全 文 ：文章编号:1004-5422(2012)03-0215-03
不同产地青果中没食子酸含量的比较研究
廖 婉1 , 黄金珠1 , 王继森2 , 徐晓秋1 , 游 宇1 , 傅超美1
(1.成都中医药大学 药学院 药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地
中药材标准化教育部重点实验室 , 四川 成都 611137;2.成都市 食品药品检测中心 , 四川 成都 610045)
摘 要:采用高效液相色谱法测定了 26 批不同产地青果中没食子酸的含量 , 使用 Thermo Hypersil BDS C18高效
液相色谱柱 , 甲醇—0.1%磷酸(5∶95)为流动相 ,流速 1.0 mL min ,检测波长 254 nm , 柱温 30 ℃.结果表明:不同
产地青果中没食子酸的含量存在一定差异 ,其中 , 产于四川合江的青果没食子酸含量较高(2.293 mg·g-1), 其次
是产于福建的青果 , 其他产地青果中没食子酸含量也均超过了 1.0 mg·g-1;同一产地 , 由于品种和采收期的不
同 , 青果中没食子酸的含量存在一定差异.
关键词:青果;不同产地;没食子酸;高效液相色谱法
中图分类号:R283.6 文献标识码:A
0 引 言
青果为橄榄科植物橄榄(Canarium album Rae-
usch)的干燥成熟果实 ,具有清热解毒 、利咽 、生津等功
效 ,可用于治疗咽喉肿痛 、咳嗽痰黏 、烦热口渴 、鱼蟹
中毒等症[ 1] .青果主产于四川 、福建 、广东等地 ,但全
国各地品种繁多 ,划分标准不明确 ,容易混淆.青果在
我国南方各地民间用量很大 ,它既为可食鲜果 ,又为
药膳 、饮品 、中药的常用资源[ 2] .随着科研人员对青果
食用与药用研究的深入 ,青果的应用开发呈现出巨大
的发展潜力.目前 ,1963年版～ 2005年版《药典》均无
青果指标性化学组分的定性和定量分析方法 ,而 2010
年版《药典》也只增加了鉴别(理化鉴定)、检查和浸出
物3项 ,其含量测定尚为空缺 ,质量评价体系不完善 ,
难以科学控制青果内在质量 ,其资源的开发与利用受
到很大限制.研究发现 ,青果中没食子酸是其主要有
效成分[ 3] ,据此 ,本研究采用高效液相色谱法对 26批
不同产地青果中没食子酸的含量进行比较研究 ,以期
为青果的质量控制和合理开发利用提供科学依据.
1 仪器与材料
1.1 仪 器
实验所用仪器包括:Waters 2695-2487高效液
相色谱仪 ,Waters2487检测器 ,Empower Pro色谱工作
站 ,色谱柱为 Thermo Hypersil BDS C18柱(250×4.6
mm , 5 μm);Mettler AE240 电子分析天平(Mettler
Inc.);FA1104 电子分析天平(上海天平仪器厂);
KQ-500E型医用超声清洗器(昆山超声仪器有限公
司);数显恒温水浴锅HH-4(国华电器有限公司).
1.2 材 料
实验所用材料包括:青果分别购于四川 、福建 、
广东 、云南 、安徽等地药材市场或饮片公司 ,经鉴定
为橄榄科植物橄榄的干燥成熟果实(见表1);没食子
表 1 青果药材来源
批号 品 种 来 源 产地 批号 品 种 来 源 产地
1 大白圆 四川合江甘雨村种植基地 四川 14 二梭子 安徽九九通医药公司 安徽
2 二白圆 四川合江甘雨村种植基地 四川 15 甘青果
河北安国冷背药材有限公司 福建
3 自来圆 四川合江甘雨村种植基地 四川 16 檀 香
安徽福春堂中药饮片有限公司 安徽
4 二梭子 四川合江甘雨村种植基地 四川 17 大梭子
安徽亳州杏林百草药业有限公司 安徽
5 三梭子 四川合江甘雨村种植基地 四川 18 大三棱榄 闽侯荣晨橄榄园 福建
6 脆 皮 四川合江甘雨村种植基地 四川 19 长 营 闽侯荣晨橄榄园 福建
7 檀 香 四川夹江甘江镇种植基地 四川 20 檀 香 闽侯荣晨橄榄园 福建
8 丁香榄 四川夹江甘江镇种植基地 四川 21 惠 园 闽侯荣晨橄榄园 福建
9 二白圆 泸州百草堂中药饮片有限公司 四川 22 自来圆
闽侯荣晨橄榄园 福建
10 大梭子 成都荷花池药材市场 四川 23 丁香榄 广州清平中药材市场 广东
11 二白圆 成都荷花池药材市场 云南 24 三棱榄 广州清平中药材市场 广东
12 长 营 安国市健仁药材有限公司 福建 25 冬节圆 广东普宁中药材市场 广东
13 二白圆 安国市健仁药材有限公司 云南 26 长穗赤 广东普宁中药材市场 广东
收稿日期:2012-07-25.
