全 文 ：Journal of Medical Science Yanbian University　Dec.2009　Vol.32 No.4
酰胆碱(ACh)由胆碱乙酰转移酶催化合成 , AChE
催化分解.胆碱乙酰转移酶和 AChE 共同维持着
ACh的动态平衡 ,是维持学习记忆正常的必要条
件.AChE 是乙酰胆碱的水解酶 ,测定脑内 AChE的
活性可判断脑内乙酰胆碱含量的变化[ 7] .本实验采
用 AChE试剂盒检测了大鼠脑组织的 AChE 活性 ,
结果表明不同蒸制时间黑豆汁制首乌均明显降低脑
组织中的 AChE 活性 ,提示黑豆汁制首乌抗衰老作
用与降低 AChE 活性 ,改善中枢胆碱能系统有关.
CA T 是细胞内的抗氧化酶 ,可消除细胞新陈代谢的
副产物过氧化氢 ,以减少自由基和过氧化脂质的生
成 ,从而阻止过氧化氢转变为羟自由基.CA T 与过
氧化物歧化酶协同作用 ,使氧自由基彻底无毒化 ,而
CA T 可清除过氧化氢 ,对超氧化物歧化酶(SOD)起
保护作用 ,同样氧自由基也可使 CA T 失去活性 ,这
2 种酶组成相互保护的系统 , 起协同作用[ 8] , 而
CA T 活性可间接反映机体清除氧自由基的能力.本
实验结果表明 ,黑豆汁制首乌各组大鼠血清 、肝脏及
脑组织 CAT 活性均明显提高 ,提示黑豆汁制首乌
抗衰老作用与清除体内 CA T 活性有关.总之 ,何首
乌具有抗衰老作用 ,其作用机制可能是由多个因素
综合作用的结果.何首乌具有广泛的开发前景 ,对它
的炮制方法及时间的研究将有利于今后更合理 、科
学地利用何首乌.
[参　考　文　献]
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[ 收稿日期] 　2009-10-08
＊[ 通信作者] 　尹明浩(1963—),男(朝鲜族),教授 ,博士 ,研
究方向为天然药物开发.
卷柏穗花杉双黄酮的舒张血管作用实验研究
许兰 ,尹明浩＊
(延边大学中医学院 ,吉林 延吉 133000)
[ 摘要] 　[ 目的] 探讨卷柏乙酸乙酯提取物穗花杉双黄酮对血管紧张性的影响及其可能的机制.[ 方法]
利用多道生理记录仪对大鼠离体主动脉环进行观察 , 了解卷柏己烷 、乙酸乙酯和正丁醇提取物对血管的
作用 , 并从血管内皮细胞 、一氧化氮和受体角度探讨其机制.[ 结果] 卷柏的 3种提取液均有明显的舒张
血管作用 , 其中以乙酸乙酯提取物穗花杉双黄酮的作用最强 , 且在 0.1 ～ 10.0 μmol/ L 范围内具有剂量
依赖性.损伤大鼠胸主动脉环内皮后 ,穗花杉双黄酮的舒张血管作用被抑制;在内皮完整的动脉血管环
使用一氧化氮抑制剂 L-NAME 后 ,穗花杉双黄酮的作用亦被抑制;使用 1.0μmo l/ L 盐酸普萘洛尔或阿
托品对穗花杉双黄酮的舒张血管作用无影响.[ 结论] 卷柏乙酸乙酯提取物穗花杉双黄酮的舒张血管作
用存在内皮依赖性 , 且有一氧化氮参与.
