全 文 ：中目药师2 即 年第 10 卷第 5期C h `n ah Pm a rc a`s , 2的 7 . V o l· ’ 0 N o ·
西河柳中撇皮素与异鼠李素在植物体内分布及随季节变化
宋霞林 (常德市第一人民医院 湖南常德 41 50 3) 黄子君 (湖南省常德市第一 中医院 )
摘 要 目的 : 建立西河柳 中拼皮素与异鼠李素的 H PCL 测定方 法 ;研究拼皮素与异氛李素在西河柳不 同部位的分布及随季
节变化的规律。 方法 : 以 NUC比O D U R I加一 C: 。柱 ( 150 m m x 4 . 6 m m , 5 卜m ) ,甲醉刃 . 4% 碑酸溶液 ( 50 , 50 ) 为流动相 ,流速为
0
.
8 耐 · m in 一 ’ ,柱温为 30 ℃ ,检测波长为 360 n m 。 结果 : 拼皮紊与异风李素线性范围分别为 : 0 . 17 一 1 . 01 阴 ( r 二 0 . 9 7 ) 和
0
.
19 · 。 . 95 此 ( r 二 0 . 9 9 6 ) , 回收率分别为 : 102 . 3 % , 10 . 7% 月5 0 4 . 0 , 3 . 1% ; 西河柳中拼皮素与异民李素含黄随季节的变
化而变化 ,且不 同部位有不同的含 1 。 结论 : 该方法可用于控制西河柳药材质童 ;西河柳中拼皮素与异鼠李素含全按春 、 夏 、
秋次序依次降低 ,在嫩技叶中含 1 最高。
关 I 切 西河柳 ;拼皮紊 ; 异裁李紊 ;含责 ; 高效液相色讲法
中圈分类号 : 2R 82 . 4 文献标识码 : A 文章编号 : 10 8供9 x( 2X() 7 )05 拱59 刁 3
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er s伴 e tiv e l y· hT e e o n te n t of 甲e o e t in an d i so ht axn n e t i n i n C ac u me n tam而 e i s仓 , v iar ab le by s e as o n an d di fe er n t i n d硫 er n t p a rt . .
C on c】su io n : hT e m e ht do e an be u s e d fo r c o n tor l ht e q u al i yt fO Cac u m e n t别旧 iar e i s . hT e e o n te n t of qU e cr e t i n an d iso ht amn
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K E Y WO R D S C
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e i s ; Qu e cr
e t i n ; Is o ht am
n e t in ; Co n te nt ; HP LC
.
西河柳 ( aT 。 心 ch ine o is 助ur )又称怪柳 、 西湖柳 、 山川 榭皮素对照品 (中国药品生物制品检定所 , 批号 : 1《拟 ) 8 1 -
柳 ,为怪柳科植物灌木或小乔木。 分布自华北至长江中下游 20( 目肠 , 120 ℃干燥 4 h 后按 97 . 3% 计 ) ;异鼠李 t 对照品 (中
各省 .向南至广东 、广西 、云南各地 ,多栽培川 。 干燥细嫩枝 国药品生物制品检定所 ,批号 : 1108 60 一 204 伪 ) ;
叶人药 ,具疏风 ,解表 ,透疹 、 解毒功能 ; 主治风热感冒 、麻疹 1 . 3 药材
初起 、疹出不透 、风湿痹痛 、皮肤痰痒 2[] 。 研究表明其干燥嫩 试验用药用植物采集于湖南常德 ,为栽培 ,经湖南中医
枝叶中含有栅皮素 〔’ 〕、 异鼠李家闭 。 中国药典历版均有收 药大学周日宝教授鉴定为怪柳科植物怪柳 ( 几琳公认 hc
~
自
载 ,但其质量标准简单 ,仅有外观形状描述 。 民间在秋 、冬 、 _ _ _ _ 、
~
, `二六~ 里 人 ’ ` 再 ’ , 一 , 认 门 / ’ ~ I “ ’ v 、 J因 ~ “ 卜 M ’ , 阵 M、 、 一 、 助 ur ) 。季 ,常用其茎 、枝替代其干燥嫩枝叶 ,疗效不减 。 为控制西河 。 一一 、 ~ .痴药益募奚筷茜石桑燕薪药遏幕裱幕岌益美盆芬写 2 方法与结果一 _ ,` 云 二 ` ~ ~ , “ 一一~ 一 ~ ~ 一。 J 二` 二 。 。二 ~ , 一、 . 2 . 1 色讲条件药理作用的相关性 ,本文建立了测定栅皮素与异鼠李素含量 一“ ~ ` , `” “的 Hp L C 方法 ,并对其在嫩枝叶 、皮 、木部的分布及随季节的 色谱柱 : N UC比 o D U R l o 一 e : . ( 150 m m x 4 . 6 m m , 5
变化作了相应的考察。 卿 ) ;流动相 : 甲醇刁 . 4% 磷酸溶液 (5 o : 50) ; 流速 : 0 . 8 耐 ·
1 仪器与试药 m i n 一 , ;柱温 : 35 ℃ ;检测波长 : 360 n m ,进样 t 2 0 闪。
1
.
