD also could be reduced significantly by myricetin. Conclusion:Dihydromyricetin，
gallic acid，dihydroquercetin，myricetin and myricitrin from A. grossedentata can alleviate oxidative stress in the insulin-
resistant HepG2 cells.
［Keywords］ Ampelosis grossedentata;HepG2 cells;insulin-resistant;oxidative stress
doi:10． 13313 / j． issn． 1673-4890． 2015． 3． 019
胰岛素抵抗(Insulin resistance， IＲ)是指机体
对一定量胰岛素的生物学反应低于预计正常水平
的一种现象，也就是机体对胰岛素的反应减退。
胰岛素抵抗被认为是糖尿病、肥胖、脂代谢紊乱
等慢性代谢性疾病的共同的生理病理学基础［1］，
因此对于胰岛素抵抗发生机制的研究具有非常重
要的意义。
多种致病因素如高血糖、高游离脂肪酸血症以
及促炎因子分泌增加均可导致胰岛素抵抗。研究表
明，上述因素导致胰岛素敏感性下降的共同机制之
一是促进机体的氧化应激［2-3］。氧化应激是指机体内
活性氧(ＲOS)的生成增加和(或)清除能力降低，导
致 ＲOS的生成和清除失衡。ＲOS 具有重要的生理作
用，但过量则引起分子、细胞和机体的损伤［4-5］，导
致细胞内 MDA、LD 含量升高，SOD、CAT 活性下
降［6］，ATP水平降低［7］。大量研究表明，胰岛素抵
抗的发生与机体的氧化应激状态有着密不可分的关
系，过多的氧自由基促发胰岛素抵抗，而胰岛素抵
抗又反过来加重氧化应激［8］。机体氧化应激水平越
高，抗氧化防御能力越弱，胰岛素抵抗的程度就越
高。因此，降低高血糖细胞的氧化应激水平，是改
善细胞胰岛素抵抗的途径之一。
藤茶，系葡萄科蛇葡萄属植物显齿蛇葡萄
Ampelosis grossedentata(Hand. -Mazz)W. T. Wang 的嫩
茎叶［9］，是中国民间流传已久的古茶。文献报道，
藤茶具有显著的抗氧化活性［10］。前期研究发现，藤
茶具有显著的预防胰岛素抵抗的活性。藤茶总黄酮
及二氢杨梅素能够明显降低高脂饮食大鼠的血脂水
平，对多种动物模型有明显的降低血糖的作用，而
对正常小鼠血糖无明显影响［11-12］。然而，藤茶是否
能通过改善氧化应激水平而预防胰岛素抵抗，这方
面的研究至今尚无报道。
二氢杨梅素、没食子酸、二氢槲皮素、杨梅素
及杨梅苷为藤茶中的主要成分，其中以二氢杨梅素
含量最高。本实验首次研究了藤茶主要成分对胰岛
素抵抗 HepG2 细胞糖消耗、活性氧(reactive oxygen
species，ＲOS)、丙二醛(malondialdehyde，MDA)、
超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、过氧
化氢酶(catalase，CAT)、乳酸(lactic acid，LD)、三
磷酸腺苷(adenosine 5’-triphosphate，ATP)的影响，
探讨藤茶预防胰岛素抵抗的物质基础及可能的作用
机制，为藤茶的深度开发，资源进一步的充分利用，
提供理论依据。
1 实验材料
1. 1 仪器
DL-CJ-IND-Ⅱ超净工作台:北京东联哈尔仪器
制造有限公司;3100 型 CO2 细胞培养箱:美国
Thermo Forma 公司;CKX41 倒置显微镜:日本
Olympus公司;Fluoroskan Ascent FL 型荧光 /化学发
光分析仪:美国 Thermo Forma 公司;MQX200 型酶
标仪:美国 BioTek公司;
1. 2 试剂
DMEM低糖培养基:HyClone 公司;胎牛血清:
美国 Gibco 公 司;青-链 霉 素: HyClone 公 司;
0. 25%胰蛋白酶:美国 Gibco 公司;二甲基亚砜
(DMSO) :国药集团化学试剂有限公司;四氮甲唑
蓝(MTT) :美国 Sigma公司;牛胰岛素:美国 Sigma
公司;葡萄糖测定试剂盒:北京普利莱基因技术有
限公司;超氧化物歧化酶检测试剂盒:日本同仁化