[关键词] 　穗花杉双黄酮;主动脉;血管舒张;一氧化氮;大鼠
[中图分类号] 　R 285.5　　　[文献标志码] 　A　　　[文章编号] 　1000-1824(2009)04-0246-03
Experiment study on vasodilative effects of amentoflavone ethyl acetate
extract of selaginella tamariscina
XU Lan , YINMing-hao＊
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延边大学医学学报　2009年 12 月　第 32 卷　第 4 期
(Yanbian University College o f T raditional Chinese Medical , Yanj i 133000 , J ilin , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To investig ate the effects of ethy l acetate ex t ract of the selaginella tamariscina
(S T)on vaso tonia and its underlying mechanisms.METHODS Using the po ly g raph , the effects of hexane ,
ethy l acetate and n-bulanol ex t racts of the S T fo r the vasotonia w ere evalua ted wi th the model o f iso lated
rat tho racic aorta ring s in o rgan bath , and the mechanisms w ere studied by the point of vascula r endo thelial
cell , nit ric oxide (NO) and receptor.RESULTS All o f three ext racts o f the ST had the ef fects o f
vasodilation , in w hich the ethy l acetate ex t ract of the ST had the st rongest effects w ith the dose-dependent
at the concentrat ions of 0.1 ～ 10.0 μmol/ L.But this ef fect w as almost inhibited after removal of rat
thoracic aor ta rings and pret reating the endo thelium intact ao rta rings w ith NG nit ro-L-arginine me thyl
ester at the concentrat ion of 1.0 μmo l/L , respectively.Thepropranolo l (1.0μmol/ L)or atropine (1.0
μmo l/L)did no t affect vasodilation wi th ethyl acetate ex tract of the ST .CONCLUSION The ethy l ace tate
ex t ract of the ST has the effect of v asodila tion w ith endothelium dependent and engaging in NO.
Key words:Amentof lav one;ao rta;vasodilat ion;nit ric oxide;rats
　　卷柏科植物卷柏(S elag inel la tamariscina)具
有活血通经之功效 ,用于经闭痛经 、癓瘕痞块及跌打
损伤的治疗 ,炒炭后可化瘀止血 ,用于治疗吐血 、崩
漏 、便血及脱肛等疾病[ 1] .卷柏的主要化学成分为黄
酮类 、生物碱 、酚类 、有机酸类 、氨基酸及多糖类
等[ 2] .研究结果表明 ,卷柏除具有调节免疫 、抗肿瘤 、
抑菌 、抗炎 、镇痛及镇静作用外 ,尚有抑制正常离体
兔肠平滑肌的蠕动及张力的作用.本实验观察了卷
柏乙酸乙酯提取物对大鼠离体胸主动脉环的作用 ,
并初步探讨了其机制.
1　材料与方法
1.1　实验动物与试剂 　取体重为 250 ～ 300 g 的
SD雄性大鼠 ,由韩国 Sam tako 实验动物中心提供.
苯肾上腺素 、乙酰胆碱 、阿托品 、盐酸普萘洛尔及
L-NAME均购自美国 SIGMA 公司.
1.2　卷柏提取物的制备　取卷柏 1.2 kg 浸泡于
5 L甲醇中 ,3 周后用回旋式减压浓缩机浓缩 ,再将
浓缩物溶解于水后 ,用己烷 、乙酸乙酯 、正丁醇和水
依次萃取成分.在预实验中发现 ,乙酸乙酯提取物对
血管的舒张作用最为明显 ,故采用 C18柱色谱分离
法和硅胶柱色谱分离法进行分离 ,通过改变样品混
合物处理 条件 及流动 相极 性 , 得 到分 离物
DH 110-2-11.通过血管舒张实验证明其为有效活
性成分 ,并经 H-NMR波谱和13C-NMR光谱分析 ,
最终确定其为双黄酮类化合物穗花杉双黄酮
(Amentof lavone).
1.3　血管环的制备　参照 Kim 等[ 3] 的方法 ,将大
鼠断头处死 ,迅速开胸取胸主动脉 ,在 4 ℃的 Krebs
液中去除血管周围脂肪及结缔组织 ,制作成约 3mm
长的血管环.血管环悬挂于含有 5 mLKrebs 液
(118.0 mmo l/L 氯化钠 , 4.7 mmol/ L 氯化钾 ,
1.1 mmol/ L硫酸镁 , 1.2 mmo l/L 磷酸二氢钾 ,
1.5 mmol/ L 氯化 钙 , 25.0 mmol/L 碳 酸氢钠 ,
10.0 mmol/L葡萄糖)的浴槽中恒温 37 ℃,持续通
入 950 mL/L 氧-50mL/L 二氧化碳混合气体.将血
管环两端分别连接于张力传感器和浴槽底部的不锈
钢丝 , 使用 Pow er Lab 生物信号采集系统(美国
GRASS 公司)进行记录.最适前负荷为 1 g ,每隔
10 min换液 1次 ,平衡 1 h后开始进行实验.