1 仪器 2 . 2 材料采集与处理
高效液相色谱仪 : 岛津 LC 一 or AvP ( L c 一 10 vA p 输液泵 , 以农历清明节 、端五节 、 中秋节 、 冬至分别为春 、 夏 、 秋 、
SDP
·
M1 0 AvP 二极管阵列检测器 ; c T O一 10 AvP 柱温箱 ; s c L 冬的采集季节 ; 取采集材料 , 去杂质 、 洗净 、 沥 干水 (茎去
10 A vP 系统控制器 ; lC as s 一v户 . 0 工 作站 ;) 天平 : s aI’t o iur 。 皮 ) 、阴干 、 研碎 、过五号筛 ,取粉末用于实验 。
C凡25 D 。 2 . 3 供试品溶液的制备
1
.
2 试别与试药 取细粉 ( 叶 )约 1 . 5 9 (皮及木部取约 12 9 ) ,精密称定 (同
甲醉为色谱纯 ,磷酸、 盐酸均为分析纯 ,纯化水 (自制 ) ; 时按规定 3[] 测定水分 ) , ! 索氏提取器中 ,加三抓甲烷 20 d
作者简介:宋该林 ,男 ,副主任药师 , 主要从事质检工作。 elT : 1 301 7 25 7侧犯 E 一耐1:威 32 @ yha o . 。。 m . 。 n
试天夕
w 脚 W· zgy s .0飞 研究报告
t 水浴提取近无色 (约 Zh );挥干三氛甲烷 ,取残渣 ,用水约
s d 湿润 、过夜 ,于索氏提取器中 ,用甲醉 20 耐提取 6 h( 水
浴 ) 回收甲醇 ,残渣用甲醉一5 % 盐酸 ( :4 1 ) 12 . 5 动 回流 30
m in
,定量转移至里 25 耐量瓶中 ,放冷 ,用甲醇稀释至刻度 ,
摇匀 ,微孔滤膜滤过 ,取续滤液作为供试品溶液。
2
.
4 对照品溶液的制备
取搬皮素对照品 , 120 ℃ 干燥 4 h ,置干燥器中 ,冷却 ,精
密称取 17 . 30 吨 (按含 t 为 97 . 3% 计算为 16 . 83 m g ) ,置 50
园 t 瓶中 ,加甲醇溶解并稀释至刻度 ,即得懈皮素对照品贮
备液 (0 . 3 36 6 gm · 耐 一 ’ ;) 取异鼠李素对照品 , 精密称取
1
.
85 m g
,置 50 d 容量瓶中 ,加甲醇溶解并稀释至刻度 ,即
得异鼠李素对照品贮备液 ( 。 . 2 37 毗 ·耐 一 ’ ) 。
2
.
5 戏性关系试脸
分别精密量取搬皮素对照品贮备液 0 . 25 , 0 . 50 , 0 . 75 , 1 .
的 , 1 . 25 , l . 50 ml ! 10 耐量瓶中 ,加甲醇稀释至刻度 ,摇匀 ,
制得含懈皮素对照品的系列浓度溶液 ;分别精密量取异鼠李
家对照品贮备液0 . 25 , 0 . 50 , 0 . 75 , 1 . 的 , 1 . 25 , 1 . 50 , 2 . 佣 祖
里 10 耐 容量瓶中 ,加甲醉稀释至刻度 ,摇匀 .制得含异鼠李
素对照品的系列浓度溶液。 取懈皮素和异鼠李素对照品的
系列浓度溶液各 20 闪分别注人液相色谱仪 ,记录色谱图
(见图 1 : A 、 B ) 。 以对照品进样量 x (此 )对峰面积积分值 Y
进行线性回归 ,得拼皮素的回归方程 : Y 二 5 . 7 1 x 10` X + 1. 3
、 10 , , r = 0 .卿 7 ( n = 6 ) , 线性范围: 0 . 17 一 1 . 0 1 此 ;异鼠
李素的线性回归方程 : Y 二 4 . 95 / 1。忱 一 3 . 63 、 1护 , ; 二
0
.
