全 文 ：食 品 科 技
FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY食品开发
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2016年 第41卷 第04期
收稿日期：2015-10-15 *通讯作者
基金项目：国家级大学生创新创业训练项目(201210564183)；广东省科技计划项目(2012B061700094)。
作者简介：崔明汉(1991—)，男，硕士研究生，研究方向为制药工程。
崔明汉，李 东，邓亚利*
(华南农业大学制药工程系，广州 510642)
摘要：目的：五指毛桃单味药材及其复方提取工艺研究；复方质量标准、抗氧化活性研究。方
法：单味药材分别采用95%乙醇提取(A)、水提取(B)、水中加入猪肉提取(C)；补骨脂素的含量采
用高效液相色谱法(High-performance liquid chromatography，HPLC)测定；多糖含量采用紫外分光
光度法测定；抗氧化活性采用氧化时间法、总还原力进行综合评价。结果：A、B、C三种提取
方法，分别可提取出0.469、0.098、0.387 mg补骨脂素；每100 g稠膏的多糖含量分别为0、5.29、
3.12 g。故确定复方的提取工艺：五指毛桃先醇提，再与复方合并水提。补骨脂素、水溶性多糖
含量分别为0.383 mg/g药材、31.5 g/100 g稠膏。复方稠膏质量标准中：五指毛桃、茯苓、大枣采
用薄层色谱(Thin-layer chromatography，TLC)进行定性分析；HPLC对补骨脂素进行定量分析。抗
氧化能力结果显示：复方＞C＞B＞A。结论：采用先醇提后水提的制备工艺，能有效提出五指
毛桃中的多种有效成分；与单味药材相比，组成复方后抗氧化能力增强，可为进一步的食品开
发提供依据。
关键词：五指毛桃；补骨脂素；多糖；抗氧化
中图分类号：TS 255.43 文献标志码：A 文章编号：1005-9989(2016)04-0110-05
Extraction preparation, quality standard and antioxidant activity of
Ficus hirta Vahl and other herbs
CUI Ming-han, LI Dong, DENG Ya-li*
(South China Agricultural University, Department of Pharmaceutical Engineering,
Guangzhou 510642)
Abstract: Purpose: To investigate the extraction preparation, quality standard and antioxidant activity of
Ficus hirta Vahl, with or without other herbs. Methods: Ficus hirta Vahl was extracted by three different
solutions, which there were alcohol, water and broth respectively, corresponding mathod A, B and C. The
psoralen and polysaccharide content of different methods were compared. Psoralen was analyzed by
high-performance liquid chromatography(HPLC). Polysaccharide was evaluated by UV spectrophotometer.
The oxidation time and reducing power were used to evaluate antioxidant activities comprehensively.
复方五指毛桃稠膏的制备工艺、质量
标准及抗氧化活性研究
DOI:10.13684/j.cnki.spkj.2016.04.022
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在中国民间，人们常将一些滋补的中药材用
于日常饮食的烹调中，使食物在果腹的同时发挥
保健补益等功效，五指毛桃(Ficus hirta Vahl)便是
这类中药材中的一种。五指毛桃为桑科植物粗叶
榕(Ficus hirta Vahl.)的干燥根，味辛、甘，性平，
具有益气健脾补肺、利湿舒筋的功效，属补益
类中药。其为岭南常用中药，又名牛乳木、土黄
芪、南芪、五爪龙、五爪毛桃等[1]。
五指毛桃水提物具有调节免疫功能、抗应激
及补血的作用，水提液含有多糖类成分。文献报
道，五指毛桃的主要活性成分为补骨脂素，其为
呋喃香豆素类化合物，具有抗菌、抗病毒、抗凝
血、抑制肿瘤、免疫调节等作用，并对红细胞系
统的造血有一定的促进作用，而乙醇提取法能有
效提取补骨脂素和佛手内酯等成分[2-3]。
五指毛桃在广东民间被称为“广东人参”，
也是民间流传甚广的“煲汤料”，其应用历史悠
