全 文 ：谱法测定尿毒清胶囊中橙皮苷及丹酚酸 B 的含量，其中橙皮
苷的最大吸收波长为 283nm，丹酚酸 B 的最大吸收波长为
286nm，预实验发现，在 286nm处，橙皮苷的吸收稳定，峰面积
与 283nm处测得的结果基本一致，因此，选择 286nm 作为两
种成分含量测定的检测波长。HPLC 法的结果目标峰分离度
理想，并通过方法学验证，该方法准确、可靠，可用于尿毒清胶
囊的质量控制。
参考文献
〔1〕国家药典委员会 . 中国药典(一部)〔S〕. 北京，中国医药科技出
版社，2015:76，191，283，354.
〔2〕赵培敬，张桂平 . HPLC法同时测定活血通脉片中 4 种成分〔J〕.
中成药，2015，37(12):2651-2655.
中草药石上柏的质量标准研究
张 瑾，丁 晴，金 卓(江苏省无锡药品检验所 无锡 214028)
摘要:目的 对江苏省流通的石上柏的药材质量进行分析研究，拟为其质量标准的提高奠定基础。方法 主要采用薄层色谱法对石上柏进行
定性鉴别，采用高效液相色谱法测定石上柏中穗花杉双黄酮的含量等。结果 TLC 法鉴别色谱特征斑点明显。穗花杉双黄酮在 0. 0046 ～
0. 4605mg·mL －1的浓度范围内呈现良好的线性关系，平均回收率为 99. 2%，ＲSD为 1. 2%(n = 6)，10 批样品中含穗花杉双黄酮按干燥品计平均
为 1. 11%。结论 本文建立的 TLC和 HPLC方法专属性强，重复性好，可用于石上柏的质量控制。
关键词:石上柏;薄层色谱法;高效液相色谱法
中图分类号:Ｒ927 文献标识码:A 文章编号:1006-3765(2016)-07-0115-0070-04
作者简介:张 瑾，女。职称:主管中药师。主要从事药物分析工作，
联系电话::18261520797，E-mail:zhangjin1332@ 163. com
Studies on Quality Standard for Chinese herbal medicine Selaginella doe-
derleinii Hieron
ZHANG Jin，DING Qing，JIN Zhuo(Jiangsu Province，Wuxi Institute for drug control，Wuxi 214028，China)
ABSTＲACT:OBJECTIVE By analysis of the quality of Selaginella doederleinii Hieron in the market of Jiangsu
Province，in order to improve its quality standards. METHDODS Selaginella doederleinii Hieron was Mainly identi-
fied by TLC，the content of amentoflavone in Selaginella doederleinii Hieron was determined by HPLC. ＲESULTS
Identification spots of chromatographic characteristics of TLC were marked. The quantitative evaluation of amentofla-
vone had the linear range of 0. 0046 ～ 0. 4605mg·mL －1 and the average recovery was 99. 2%(ＲSD =1. 2%，n = 6)
. The averages containing was 1. 11% in 10 batches of drying samples. CONCLUSION The TLC and HPLC meth-
od were strong specificity and good repeatability，they can be used for quality control of Selaginella doederleinii Hi-
eron.
