全 文 ：收稿日期：２０１２－０６－１１
作者简介：吴鞠（１９９０－），男，北京林业大学梁希实验班２００９级２班，研究方向：城市林业。
文章编号：１００２－２７２４（２０１２）０４－００９１－０２
天目琼花的微体快繁技术
吴　鞠１，法永乐２，朱翠英３，庞献伟４，王新花４
（１．北京林业大学２００９级梁希２班，北京１０００８３；２．日照市林业局；３．山东农业大学；４．泰山林科院）
摘要：以天目琼花带腋芽茎段为外植体，对天目琼花组织培养进行了系统的研究。旨在建立可用于工厂化繁殖的天目琼
花微体快繁技术体系，并为天目琼花的分子育种及相关研究提供技术支持。筛选出芽诱导培养基为 ＭＳ＋６－ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ＋
ＩＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ和增殖培养基）ＭＳ＋６－ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．３ｍｇ／Ｌ，增殖系数可达６倍；生根培养基为１／２ＭＳ＋ＩＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ，
２０天开始生根，３０天可产生３～８条粗壮的不定根，根长平均为２ｃｍ，生根率达到９０％。通过等量草炭土和蛭石的基质炼苗、
移栽，移栽成活率达８５％以上，实现微体快繁。
关键词：天目琼花；组织培养；快繁技术
中图分类号：Ｓ７２７．３＋７　　　　　　　　文献标识码：Ｂ　
　　目前天目琼花主要通过播种和扦插的方法繁
殖。但其种子休眠期长，播种繁殖困难，野生资源不
能满足实际需要，因此对其组织培养技术的研究显
得尤为迫切。天目琼花的组织培养和快繁技术尚未
见报道。
１　材料与方法
材料为天目琼花（Ｖｉｂｕｒｎｕｍ　ｓａｒｇｅｎｔｉｉ）带芽茎
段。
１．１　取材与消毒
在泰山南天门景区的后石坞山上采集幼树当年
萌发的幼嫩枝条，取回后放在流水中冲洗１ｈ，然后
在超净工作台上用０．１％升汞灭菌６～８ｍｉｎ，无菌水
漂洗５～６次，用无菌滤纸吸干材料上的水分，切割
长约１ｃｍ的带芽茎段，接种在培养基上。
１．２　培养条件
以 ＭＳ为基本培养基。
芽诱导培养基：（１）ＭＳ＋６－ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ＋
ＩＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ；（２）ＭＳ＋６－ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ　０．３
ｍｇ／Ｌ。
增殖培养基：（３）ＭＳ＋６－ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ＋
ＩＢＡ０．３ｍｇ／Ｌ。
生根培养基：（４）１／２ＭＳ＋ＩＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ。
以上培养基均添加３０ｇ／Ｌ蔗糖和６．５ｇ／Ｌ琼脂
粉，ｐＨ５．８。培养温度为（２５±２）℃，光照强度为
３０μｍｏｌｏｍ
－２ｏｓ－１，光照时间为１２ｈ／ｄ。
图１　增殖培养组培苗
２　结果与分析
２．１　生长与分化情况
经过１５天左右的培养，腋芽萌发并分化出２片
小叶；３０天左右在叶腋处分化出少量丛生芽，同时
茎段伸长至３ｃｍ左右。然后将其剪下进行增殖培
养，培养基（１）比（２）丛生芽分化率高。
２．２　增殖培养
在增殖培养基（３）上培养３０天后，形成大量丛
生芽，增殖系数可达６倍，同时苗高４ｃｍ 左右（图
１）。天目琼花增殖主要以丛生芽型和短枝发生型两
种途径形成再生植株。通过反复转接丛生芽，可在
较短时间里得到大量丛生芽，３０天左右为一个继代
周期。
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山东林业科技　　２０１２年第４期　　总２０１期　　ＳＨＡＮＤＯＮＧ　ＦＯＲＥＳＴＲＹ　ＳＣＩＥＮＣＥ　ＡＮＤ　ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ　　２０１２．Ｎｏ．４
图２　生根培养组培苗
２．３　生根培养
挑选生长健壮的无根苗接种到培养基（４）上，２０
天开始生根，３０天可产生３～８条粗壮的不定根，根
长平均为２ｃｍ，生根率达到９０％（图２）。
２．４　炼苗
挑选生长健壮、根系发达的生根组培苗，打开封
口膜在室内散射光条件下培养３～５天，然后用镊子
将试管苗从培养瓶中取出，洗净根部残留的培养基，
离体材料长度为１５～２０ｃｍ，粗度为０．５～０．６ｃｍ，材
料上端是平切口，距离顶芽２．５～３ｃｍ；在底芽的侧
下方０．５ｃｍ处剪成马耳形切口，切口要平滑。将下
部叶片全部摘除，只留最上端２片，并各剪去一半，
以减弱蒸腾作用。
离体材料剪好后，立刻将下切口浸入盛放有
５００×１０－６的ＡＢＴｌ号生根粉溶液的塑料容器中，浸
入深度为４ｃｍ，处理时间为３０秒，取出后即行移栽。
２．５　移栽
选含有等量草炭土和蛭石的基质，移栽前将基
质用０．３％高锰酸钾溶液淋透消毒，然后再用清水
冲淋３～５遍。先用粗度为０．８ｃｍ的木棍打孔，深
度为３ｃｍ，株行距为５ｃｍｘ５ｃｍ，每平方米４００株左
右，栽植后用食指和拇指轻压以利与基质密实。移
栽后７～１０天内覆盖塑料薄膜保湿并用遮荫网适当
遮阴，每天喷雾３～４次，随后逐渐降低湿度，增加光
照。１５天左右长出新根，移栽成活率达８５％以上。
３　讨论
天目琼花带芽茎段通过 ＭＳ＋６－ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ
＋ＩＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ进行分化培养；ＭＳ＋６－ＢＡ　２．０
ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．３ｍｇ／Ｌ培养基进行增殖培养；１／２ＭＳ
＋ＩＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ进行生根培养；移栽基质为等量草
炭土和蛭石的基质。在分化培养基上３０天左右在
叶腋处分化出少量丛生芽，同时茎段伸长至３ｃｍ左
右；在增殖培养基上３０天后，形成大量丛生芽，增殖
系数可达６倍，同时苗高４ｃｍ左右；在生根培养基
上，２０天开始生根，３０天可产生３～８条粗壮的不定
根，根长平均为２ｃｍ，生根率达到９０％；在移栽基质
上１５天左右长出新根，移栽成活率达８５％以上。
通过采取以上技术体系，可以实现天目琼花的微体
快繁。
参考文献：
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参考文献：
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山东林业科技　２０１２年第４期