全 文 ： Journal of Pharmaceutical Analysis药物分析杂志
·968· 药 物 分 析 杂 志 Chin J Pharm Anal 2016,36(6)
Chinese
　　*　国家自然科学基金项目（81202919）；国家中医药管理局中医药行业科研专项项目（20110700712）
　　　 第一作者　Tel：18909816763；E-mail：95142012@qq.com
茅苍术麸炒前后对乙酸致胃溃疡大鼠胃动素和胃泌素的影响 *
于艳 1，袁媛 2，贾天柱 3，才谦 3
（1.辽宁中医药大学附属医院中医药实验中心，沈阳 110847；2.辽宁省中医药研究院，沈阳 110034；
3.辽宁中医药大学药学院，大连 116600）
摘要　目的：考察茅苍术麸炒后对乙酸致胃溃疡大鼠血清及胃组织中胃动素（MTL）和胃泌素（GAS）的影
响，初步探讨茅苍术麸炒后抗胃溃疡作用变化的机理。方法：实验随机分成 10组，即假手术组、模型组、奥
美拉唑组、三九胃泰组、茅苍术生品低剂量组、茅苍术生品中剂量组、茅苍术生品高剂量组，茅苍术麸炒品低
剂量组、茅苍术麸炒品中剂量组和茅苍术麸炒品高剂量组。参考 Okabe方法进行适当改良，即外科手术法
以乙酸诱导大鼠胃溃疡模型。采用常规组织病理学 HE染色法观察胃组织病理改变情况，采用酶联免疫吸
附（ELISA）法检测血清及胃组织中 MTL和 GAS的含量。结果：茅苍术麸炒品抗胃溃疡的作用优于生品。
与假手术组比较，模型组大鼠血清及胃组织中 MTL和 GAS的含量明显降低；与模型组比较，茅苍术生品和
麸炒品各组血清及胃组织中 MTL和 GAS的含量均有不同程度的升高，麸炒品的作用优于生品。结论：茅
苍术麸炒后抗胃溃疡的作用增强，其作用机理部分是由于促进 MTL和 GAS的分泌。
关键词：茅苍术麸炒品；中药炮制；麸炒法；胃动素（MTL）；胃泌素（GAS）；抗胃溃疡；ELISA；中药活性分析
中图分类号：R 917　　　文献标识码：A　　　文章编号：0254-1793（2016）06-0968-06
doi：10．16155/j．0254-1793．2016．06.04
Effects of Rhizoma Atractylodis Lanceae on motilin and gastrin in rat model of gastric ulcer induced by acetic acid before and after processing*
YU Yan1，YUAN Yuan2，JIA Tian-zhu3，CAI Qian3
（1. Experimental Center of Traditional Chinese Medicine，The Affiliated Hospital，Liaoning University of Traditional Chinese Medicine，
Shenyang 110847，China；2. Institute of Traditional Chinese Medicine of Liaoning Province，Shenyang 110034，China；
3. School of Pharmacy，Liaoning University of Traditional Chinese Medicine，Dalian 116600，China）
Abstract　Objective：To investigate the effect of Rhizoma Atractylodis Lanceae on levels of motilin（MTL）
and gastrin（GAS）in the rat model of gastric ulcer induced by acetic acid after processing，and evaluate the
mechanisms of action involved in the anti-ulcer properties of Rhizoma Atractylodis Lanceae．Methods：All rats
were randomly divided into the following 10 groups：sham-operated group，model group，omeprazole group，
Sanjiu Weitai granule，low dose group of the crude Rhizoma Atractylodis Lanceae，middle dose group of the crude Rhizoma
Atractylodis Lanceae，high dose group of the crude Rhizoma Atractylodis Lanceae，low dose group of the processed Rhizoma
