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河北习用望江南子炮制规范研究



全 文 :超出天平的最大称量值。
2. 2 砝码加减依数判 砝码加减的依据是根据光幕上
数字的变化来判断,光幕只能显示 + 10mg 至 - 10mg之
间任意一个分度值,如果当砝码和物件之间质量相差过
大,此时全开天平光幕上无法显示数据。我们就只能通
过加、减砝码来减小砝码和物件之间的质量差至 + 10mg
和 - 10mg,最后称出物件的准确质量。
如在称量中慢慢开启天平时,光标走向是 0、+ 1、
+ 2、+ 3、+ 4、+ 10……数字依次增加,给我们的提示
是物件的质量比现在砝码的质量要重,又因全开天平
时光标超出了 + 10mg,不能读数,所以我们需要加砝
码,使两者质量接近直至 0mg 和 + 10mg 之间。
反之在称量中慢慢开启天平时,光标上数字的走
向是 0、- 1、- 2、- 3、- 4…… - 10mg 数字依次减小,
给我们的提示是物件的质量比现有砝码的质量要轻,
又因全开天平光标超出了 - 10mg,不能读数,所以我
们需要减小砝码,使两者质量接近直至 0 ~ 10mg 之
间。
综上所述可得出一个判断砝码加减的依据就是:
数字增加加砝码,数字减小减砝码,直至全开天平显数
字(即为光标位于 + 10mg 至 - 10mg)。
2. 3 读数 该步骤可能不少学生认为很简单,只要把
指数盘上所有的砝码数加起来,再加上或减去光标上
的数字,单位换算成克就行了。但是往往有不少学生
因为疏忽而出错。如当天平稳定下来后光标是停在
+ 2mg和 + 3mg 的中间,我们应当怎么样确定光标上
数值呢?因为,从光标左边往右边看的话就是 +
3. 5mg,从右边往左边看就是 + 2. 5mg。这时我们就应
当参考“0”刻度在哪里,从而才能确定光幕上的读数
是 + 2. 5mg而不是 + 3. 5mg。
3 称量后天平的整理
待读数完毕后,首先关闭天平,用手轻轻推开天平
侧门,取出被称物体,再把所在的砝码归零。用专用的
毛刷清理一下天平称盘,检查是否有残物,如果有则应
及时清理,以免对天平造成损害。最后,罩上天平罩,
作好天平使用登记,整个称量过程结束。
总之,分析天平的操作是一种专业而精细的工作,
我们在操作的过程中一定要科学、严谨、规范,注意天
平刀口的保护,注意天平的保养,学会天平简单故障的
排除,为下一次的称量作好准备,只有这样才能为我们
今后的学习、科研打下坚实的基础。
(本文校对:喻祖文 收稿日期:2009 - 09 - 24)
河北习用望江南子炮制规范研究*
付秀英 田新刚 王永新 王立岭 河北省沧州市药品检验所(沧州 0610001)
摘要:目的 综合考察研究河北习用望江南子的基原;建立其炮制规范。方法 采用生药学鉴别方法确定植物基原;建立薄层
色谱鉴别、紫外-可见分光光度法测定总蒽醌的含量及高效液相色谱法测定总蒽醌中的大黄素甲醚含量的检测方法。结果 确定
河北习用望江南子基原应为豆科植物茳芒决明 Cassia sophera L.的干燥成熟种子;建立了望江南子、大黄素甲醚双对照的薄层色谱
鉴别法;在 510mm 测定总蒽醌:1,8-二羟基蒽醌线性范围为 0. 04016 ~ 0. 2008mg /L(r = 0. 9998),平均加样回收率为 98. 5%,RSD =
2. 1%(n = 6)。测定大黄素甲醚:Agilent ZORBAX Extend-C 18 色谱柱(4. 6mm × 250mm,5μm),甲醇-0. 1%磷酸溶液(85 ︰ 15)为流
动相,体积流量 1. 00ml /min,检测波长为 440 nm,室温操作,平均加样回收率为 99. 5%,RSD 为 1. 0%(n = 6)。结论 方法准确、可