久，保健作用广为认可。五指毛桃常与猪肉(五花
肉)、鸭肉等加水同煮煲汤食用，在提高汤料口感
的同时[4]，此种制备工艺，是否有利于补骨脂素与
多糖类成分的溶出，需实验论证；民间用五指毛
桃煲汤时，会加入大枣(Fructus Ziziphi Jujubae)、
当归( Angelica sinensis)、茯苓(Poria cocos)、薏苡
仁(Semen Coicis)等其他药食两用的药材，组成复
方，其合理性也需实验论证。
本研究的目的是比较五指毛桃单味药材，3种
提取方法所得稠膏中补骨脂素、多糖含量，即采
用95%乙醇提取(A)、水提取(B)、水中加入猪肉提
取(C)，在此基础上确立复方提取工艺，并制定复
方稠膏质量标准；比较单方与复方抗氧化能力，
为复方五指毛桃功能性食品的组方合理性提供科
学依据，为该产品的大生产、质量控制及上市奠
定基础。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
五指毛桃：广东河源金源绿色生命有限公
司，经鉴定为粗叶榕Ficus hirta Vahl. 的根，洗净，
晾干；茯苓：广东紫和堂大药房；大枣：广东和
翔制药有限公司；白术：广州至信中药饮片有限
公司；110739-200814补骨脂素标准品、110833-
200302葡萄糖标准品：中国药品生物制品检定
所；甲醇：色谱纯，德国默克公司；水：蒸馏
水；其余试剂为分析纯。
1.2 仪器与设备
Waters 600-2998高效液相色谱仪：美国Waters
公司；十八烷基硅胶色谱柱(Ecosil C18-Extend，
250 mm×4.6 mm，5 μm)：广州Lubex公司；
UV2300紫外可见分光光度计：上海天美公司等。
1.3 单味药材提取工艺研究
1.3.1 单味药材稠膏的制备 (1)称取五指毛桃干
燥药材200 g，用10倍量95%乙醇浸泡1 h[5]后，加
热回流提取2 h，趁热滤取药液；药渣再加8倍量
95%乙醇回流提取1 h，合并2次滤液，用旋转蒸
发仪减压浓缩至稠膏备用(相对密度为1.30~1.35，
80 ℃)。
(2)称取五指毛桃药材200 g，用10倍量(M/V)蒸
馏水浸泡1 h后，加热煮沸1 h，趁热滤取药液；再
加8倍量水，煮沸30 min，合并两次滤液，浓缩至
稠膏备用。
(3)称取五指毛桃药材200 g，猪肉200 g，其制
备工艺同(2)。
Results: Psoralen in per gram of Ficus hirta Vahl were 0.469 mg (A), 0.098 mg (B) and 0.387 mg (C).
Polysaccharide content in per hundred gram of extraction were 0g (A), 5.29 g (B) and 3.12 g (C). Then
the extraction preparation of Ficus hirta Vahl with other herbs was as follows: Ficus hirta Vahl was
extracted by 95% alcohol and the solution were fi ltrated. The fi lter risidue with other herbs were extracted
by water. And the extraction of psoralen was 0.3825 mg/g and polysaccharide was 31.5 g/100 g. The
qualitative analysis includes Ficus hirta Vahl, Poria cocos, Fructus Ziziphi Jujubae was by thin-layer
chromatography(TLC). And the quantitative analysis of psoralen was by HPLC. Antioxidant activity:
Ficus hirta Vahl with other herbs＞C>B＞A. Conclusion: It is an effective way to extract different polar
active ingredients from Ficus hirta Vahl by alcohol or water. Ficus hirta Vahl with other herbs have more
antioxidant activity than itselve’ s only.
Key words: Ficus hirta Vahl; psoralen; polysaccharose; antioxidant
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1.3.2 HPLC法测定补骨脂素的含量 色谱条件：
色谱柱为LubexEcosilC18；流动相：甲醇与水[6-8]
(60:40 )；检测波长：254 nm；流速：1 mL/min；温
度：30 ℃；进样量：10 μL。