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·969· 药 物 分 析 杂 志 Chin J Pharm Anal 2016,36(6)
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茅苍术为菊科植物茅苍术 Atractylodes lancea
Thunb. DC.的干燥根茎，始载于《神农本草经》，味
辛、苦，性温，归脾、胃、肝经，具有燥湿健脾、祛风散
寒、明目之功效［1-2］。现代药理研究表明，茅苍术具
有抑菌、抗炎、抗病毒、抗血管增生、保肝，治疗胃溃
疡、高血糖、类风湿性关节炎等多种生物活性［3-6］。
茅苍术的炮制方法从古至今有很多种，如炒焦、炒
黄、炒炭、蒸法、米泔水炒、麸炒、土炒、醋炒、盐炒、酒
煮、童便制等［7］，但大部分炮制方法现代已不再延
用，目前临床最为常用的炮制方法为麸炒法。关于
茅苍术的炮制，传统认为生品燥性较大，炮制后燥性
降低，补脾健胃作用增强。胃溃疡是临床的常见病、
多发病，是消化性溃疡的一种，中医认为其属于“脾
虚”、“胃虚”、“脾胃虚寒”、“胃脘痛”等范畴［8-9］。茅
苍术具有燥湿健脾之功，临床常用于治疗消化系统
疾病，日本学者［10-12］曾报道过茅苍术具有抗实验性
胃溃疡的作用。关于茅苍术炮制后对胃溃疡大鼠
胃动素（motilin，MTL）和胃泌素（gastrin，GAS）分
泌的影响，笔者目前未见相关报道。本研究采用目
前公认的较为成熟的慢性胃溃疡造模方法—乙酸
法诱导大鼠胃溃疡模型，采用常规组织病理学方法
观察胃组织病理改变情况，运用 ELISA技术检测
血清及胃组织中 MTL和 GAS的含量，比较茅苍术
生品及麸炒品抗胃溃疡的作用，并初步探讨其作用
机理。
Atractylodis Lanceae，middle dose group of the processed Rhizoma Atractylodis Lanceae，and high dose group
of the processed Rhizoma Atractylodis Lanceae．The model of gastric ulcer was established by acetic acid in rats
according to the method of Okabe et al．with some modifcations．Histopathological changes were evaluated by
hematoxylin and eosin（HE）stain．The levels of MTL and GAS in serum and gastric tissues were determined
by the double-antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）．Results：The results
demonstrated that the processed Rhizoma Atractylodis Lanceae had better anti-ulcer effect compared with the
crude Rhizoma Atractylodis Lanceae．The productions of MTL and GAS in serum and stomachs of model group
were notably decreased compared with sham-operated group.Compared with model group，higher levels of MTL
and GAS in serum and stomachs of the crude Rhizoma Atractylodis Lanceae and Rhizoma Atractylodis Lanceae
processed groups were observed．Compared with the crude Rhizoma Atractylodis Lanceae，the processed Rhizoma
Atractylodis Lanceae was more effective．Conclusion：The results show that the anti-ulcer effect of Rhizoma
Atractylodis Lanceae is enhanced after processing．The anti-ulcer effect of Rhizoma Atractylodis Lanceae can be
partly attributed to up-regulation of MTL and GAS．