99 6 ( n 二 7 )
,线性范围 : 0 . 19 一 0 . 9 5 卜g 。
时测定水份 ) ,置索氏提取器中 ,加三氛甲烷 20 耐 (水浴 )提
取近无色 (约 Z h ) ,挥干三氛甲烷 ,精密加人拼皮素 、异鼠李
素对照品贮备液各 1 耐 , 按 2 , 3 项下从 “ 置水浴中 ,加甲醉
20 耐提取 6 h ” 起 ,至经微孔滤膜滤过止取 20 闪进样 , 记录
峰面积 ,按外标法进行计算 ,结果见表 l 。
裹 1 回收率侧定绪. 《 n 二 6)
成份 样品中含 t 加人 t 实侧值 回收率 平均回收率
(哪 ) (叱 ) (叱 ) (% ) (% ) 脚( % )
拼皮家 0 . 25
0
.
26
0
.
25
0 27
0
.
25
0
.
27
0 34
0
.
34
异眼李素
0 50
O 46
O 49
0
.
34
O
,
34
0
.
34
0
.
34
O 24
0
.
24
0
.
24
0
.
24
0
.
24
0
.
24
0
.印
O 62
0
.
58
0
.
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0
.
59
0
.
64
0
.
70
0
.
72
0
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0
.
75
0
.
7 0
0
.
73
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105 9
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. 肠
102
.
9
1的 . 0
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.
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.
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.
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.
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0
2
.
9 样品浏定
分别取春 、 夏 、 秋 、 冬季采集的药材按 2 . 2 项 、 2 . 3 项下
操作 , 20 闪进样 ,记录峰面积 ,按外标法计算其含量 ,结果见
表 2 。
衰 2 拼皮 , 、 异皿李班含 . 侧定结 . ( n 二 3 !
季节 成分 嫩枝叶中含量 树皮中含 t
拼皮素
异鼠李素
懈皮素
异鼠李素
椒皮素
异鼠李素
拼皮素
异鼠李素
(% )
0
.
0 8
0
.
1 1
0
.
05
0
.
0 7
0
.
0 3
0
.伪
% )
.
0 1季夏春
你若且
. 一 ~. ~ ~ ~一 - ~ -~ , 一0 1 0 2 0
{ {
, 秋’
一一习 匕 州以一八炎一一 冬季10 20 30 10 2 0 3 0
0
.
0 7
0
.
0 1
0
.
05
0
.
0 1
0
.
05
0
.
0 1
0
. 肠
10 20 30
叹m ln )
D
A
. 椒皮家对照品
D
. 树皮 E . 木部
圈 1
《而 n )
C止一 `一一 ~一一 ~ ,
2
.
6 精密度试脸
精密量取同一对照品溶液 ,重复进样 5 次 , 每次 20 川 ,
测定拼皮素峰面积沐5刀 二 1 . 2% ( n 二 5 )洞时测定异鼠李素
的峰面积沂S D 为 1 . 1% ( n 二 5 ) 。
2
.
7 德定性实脸
取 2 . 3 项下同一供试品溶液 (置冰箱内保存 )按 2 . 1 色
谱条件测定峰面积 .每 l h 测定一次 ,共 5 次 ,拼皮素沂5口 =
1
.
7%
,异鼠李素为 月5刀 二 2 . 6% ( n 二 5 ) 。
2
.
8 加样回收率试验
取已知含量秋季采集的叶粉末约0 . 75 9 ,精密称定 ( 同
注 : “ 一 ” 表示未测定
3 讨论
3
.