靠,可用于控制望江南子及其炮制品的质量。
关键词:望江南子;基原鉴定;中药炮制
doi:10. 3969 / j. issn. 1003-8914. 2010. 03. 054 文章编号:1003-8914(2010)-03-0427-03
* 基 金 项 目:河 北 省 科 学 技 术 研 究 与 发 展 指 导 计 划 项 目
(No. 052761482)
望江南子为河北省有较长使用历史的中药,《河
北中草药》[1]早有收载,现在安国、博野一带有大面积
种植。具有清肝明目,健胃润肠,解毒止痛的功效。为
了更好地开发和利用望江南子药用资源,有效控制望
江南子质量,规范其炮制,我们在重新鉴定其基原的基
础上,根据其化学成分研究结果[2],建立了新的薄层
色谱鉴别方法和总蒽醌及大黄素甲醚的含量测定方
法。
1 材料与方法
1. 1 仪器与试药 硅胶 G 薄层板(青岛海洋化工厂
分厂),定量毛细管;Agilent 8453 紫外-可见分光光度
计;岛津 LC-2010 高效液相色谱仪(四元泵,自动进样,
紫外检测器)。
大黄素甲醚对照品(含量测定用,批号 110758-
200610)、1,8-二羟基蒽醌对照品(含量测定用,批号
·724·光明中医 2010 年 3 月第 25 卷第 3 期 CJGMCM March 2010. Vol 25. 3
0829-9702)均由中国药品生物制品检定所提供,望江
南子对照药材由河北省药品检验所鉴定;液相色谱所
用甲醇为色谱纯,其余试剂均为分析纯。
1. 2 方法
1. 2. 1 基原鉴定 河北习用望江南子的基原以往曾
认为是豆科植物望江南 Cassia ouidentalis L. 的干燥成
熟种子[1]。根据药材商品鉴定,核对植物标本及查阅
有关资料,综合考察研究河北习用望江南子的基原。
两者主要区别点如下:
望江南:小叶 3 ~ 5 对,小叶片卵形或卵状披针形,
先端尖或渐尖。荚果扁平长 10 ~ 13 cm,无毛,种子 1
列;种子类圆形,扁平,对称。
河北习用望江南:小叶 6 ~ 10 对,小叶先端急尖或
短渐尖。荚果茼状肥胖,长 6 ~ 9 cm,疏生细毛,种子 2
列;种子卵圆形而扁,边缘厚薄不均,下部扁斜,表面有
明显凹斑。
1. 2. 2 薄层鉴别 取供试品粉末 0. 2g,加甲醇 20ml,
加热回流 30min,冷却,滤过,滤液蒸干,残渣加水 10ml
使溶解,再加盐酸 1ml,置水浴上加热回流 30min,立即
冷却,加乙醚提取 2 次,每次 10ml,合并乙醚液,蒸干,
残渣加三氯甲烷 1ml 使溶解,作为供试品溶液。另取
望江南子对照药材 0. 2g,同法制成对照药材溶液。再
取大黄素甲醚对照品,加甲醇制成每 1ml 含 1mg 的溶
液作为对照品溶液。照薄层色谱法试验,吸取上述三
种溶液各 3μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘
合剂的硅胶 G 薄层板上,以石油醚(30 ~ 60℃)-甲酸
乙酯-甲酸(15∶ 5∶ 1)的上层溶液为展开剂,展开,取
出,晾干。供试品色谱中在与对照药材和对照品色谱
相应的位置上,显相同颜色的斑点,置氨气中熏后,斑
点变为红色。
1. 2. 3 大黄素甲醚含量测定 ①色谱条件:Agilent
ZORBAX Extend-C18色谱柱(4. 6mm × 250mm,5μm);
甲醇-0. 1% 磷酸溶液(85 ∶ 15)为流动相;体积流量
1. 00ml /min;检测波长为 440nm;室温操作。②对照品
溶液的制备:精密称取经干燥(105℃)至恒重的大黄
素甲醚对照品 10. 74mg,置 100ml 量瓶中,用无水乙
醇-乙酸乙酯(2∶ 1)溶解并稀释至刻度,摇匀;精密吸