学研究所;乳酸测试盒:南京建成生物工程研究所;
活性氧检测试剂盒、脂质氧化检测试剂盒、过氧化
氢检测试剂盒、ATP 检测试剂盒、BCA 蛋白浓度测
定试剂盒:碧云天生物技术研究所。其他试剂均为
分析纯，水为超纯水。
1. 3 材料
HepG2 细胞株:中国医学科学院基础研究所;
二氢杨梅素、没食子酸、二氢槲皮素、杨梅素、杨
梅苷购自上海融禾医药科技发展有限公司。
·862·
2015 年 3 月 第 17 卷 第 3 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine Mar. 2015 Vol. 17 No. 3
2 方法
2. 1 HepG2 胰岛素抵抗细胞模型的建立
根据文献方法［13］加以改进，取对数生长期细
胞制成细胞悬液，用含 10% 胎牛血清的低糖
DMEM 培养基稀释，以 105 个 /孔的细胞密度接种
于 96 孔细胞培养板，100 μL /孔，于 37 ℃，5%
CO2 的恒温培养箱中培养。当细胞贴壁后，弃去
上清液，加入新鲜配制的不同浓度的高糖溶液
100 μL /孔继续于 37 ℃，5% CO2 的恒温培养箱
中培养不同的时间，用预热的 PBS 冲洗 2 遍后，
用 1 nmol·L － 1胰岛素刺激 15 min，葡萄糖测定试
剂盒检测细胞培养液上清的葡萄糖含量，计算葡
萄糖消耗量。最终选定以 55 mmol·L － 1的高糖溶
液作用 24 h 建立胰岛素抵抗模型。
2. 2 藤茶主要成分对 HepG2 细胞增殖的影响
取对数生长期细胞，以 105 个 /孔的细胞密度接
种于 96 孔细胞培养板。将细胞分为正常对照组和样
品干预组，样品干预组换无血清的含药培养基，样
品终剂量分别为二氢杨梅素、没食子酸、二氢槲皮
素、杨梅素、杨梅苷:5 μmol·L －1、10 μmol·L －1、
50 μmol·L －1、100 μmol·L －1、150 μmol·L －1、
200 μmol·L －1 、300 μmol·L －1及 400 μmol·L －1，每
个浓度设 8 个复孔，加药 24 h 后，移出培养液，将
5 mg·mL －1的 MTT原液与无血清 DMEM 培养基按体
积比 1∶9 配成 MTT 溶液，每孔加入 100 μL，4 h 后
换二甲基亚砜，震荡 10 min，在酶标仪 570 nm波长
下测定各孔吸光度值。
2. 3 藤茶主要成分对胰岛素抵抗 HepG2 细胞糖消耗
的影响
根据文献方法［13］加以改进，取对数生长期细
胞，以 105 个 /孔的细胞密度接种于 96 孔细胞培养
板。将细胞分为正常对照组、模型组及样品干预组。
样品干预组换无血清的含药培养基，样品终剂量分
别为二氢杨梅素、没食子酸、二氢槲皮素、杨梅素、
杨梅苷:5 μmol·L －1、10 μmol·L －1、20 μmol·L －1及
40 μmol·L －1，每个浓度设 8 个复孔，加药 24 h 后，
上述 各 组 (除 空 白 对 照 组)再 分 别 加 高 糖
(55 mmol·L －1)处理 24 h 后。各组细胞用预热的
PBS冲洗 2 遍，用 1 nmol·L －1胰岛素刺激 15 min，
用葡萄糖测定试剂盒检测细胞培养液上清的葡萄糖
含量，计算葡萄糖消耗量。
2. 4 藤茶主要成分生化指标测定
根据文献方法［13］加以改进，取对数生长期细胞，
以 105 个 /孔的细胞密度接种于 96 孔细胞培养板。将
细胞分为正常对照组、模型组及样品干预组。样品干
预组换无血清的含药培养基，样品终剂量分别为二氢
杨梅素、没食子酸、二氢槲皮素、杨梅素、杨梅苷:
5 μmol·L －1、10 μmol·L －1、20 及 40 μmol·L －1，每
个浓度设 8 个复孔，加药 24 h 后，上述各组(除空
白对照组)再分别加高糖(55 mmol·L －1)处理 24 h
后。收集细胞，按照试剂盒方法处理细胞样品并测
定 ＲOS、MDA、SOD、CAT、LD、ATP水平。
2. 5 统计分析
结果均以 ± s 形式表示，所有数据采用
SPSS17. 0 统计学软件进行单因素方差分析，组内比
较采用 Duncan’s检验，P ＜ 0. 05 有显著性差异。
3 结果
3. 1 藤茶主要成分对 HepG2 细胞增殖的影响
图 1 藤茶主要成分对 HepG2 细胞增殖的影响