Keywords：bran fried product of Rhizoma Atractylodis Lanceae；Chinese crude drug processing；stir-baked with
bran method；motilin（MTL）；gastrin（GAS）；resisting gastric ulcer；ELISA；TCM activity analysis
1　实验材料
1.1　实验动物
SD大鼠，SPF级，雌雄各半，体重 220~240 g，购
于辽宁长生生物技术有限公司，合格证号 SCXK（辽）
2010-0001。所有动物实验均经辽宁中医药大学附
属医院动物研究论理委员会审核通过。
1.2　药品及试剂
生茅苍术购自安徽济人药业有限公司（产地江
苏，批号 121019），由辽宁中医药大学中药鉴定教研
室翟延君教授鉴定为菊科植物茅苍术 Atractylodes
lancea Thunb. DC.的干燥根茎。麸炒茅苍术为辽宁
中医药大学附属医院中医药实验中心按照中国药
典 2010年版苍术项下及炮制通则（附录Ⅱ D）“麸
炒法”进行炮制，麸炒品的平均收率为 99.1%。三九
胃泰颗粒（华润三九医药股份有限公司，国药准字
Z44020705，批号 1301022N）、奥美拉唑胶囊（吉林
省东北亚药业股份有限公司，国药准字 H20057570，
批号 20120601）。大鼠 ELISA试剂盒（美国 R&D
生物科技有限公司）。矿物油（美国 Sigma公司）。
冰乙酸、水合氯醛等试剂（国药集团化学试剂有限
公司）。
1.3　主要仪器设备
INFINITE M200型 多 功 能 酶 标 仪（奥 地 利
TECAN）。MR1822型低温高速离心机（法国 Jouan
公司）。BS-51型奥林巴斯显微镜，JD801形态学图
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像分析系统（日本 Olympus公司）。RM2235旋转式
显微镜用薄片切片机（德国 Leica公司）。TC-1205
型智能程控生物组织自动脱水机（湖北泰维医疗科
技有限公司）。
2　方法
2.1　实验分组　SPF级 SD大鼠 100只，随机分成
10组，每组 10只，即假手术组、模型组、奥美拉唑组、
三九胃泰组、茅苍术生品低剂量组（生低组）、茅苍术
生品中剂量组（生中组）、茅苍术生品高剂量组（生高
组）、茅苍术麸炒品低剂量组（炒低组）、茅苍术麸炒
品中剂量组（炒中组）和茅苍术麸炒品高剂量组（炒
高组）。
2.2　动物造模　大鼠胃溃疡模型的制备参考 Okabe
等方法［13-14］改良后所建立的造模方法。大鼠在术
前禁食自由饮水 24 h，严格控制其食粪便及垫料，
10%水合氯醛（4.0 mL·kg-1体重）肌肉注射麻醉。
用 0.5%碘伏消毒大鼠腹部皮肤，沿左肋下缘开腹，
将胃轻轻拉出。用实验室自行设计的胃溃疡制备
镊子（一种尖端为直径 9 mm圆环的镊子，专利号：
200920015194.7）夹住距幽门部 3 mm胃体部区域。
将事先吸好矿物油 0.18 mL和 60%乙酸 0.02 mL的
注射器插入挟闭区的胃腔内，注入液体，45 s后从胃
部吸出，再向胃腔内注入生理盐水 2 mL，1 min后吸
出。将胃复位，逐层缝合。假手术组以生理盐水代替
乙酸。
2.3　给药　阳性对照药奥美拉唑肠溶胶囊及三九胃
泰颗粒研细，茅苍术生品及麸炒品粉碎，过 140目筛，
临用前用蒸馏水混悬均匀。于术后第 2天灌胃给药，
每 100 g体重给药体积 1.0 mL，给药剂量如下：奥美
拉唑组 0.013 g·kg-1，三九胃泰组 2.08 g·kg-1，茅苍
术以临床常用量作为中剂量，低剂量组和高剂量组
分别为中剂量组的 1/2和 2倍，即生低组和炒低组均
为 0.625 g·kg-1，生中组和炒中组均为 1.25 g·kg-1，
生高组和炒高组均为 2.5 g·kg-1，每日 2次，假手
术组和模型组灌胃等体积的生理盐水，连续给
药 10 d。
2.4　标本采集　大鼠末次给药后禁食、自由饮水 15
h，严格控制其食粪便及垫料，用 10%水合氯醛（每
1 kg体重给药体积 4.0 mL）腹腔注射麻醉，开腹，腹
主动脉采血，室温放置 2 h后，3000 r·min-1离心 15
min，收集血清于 -70 ℃保存以备进行 ELISA法检
测。取出胃，沿胃大弯剪开，用生理盐水将胃黏膜冲
洗干净，取出胃部溃疡处，取 1/4溃疡面于 -70 ℃冰
箱中保存，以备 ELISA法检测，另取 1/2溃疡面置 4%
多聚甲醛中固定以制备病理切片供 HE染色光镜观
察病理组织改变。假手术组在相同部位切取相同面
积的胃组织。
2.5　常规组织病理学观察　取在 4%多聚甲醛中固
定的胃组织，梯度乙醇脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，