1 水解条件的确定 。 酸性条件选择 :参照银杏叶水解酸
度 [`〕 ;水解时间的确定 :精密量取 2 . 3 项下的同一甲醉提取
浓缩液 10 ml ,共 5 份 ,分别加人甲醇 : 25 % 盐酸溶液 ( 4 : l)
12
.
s d
,置水浴中回流 10 , 20 . 30 , 40 , 50 m i n ,再分别用甲醉
定容至 50 耐 ,微孔滤膜滤过 , 20 闪进样 ,记录峰面积 ,比较
其大小 ,结果为 : 20 m in 后其峰面积变化不大 ,栩皮素平均峰
面积为 94 7 8的 , RS D 二 1 . 7% , 异鼠李素峰面积为 76 9 147 ,
人5刀 二 1 . 4% ;表明 20 m in 样品水解完全 ,为确保实验结果 ,
选择水解时间为30 o in 。
3
.
2 由于样品中懈皮素与异鼠李素含量相对于其它样品
( 如银杏叶 )的含量低 ,故取样量较多 ,体积较大 ,所以样品
在回流提取过程中不宜捆扎过紧 ;用水浸过夜 ,是为了让样
品充分膨胀 ,有利于溶剂的渗透 、所研究成份的溶出 ,缩短提
取时间 ,虽然杂质相对增多 ,但不影响测定 ,实验证明 : 水浸
过夜后 ,再提取 ,测得结果的 RS D 比只用 甲醇提取结果的
五SD 小。
3
.
3 懈皮素与异鼠李家为黄酮醇类普元 ,为平面性结构 , 不
、 .
ha)
B订姚到人
l
”比.一砚习一
0 10 2 0 3 0
叹m 川 )
E
B
. 异鼠李索对照品 C . 叶
1
. 搬皮素 2 . 异鼠李素
HPLC 色讲口
尹公沙
中阅踌师2 加 7年第 10 卷第 5期C h ` n ah Px m a a c“` , 207 V o l. 10 N o . 5
超临界 C O : 萃取川苟挥发油的工艺研究
李秋怡 王光忠 干国平 刘众文 (湖北中医学院 武汉 43晰 l)
摘 要 目的 : 优选超临界 CO : 革取川芍挥发油的最佳工艺条件 。 方法 : 以川可挥发油 出油率和阿魏故的含黄为评价指标 ,
采用正交试脸优化超临界 C0 2 苹取川芍挥发油的工艺条件 。 结果 : 超临界 CO : 苹取川可油的最佳条件 : 苹取沮度 50 ℃ ,苹取
压力 35 MaP ,苹取时间 Z h , c o : 流 1 20 .L m in 一 ’ 。结论 : 该优选提取工艺条件德定可行。
关位词 川芍 ;挥发油 ;超临界 C O : 革取 ; G C
中圈分类号 : 2R 84 . 2 文献标识码 : A 文章绷号 : 10 8供 g X ( 2 0 7 ) 05 供 61 刁 3
S tU dy o n E x t r a eU o n cet h
n ol o gy of V ul a t Ue o U of 乙心u s公 u m hC au nx 勿gn oH rt b y su eP rC ir it ca l C O : n ul d e x ·
灯 a C廿O n
U Qi u y i
,
W an g uG an 参ho n g , aG n Gu o p i n g , U u Y an w e n ( H u be i C o l e罗 Of Tar di t i o n al Ch in e s e M e d i e i n e , W u han 4 30( 巧 l , Chi n a )
A B S T R A C T o bj eC廿v e : OT o p tim iz e th e e o n d it io n s of s u p e cr ir tic al if u i d ex atr e tio n fo r v o l a til e 0 11 Of U , s ti e u m Ch u a xn i o n g Ho rt ·
M曲 od : Re e vo e yr of v o l a t i le 0 11 an d th e e o n t e n t of fe ur li e ac id w e er u s e d as ht e i n dxe , th e e x tacr t io n t e e h n o logy fo r v o lat i le 0 11 of U , -
s it e u m Ch u axn i
o n g Ho rt w a s o p t im i z e d by th
e o rt h o即 n al d e s i , . ReS公 t: 仆 e OtP im al e x atr e t i o n e o n di t i o n s we er te m伴 ar tu er 60 ℃ ,
附 s s u er 35 M aP , t im e 2 h o u sr , n o w art e of C0 2 w as 20 L · m i n 一 1 . C o o c lus io n 二 hT e e x actr t i o n te e h n o lo盯 w as s tab le an d fo as i bl e .