图 1 表明，五个化合物浓度在 100 μmol·L －1范
围内时，细胞存活率均接近 100%，对细胞增殖无显
著影响。当样品浓度增大到 150 μmol·L －1时，二氢
杨梅素、二氢槲皮素、杨梅素才开始对细胞增殖起
到抑制作用。
3. 2 藤茶主要成分对胰岛素抵抗 HepG2 细胞糖消耗
影响
如表 1所示，模型组细胞糖消耗量明显低于正常
对照组(P ＜ 0. 01) ，说明建模成功。用藤茶各部位预
处理 24 h后，再给予高糖刺激，与模型组相比，除杨
梅素 5 μmol·L －1、10 μmol·L －1和 40 μmol·L －1组外，
其余各化合物各个浓度组均能不同程度的促进 HepG2
细胞糖消耗。
·962·
2015 年 3 月 第 17 卷 第 3 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine Mar. 2015 Vol. 17 No. 3
3. 3 藤茶主要成分对胰岛素抵抗 HepG2 细胞内 ＲOS、
MDA、SOD、CAT、LD和 ATP水平的影响
由表 2 可知，模型组 ＲOS、MDA、LD 含量较正
常对照组显著升高，SOD、CAT活性及 ATP水平与正
常对照组相比显著降低。与模型组相比，没食子酸、
二氢槲皮素及杨梅苷(20 μmol·L －1、40 μmol·L －1)处
理后 ＲOS 含量显著降低;二氢杨梅素和二氢槲皮素
(10 μmol·L －1、20 μmol·L －1、40 μmol·L －1)、没食
子酸(20 μmol·L －1、40 μmol·L －1)、杨梅素及杨梅
苷各浓度组 MDA含量也明显下降;与此同时，二氢
杨梅素和杨梅苷 (10μmol·L －1、20μmol·L －1、
40 μmol·L －1 )、没食子酸和杨梅素(20 μmol·L －1、
40 μmol·L －1)及二氢槲皮素各浓度组 SOD 活性较模
型组有显著提高;二氢杨梅素(10 μmol·L －1、
20 μmol·L －1 )、杨梅素(10 μmol·L －1、20 μmol·L －1、
40 μmol·L －1)、没食子酸、二氢槲皮素及杨梅苷各
浓度组的 CAT 活性也显著上升;没食子酸和二氢槲
皮各浓度组、杨梅素(40 μmol·L －1)及杨梅苷
(20 μmol·L －1 )LD含量显著降低;二氢杨梅素和没
食子酸各浓度组、二氢槲皮素和杨梅素(20 μmol·L －1、
40 μmol·L －1)及杨梅苷(10 μmol·L －1、20 μmol·L －1、
40 μmol·L －1)ATP含量显著升高。
表 1 藤茶主要成分对 IＲ-HepG2 细胞糖消耗影响
(珔x ± s，n =8)
组别 剂量(μmol·L －1) 糖消耗(mmol·L －1)
正常对照组 - 0. 696 ± 0. 031＊＊
IＲ模型组 - 0. 398 2 ± 0. 075##
二氢杨梅素(DHM) 5 0. 685 6 ± 0. 104＊＊
10 0. 592 1 ± 0. 066＊＊
20 0. 606 ± 0. 046＊＊
40 0. 716 8 ± 0. 079＊＊
没食子酸(GA) 5 0. 644 1 ± 0. 065＊＊
10 0. 657 9 ± 0. 091＊＊
20 0. 675 2 ± 0. 076＊＊
40 0. 640 6 ± 0. 07＊＊
二氢槲皮素(DHQ) 5 0. 654 5 ± 0. 132＊＊
10 0. 699 5 ± 0. 065＊＊
20 0. 782 6 ± 0. 08＊＊
40 0. 747 9 ± 0. 03＊＊
杨梅素(Myricetin) 5 0. 533 3 ± 0. 066
10 0. 526 3 ± 0. 134
20 0. 557 5 ± 0. 058*
40 0. 495 2 ± 0. 046
杨梅苷(Myricitrin) 5 0. 692 5 ± 0. 069＊＊
10 0. 737 6 ± 0. 031＊＊
20 0. 709 9 ± 0. 04＊＊
40 0. 696 ± 0. 024＊＊
注:与模型组相比，* P ＜ 0. 05，＊＊P ＜ 0. 01;与正常对照组相比，##P
＜ 0. 01。
表 2 藤茶主要成分对胰岛素抵抗 HepG2 细胞内 ＲOS、MDA、SOD、CAT、LD和 ATP水平的影响(珔x ± s，n =8)
