全 文 ：0. 1Eu /mg。具体检查方法如下: 取本品 ,依法检查
(《中国药典》二部附录Ⅺ E) ,每 1mg中含内毒素量
应小于 0. 1Eu。
参考文献
[1 ] U. S. PHARM ACO PEIA. 1995. I: 254
[2 ]国家药典委员会 .中华人民共和国药典 2005年版二部 .北京:化
学工业出版社 , 2005:附录 85- 88
[3 ]国家药典委员会 .中华人民共和国药典临床用药须知 .化学药和
生物制品卷 . 2005年版 .北京:人民卫生出版社 , 2005: 453
作者简介:梁佐力 ,男 ,中药师。 学科及研究方向:中成药的检验及中药鉴定。 联系电话: 0771- 3964805。
复方杏香兔耳风胶囊薄层鉴别和含量测定方法的研究
梁佐力 1　农克文 1　赵建平 1( 1.广西南宁食品药品检验所 ,南宁 530001; 2. 广西南宁万士达制药有限公司 ,南宁 530003; 3.广西民族
医院 ,南宁 530001)
摘要　目的: 为完善改变剂型的制剂复方杏香兔耳风胶囊的质量控制方法。 方法:采用薄层鉴别和高效液相色谱法 ,以绿原酸
为对照品 ,检测波长为 327nm,甲醇 -2%冰醋酸溶液 ( 10∶ 90)为流动相。 结果: 通过方法学考察 ,绿原酸进样量在 0. 0594～
0. 5348μg范围内 ,呈良好的线性关系 ,平均回收率为 98. 9% , RSD为 0. 9%。结论:薄层鉴别 ,方法专属 ,斑点清晰 ;含测方法简
便 ,精密度及重复性均好。 可有效控制复方杏香兔耳风胶囊的质量。
关键词: 复方杏香兔耳风胶囊 ;薄层鉴别 ;高效液相色谱法 ;含量测定。
中图分类号: 921. 2　　　文献标识码: A　　　文章编号: 1009-3656( 2007) -3-58-3
Study on Identification by TLC and Determination Method of Fufang Xingxiang Tu’ erfeng
Capsule
Liang Zuo-li1 , Nong Ke-w en2 , Zhao Jian-ping3 ( 1. Guang xi N anning Inst itu te for Food and Drug Control , N annin g 530001;
2. Guangx i Nanning Wanshida Pharmaceutical Limi ted Company, Nannin g 530003; 3. The Minority Hospi tal of Guangx i , Nannin g 530001)
Abstract Objective: In this ar ticle, to study quality standard, and edit thin-1ayer identifica tion and determination me thod fo r
chang ing prepa ra tion o f Fufang Xingx iang Tu er feng Capsule. Methods: Compa rison to Chlo ro g enic Acid standa rd substance,
the Chlo ro genic Acid content in capsule wa s dete rmined by HPLC method, with 327nm as the detection w aveleng th and
methanol-2% g lacial acetic acid solution ( 10∶ 90) as the mobile phase.Results: It w as demonstra ted, when injec ted volum e of
chlo ro genic acid ranges f rom 0. 0594μg to 0. 5348μg, the result has a good 1inear reg ression, the average recover y was 98. 9% ,
and RSD was 0. 9% . Conclusion: This me thod is accurate and reliable and can be used fo r differ entiating , and determination of
chlo ro genic acid content.