KE
Y WO劝 S 纯山 t ic姗 hC au nx 必叮 H o rt ; v o l a t i le 0 11 ; s u eP er ir tie al l u id C O : ex atr e t io n ; G C
川夸为伞形科植物川苟纯山疵“ 。 hC au 。 勿gn Hort . 的
干燥根茎 ,具有行气活血 、祛风止痛的功效川 ,主要含有挥发
油 、生物碱 、苯酞类 、 酚酸类等成份 。 本实验采用 G C 内标法
测定其有效成份阿魏酸的含量 , 对超临界 Co : 萃取川芍挥
发油的提取工艺进行研究 ,优选最佳提取工艺条件 。
1 仪器与试药
气相色谱仪 ( SH IMA D z U G C一 14 C , F l n 检测器 , C以55 -
G a O色谱工作站 ) ,十万分之一电子天平 ( B P一 1I D , Sar’t ior -
us )
,
HA一21 40
一
11
一
C 型超临界萃取装置 (江苏南通华安公司
生产 ) 。
通讯作者 :刘众文 ,男 ,教授 , 主要从事中药及其制剂有效成分的研究工作。
阿魏酸对照品 (批号 : 07 3 一 10 , 中国药品生物制品检
定所提供 ,含量测定用 ) ,香荆芥酚对照品 (美国 iS gm 。 公司
提供 ,含量为 9 % ) ,川芍药材饮片购自湖北薪春药材市场 ,
经湖北中医学院鉴定教研室吴和珍博士鉴定为伞形科植物
纯山公unI ch ~ 如gn Hort
. 的干燥根茎 ,其他试剂均为分析
纯 。
2 方法与结果
2
.
1 正交试脸设计
根据影响超临界 C O : 萃取的各种因素条件 , 采用 肠
( 3
`
)正文表设计试验 ,见表 l 。
elT
:
(02 7 ) 8 8 9 2 0 83 4 E
· m巨l : yw liu @ p ub lie . w h . hb . e n
溶于水 ,易溶于甲醇 、 三抓甲烷等 ; 在植物体内与糖成昔存
在 ,水溶性增加 ,醋溶性降低 ,溶于热水 、 甲醇 、 乙醇等 ,而不
溶于苯 、乙醚 、 三抓甲烷等有机溶剂 〔’ 〕 ;故选用三氯甲烷除去
叶绿素 , 甲醇提取懈皮素与异鼠李素昔 ,再将所提取的昔在
甲醇 : 25 % 盐酸溶液 ( 4 , 1) 条件下水解得榭皮素与异鼠李
素 。 同理 ,在加样回收率实验中 ,选择对照品加人经三抓甲
烷处理后的样品中 , 避免椒皮素与异鼠李素昔元溶于三抓甲
烷中而被弃去 。
3
.
4 样品溶液常温下长时间存放不稳定 , 由于样品处理周
期长 ,测定操作应尽量在周内时间完成 、并置冰箱中保存 。
3
.
5 拼皮素 、 异鼠李素在嫩枝叶中含量随季节的变化
而变化 ,其中在春季中的含量最高 ,夏季次之 ,但夏季枝繁叶
茂 ,产 t 高。 拼皮素在嫩枝叶中含量最高 ,在植物皮内含 t
甚徽 ,在木部内含量为零 ;异鼠李素在植物体内分布有差异 ,
但差异不大 (木部除外 ) 。 根据民间用药的特点 , 即用茎替
代嫩枝叶的方法 。
, 考 文 献
中国科学植物研究所 . 《中国高带植物田鉴》第二册〔 M〕. 北京 : 科学出版
社 , 197 2 . 8 95
蔡光先 .谢昭明 ,潘远根 .等 . 湖南药物志〔M 〕. 长沙 :湖南科学技术出版杜 .
2以抖 . 29 5一卯7
张秀尧 ,凌罗庆 . 毛泉明 . 西河柳化学成分研究【J〕. 中草药 , 198 , , 20 ( 3 ) : -4
5
张秀尧 ,凌罗庆 , 王息康. 西河柳化学成分研究 ( n ) 【J〕. 中草药 . 1卯 l , 2
( 7 )
,
2卯一的
中网药典【S〕. 2X() 5 年版一部 . 附录 VI H . 47
中国药典〔5] . 2 0 5 年版一部 . 220
肖泉厚 . 中药化学【M 〕. 上海 : 上海科学技术出版社 . 19 7 . 2砧一76
( 2X( 巧折那 收稿 2以场· 10 一3 . 回 )
夕公丫