组别 剂量(μmol·L －1) ＲOS(% of control) MDA(nmol /mg prot) SOD(units /mg prot) CAT(units /mg prot) LD(mmol·L －1) ATP(nmol /mg prot)
正常对照组 - 100. 00 ± 1. 21＊＊ 0. 756 4 ± 0. 128＊＊ 31. 7949 ± 3. 777＊＊ 0. 5521 ± 0. 138＊＊ 3. 787 8 ± 0. 534＊＊ 0. 398 5 ± 0. 047＊＊
IＲ模型组 - 121. 99 ± 6. 02## 2. 636 8 ± 0. 267## 17. 9487 ± 1. 282## 0. 2708 ± 0. 006## 5. 461 5 ± 0. 148## 0. 172 1 ± 0. 009##
二氢杨梅素 5 109. 98 ± 3. 00 2. 423 1 ± 0. 256 24. 3823 ± 3. 851 0. 310 4 ± 0. 036 4. 711 5 ± 0. 113 0. 457 6 ± 0. 054＊＊
10 115. 98 ± 1. 70 1. 696 6 ± 0. 196＊＊ 29. 1142 ± 9. 231＊＊ 0. 4675 ± 0. 022＊＊ 4. 334 6 ± 0. 249 0. 493 8 ± 0. 04＊＊
20 115. 44 ± 9. 06 0. 970 1 ± 0. 074＊＊ 32. 1445 ± 5. 415＊＊ 0. 5334 ± 0. 097＊＊ 4. 263 5 ± 0. 265 0. 627 5 ± 0. 041＊＊
40 116. 78 ± 2. 20 1. 183 8 ± 0. 074＊＊ 30. 2331 ± 6. 581＊＊ 0. 2807 ± 0. 073 4. 473 1 ± 0. 298 0. 598 2 ± 0. 061＊＊
没食子酸 5 113. 15 ± 7. 27 2. 094 6 ± 0. 671 17. 9487 ± 5. 588 0. 5176 ± 0. 055＊＊ 4 ± 0. 533* 0. 385 2 ± 0. 064*
10 109. 34 ± 6. 43 2. 139 9 ± 0. 522 26. 0684 ± 2. 669 0. 5339 ± 0. 039＊＊ 3. 615 4 ± 0. 705＊＊ 0. 385 9 ± 0. 129*
20 95. 08 ± 17. 49＊＊ 1. 247 8 ± 0. 296＊＊ 29. 4017 ± 4. 293＊＊ 0. 5683 ± 0. 039＊＊ 3. 538 4 ± 0. 133＊＊ 0. 427 6 ± 0. 156＊＊
40 102. 43 ± 7. 32＊＊ 1. 057 1 ± 0. 341＊＊ 30. 8034 ± 3. 219＊＊ 0. 6089 ± 0. 011＊＊ 3. 384 6 ± 0. 581＊＊ 0. 408 2 ± 0. 126＊＊
二氢槲皮素 5 106. 17 ± 7. 56 2. 100 2 ± 0. 159 31. 6517 ± 0. 248＊＊ 0. 4102 ± 0. 017* 3. 998 6 ± 1. 218* 0. 309 4 ± 0. 026
10 109. 03 ± 10. 09 1. 666 6 ± 0. 059＊＊ 29. 2169 ± 1. 873＊＊ 0. 4712 ± 0. 017＊＊ 3. 803 6 ± 0. 507＊＊ 0. 344 5 ± 0. 033
20 97. 63 ± 5. 03＊＊ 0. 6684 ± 0. 034＊＊ 29. 2562 ± 4. 553＊＊ 0. 5331 ± 0. 026＊＊ 4. 096 2 ± 0. 774* 0. 382 7 ± 0. 051*
40 92. 89 ± 11. 78＊＊ 0. 482 8 ± 0. 023＊＊ 29. 6466 ± 1. 289＊＊ 0. 499 ± 0. 021＊＊ 3. 901 1 ± 1. 182* 0. 431 9 ± 0. 047＊＊