Key words　 Xingx iang Tu’ e rfeng Capsule; Thin-laye r Identification; HPLC; Content Dete rmination
　　复方杏香兔耳风胶囊为卫生部药品标准中药成
方制剂第 14册《复方杏香兔耳风颗粒》剂改品种 ,由
杏香兔耳风和白术二味药组成 ,原标准项下收载一
项试管鉴别法 ,一项滤纸荧光鉴别 ,另一项白术的薄
层鉴别 ,对君药杏香兔耳风未进行专属性鉴别 ,也未
建立含量测定项。 改变剂型后对其君药的鉴别和含
量测定方法均进行了研究 ,增加杏香兔耳风的薄层
鉴别 ,并建立用 HPLC法测定杏香兔耳风中绿原酸
含量 ,现报道如下:
一、试验仪器与材料
1. 仪器　日本岛津 LC-10A TV P高效液相色
谱仪 ; SPD-10AV P紫外检测仪 ;威玛龙色谱工作
站 ;日本 GR-202十万分之一电子天平。
2. 试剂、试药　甲醇为色谱纯试剂 ,水为重蒸
馏水 ,其他试剂均为分析纯试剂。
3. 绿原酸对照品 (批号 10753-200212,含量测
定用 ) ,购自中国药品生物制品检定所 ;复方杏香兔
耳风胶囊:广西南宁万士达制药有限公司产。
二、方法与结果
1. 鉴别
1. 1　杏香兔耳风的薄层鉴别　取本品内容物
1g ,研细 ,加乙醇 20ml,超声处理 30分钟 ,滤过 ,滤液
58 中国药品标准 2007年第 8卷第 3期　 (总 218) Drug Standards o f China 2007, v ol. 8 No. 3
蒸干 ,残渣加无水乙醇 1ml使溶解 ,作为供试品溶
液。另取杏香兔耳风对照药材 10g ,同法制成对照药
材溶液。照薄层色谱法 (中国药典 2005年版一部附
录Ⅵ B)试验 ,吸取上述两种溶液各 10μl ,分别点于同
一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶 G薄层板上 ,
以苯-乙酸乙酯 ( 9. 5∶ 0. 5)为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾
干 ,置紫外光灯 ( 365nm )下检视。供试品色谱中 ,在
与对照药材色谱相应的位置上 ,显相同颜色的斑点。
空白样品无干扰 (见图 1)。
1. 2　白术的薄层鉴别　取本品内容物 2. 5g,加
石油醚 ( 30～ 60℃ ) 30ml,加热回流 20分钟 ,滤过 ,滤
液浓缩至约 1ml ,作为供试品溶液。另取白术对照药
材 2g ,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法 (中国
药典 2005年版一部附录Ⅵ B)试验 ,吸取上述两种溶
液各 10μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合
剂的硅胶 G薄层板上 ,以石油醚 ( 30～ 60℃ )-乙酸乙
酯 ( 30∶ 15)为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干 ,喷以 5%对
二甲氨基苯甲醛的 10%硫酸乙醇溶液 ,加热至斑点
显色清晰。供试品色谱中 ,在与对照药材色谱相应的
位置上 ,显相同颜色的斑点。 空白样品无干扰 (见图
2)。
2. 含量测定
2. 1　色谱条件与系统适用性试验　以十八烷
基硅烷键合硅胶为填充剂 ;以甲醇-2%冰醋酸溶液
( 10∶ 90)为流动相:检测波长为 327nm。理论板数按
绿原酸峰计算应不低于 2000。
2. 2　对照品溶液的制备　精密称取绿原酸对
照品适量 ,置棕色量瓶中 ,加 50%甲醇制成每 1m l含
30μg的溶液 ,即得 ( 10℃以下保存 )。
2. 3　供试品溶液的制备　取装量差异项下的
本品内容物 ,研细 ,取约 0. 55g ,精密称定 ,置具塞锥