对照品溶液的制备：精密称取补骨脂素对照
品适量，加甲醇制成浓度为40 μg/mL的溶液，
即得。
供试品溶液的制备：精密称取稠膏0.5 g，
置具塞锥形瓶中，加甲醇100 mL，精密称定，超
声[9](功率为功250 W，频率33 kHz)提取 40 min，
放冷，再精密称定，用甲醇补足减失的质量。摇
匀，过滤，弃去初滤液，取续滤液，用0.22 μm微
孔滤膜过滤，即得。
1.3.3 紫外分光光度法测定多糖含量 标准曲线的
制定：精密称取葡萄糖(105 ℃干燥3 h)适量，加
甲醇配制成浓度分别为24.0、57.6、91.2、128.4、
158.4 μg/mL的对照品溶液系列。分别移取2 mL置
10 mL容量瓶中，再加入4%苯酚溶液1 mL，摇匀
后迅速加入7 mL浓硫酸，摇匀后于40 ℃水浴中保
温30 min，取出，置冰水浴中5 min，取出，摇匀
后静置10 min，在490 nm测吸收度。
供试品溶液的制备：精密称取稠膏2 g，分别
加入80%乙醇50 mL，超声5~10 min(功率为功250
W，频率33 kHz)，成混悬液后，避光静置过夜。
过滤，滤渣置红外干燥箱干燥。滤渣适量水加热
溶解，定容置50 mL容量瓶中，再吸取0.5 mL定
容置25 mL容量瓶中，分别移取2 mL，同按上述
标准曲线的步骤操作，测定样品溶液在490 nm吸
光度[9-10]。
1.4 复方五指毛桃稠膏的制备
处方中的五味药材按《中国药典》2015年版
一部各药项下有关规定净选或炮制，备用。五指
毛桃净选。取五指毛桃干燥药材粉碎成粗粉，用
95%乙醇浸泡1 h后，冷凝回流2 h，趁热滤取药
液；再加95%乙醇回流提取1 h，合并2次滤液，
减压浓缩成稠膏备用。保留药渣。将除大枣外的
三味药材粉碎成粗粉，大枣直接加入，与药渣合
并，加水煎煮二次，第一次3 h，第二次2 h。合并
煎液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.30～
1.35(80 ℃)的稠膏。
1.5 复方五指毛桃稠膏的质量标准研究
1.5.1 五指毛桃TLC 精密称取稠膏3 g，加醋酸乙
酯50 mL，超声25 min，过滤，滤液浓缩至干，加
醋酸乙酯2 mL，作为供试品溶液。另取五指毛桃
对照药材5 g，同法制成对照药材溶液。另取补骨
脂素对照品，加醋酸乙酯溶解，制成每1 mL含2
mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中
国药典》2015年版通则：编号0502)试验，吸取上
述3种溶液各3 μL，分别点于同一硅胶G薄层板
上，正己烷-三氯甲烷-乙酸乙酷-甲酸(20:4:5:0.7)
饱和10 min后展开，晾干，置紫外光灯(365 nm)下
检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位
置上，显相同颜色的荧光斑点。
1.5.2 茯苓TLC 精密称取稠膏1 g，加丙酮100
mL回流提取1 h，过滤，取滤液水浴浓缩至约0.5
mL，作为供试品溶液。另取茯苓对照药材1 g，
加丙酮20 mL回流提取1 h，过滤，滤液浓缩至约
0.5 mL，作为对照药材溶液。吸取上述2种溶液各
15~20 μL，点于硅胶G薄层板，以石油醚(60~90
℃)-乙醚(1:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以
10%磷钼酸乙醇溶液，在100 ℃加热至斑点显色清
晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位
置上，显相同颜色的斑点。
1.5.3 大枣TLC 精密称取稠膏1 g，加水40 mL使
溶解，过滤，取滤液用水饱和的正丁醇提取2次，
每次20 mL，合并正丁醇液，用正丁醇饱和水洗
涤2次，每次20 mL，分取正丁醇液蒸干，残渣加
1 mL甲醇使溶解，作为供试品溶液。另取大枣对
照药材2 g，加水煎煮1 h，过滤，滤液浓缩至20
mL，同法制成对照药材溶液。吸取上述2种溶液
各5 μL，点于硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸
注：A.标准品HPLC图；B.样品HPLC图；1.补骨脂素色谱峰。
图1 复方五指毛桃稠膏HPLC图
A
B
-1
-1
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-水(3:1:0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以
10%硫酸乙醇溶液，在100 ℃加热至斑点显色清
晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位
置上，显一个相同的褐色斑点。
1.5.4 复方五指毛桃稠膏中补骨脂素的含量测定
色谱条件、样品溶液的制备依照1.3.2项，色谱图
见图1。
1.6 采用氧化时间法测定抗氧化能力
1.6.1 对照品溶液的制备 称取Vc粉末适量，加水
制得0.001 mg/mL溶液。
1.6.2 样品溶液的制备 取稠膏约0.5 g，精密称