KEY WOＲDS:Selaginella doederleinii Hieron;TLC;HPLC
中草药石上柏是用于治疗肿瘤的常用药物之一，具有清
热解毒，止血，抗癌等功效。是中成药抗癌平丸的主要原料之
一，临床上亦有直接制成片剂使用，如石上柏片(治癌片)。
本文针对江苏市场上流通的石上柏药材，主要采用 TLC 法对
石上柏进行定性鉴别和 HPLC法测定石上柏中穗花杉双黄酮
的含量，拟为江苏省石上柏质量标准的提高奠定基础。
1 基源研究
石上柏为地方用中药品种之一，尚未被《中国药典》收
载，名称和来源在全国未得到统一，存在同名异物的现象，临
床使用和市场流通易引起混淆。据统计〔1〕，地方中药材标准
中已收载的石上柏通常有两个来源:卷柏科植物深绿卷柏
Selaginella doederleinii Hieron. 和江南卷柏 Selaginella moellen-
dorffii Hieron. 的干燥全草。前者收载于《广东省中药材标
准》(2010 年)，《广西省中药材标准》(1990 年)，《湖南省中
药材标准》(2009 年)，《江西省中药材标准》(1996 年) ，《上
海省中药材标准》(1994 年)等;后者出现于《江苏省中药材标
准》(1989 年增补本)、《广西省中药材标准》(1990 年) ，《广
东省中药材标准》(2004 年)，《湖北省中药材标准》(2009
年) ，《上海市中药材标准》(1994 年)等。江苏一直将江南卷
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海峡药学 2016 年 第 28 卷 第 7 期
柏作石上柏用，本文研究的石上柏来源于卷柏科植物江南卷
柏 Selaginella moellendorffii Hieron. 的干燥全草。
2 性状特征〔2-5〕
本品地下根茎横走，灰棕色，屈曲，具纤细须根。茎禾秆
色或基部稍带红色，高 10 ～ 40cm，直径 1. 5 ～ 2mm;下部不分
枝，上部 3 ～ 4 回羽状分枝。叶黄绿色或灰绿色，具白膜质边
缘，边缘有微齿或下侧全缘。下部叶呈卵状三角形，稀疏螺旋
状排列，向上贴生;分枝上营养叶二型，背腹各 2 列，中叶(腹
叶)斜卵形，顶端锐尖，基部心形，侧叶(背叶)斜展，卵状三角
形，具短尖头。孢子囊穗，单生枝顶，四棱形，孢子囊浅黄色至
橘黄色。茎质柔韧，不易折断。叶质脆，易碎。气微，味辛，微
甘。
3 显微特征
本品粉末黄绿色。气孔不定式，副卫细胞 4 ～ 6 个。表皮
细胞壁波状弯曲，叶缘部分具白色膜质边缘，细胞壁向外突出
形成粗短刺，顶端钝圆。管胞成群，螺纹或梯纹，直径约
20μm。孢子四分体，类圆球形，直径约 28μm。
4 试验与结果
4. 1 仪器与试药
4. 1. 1 仪器:Mettler XS-205 电子天平，CAMAG ATUOMATIC
TLC SAMPLEＲ4 及 TLC VISUALIZEＲ 系统，Waters2695-2998
液相色谱仪系统等。
4. 1. 2 试药:甲苯、甲酸乙酯、甲酸等均为分析纯，甲醇为色
谱纯，水为超纯水，磷酸为优级纯等。
江南卷柏对照药材(批号:121146-200502)，穗花杉双黄
酮对照品(批号 111902-201102，纯度 90. 2%)均来源于中国
食品药品检定研究院。
收集样品共 10 批，经鉴定均来源于为卷柏科 Selaginel-
laceae植物江南卷柏 Selaginella moellendorffii Hieron. 的干燥
全草(见表 1)。
表 1 样品信息表
样品编号 药材名 来源 产地
1 石上柏 江南卷柏 广西
2 石上柏 江南卷柏 广西
3 石上柏 江南卷柏 广西
4 石上柏 江南卷柏 -
5 石上柏 江南卷柏 浙江
6 石上柏 江南卷柏 -
7 石上柏 江南卷柏 亳州
8 石上柏 江南卷柏 亳州
9 石上柏 江南卷柏 亳州
10 石上柏 江南卷柏 亳州
4. 2 薄层鉴别
4. 2. 1 供试品溶液的制备:分别取样品 1，2，3 的粉末 1g，精
密称定，加甲醇 20mL，超声处理 20min，滤过，滤液作为供试
品溶液。
4. 2. 2 对照药材溶液的制备:取江南卷柏对照药材 1g，同法
制成对照药材溶液。
4. 2. 3 薄层色谱条件:硅胶 G预制板(默克公司)，展开剂为
甲苯-甲酸乙酯-甲酸(10∶ 8∶ 1)，点样量:2μL，显色条件:喷以