形瓶中 ,精密加入 50%甲醇 50ml ,称定重量 ,超声处
理 (功率 150w ,频率 40KHz) 30分钟 ,放冷 ,再称定重
量 ,用 50%甲醇补足减失的重量 ,摇匀 ,滤过 ,精密量
取续滤液 5m l,置 10m l棕色量瓶中 ,加 50%甲醇至刻
度 ,摇匀 ,即得。
2. 4　阴性溶液的制备　按处方量取缺杏香兔
耳风的其他药味 ,按供试品溶液制备方法制成阴性
溶液 ,即得。
2. 5　色谱分离及干扰试验　取绿原酸对照品
溶液 ,供试品溶液及阴性溶液分别进样 ,理论板数大
于 2000( n= 3) ,分离度大于 1. 5,阴性溶液在主峰绿
原酸出峰处无干扰 (见图 3、 4、 5)。
2. 6　标准曲线的制备　精密吸取 2. 2项下对
照品溶液 0. 5, 1. 5, 2. 5, 3. 5, 4. 5m1,分别置 10ml的
棕色量瓶中 ,加 50%甲醇至刻度 ,摇匀 ,分别进样
20μl,测定 .以峰面积为纵坐标 ,浓度为横坐标 ,计算
回归方程为 y= 5381+ 1523264x , r= 0. 9999。结果表
明:绿原酸对照品进样量在 0. 0594～ 0. 5348μg范围
内 ,其浓度与峰面积呈良好的线性关系。
2. 7　稳定性试验　取供试品溶液 ,每隔 3小时
测定峰面积一次 ,结果 RSD为 0. 6% ,可知供试品溶
液在 9小时内稳定。
2. 8　精密度试验　取同一批供试品溶液 ,连续
进样 5次 ,结果 RSD为 0. 6%
2. 9　重复性试验　取同批样品 5份 ,按供试品
溶液制备项下制备并测定 ,结果 RSD为 1. 2% 。
2. 10　回收率试验　精密称取已知含量同一批
号 (批号: 050401,含量: 1. 56mg /粒 )的样品 ( 10粒
重: 1. 7254, X= 0. 4725,置具塞锥形瓶中 ,分别精密
加入绿原 酸对 照品溶 液 (每 1m l含 绿原 酸
0. 2476mg )各 3. 5ml ,按拟定方法制备供试品溶液 ,
依法测定 ,结果平均回收率为 98. 9% , RSD为
0. 9% 。详见下表 1。
表 1　回收率试验结果
编号 样品称样量 ( g)
样品中绿原酸
含量 ( mg )
加入绿原酸
量 ( mg)
测得绿原酸
总量 ( mg)
回收率
(% )
平均回收率
(% )
RSD
(% )
1 0. 2700 0. 8914 0. 8666 1. 7539 99. 5
2 0. 2693 0. 8891 0. 8666 1. 7363 97. 8
3 0. 2650 0. 8749 0. 8666 1. 7426 100. 1 98. 9 0. 9
4 0. 2591 0. 8554 0. 8666 1. 7106 98. 7
5 0. 2609 0. 8614 0. 8666 1. 7143 98. 4
　　 2. 11　样品含量测定　分别精密吸取对照品溶
液 10μl与供试品溶液 15μl,注入液相色谱仪 ,测定 ,
即得。
结果显示: 10批样品中 ,每粒最高含量为
2. 12mg,最低为 1. 18mg ,故暂定本品每粒含杏香兔
耳风以绿原酸 ( C16H18O9 )计 ,不得少于 1. 0mg。
三、讨论
1. 本品原复方杏香兔耳风颗粒鉴别方法为化
学试管法 ,专属性差 ,改为专属性强的薄层色谱法。
2. 本品原剂型无含量测定 ,增加了 HPLC法测
59Drug Standards o f China 2007, v o l. 8 No. 3 中国药品标准 2007年第 8卷第 3期　 (总 219)
定杏香兔耳风中绿原酸含量 ,结果准确 ,精密度及重
复性均好 ,能更好地控制本品质量。
参考文献
[1 ]宋有昕 ,昌武清 .高效液相色谱法测定杏香兔耳风药材中绿原酸
含量 [ J]江西中医学院学报 , 2005, 17( 2): 36.