取大黄素甲醚溶液 2ml,置 10ml 量瓶中,加无水乙醇-
乙酸乙酯(2 ∶ 1)至刻度,摇匀,即得。③供试品溶液
的制备:精密称取望江南子粉末 0. 5g,置具塞锥形瓶
中,精密加入甲醇 50ml,称定重量,置水浴上回流
30min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇
匀,滤过。精密量取续滤液 25ml,蒸干,加 10%盐酸溶
液 30ml,置水浴中加热水解 1h,立即冷却,用三氯甲烷
振摇提取 4 次,每次 30ml,合并三氯甲烷液,回收溶剂
至干,残渣加用无水乙醇-乙酸乙酯(2 ∶ 1)溶解,转移
至 25ml 量瓶中,并稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,
即得。④线性关系考察:取浓度为 21. 48μg /ml 的对
照品溶液 1、5、10、15、20、25、30、35μl,注入液相色谱
仪,以对照品进样量为横坐标,峰面积积分值为纵坐
标,绘制工作曲线,回归方程 Y = - 8621 + 57400X,r =
0. 9999。表明大黄素甲醚在 0. 02148 ~ 0. 7518μg 范围
内呈良好的线性关系。⑤稳定性试验:在所选定的测
定条件下,取样品液和对照品溶液(21. 48μg /ml)20μl
于 0h 开始测定,以后每隔一定时间测 1 次,结果表明
在 12h 内稳定。⑥重复性试验:取同一批样品 6 份,按
供试品溶液制备及样品测定方法项下方法,进样 20μl
分别测定含量,平均含量为 0. 2004%,RSD = 1. 0%。
结果表明重复性良好。⑦加样回收率试验:取已知含
量的 样 品 约 0. 5g,精 密 称 定,精 密 加 入 浓 度 为
21. 48μg /ml 的对照品无水乙醇-乙酸乙酯溶液 1ml,按
样品测定方法提取,测定,计算回收率为 99. 5%,RSD
= 1. 0%。
1. 2. 4 总蒽醌含量测定 ①测定波长的选择:取 1,8-
二羟基蒽醌对照品适量,用 0. 5% 醋酸镁甲醇溶液溶
解,在 400 ~ 600nm 波长扫描,1,8-二羟基蒽醌在
510nm 处有最大吸收,故选 510nm 为检测波长。②对
照品溶液的制备:精密称取 1,8-二羟基蒽醌对照品
(105℃干燥至恒重)20. 08mg,置 50ml 量瓶中加无水
乙醇-乙酸乙酯(2 ∶ 1)至刻度。精密吸取上述溶液
5ml,置 25ml 量瓶中,加无水乙醇-乙酸乙酯(2∶ 1)至
刻度,作为对照品溶液。③供试品溶液的制备:以大黄
素甲醚含量测定项下的供试品溶液为供试品溶液。④
线性关系考察:精密吸取对照品溶液 0. 5、1. 0、1. 5、
2. 0、2. 5ml,分别置 10ml 容量瓶中,加 0. 5%醋酸镁甲
醇液至刻度,以 0. 5%醋酸镁甲醇液作空白,于 510nm
波长测得吸光度值。以吸光度对浓度进行线性回归,
得到回归方程 Y = 0. 01302 + 0. 3410X,r = 0. 9998。结
果表明 1,8-二羟基蒽醌在 0. 04016 ~ 0. 2008mg 范围内
呈线性关系。⑤精密度试验:取 0. 08032mg /ml 对照
品溶液,重复测定 6 次,测得的吸光度值RSD为 1. 4%
(n = 6)。⑥重现性试验:取同一批供试品 6 份,按供
试品溶液的制备方法制备,依法测定,测得的吸光度值
RSD 为 2. 3%(n = 6)。⑦稳定性试验:取 1,8-二羟基
蒽醌对照品和望江南子适量,按对照品溶液和供试品
溶液的制备方法制备,每间隔 20min 测定吸光度,共测
6 次,表明 0. 5% 醋酸镁甲醇溶液显色在 2h 内稳定。
