全 文 ： ·592· Chin J Mod Appl Pharm, 2016 May, Vol.33 No.5 中国现代应用药学 2016 年 5 月第 33 卷第 5 期
across intestinal epithelium [J]. Biomaterials, 2012, 33(5):
1663-1672.
[11] ZHANG Z S, TAN, FENG S S. Vitamin E TPGS as a
molecular biomaterial for drug delivery [J]. Biomaterials, 2012,
33(19): 4889-4906.
[12] FISHBURN C S. The pharmacology of PEGylation: Balancing
PD with PK to generate novel therapeutics [J]. J Pharm Sci,
2008, 97(10): 4167-4183.
[13] BOCCA C, CAPUTOB O, CAVALLI R, et al. Phagocytic
uptake of fluorescent stealth and non-stealth solid lipid
nanoparticles [J]. Int J Pharm, 1998, 175(2): 185-193.
[14] TOBÍO M, SÁNCHEZ A, VILA A, et al. The role of PEG on the
stability on digestive fluids and in vivo fate of PEG-PLA
nanoparticals following oral administration [J]. Coll Surf B:
Bioinferfaces, 2000, 18(3/4): 315-323.
[15] TEXIER I, GOUTAYER M, DA SILVA A,, et al.
Cyanine-loaded lipid nanoparticles for improved in vivo
fluorescence imaging [J]. J Biomed Opt, 2009, 14(5): 054005.
Doi: 10.1117/1.3213606.
[16] ZHANG Z Q, QIN B, LI Z, et al. Preparation of paclitaxel
liposomes modified with mPEG-DSPE and its
pharmacokinetics in rats [J]. Chin Pharm J(中国药学杂志),
2008, 43(3): 199-202.
[17] YUAN H, CHEN C Y, CHAI G H, et al. Improved transport
and absorption through gastrointestinal tract by PEGylated
solid lipid nanoparticles [J]. Mol Pharm, 2013, 10(5):
1865-1873.
[18] WANG H X, WANG H Y, ZHANG M, et al.
Poloxamer188-PLGA nanodrug delivery system for
overcoming drug resistant tumor [J]. Chin J Mod Appl
Pharm(中国现代应用药学), 2014, 31(10): 1167-1170.
[19] XIN H, CHEN L, GU J, et al. Enhaneed anti-glioblastoma
efficaey by PTX-loaded PEGylated poly (-eaprolaetone)
nanopartieles: In vitro and in vivo evaluation [J]. Int J pharm,
2010, 402(l/2): 238-247.
收稿日期：2015-11-08



HPLC 同时测定大血藤中绿原酸、咖啡酸和香草酸的含量

荆彦民 1，马瑞丽 1,2*(1.定西市农业科学研究院，甘肃 定西 743000；2.江苏大学药学院，江苏 镇江 212013)

摘要：目的 建立同时测定大血藤各部位绿原酸、咖啡酸和香草酸含量的高效液相色谱方法。方法 色谱柱为 Kromasil
C18 柱(4.6 mm×250 mm，4.5 µm)，流动相：A 为 1%冰醋酸，B 为甲醇，以 A∶B=68∶32 等度洗脱；柱温：30 ℃；流
速：1 mL·min1；检测波长：327 nm；进样量：20 µL。结果 在测定样品中，绿原酸和咖啡酸在乙酸乙酯部位含量最
高，分别为 4.52%，0.11%，香草酸在二氯甲烷部位含量最高，为 5.8%。结论 该方法简便、准确、重复性高，可用于
大血藤中绿原酸、咖啡酸、香草酸含量的测定。
关键词：高效液相色谱法；大血藤；绿原酸；咖啡酸；香草酸
中图分类号：R917.101 文献标志码：B 文章编号：1007-7693(2016)05-0592-04
DOI: 10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2016.05.016

Simultaneous Determination of Chlorogenic Acid, Caffeic Acid and Vanillic Acid in Sargentodoxae
Caulis by HPLC

JING Yanmin1, MA Ruili1,2*(1.Dingxi Academy of Agricultural Sciences, Dingxi 743000, China; 2.School of Pharmacy,
Jiangsu University, Zhenjiang 212013, China)