[2 ]江西省中药材标准 1996年版 122～ 123页。
[ 3]张贵君主编 ,常用中药鉴定大全 ,黑龙江科学技术出版社 1992:
247。
作者简介:王红梅 ,女 ,副主任药师 /学士。 学科及研究方向:药物分析。 联系电话: 5619833。
HPLC法测定硝酸异康唑软膏中的硝酸异康唑的含量及有关物质
王红梅　张水龙 (厦门市药品检验所　厦门 361012)
摘要　目的:建立高效液相色谱法 ,测定硝酸异康唑软膏中的硝酸异康唑的含量及有关物质。 方法: 用 ZORBAX Ex tend C18
( 250mm× 4. 6mm, 5μm)色谱柱 , 2%醋酸铵溶液 -甲醇-乙腈 ( 270∶ 375∶ 355)为流动相 ,检测波 K为 235nm。结果:硝酸异康唑
与硝酸益康唑的分离度大于 5. 0及检出灵敏度完全达到要求 ,最小检出量为 0. 02μg。浓度在 40～ 250μg· mL- 1内线性关系良
好 ( r= 1. 0000, n= 6)。平均回收率为 101. 1% , RSD为 1. 1%。结论:本方法准确、简便、快速 ,能有效控制硝酸异康唑软膏的质
量。
关键词: 高效液相色谱法 ;硝酸异康唑 ;含量 ;有关物质
中图分类号: 921. 2　　　文献标识码: A　　　文章编号: 1009-3656( 2007) -3-60-3
Study on the Content of Isoconazole Nitrate and Determination of Its Related Substances In
Isoconazole Nitrate Cream by HPLC
Wang Hong-mei, Zhang Shui-long( X iamen Inst itute for Drug Control , X iamen 361012)
Abstract Objective: To establish an HPLC method fo r the Content of Iso conazole Nitr ate and th e dete rmination o f its r ela ted
substances in Isocona zo le Nitra te Cream . Method: ZORBAX Ex tend C18 co lum n was used with 2% ammonium aceta te-
methanol-acetonitrile( 270∶ 375∶ 355) as the mobile pha se. The de tection w aveleng th was a t 235nm. Results: The r eso lution
w as acceptable. The detection w as 0. 02μg. The 1inea r range w as 40～ 250μg· m L- 1 ( r= 1. 0000, n= 6) . The average recover y
w as 101.% ( RSD= 1. 1% ) . Conclusions: This method is accurate , simple and sensitiv e. It can be used to contr ol the quality of
Isocona zo le N itra te Cream.
Key words　 HPLC; Isocona zole Nit rate; Assay; Related Substances.
　　硝酸异康唑软膏 ( Isoconazo le Ni trate Cream )
为抗真菌药 ,主要用于皮肤浅表真菌感染 ,疗效显
著 ,临床上应用广泛。 《中国药典》未收载 ,收载的硝
酸咪康唑是硝酸异康唑的同分异构体 ,英国药典收
载了硝酸异康唑阴道片 ,美国药典未收载。为了控制
其质量 ,本文采用高效液相色谱法测定硝酸异康唑
软膏的含量及有关物质 ,方法简便、快速、专属性强。
一、仪器与试药
Agi llent 1100高效液相色谱仪 ,甲醇、乙腈均
为色谱纯 ,醋酸铵为分析纯。硝酸异康唑软膏 (批号
为 040228, 040305, 040330)和硝酸异康唑对照品 (批
号为 023002,含量为 99. 68% )均由进口公司的国内
代表处提供 ,硝酸益康唑对照品 (批号为 0214-9802)
由中国药品生物制品检定所提供。
二、方法及结果
1. 色谱条件: ZO RBAX Ex tend-C18 ( 250mm×
4. 6mm , 5μm) ;流动相: 2%醋酸铵溶液 -甲醇 -乙腈
( 270∶ 375∶ 355):流速为 2. 0mL· min- 1 ;检测波长
235nm。 硝酸异康唑与硝酸益康唑的分离度应大于
5. 0。
2. 系统适用性实验
取硝酸异康唑对照品和硝酸益康唑对照品适
量 ,用流动相制成含硝酸异康唑对照品和硝酸益康
唑分别为 0. 1mg· mL- 1的溶液 ,按上述色谱条件 ,
取 20μL注入液相色谱仪中 ,记录色谱图 ,结果见图
1。硝酸异康唑与硝酸益康唑的分离度大于 5. 0,硝酸
异康唑的理论板数大于 6000。
　　 3 .线性关系及范围　精密称取对照品约
60 中国药品标准 2007年第 8卷第 3期　 (总 220) Drug Standards o f China 2007, v ol. 8 No. 3