1.4　统计学处理　所有数据均以均数±标准偏差
( x±SD)表示 ,采用 t检验及 one-way ANOVA 进
行显著性检验.
2　结果
2.1　卷柏提取物对主动脉环张力的影响　动脉环
在灌流稳定 1 h 后 ,向灌流槽内加入 1.0μmo l/L 苯
肾上腺素 ,使动脉环收缩达到稳定.分别加入卷柏己
烷 、乙酸乙酯和正丁醇提取物 ,观察动脉对苯肾上腺
素导致的收缩血管作用的影响.发现卷柏的上述提
取物均有显著的舒张血管作用 ,其中以 100 g/L 卷
柏乙酸乙酯提取物的舒张血管作用最强 ,见图 1.
2.2　损伤血管内皮对穗花杉双黄酮舒张血管作用
的影响　向灌流槽内加入 0.1μmol/ L 苯肾上腺素 ,
待血管环收缩达到稳定后 ,逐渐增加穗花杉双黄酮
的浓度(0.01 ～ 10.00 μmol/L),发现对血管的舒张
作用呈剂量依赖性.但当使用外科方法剥去动脉血
管内皮后 ,穗花杉双黄酮的舒张血管作用明显减弱 ,
甚至完全消失(图 2 A).
2.3　L-NAME对穗花杉双黄酮舒张血管作用的影
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响　用非特异性一氧化氮抑制剂 L-NAME(0.1 ,
1.0μmo l/L)预处理血管后 ,再观察穗花杉双黄酮的
舒张血管作用 ,发现 L-NAME 几乎可完全阻断穗
花杉双黄酮的舒张血管作用(图 2 B),提示穗花杉
双黄酮可能通过一氧化氮发挥舒张血管作用.
2.4　普萘洛尔和阿托品对穗花杉双黄酮舒张血管
作用的影响　应用 1.0 μmol/L 普萘洛尔及 0.1 ～
10.0μmol/L 阿托品分别对血管进行预处理后发现
均不影响穗花杉双黄酮的舒张血管作用 ,与对照组
相比较均无显著性差异(P >0.05 ,图 3).
图 1　卷柏的不同提取物对苯肾上腺素导致的大鼠
胸主动脉收缩作用的影响
A:血管内皮损伤对穗花杉双黄酮舒张血管作用的
影响;B:L-NAME 对穗花杉双黄酮舒张血管作用的
影响.
图 2　血管内皮损伤和 L-NAME对穗花杉双黄酮舒张
血管作用的影响
图 3　普萘洛尔和阿托品对穗花杉双黄酮舒张血管
作用的影响
3　讨论
本实验结果表明 ,卷柏的己烷 、乙酸乙酯和正丁
醇等 3种提取物均有一定的降低由苯肾上腺素引起
的动脉血管收缩的作用 ,而其中以乙酸乙脂提取物
穗花杉双黄酮的作用最强.穗花杉双黄酮的舒张血
管作用可能与胆碱能 M 受体及肾上腺素能 β 受体
无关 ,但在剥去血管内皮后作用完全被阻断 ,提示穗
花杉双黄酮的舒张血管作用依赖血管内皮.血管内
皮细胞可分泌内皮源性血管舒张因子 ,而其化学本
质为一氧化氮[ 4] .一氧化氮是由一氧化氮合酶催化
其底物 L-精氨酸产生的 ,一氧化氮的舒张血管作用
是通过增加平滑肌内 cGMP 水平来介导[ 5] .本实验
结果表明 ,用非特异性一氧化氮抑制剂 L-NAME
预先处理后 ,穗花杉双黄酮的舒张血管作用完全被
阻断 ,提示卷柏的乙酸乙脂提取物穗花杉双黄酮可
能是通过激活血管内皮细胞中的一氧化氮/c GMP
信号转导系统发挥作用 ,其详细机制有待于进一步
研究阐明.
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