ABSTRACT: OBJECTIVE To develop an HPLC method for simultaneous determination of chlorogenic acid, caffeic acid and
vanillic acid in each fraction of Sargentodoxae Caulis. METHODS The analysis was carried on a column of Kromasil C18(4.6
mm×250 mm, 4.5 µm). Isocratic elution, mobile phase consisted of solvent A (1%, solution of HAc in water) and solvent B
(methanol) at the ratio of 68∶32, the flow rate was 1.0 mL.min1, the injection volume was 20 μL, the detection wavelength was
327 nm, the column temperature was at 30 ℃. RESULTS Ethyl acetate fraction had the highest concentration of chlorogenic
acid (4.52%) and caffeic acid (0.11%) and dichloromethane fraction possessed the highest concentration of vanillic acid of 5.8%.
CONCLUSION This method is simple, accurate, rapid and suitable for the usual quality control of Sargentodoxae Caulis.
KEY WORDS: HPLC; Sargentodoxae Caulis; chlorogenic acid; caffeic acid; vanillic acid


基金项目：甘肃省定西市道地中药材产业化推广及惠民示范工程(S2013GMG100004)
作者简介：荆彦民，男，高级农艺师 Tel: 13993248301 E-mail: jym.86@163.com *通信作者：马瑞丽，女，硕士 Tel:
18209326620 E-mail: maruili@live.cn
大血藤为木通科植物大血藤 Sargentodoxa
cuneata (Oliv. ) Rehd. et Wils.的藤茎，别名血藤、红
皮藤、大活血等，主产于安徽、浙江、江西、湖北、
广西等地，具有清热解毒、理气活血、祛风杀虫、
消肿散结、止痛、通经、败毒等功效[1]。孙惠芳
等 [2]研究表明大血藤具有较强的抗氧化、抗菌活