切片（5 μm），脱蜡至水，苏木精 -伊红染色，脱水，
透明，中性树胶封片，于显微镜下观察病理改变情况。
2.6　ELISA法检测血清及胃组织中 GAS和 MTL的
含量 将胃组织自然解冻后，剪碎，称量，按 9 mL·
g-1加 PBS液匀浆，得到胃组织匀浆液，血清样品自
然解冻。用 ELISA法检测血清及胃组织中 GAS和
MTL的含量，实验严格按照大鼠酶联免疫检测试剂
盒使用说明书操作，用多功能酶标仪进行检测，波
长 450 nm测定吸光度（A）。根据对照品的浓度及
对应的 A值，计算出相应标准曲线的直线回归方程，
再根据样品的 A值在回归方程上计算出对应的样品
浓度。
2.7　统计学方法　采用 SPSS 10.0软件，多组间比
较应用单因素方差（one-way ANOVA）分析，方差
齐采用最小显著差法（LSD方法），方差不齐采用
Tamhane’s T2方法（近似方差分析），并进一步行两
两比较。结果均以（x ±s）表示，以 P<0.05为差异
有统计学意义。
3　实验结果
3.1　大鼠胃组织大体病理结果
假手术组大鼠胃组织结构正常（见图 1-A），模
型组胃组织可见明显炎性细胞浸润，胃黏膜充血、水
肿等病理改变（见图 1-B）。各给药组可见不同程度
的胃组织损伤减轻现象，麸炒品各组作用优于相应生
品组。见图 1-C~J。
3.2　血清中 GAS和 MTL的含量
与假手术组比较，模型组血清中 GAS和 MTL的
含量显著降低，与模型组比较，各给药组均呈现血清
中 GAS和 MTL的含量上升的趋势，除 GAS生低组、
炒低组外，差异有显著性。茅苍术生品及麸炒品 3个
剂量组各指标均呈现一定的量效关系。经进一步组
间两两比较，各指标炒中组与生中组、炒高组与生高
组之间存在显著性差异。在提高血清中 GAS和 MTL
的含量方面，茅苍术麸炒品的作用优于生品。见
图 2。
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A.假手术组（sham-operated group）　B.模型组（model group）　C.奥美拉唑组（omeprazole group）　D.三九胃泰组（Sanjiu Weitai granule group）　
E.生低组（low dose group of the crude Rhizoma Atractylodis Lanceae）　F.生中组（middle dose group of the crude Rhizoma Atractylodis Lanceae）　G.生
高组（high dose group of the crude Rhizoma Atractylodis Lanceae）　H.炒低组（low dose group of the processed Rhizoma Atractylodis Lanceae）　I.炒中组
（middle dose group of the processed Rhizoma Atractylodis Lanceae）　J.炒高组（high dose group of the processed Rhizoma Atractylodis Lanceae）
图 1　各组大鼠胃组织常规组织病理学观察结果（×10）
Fig．1　Microscopic observation of the stomachs of rats（Microscopy magnification 10×）
SO. 假手术组（sham-operated group）　MD.模型组（model group）　OM.奥美拉唑组（omeprazole group）　SJ.三九胃泰组（Sanjiu Weitai granule）　
LC.生低组（low dose group of the crude Rhizoma Atractylodis Lanceae）　MC.生中组（middle dose group of the crude Rhizoma Atractylodis Lanceae）　
HC.生高组（high dose group of the crude Rhizoma Atractylodis Lanceae）　LP.炒低组（low dose group of the processed Rhizoma Atractylodis Lanceae）
MP.炒 中 组（middle dose group of the processed Rhizoma Atractylodis Lanceae）　HP.炒 高 组（high dose group of the processed Rhizoma Atractylodis
Lanceae）
*.与模型组比较（indicates a significant difference compared with model group，P<0.05）　▲ .与生中组比较（indicates a significant difference compared