基金项目:四川省教育厅重点科研项目 —功能性保健饮料研制(09Z207)资助项目.
作者简介:廖 婉(1983 — ), 女 , 博士研究生 , 讲师 , 从事中药新制剂和新剂型研究.
酸对照品(批号 0831-9501 ,中国药品生物制品检定
所);甲醇为色谱纯(Fisher Inc.),水为超纯水 ,其余
试剂均为分析纯.
2 方法与结果
2.1 对照品与供试品溶液制备
精密称取没食子酸对照品适量 ,置 10 mL 量瓶
中 ,加甲醇溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,配制成 0.104
mg mL 的对照品溶液.
精密称取青果药材粉末 5 g ,置锥形瓶中 ,精密
加入 80%甲醇溶液 50 mL ,称定重量 ,超声提取 20
min ,放冷 ,再称定重量 ,用 80%甲醇溶液补足减失
的重量 ,滤过 ,取续滤液 5 mL至 10 mL量瓶中 ,用水
稀释至刻度 ,摇匀 ,滤过 ,得供试品溶液.
2.2 色谱条件
实验的色谱条件为:色谱柱为 Thermo Hypersil
BDS C18柱(250×4.6 mm , 5 μm),流动相为甲醇—
0.1%磷酸(5∶95),流速1.0mL min ,柱温30 ℃.检测
波长 254 nm ,理论塔板数按没食子酸峰计应不低于
2 000.在上述色谱条件下 ,样品溶液色谱图中未见其
他组分和辅料对测定组分没食子酸的干扰(见图 1).
(a)空白溶剂;(b)没食子酸对照品;(c)青果样品.
图 1 HPLC 色谱图
2.3 线性关系考察
分别精密吸取没食子酸对照品溶液2 、5 、10 、15 、
20μL 注入高效液相色谱仪中 ,在上述色谱条件下
测定 ,重复进样2次 ,记录色谱图 ,测定峰面积值.以
峰面积平均值(y)对进样量(x)进行线性回归 ,绘制
标准曲线 ,计算得到回归方程为 ,
y =3×10-8 x+0.004 , r=0.9999 ,
数据表明 ,没食子酸在 0.0208 ～ 0.208 mg·mL-1
范围内呈现良好的线性关系.
2.4 精密度实验
精密吸取没食子酸对照品液 ,连续进样 6次 ,其
RSD%为 0.24%.结果表明 ,实验所用仪器精密度良
好.
2.5 稳定性实验
精密吸取供试品溶液分别于 0 、2 、4 、6 、8 、12 、
18 h进样10μL ,测定峰面积 ,其 RSD为 0.27%.结果
表明 ,样品在 18 h内稳定性良好.
2.6 重复性实验
平行精密称取同一批样品 5份 ,按“2.1”项供试
品溶液制备项下操作 ,分别进样 10 μL ,计算求得平
均含量为 1.695 mg·g-1 ,其 RSD为 1.75%.结果表
明 ,实验方法重复性良好.
2.7 加样回收实验
精密称取已知含量的样品(1.702 mg·g-1)6份 ,
各约 2.5 g , 分别精密加入没食子酸对照品溶液
(1.064 mg·mL-1)4 mL ,按供试品项下操作并按含
量测定方法进行测定 ,结果如表 2所示.计算平均加
样回收率为 100.5%,其 RSD为 2.75%,表明样品回
收率符合要求.