杨梅素 5 116. 81 ± 7. 50 1. 534 4 ± 0. 588＊＊ 19. 4625 ± 0. 649 0. 3591 ± 0. 047 5. 465 3 ± 0. 193 0. 231 5 ± 0. 057
10 112. 40 ± 4. 60 1. 435 ± 0. 21＊＊ 18. 3812 ± 0. 375 0. 4426 ± 0. 048＊＊ 5. 399 5 ± 0. 191 0. 270 7 ± 0. 044
20 107. 58 ± 7. 54 0. 873 5 ± 0. 207＊＊ 29. 6262 ± 0. 991＊＊ 0. 5417 ± 0. 058＊＊ 4. 545 9 ± 0. 206 0. 414 5 ± 0. 046＊＊
40 109. 83 ± 5. 51 0. 622 ± 0. 056＊＊ 33. 9512 ± 1. 982＊＊ 0. 5156 ± 0. 025＊＊ 4. 098 ± 0. 224* 0. 413 2 ± 0. 021＊＊
杨梅苷 5 112. 22 ± 7. 78 1. 725 6 ± 0. 586＊＊ 25. 2747 ± 2. 395 0. 409 ± 0. 07* 5. 337 7 ± 0. 299 0. 260 6 ± 0. 083
10 109. 24 ± 6. 62 1. 244 9 ± 0. 212＊＊ 31. 8681 ± 2. 395＊＊ 0. 613 ± 0. 04＊＊ 4. 233 7 ± 0. 589 0. 460 4 ± 0. 019＊＊
20 103. 41 ± 5. 88* 0. 822 5 ± 0. 369＊＊ 33. 6996 ± 1. 679＊＊ 0. 5889 ± 0. 039＊＊ 4. 020 6 ± 0. 219* 0. 515 7 ± 0. 015＊＊
40 100. 96 ± 7. 58＊＊ 1. 382 9 ± 0. 148＊＊ 37. 9121 ± 1. 648＊＊ 0. 6503 ± 0. 032＊＊ 4. 895 ± 0. 6 0. 358 9 ± 0. 143*
注:与模型组相比，* P ＜ 0. 05，＊＊P ＜ 0. 01;与正常对照组相比，##P ＜ 0. 01。
·072·
2015 年 3 月 第 17 卷 第 3 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine Mar. 2015 Vol. 17 No. 3
4 结论
机体发生氧化应激损伤，细胞内 ＲOS 水平升
高;MDA作为脂质过氧化最重要的产物之一，可以
反映体内脂质过氧化的程度，间接地反映细胞氧化
损伤程度;而体内的抗氧化系统，如 SOD、CAT 等
则能减少氧自由基对细胞的损伤，它们活性的高低
反映机体的抗氧化能力［6］。胰岛素抵抗引起细胞内
葡萄糖无氧酵解的过程增强，乳酸生成增加。乳酸
在细胞内积聚，会导致细胞渗透压增高，线粒体肿
胀和破裂，影响线粒体呼吸功能而发生能量代谢障
碍。高糖使细胞内乳酸和氧自由基与脂质过氧化物
生成增加，又会损伤线粒体的能量代谢，细胞内
ATP水平下降［14，15］。本实验以高糖诱导 HepG2 细胞
产生胰岛素抵抗，结果表明，在有效浓度范围内，
各样品对细胞存活率无显著影响。高糖可以引起细
胞内 ＲOS、MDA 水平增高，SOD、CAT 活性下降，
其氧化 /抗氧化体系的稳态失衡，而没食子酸、二氢
槲皮素和杨梅苷能显著降低细胞内的 ＲOS 水平，二
氢杨梅素、没食子酸、二氢槲皮素、杨梅素和杨梅
苷均能明显增加胰岛素抵抗 HepG2 细胞 SOD、CAT
的活性，降低 MDA 水平。本研究经过高糖造模后，
细胞内液乳酸含量明显增加，而损伤前给予供试样
品预处理可抑制乳酸含量的增加。
以上研究结果提示藤茶可能通过降低细胞内活
性氧水平、抑制脂质过氧化反应及提高细胞内抗氧
化酶的活性来减少自由基对细胞的损伤，增加细胞
的抗氧化功能，减轻细胞的氧化应激，从而预防胰
岛素抵抗。同时，可能也与减轻细胞代谢性酸中毒，
提高 ATP水平，改善细胞能量代谢有关。
参考文献
［1］ Zuo H，Shi ZM，Hu XS，et al． Prevalence of metabolic
syndrome and factors associated with its components in
Chinese adults［J］． Metabolism:clinical and experimental，