with middle dose group of the crude Rhizoma Atractylodis Lanceae，P<0.05）　◆ .与生高组比较（indicates a significant difference compared with high dose
group of the crude Rhizoma Atractylodis Lanceae，P<0.05）
图 2　各组动物血清中 GAS（A）和MTL（B）的含量（ng·L-1）
Fig．2　Levels of GAS（A）and MTL（B）in serum of different groups
3.3　胃组织中 GAS和 MTL的含量
与假手术组比较，模型组胃组织中 GAS和 MTL
的含量显著降低，与模型组比较，各给药组均呈现胃
组织中 GAS和 MTL的含量上升的趋势，差异有显著
性。茅苍术生品及麸炒品 3个剂量组各指标均呈现
一定的量效关系。经进一步组间两两比较，除 MTL
炒低组与生低组无显著性差异外，各指标炒低组与生
低组、炒中组与生中组、炒高组与生高组之间存在显
著性差异。在提高胃组织中 GAS和 MTL的含量方
面，茅苍术麸炒品的作用优于生品。见图 3。
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SO、MD、OM、SJ、LC、MC、HC、LP、MP、HP.同图 2（same as Fig. 2）
*.与模型组比较（indicates a significant difference compared with model group，P<0.05）　▲ .与生中组比较（indicates a significant difference compared
with middle dose group of the crude Rhizoma Atractylodis Lanceae，P<0.05）　◆ .与生高组比较（indicates a significant difference compared with high dose
group of the crude Rhizoma Atractylodis Lanceae，P<0.05）
图 3　各组动物胃组织中 GAS（A）和MTL（B）的含量（ng·L-1）
Fig．3　Levels of GAS（A）and MTL（B）in stomachs（ng·L-1）of different groups
4　讨论
4.1　胃溃疡模型的建立
胃溃疡的造模主要有药物法、幽门结扎法、应
激法和幽门螺杆菌感染法等。有研究表明乙酸胃溃
疡模型出现气损、阳竭，以及精血虚少的证候。目前
慢性胃溃疡造模较多使用乙酸法，一般认为乙酸法
造成的溃疡模型病理形态特点与修复过程与人类消
化性溃疡相似，广泛用于胃溃疡的病理生理学研究、
抗溃疡药物的疗效研究以及溃疡愈合的机制研究
等［15-16］。据报道，乙酸诱导的胃溃疡模型的损伤部
位不仅在黏膜层和黏膜下层，而且会损及肌层，该模
型成功率高［17］，而且对多种抗溃疡药物反应敏感［18］，
因此，目前慢性胃溃疡造模应用较多的即为乙酸法。
4.2　茅苍术麸炒前后对 GAS及 MTL的影响
胃溃疡患者常表现为胃肠动力减弱，胃排空延
迟，而出现上腹部胀满、嗳气、纳差现象。现代医学治
疗胃溃疡的一类常用药物即为胃动力药，此类药物通
过增强胃动力，加速胃排空而使细菌不能在胃内久
留，可减少溃疡创面感染的机会；同时也减轻食物对
胃窦部 G细胞和壁细胞的刺激，从而帮助减少抑酸
药的用量。改善胃动力异常的胃肠激素主要有 MTL
和 GAS，其作用主要是影响胃肠道运动，使胃动力增
强，加速溃疡愈合。MTL作为一种非常重要的胃肠
激素，表达在以哺乳动物为代表的大多数动物的消化
道上，表达在平滑肌上的胃动素受体与 MTL发生反
应，促使平滑肌收缩，从而使胃排空加速，小肠传输时
间缩短［19］。GAS能够促进胃肠运动功能，是一种起
兴奋作用的脑肠肽。GAS异常分泌与胃排空延迟有
密切关系。
大鼠经乙酸造成胃溃疡模型后，溃疡严重、溃疡
周围炎症明显，使胃腔内环境遭到严重破坏，导致神
经、体液对 MTL和 GAS的释放调节作用明显减弱，
血清和胃组织中的含量明显减少。生茅苍术和麸炒
茅苍术均可促进 MTL和 GAS的分泌，麸炒品各剂量
组均高于生品相应剂量组。与阳性对照药相比，麸炒
品中、高剂量的作用与三九胃泰相似，麸炒品高剂量
的作用与奥美拉唑相似；生品高剂量的作用与三九
胃泰相似。提示茅苍术麸炒后抗胃溃疡作用增强的
部分原因是由于促进 MTL和 GAS的分泌。
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