中国现代应用药学 2016 年 5 月第 33 卷第 5 期 Chin J Mod Appl Pharm, 2016 May, Vol.33 No.5 ·593·
性。临床用于治疗阑尾炎、月经不调、崩漏、肠
痈腹痛、经闭痛经、风湿痹痛、跌打肿痛等。毛
水春[3]、田瑛[4]、陈智仙[5]等研究发现大血藤中含
有大量酚酸类化合物，推测其为主要药效活性成分
之一。酚酸类物质作为一类具有独特生理和药理活
性的天然产物，具有较强的抗氧化作用，在抑菌、
抗肿瘤、防衰老和抗炎免疫等方面都具有良好的功
效[6]。但目前对大血藤中酚酸类化合物含量的测定
报道较少。本研究建立了同时测定大血藤不同极性
溶剂萃取部位中绿原酸、咖啡酸、香草酸含量的高
效液相色谱法，为进一步研究大血藤药材各部位的
生物活性与物质基础的关联性提供依据。
1 仪器与试药
高速中药粉碎机(瑞安市永历制药机械有限公
司)；S-2 药典检验筛(浙江上虞市华康化验仪器
厂)；1810-B 型自动双重纯水蒸馏器(上海申立玻璃
仪器公司)；BS-110S 型电子天平(北京赛多利斯仪
器系统有限公司)；岛津 SPD-20A 型高效液相色谱
仪(日本岛津公司)；N2000 色谱工作站(浙江大学
信息智能研究所)；0.45 µm 滤膜及过滤装置(江苏
汉邦科技有限公司)。
大血藤药材购于安徽亳州药材市场，经江苏
大学欧阳臻教授鉴定为木通科植物大血藤
Sargentodoxa cuneata (Oliv.) Rehd. et Wils.的藤茎；
绿原酸对照品 (批号：110753-200413，含量：
98.7%)、咖啡酸对照品(批号：11885-200102，含
量：99.1%)、香草酸对照品(批号：110776-200402，
含量≥98%)均购于中国药品生物制品检定所；其
余试剂均为国产分析纯；实验用水为蒸馏水。
2 方法与结果
2.1 大血藤乙醇提取物及其不同极性溶剂萃取部
位的制备
2.1.1 大血藤乙醇提取物的制备 将过 2 号筛的
干燥大血藤粉末用 75%乙醇，按 8 倍药材质量的
溶剂量浸泡 2 h 后，85 ℃回流提取 2 次，每次 2 h，
合并滤液，于 45 ℃下减压浓缩为浸膏，冷冻干燥
得大血藤乙醇提取物。根据得率(%)=浸膏总量/药
材总量计算，大血藤乙醇提取物得率为 21.93%。
2.1.2 大血藤各萃取部位的制备 取“2.1.1”项
下提取物适量，用蒸馏水调节至浓度为 1 g(生
药)·mL，依次用 3 倍体积的石油醚、二氯甲烷、
乙酸乙酯萃取，各 3 次，分别合并萃取液，于 45 ℃
下减压浓缩，冷冻干燥得大血藤石油醚部位、二
氯甲烷部位、乙酸乙酯部位。各萃取部位得率依
次为 0.17%，1.21%，3.27%。
2.1.3 大血藤剩余部位的制备 将“2.1.2”项下
萃取后的剩余部分，以 HP-20 大孔树脂吸附，先
用水洗至洗脱液澄清，再用 95%乙醇洗脱，收集
洗脱液于 45 ℃下减压浓缩，冷冻干燥即得，得率
为 7.45%。
2.2 对照品溶液的制备
分别精密取称干燥至恒重的绿原酸对照品、
咖啡酸对照品和香草酸对照品适量，分别用甲醇
稀释至 50 mL，得绿原酸、咖啡酸和香草酸储备液，
浓度分别为 128，210，107 µg·mL1。
2.3 混合对照品溶液配制
分别取储备液一定体积混合，加溶剂稀释至
刻度至 10 mL，得混合液 1 中绿原酸、咖啡酸、香
草酸浓度分别为 25.6，4.2，32.1µg·mL1，采用倍
半稀释法，逐级稀释，得混合液 2 中绿原酸、咖
啡酸、香草酸浓度为 12.8，2.1，16.05 µg·mL1，
混合液 3 中绿原酸、咖啡酸、香草酸浓度为分别
6.4，1.05，8.025 µg·mL1，混合液 4 中绿原酸、
咖 啡 酸 、 香 草 酸 浓 度 分 别 为 3.2 ， 0.525 ，
4.012 5 µg·mL1，混合液 5 中绿原酸、咖啡酸、香
草酸浓度分别为 1.6，0.262 5，2.006 25 µg·mL1，
混合液 6 中绿原酸、咖啡酸、香草酸浓度分别为
0.8，0.131 25，1.003 125 µg·mL1，所有混合液经
0.45 μm 微孔滤膜过滤，即得。
2.4 供试品溶液的制备
分别精密称取大血藤乙醇提取物、二氯甲烷
萃取物、乙酸乙酯萃取物、剩余部位粉末 8.00，
8.40，5.08，8.40 mg，分别用甲醇稀释至 10 mL，
得供试品溶液浓度依次为 800， 840， 508，
840 μg·mL1，用 0.45 μm 微孔滤膜滤过，即得。
2.5 色谱条件
色谱柱：Kromasil C18 柱(4.6 mm×250 mm，
4.5 µm)；流动相：1%冰醋酸-甲醇(68∶32)；柱温：
30 ℃；流速：1 mL·min1；检测波长：327 nm；
进样量：20 µL。
2.6 系统适用性试验
分别精密吸取上述混合对照品溶液和供试品
溶液各 20 μL，按“2.5”项下色谱条件进样测定，
结果样品中绿原酸、咖啡色、香草酸保留时间分
别为 7.6，11.7，21.2 min，理论板数以绿原酸计≥
8 000，色谱图见图 1。


·594· Chin J Mod Appl Pharm, 2016 May, Vol.33 No.5 中国现代应用药学 2016 年 5 月第 33 卷第 5 期