定，分别置锥形瓶，加入50%乙醇10 mL，50 ℃超
声提取30 min，取出，冷却，过滤，滤液置50 mL
量瓶中，加水至刻度，摇匀。稀释2倍后备用。
1.6.3 氧化时间的测定 吸取对照品溶液、样品溶
液各10 mL，置具塞锥形瓶中，立即加入20%硫酸
溶液2 mL，振摇1 min，立即加入0.02 mol/L高锰酸
钾溶液0.05 mL，计时，当溶液的紫红色完全消褪
时，记录时间，时间越长抗氧化能力越强[10]。
1.7 总还原力的测定
吸取1.6 . 1项中的对照品溶液、样品溶液
各0.1mL，分别加入2.5 mL磷酸盐缓冲液(0.2
mol/L，pH=6.6，0.2 mol/L Na2HPO4：0.2 mol/
L NaH2PO4=37.5:62.5)及5.0 mL 1%(w/v)铁氰化钾
K3[Fe(CN)6]溶液，于50 ℃水浴反应20 min后迅速冷
却，加入2.5 mL 10%(w/v)的三氯乙酸(TCA)溶液，
混匀，3000 r/min离心10 min，取上清液2.5 mL，
加入2.5 mL蒸馏水和0.5 mL 0.1%(w/v)的氯化铁溶
液，混合均匀，10 min后于700 nm处测定其吸光
值，以蒸馏水为空白，吸光值越大表示还原力越
强[11-14]。
2 结果与分析
2.1 多糖含量测定标准曲线
以吸光度为纵坐标，以浓度(μg /mL )为
横坐标，进行线性回归，得回归方程为：
y=0.0383x+0.1101(R2=0.9994)表明浓度在2.40~15.84
μg/mL之间，葡萄糖标准品浓度与490 nm吸光度
呈线性关。
2.2 提取工艺研究结果
A、B、C 3种提取方法，每克药材提取的补
骨脂素含量分别为0.469、0.098、0.387 mg；每100
g稠膏的多糖含量分别为0、5.29、3.12 g。故复
方的提取工艺确定为：五指毛桃先用95%乙醇提
取，再与茯苓、大枣等药材加水提取，脂溶性补
骨脂素、水溶性多糖提取率均较高，含量分别为
0.383 mg/g药材、31.5 g/100 g稠膏。
2.3 TLC定性分析结果
复方五指毛桃稠膏中，五指毛桃、茯苓、大
枣TLC图见图2~图4。
注：1.药材对照品；2~4.复方稠膏样品；5.阴性对照。
图4 大枣TLC图
注：1.补骨脂素标准品；2.药材对照品；3~5.复方稠膏样品；6.阴性对
照品。
图2 五指毛桃TLC图(365nm)
注：1.药材对照品；2~4.复方稠膏样品；5.阴性对照品。
图3 茯苓TLC图
2.4 抗氧化活性实验
2.4.1 氧化时间 样品氧化时间结果：Vc、水提样
品、水提加肉样品、醇提样品、复方样品依次为
(67.32±0.34)s/g、(68.98±0.40)s/g、(182.00±0.38)
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s/g、(20.58±0.33)s/g与(261.06±0.44)s/g(n=3)。结
果表明：抗氧化活性由强到弱依次是复方稠膏＞
水提稠膏＞Vc＞乙醇提取的稠膏。
2.4.2 总还原力 样品吸光度测定结果为：
Vc、水提取样品、水提加肉、醇提样品、复
方样品依次为(0.529±0.023)、(0.253±0.043)、
(0.317±0.032)、(0.103±0.022)、(0.365±0.041)
(n=3)。吸光度的值越大表示样品对铁氰化钾的还
原力越强，即抗氧化活性越强。结果表明：还原
力由强到弱依次为Vc＞复方稠膏＞水提稠膏＞醇
提稠膏。
3 结论
单味药材3种提取方法，95%乙醇回流提取
所得补骨脂素含量最高，其次是加肉煎煮，肉中
含有脂肪类物质，有利于脂溶性成分补骨脂素的
溶出，故与单纯的水提相比，应用更加合理。水
溶性多糖类成分以水提取最高，而95%乙醇不能
将多糖类成分提出。故综合考虑2种极性有效成
分的提取，复方的提取工艺确定为：五指毛桃先
用95%乙醇提取，再与茯苓、大枣等药材加水提
取，脂溶性补骨脂素、水溶性多糖提取率均较
高，有利于中药多组分发挥协同作用，有利于药
材的有效利用。
本复方以药食同源的五味中药组成，从中医
理论方面分析，五指毛桃为君药，大枣、当归为
臣药，茯苓、薏苡仁为佐药，适用于气血不足、
脾失营运、湿气阻滞所致的病症。从有效成分方
面分析，大枣、当归、茯苓、薏苡仁均含有多糖
类成分，多糖类含量高于单味药材[15-20]，而多糖
类成分有抗老化、延缓衰老的作用，与单味药材
相比，组成复方后抗氧化能力增强，提示中药复
方制剂的协同作用。
本复方采用先醇提后水提的制备工艺，与
传统的加肉煲汤法相比，更适用于工业化的大生
产；所制备的五指毛桃复方稠膏，对其中五指毛
桃、茯苓、大枣三味药材进行了定性分析；采用
高效液相色谱法对君药五指毛桃的香豆素类成分
进行含量测定，从而保证了大生产工艺的可控
性，成品质量的稳定性。
综上所述，本文使用现代技术对五指毛桃及
其复方药材中有效成分进行提取，制得了具有抗
氧化作用的复方五指毛桃稠膏，并制定出相关质
量标准。该稠膏的制备工艺与质量标准，可作为
相关功能性食品的开发基础，如饮料、汤膏和冲
剂等，具有较好的开发潜力。
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