2%三氯化铝甲醇溶液，置紫外光灯(365nm)下检视。
4. 2. 4 测定结果:三批样品供试品色谱中，在与对照药材色
谱相应的位置上，均显相同颜色的斑点。薄层色谱图(见图
1)。
图 1 石上柏的薄层色谱图
S. 江南卷柏对照药材;1. 样品 1;2. 样品 2;3. 样品 3
4. 3 理化指标 分别按照《中国药典》2010 年版(一部)附录
IX H、IX K、Ⅹ A对 10 批样品进行水分、总灰分和浸出物进行
考察〔6〕。水分测定采用烘干法，浸出物测定采用热浸法，以
50%乙醇作为提取溶剂。测定结果(见表 2)。
表 2 测定结果表
编号 水分 /% 总灰分 /% 浸出物含量 /%
1 10. 2 9. 1 13. 4
2 11. 2 15. 7 12. 3
3 11. 0 14. 0 12. 9
4 9. 8 12. 1 18. 2
5 9. 5 12. 2 16. 9
6 8. 2 8. 5 15. 6
7 9. 0 12. 5 12. 8
8 9. 3 11. 1 17. 1
9 9. 3 10. 4 18. 5
10 9. 1 10. 4 11. 0
4. 4 含量测定
4. 4. 1 色谱条件:以 Lichrospher C18(5μm，4. 6 × 250mm)为
填充剂;以甲醇为流动相 A，以 0. 1%磷酸溶液为流动相 B，按
表 3 进行梯度洗脱;流速为 1. 0mL·min －1;柱温 35℃;检测波
长 338nm;进样量为 10μL。
表 3 流动相梯度洗脱表
时间(min) 流动相 A(%) 流动相 B(%)
0 65 35
15 65 35
25 85 15
26 65 35
30 65 35
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Strait Pharmaceutical Journal Vol 28 No. 7 2016
4. 4. 2 溶液的制备〔7-8〕:对照品溶液的制备 精密称取穗花杉
双黄酮对照品 10mg，置 20mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻
度，作为对照品储备液。供试品溶液的制备 分别取 10 批样
品粉末(过三号筛)约 0. 2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密
加入甲醇 50mL，称定重量，加热回流 2h，放冷，再称定重量，
用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。对照品
溶液色谱图与供试品溶液色谱图(见图 2)。
图 2 高效液相色谱图
(A)供试品溶液，(B)对照品溶液，(C)空白溶液
4. 4. 3 标准曲线及线性范围:精密吸取对照品储备液适量，
用甲醇稀释成浓度分别为 0. 0046、0. 0092、0. 0184、0. 0460、
0. 0921、0. 2302、0. 4605mg·mL －1的对照品溶液，分别进样
10μL，记录峰面积，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制
标准曲线，穗花杉双黄酮回归方程为 y = 4. 629 × 107 x + 8. 828
× 103，r = 0. 9999，结果表明穗花杉双黄酮在 0. 0046 ～
0. 4605mg·mL －1的浓度范围内呈现良好的线性关系。
4. 4. 4 精密度试验:精密吸取浓度为 0. 0460mg·mL －1的对
照品溶液 10μL，按照“4. 4. 1”项下色谱条件连续进样 6 次，记
录峰面积。结果峰面积 ＲSD为 0. 4%(n = 6)，表明仪器的精
密性较好。
4. 4. 5 重复性试验:取“1 号”样品 6 份，每份 0. 2g，分别精密
称定，按照“4. 4. 2”项下方法制备供试品溶液，按上述液相色
谱条件测定。结果穗花杉双黄酮含量的 ＲSD 为 1. 3%(n =
6)，表明方法的重复性较好。
4. 4. 6 稳定性试验:取“1 号”样品供试品溶液，分别在 0、2、
4、8、16、24h进样 10μL，结果峰面积 ＲSD 为 1. 6%(n = 6)，表
明供试品溶液在 24h内稳定。
4. 4. 7 检测限和定量限:将对照品储备液用甲醇进行多次等
倍稀释，当信噪比 S /N为 10 时，穗花杉双黄酮最低定量限为