图 1 高效液相色谱图
A对照品；B乙醇提取物；C二氯甲烷部位；D乙酸乙酯部位；E剩余部位；1绿原酸；2咖啡酸；3香草酸。
Fig. 1 HPLC chromatograms
Areference substances; Bethanol crude extracts; Cdichloromethane fraction; Dethyl acetate fraction; Eaqueous fraction; 1chlorogenic acid;
2caffeic acid; 3vanillic acid.
2.7 方法学考察
2.7.1 线性范围考察 将“2.3”项下 6 个混合对
照品溶液分别按“2.5”项下色谱条件进样 20 μL，
以峰面积(Y)为纵坐标，对照品溶液浓度(X)为横坐
标，分别得绿原酸回归方程：Y=29 384X9917，
r2=0.999 9，在 0.8~25.6 µg·mL1 范围内呈良好的
线 性 关 系 (n=3) ； 咖 啡 酸 回 归 方 程 ： Y=64
087X618.65，r2=0.999 2，在 0.1~4.2 µg·mL1 内呈
良好的线性关系 (n=3) ；香草酸回归方程：
Y=465.18X+100.89，r2=0.999 9，在 1.0~32.1 µg·mL1
内呈良好的线性关系(n=3)。
2.7.2 仪器精密度实验 精密吸取预先配制好的
混合对照品溶液，按“2.5”项下色谱条件，进样
20 μL，重复进样 6 次，以峰面积计算 RSD，考察
仪器的精密度。绿原酸、咖啡酸和香草酸峰面积
的 RSD(n=6)分别为 0.87%，1.25%，0.84%，表明
仪器精密度良好。
2.7.3 重复性实验 取同一批号大血藤药材粉
末，按“2.1”项下制备方法，分别制备 6 份乙酸
乙酯萃取部位样品。分别按照“2.4”项下方法配
置成待测样品溶液。分别将 6 份乙酸乙酯部位待
测液按“2.5”项下色谱条件进样 20 μL 分析，以
样品的峰面积计算 RSD，考察方法的重复性。绿
原酸、咖啡酸和香草酸的峰面积 RSD(n=6)分别为
0.37%，1.02%，1.22%，表明此方法的重复性良好。
2.7.4 稳定性实验 精密吸取乙酸乙酯部位待测
液，按“2.5”项下的色谱条件分别在 0，2，4，8，
12，24 h 进样，以样品的峰面积计算 RSD，考察
样品的稳定性。绿原酸、咖啡酸和香草酸的峰面
积的 RSD(n=6)分别为 0.95%，1.21%，1.12%，表
明待测样品在 24 h 内稳定性良好。
2.7.5 加样回收率实验 以“2.1.2”项下待测样
乙酸乙酯部位为样品，分别取 3 份，在 3 个不同
浓度水平上加入一定量的绿原酸、咖啡酸和香草
酸对照品，计算回收率。结果见表 1，绿原酸、咖
啡酸和香草酸的平均加样回收率分别为 96.95%，
93.42%，97.53%，表明此定量分析方法的回收率
较高。
表 1 加样回收率实验结果
Tab. 1 Results of recovery test
成分 已知量/μg
加入量/
μg
测得量/
μg
回收率/
%
RSD/
%
平均回
收率/%
平均
RSD/%
绿原酸
22.965 12.8 35.379 96.98 1.95
96.95 1.2122.965 19.2 42.823 103.43 0.13
22.965 25.6 46.037 96.36 1.54
咖啡酸
0.557 0.42 0.927 98.12 0.88
93.42 0.780.557 0.63 1.257 101.42 1.38
0.557 0.84 1.257 97.48 0.07
香草酸
5.545 2.14 7.34 98.23 2.72
97.53 1.215.545 5.35 12.71 103.67 0.85
5.545 10.7 14.87 97.53 0.05
2.8 大血藤乙醇提取物及不同极性溶剂萃取部位
绿原酸、咖啡酸、香草酸含量测定
取同一批号大血藤药材粉末，精密称取 3 份，
按“2.1”项下制备方法，各部位分别制备 3 份供
试品溶液。按提取物质量计算，按“2.5”项下色
谱条件测定大血藤乙醇提取物及其各萃取部位的
绿原酸、咖啡酸和香草酸含量，结果见表 2。
由表 2 可知，乙酸乙酯部位含有的绿原酸和
咖啡酸含量较高，分别占提取物总量的 4.52%，
0.11%。香草酸在二氯甲烷部位含量较高，占提取
物总量的 5.8%。