⑧加样回收率试验:精密称取望江南子粉末约 0. 5g,
加入 0. 08032mg /ml 1,8-二羟基蒽醌无水乙醇-乙酸乙
酯(2∶ 1)溶液 5ml,按样品制备项下方法测定回收率,
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测得平均回收率为 98. 5%,RSD = 2. 1%(n = 6)。
2 结果
2. 1 确定河北习用望江南子基原应为豆科植物茳芒决
明 Cassia sophera L.的干燥成熟种子。这一结论已正式
收载入《河北省中药饮片炮制规范》(2003 年版)。
2. 2 薄层鉴别 薄层图谱见图 1。
图 1 TLC 图谱
1. 供试品;2. 望江南子对照药材;3. 大黄素甲醚对照品
2. 3 样品大黄素甲醚含量测定 吸取供试品溶液和
对照品溶液分别进样,进样量 20μl,以外标法进行测
定,结果见表 1,图 2。
表 1 望江南子中大黄素甲醚的测定结果(n = 6)
药材批次 大黄素甲醚% RSD%
1 0. 2045 0. 8
2 0. 1952 0. 6
3 0. 2005 0. 3
4 0. 2199 0. 5
2. 4 样品总蒽醌含量测定 取大黄素甲醚含量测定
项下的样品溶液 2. 0ml,分别按上述方法测定,回归方
程计算含量,见表 2。
本文建立的薄层鉴别方法、大黄素甲醚及总蒽醌
含量测定方法准确、可靠,可用于规范望江南子及其炮
制品质量控制。
图 2 大黄素甲醚(A)与望江南子(B)HPLC 色谱图
表 2 望江南子中总蒽醌测定结果(n = 6)
药材批次 总蒽醌% RSD%
1 0. 5814 1. 4
2 0. 6008 2. 0
3 0. 6917 1. 9
4 0. 7388 1. 6
3 讨论
对照品溶剂的选择。曾选用甲醇作溶剂,对照品
溶解性较差,改用无水乙醇-乙酸乙酯(2 ∶ 1)溶解较
好。
参考文献
[1 ] 河北省革命委员会卫生局 .河北省革命委员会商业局 . 河北中草
药[M].石家庄:河北人民出版社,1977:274-276.
[2 ] 付秀英,石月岭,罗润芝,等 . 茳芒决明中蒽醌类化学成分研究
[J].光明中医,2008,8:1087.
作者简介:付秀英(1962—),女,河北省沧州市人,主任药师,学士学位,
从事中药检验及质量标准研究工作。
(本文校对:庞春渝 收稿日期:2009 - 08 - 20)
八正散煎剂对实验性慢性细菌性前列腺炎
大鼠前列腺组织病理形态的影响
储开博 山西医科大学(太原 030001) 山西中医学院(太原 030024)
摘要:目的 通过观察八正散煎剂对慢性细菌性前列腺炎(CBP)大鼠前列腺病理形态改变的影响,以进一步探讨其作用机制。
方法 雄性 SD 大鼠 40 只,随机分为假手术组、模型组、西药对照组、八正散煎剂组共 4 组,每组 10 只,微创开腹在直视下前列腺局
部注射大肠埃希菌制备 CBP 动物模型。光镜下观察各组大鼠前列腺病理形态的变化。结果:各组间大鼠前列腺组织病理形态有明
显差异(P < 0. 01),八正散煎剂组疗效最好。结论 八正散煎剂能明显改善 CBP 发生的各种形态学异常。
关键词:八正散;慢性细菌性前列腺炎;病理
doi:10. 3969 / j. issn. 1003-8914. 2010. 03. 055 文章编号:1003-8914(2010)-03-0429-02
CBP 是男性泌尿生殖系常见病,严重影响了患者的生活质
量。八正散是治疗 CBP 的临床有效方剂,为进一步探讨该方的
疗效机制,本实验从该方对 CBP 大鼠前列腺病理形态改变的影
响方面对其疗效进行观察和评价。
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