460. 5ng·mL-1。信噪比 S /N为 3 时，穗花杉双黄酮最低检测
限为 138. 1ng·mL-1。
4. 4. 8 加样回收率试验:取“1 号”样品 6 份，每份 0. 1g，精密
称定，分别精密加入浓度为 0. 02114mg·mL －1对照品溶液
50mL，称定重量，加热回流 2h，放冷，再称定重量，用甲醇补足
减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。按上述液相色谱条
件测定，计算回收率得，平均回收率为 99. 2%，ＲSD 为 1. 2%
(n = 6)。
4. 4. 9 含量测定:分取上述 10 批样品，按照“4. 4. 2”项下，制
备供试品溶液，注入液相色谱仪，含量测定结果(见表 4)。
表 4 含量测定结果表(n = 2)
样品
编号
取样量
(g)
穗花杉双
黄酮峰面积
按干燥品计
含量(%)
平均值
(%)
1 0. 2018 1989473 1. 165 1. 17
0. 2020 2023328 1. 184
2 0. 2091 1790179 1. 011 1. 03
0. 2045 1808641 1. 045
3 0. 2022 1666718 0. 976 0. 99
0. 2089 1783895 1. 012
4 0. 2043 2346947 1. 354 1. 37
0. 2061 2417848 1. 383
5 0. 2074 1469149 0. 837 0. 84
0. 2016 1447442 0. 848
6 0. 2053 2120707 1. 208 1. 23
0. 2051 2182502 1. 244
7 0. 2077 1786162 1. 013 1. 00
0. 2010 1674821 0. 981
8 0. 2053 2186050 1. 256 1. 25
0. 2064 2187957 1. 250
9 0. 2062 2255426 1. 289 1. 31
0. 2058 2322666 1. 330
10 0. 2040 1676858 0. 972 0. 95
0. 2052 1605764 0. 925
10 批样品中穗花杉双黄酮的含量，按干燥品计平均值为
1. 11%、最低值为 0. 84%，最高值为 1. 37%。
5 讨论
5. 1 石上柏为地方用中药品种，目前市场上的统货主要来源
于卷柏科植物深绿卷柏和江南卷柏，名称和来源在全国未得
到统一，存在同名异物的现象，两者在外形及化学成分上有明
显差异，临床使用和市场流通易引起混淆，最好能一药一名。
5. 2 本文以江南卷柏为对照药材，建立了江苏省流通的石上
柏的薄层色谱方法。分别考察了薄层色谱条件、供试品溶液
的制备、环境温湿度等因素，该方法也适用于区别江南卷柏与
深绿卷柏。
5. 3 本文建立了石上柏中穗花杉双黄酮含量的 HPLC 测定
方法。考察了穗花杉双黄酮的提取工艺，曾采用乙腈-0. 4%
醋酸为流动相〔9〕，结果穗花杉双黄酮峰出峰时间长，且峰型
易拖尾。按“4. 4. 2”项下制备 1 批深绿卷柏供试品溶液注入
液相色谱仪，其穗花杉双黄酮含量按干燥品计为 0. 28%，提
示江南卷柏与深绿卷柏的穗花杉双黄酮含量有显著差异，待
做进一步研究。
参考文献
〔1〕林瑞超主编 . 中国药材标准名录〔M〕. 北京:科学出版社，2011:
4.
〔2〕江苏省卫生厅 . 江苏省中药材标准(1989 年版增补本)〔S〕. 江
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海峡药学 2016 年 第 28 卷 第 7 期
苏:江苏科学技术出版社，1989:11.
〔3〕江苏省植物研究所编 . 江苏植物志〔M〕. 江苏:江苏人民出版社，
1977:13.
〔4〕中国科学院中国植物志编 . 中国植物志〔M〕. 北京:科学出版社，
第 6(三)卷:125.
〔5〕全国中草药汇编编写组 . 全国中草药汇编(上册)〔M〕. 北京:人
民卫生出版社，1975:473.
〔6〕国家药典委员会 . 中国药典 2010 年版(一部)〔S〕. 北京:中国医
药科技出版社，2010:附录 52、53、62.
〔7〕殷丹，陈科力 . 正交试验优选江南卷柏总黄酮提取工艺〔J〕. 中国
药房，2010，21(15):1368-1370.