中国现代应用药学 2016 年 5 月第 33 卷第 5 期 Chin J Mod Appl Pharm, 2016 May, Vol.33 No.5 ·595·
表 2 各萃取部位浸膏中绿原酸、咖啡酸和香草酸含量(n=3)
Tab. 2 The content of chlorogenic acid, caffeic acid and
ferulic in fraction(n=3) %
样 品 绿原酸 咖啡酸 香草酸
乙醇提取物部位 1.660 0.022 0.710
二氯甲烷部位 0.355 0.014 5.800
乙酸乙酯部位 4.520 0.110 1.090
剩余部位 1.568 0.016 0.673
3 讨论
本研究采用 HPLC 等度洗脱法同时测定了大
血藤中绿原酸、咖啡酸和香草酸的含量，流动相
采用 1%冰醋酸-甲醇(68∶32)，该法简单方便，分
离效果好。在该方法中，将检测波长选择为
327 nm，因为绿原酸的最大吸收波长为 327 nm，
咖啡酸的最大吸收波长在 323 nm，香草酸的最大
吸收波长在 260 nm，次吸收波长在 327 nm，该方
法重点关注绿原酸，所以选择了既接近咖啡酸的
最大吸收波长又是香草酸的次吸收波长 327 nm 为
检测波长。绿原酸和咖啡酸在乙酸乙酯部位含量
最高，分别为 4.52%，0.11%，香草酸在二氯甲烷
部位含量最高，为 5.8%。本研究为进一步研究开
发大血藤提供了有效手段。
REFERENCES
[1] 国家中医药管理局. 中华本草(精华本): 上册[M]. 上海: 上
海科学技术出版社, 1998: 571-574.
[2] SUN H F, MA R L, XU X Q, et al. Antioxidant and
antibacterial properties of Sargentodoxa cuneata [J]. Chin
Wild Plant Res(中国野生植物资源), 2015, 34(3): 16-19.
[3] MAO S C, GU J Q, CUI C B, et al. Phenolic compounds from
Sargentodoxa cuneata(Oliv.)Rehd.et Wils. and their antitumor
activities [J]. Chin J Med Chem(中国药物化学杂志), 2004,
14(6): 326-330.
[4] TIAN Y, ZHANG H J, TU A P, et al. Phenolics from
traditional Chinese medicine Sargentodoxa cuneata [J]. Acta
Pharm Sin(药学学报), 2005, 40(7): 628-631.
[5] 陈智仙, 高文远, 刘岱琳, 等. 大血藤的化学成分研究(Ⅱ)
[J]. 中草药, 2010, 41(6): 867-870.
[6] MOHAN K V, GUNASEKARAN P, VARALAKSHMI E, et
al. In vitro evaluation of the anticancer effect of lactoferrin and
tea polyphenol combination on oral carcinoma cells [J]. Cell
Biol Int, 2007, 31(6): 599-608.
收稿日期：2015-10-26



香丹注射液与 3 种代糖溶媒配伍的稳定性研究

周勇 1，黄华 1，王也 1*，姚建胜 1，王超超 2，余爱民 2(1.衢州市食品药品检验研究院，浙江 衢州 324002；2.衢州市柯城区
人民医院，浙江 衢州 324000)

摘要：目的 考察香丹注射液与 3 种代糖溶媒(果糖注射液、转化糖注射液和转化糖电解质注射液)配伍的稳定性，为糖
尿病患者的临床用药提供参考。方法 按临床用药的最大使用量，制备香丹注射液与 3 种代糖溶媒的配伍溶液，考察配
伍溶液的外观、pH 值、不溶性微粒、含量测定、紫外光谱及最大吸收波长。结果 其中一批香丹注射液与转化糖电解
质注射液配伍 20 min 后出现浑浊，其他溶液在 5 h 内，溶液性状、不溶性微粒、含量、紫外光谱及最大吸收波长均无显
著变化，pH 值在正常范围内略有变化。结论 不建议香丹注射液与转化糖电解质注射液临床配伍使用，其他溶液在配
伍 5 h 内基本稳定，建议配伍静置一段时间后再输注，以提高输液的安全性。
关键词：香丹注射液；代糖溶媒；配伍；稳定性；糖尿病用药安全
中图分类号：R917.101 文献标志码：B 文章编号：1007-7693(2016)05-0595-04
DOI: 10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2016.05.017

Compatible Stability of Xiangdan Injection and 3 Kinds of Sugar Substitute Solvent

ZHOU Yong1, HUANG Hua1, WANG Ye1*, YAO Jiansheng1, WANG Chaochao2, YU Aiming2(1.Quzhou Institute
for Food and Drug Inspection, Quzhou 324002, China; 2.Quzhou Kecheng People’s Hospital, Quzhou 324000, China)

ABSTRACT: OBJECTIVE To explore the compatible stability of Xiangdan injection and 3 kinds of sugar substitute solvent
(fructose injection, invert sugar injection and invert sugar electrolytes injection), and to provide reference for clinical medication

基金项目：浙江省食品药品监管系统科技计划项目(2014009)；浙江省衢州市重点实验室项目(衢市科发高[2015]8 号)
作者简介：周勇，男，主管药师 Tel: (0570)8358027 E-mail: 171644338@qq.com *通信作者：王也，女，副主任药师 Tel:
(0570)8878923 E-mail: 25671760@qq.com