表 2 加样回收率试验结果
取样量 g 加入量 mg 测得量 mg 回收率 % 平均值 % RSD %
2.503
2.498
2.500
2.510
2.495
2.508
4.256
4.256
4.256
4.256
4.256
4.256
8.733
8.776
8.234
8.458
8.512
8.494
105.1
106.3
93.49
98.35
100.20
99.28
100.5 2.75
2.8 样品测定
取26批不同产地青果制备的供试品溶液 ,按
“2.2”项色谱分离条件 ,进样 10 μL ,测定峰面积 ,计
算含量 ,结果如表 3所示.
3 结论与讨论
由表 3数据可看出:26批青果中没食子酸的平
·216· 成都大学学报(自然科学版) 第 31卷
表 3 没食子酸含量测定结果(n=3)
品 种 产地 含量 mg·g-1 品 种 产地 含量 mg·g-1
大白圆 四川 1.886 二梭子 安徽 1.023
二白圆 四川 2.293 甘青果 福建 1.012
自来圆 四川 2.181 檀 香 安徽 2.187
二梭子 四川 1.748 大梭子 安徽 2.006
三梭子 四川 1.443 大梭子 福建 2.114
脆 皮 四川 1.043 长 营 福建 1.634
檀 香 四川 2.047 檀 香 福建 2.245
丁香榄 四川 1.844 惠 园 福建 1.698
二白圆 四川 2.046 自来圆 福建 2.162
大俊子 四川 1.987 丁香榄 广东 1.023
二白圆 云南 2.067 三棱榄 广东 1.978
长 营 福建 1.544 冬节圆 广东 1.056
二白圆 云南 2.130 长穗赤 广东 1.145
均含量为 1.752%,其中 ,没食子酸含量最高的是产
自四川泸州合江甘雨村种植基地的青果 ,其没食子
酸含量为 2.293 mg·g-1 ,福建产的青果没食子酸含
量次之 ,其他产地青果没食子酸含量也均超过了
1.0 mg·g-1;产于四川和福建的青果 ,没食子酸含量
普遍较其他产地高;产于四川的二白圆 、自来圆 、檀
香和大梭子 ,云南的二白圆 ,安徽的檀香和大梭子 ,
福建的自来圆 、檀香和大梭子没食子酸含量较高 ,均
高于 2.0 mg·g-1.表 3数据也显示:不同产地的青果
中没食子酸的含量存在明显差异;同一产地 ,由于品
种和采收期的不同 ,青果中没食子酸的含量也存在
一定差异.
没食子酸是青果中含量较多的化学成分之一 ,
研究人员通常以没食子酸作为指标成分对青果进行
质量控制研究[ 4-5] .本研究利用高效液相色谱法 ,对
产于四川 、福建 、广东 、云南 、安徽等地所产青果测定
了其没食子酸含量.实验结果表明 ,样品中各组分的
色谱峰基本达到基线分离.该测定方法稳定 、快速 、
重现性好 、灵敏度高 ,实验数据可靠 ,可为《药典》下
一步修订青果项下质量标准提供科学参考依据.
参考文献:
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京:化学工业出版社 , 2010.
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中成药 , 2006 , 28(7):1024-1026.
Comparative Study of Gallic Acid Content in Fructus
Canarii from Different Producing Areas
LIAO Wan1 , HUANG Jinzhu1 , WANG Jisen2 , XU Xiaoqiu1 , YOU Yu1 , FU Chaomei1
(1.School of Pharmacy , Chengdu University of TCM , Chengdu 611137 , China;
2.Chengdu Food and Drug Detection Center , Chengdu 610045, China)
Abstract:The high performance liquid chromatographic(HPLC)approach was adopted to determine the
content of gallic acid in fructus canarii for 26 samples from different producing regions.The experiment was
performed on a Thermo Hypersil BDS C18 column , eluted with mobile phase consisting of methanol-0.1%
and phosphoric acid solution(5∶95)at the flow rate of 1.0 mL·min-1.The detection wavelength was 254
nm , and the column temperature was set at 30 ℃.The experimental results indicate that there is significant
difference in the gallic acid content in fructus canarii from different producing areas.Fructus canarii from
Hejiang ,Sichuan province has the highest content(2.293 mg·g-1), followed by that from Fujian province ,
and the others contents are all higher than 1.0 mg·g-1 .While even from the same area , the content may
have some differences due to different varieties and harvest times.
Key words:fructus canarii;different producing areas;gallic acid;HPLC
·217·第 3期 廖 婉 ,等:不同产地青果中没食子酸含量的比较研究