〔8〕蒋雪平，陈科力 . 江南卷柏中双黄酮类化合物的研究〔J〕. 中国药
学杂志，2009，44(2):96-98.
〔9〕邓淑渊，余林中 . HPLC法测定江南卷柏片中穗花杉双黄酮的含量
〔J〕. 世界中医药，2008，3(3):177-178.
HPLC法测定卡泊三醇倍他米松凝胶的含量
吴钢伟(福建省立医院药学部 福州 350001)
摘要:目的 建立了 HPLC测定卡泊三醇倍他米松凝胶倍他米松的含量。方法 色谱柱为 C18柱(4. 6mm × 250mm，5μm)，流动相为甲醇-水
(70∶30)，流速为 1. 0mL·min －1，检测波长为 240nm。结果 倍他米松的线性范围为 30 ～ 100μg·mL －1(r = 1. 000)，平均回收率为 99. 3%，
ＲSD为 0. 5%。结论 该方法简便、准确、快速，重复性好。
关键词:卡泊三醇倍他米松凝胶;高效液相色谱法
中图分类号:Ｒ927 文献标识码:A 文章编号:1006-3765(2016)-07-0399-0073-02
作者简介:吴钢伟，男(1978. 11 －)。毕业于中国药科大学。职称:主
管药师。从事医院药学工作。
Dertermination of Calcipotril and Betamethasone Diprpionate by HPLC
WU Gang-wei(Fujian Provincal Hospital，Fuzhou 350001，China)
ABSTＲACT:OBJECTIVE To establish an HPLC method for the determination of calcipotril and betamethasone
Diprpionate. METHODS The analytical column was C18 column(4. 6mm × 250mm，5μm)and the mobile phase
was methanol-water(70∶30)at a flow rate of 1. 0mL·min －1. Detected at 240nm by UV-detector. ＲESULTS The
linearity was good for betamethasone the range of 30 ～ 100μg·mL －1(r = 1. 000)，the mean recovery was 99. 3% (n
= 9) ，ＲSD =0. 5%. CONCLUSION The results show that the method was simple，precise and rapid.
KEY WOＲDS:Calcipotril and Betamethasone Diprpionate;HPLC
卡泊三醇倍他米松凝胶为类白色凝胶:本品为复方制剂，
其组分为每克含卡泊三醇 50μg 含倍他米松计为每克 50mg，
主要用于治疗牛皮癣，银宵病。卡泊三醇显著抑制角质形成
的细胞增殖和异常变化，二丙酸倍他米松抗炎和抑制血管增
生的作用明显，二者在治疗银宵病的作用机制上存在着机制
互补的关系，因此二者联合用药存在着协同互补的关系，二者
联合用药优于如何一种药物单独使用，此外还可以互相拮抗
了彼此的不良反应。由于中国药典尚无好的测定方法。本文
建立 HPLC法测定其含量、操作简单，结果准确。
1 仪器和试药
Agilent 1100 高效液相色谱仪，卡泊三醇倍他米松凝胶注
由国内某公司生产(批号:010903，010904，010905);倍他米松
对照品由(中国药品生物制品检定所)提供。甲醇为色谱纯;
水为重蒸水。
2 实验方法及结果
2. 1 色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充柱，色谱柱
型号为依利特 Hypersil ODS2 柱(4. 6mm × 250mm，5μm);流动
相为甲醇-水(70 ∶ 30;流速为 1. 0mL·min －1，检测波长为
240nm，进样体积为 10μL(见图 1)。
2. 2 溶液的制备
2. 2. 1 对照品溶液的制备:分别精密称取倍他米松对照品适
量，加甲醇溶解，制成每 1mL 中分别含倍他米松对照品 80μg
溶液，作为对照品溶液。
2. 2. 2 供试品溶液的制备:精密称取样品 1g(约相当于倍他
米松 50mg)，置 50mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，提取过滤，
再精密量取滤液 10mL 置 100mL 量瓶中即得，作为供试品溶
液。
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Strait Pharmaceutical Journal Vol 28 No. 7 2016