2009，58(8):1102-1108．
［2］ Evans JL，Goldfine ID，Maddux BA，et al． Oxidative stress
and stress-activated signaling pathways: a unifying
hypothesis of type 2 diabetes［J］． Endocr Ｒev，2002，23
(5) :599-622．
［3］ Houstis N，Ｒosen ED，Lander ES． Ｒeactive oxygen species
have a causal role in multiple forms of insulin resistance
［J］． Nature，2006，440(7086) :944-948．
［4］ Song F，Jia W，Yao Y，et al． Oxidative stress，antioxidant
status and DNA damage in patients with impaired glucose
regulation and newly diagnosed type 2 diabetes［J］． Clin Sci
(Lond) ，2007，112(12) :599-606．
［5］ Kaneto H，Katakami N，Kawamori D，et al． Involvement of
oxidative stress in the pathogenesis of diabetes［J］． Antioxid
Ｒedox Signal，2007，9(3) :355-366．
［6］ Klaus Apel，Heribert Hirt． Ｒeactive oxygen species:
metabolism，oxidative stress，and signal transduction［J］．
Annu Ｒev． Plant Biol，2004，55:373-399．
［7］ 时丽丽，张莉，谭初兵，等． 线粒体功能损伤与胰岛素抵
抗［J］．中国药理学通报，2012，28(11):1481-1486．
［8］ Meigs JB，Larson MG，Fox CS，et al． Association of oxidative
stress，insulin resistance，and diabetes risk phenotypes:The
Framingham Offspring Study［J］． Diabetes Care，2007，30:
2529-2535．
［9］ 王文采． 葡萄科的新发现［J］． 植物分类学报，1979，17
(3) :73-96．
［10］欧贤红，叶勇，黄秋洁，等．藤茶抗氧化活性研究［J］．天
然产物研究与开发． 2013，25:245-248．
［11］陈晓军，陈学芬，李茂，等． 显齿蛇葡萄总黄酮降脂作用
的研究［J］．广西中医药，2001，24(5):52-54．
［12］钟正贤，覃洁萍，周桂芬，等． 广西藤茶总黄酮降血糖的
实验研究［J］．中国中药杂志，2002，27(9) :687-689．
［13］ Nakajima K，Yamauchi K，Shigematsu S，et al． Selective
attenuation of metabolic branch of insulin receptor down-
signaling by high glucose in a hepatoma cell line，HepG2
cells［J］． J Biol Chem，2000，275(27) :20880-20886．
［14］李建成，金淑仪，吴小梅，等． 银杏内酯对急性低氧时脑
含水量、Na +，K + -ATPase 活性、MDA、乳酸含量的影响
［J］．中国应用生理学杂志，2003，19(3) :239-240，273．
［15］ Ｒitz P， Berrut G． Mitochondrial function， energy
expenditure，aging and insulin resistance［J］． Diabetes
Metab，2005，31:5S67-5S73．
(收稿日期 2015-01-07)
·172·