全 文 ：不同炮制温度和时间对炮姜中姜酮含量的影响
徐晓青１，洪　燕２，夏伦祝１，高家荣１，汪永忠１，李钰馨１，２，邓龙飞１，２，韩燕全１
（１．安徽中医药大学第一附属医院　国家中医药管理局中药制剂三级科研实验室，
安徽 合肥　２３００３１；２．安徽中医药大学研究生部，安徽 合肥　２３００３８）
［摘要］目的　考察不同炮制温度和时间对炮姜中姜酮含量的影响。方法　采用超高效液相色谱法对１５份不
同炮制温度和炮制时间的炮姜样品中姜酮含量进行测定。色谱条件：色谱柱为Ａｃｑｕｉｔｙ　ＢＥＨ　Ｃ１８（１００ｍｍ×２．１
ｍｍ，１．７μｍ）；流动相为乙腈－水，梯度洗脱；流速０．３ｍｌ／ｍｉｎ，检测波长２８０ｎｍ，柱温３０℃。结果　姜酮进样量
在０．０７３　２～０．３６６　０μｇ时与峰面积呈良好的线性关系（ｒ＝０．９９９　８），平均加样回收率为９７．４２％（ＲＳＤ＝
２．３５％）。炮姜中姜酮含量随着炮制温度和时间的变化明显，以炮制温度为２００℃、炮制时间为６ｍｉｎ时样品
中姜酮含量最高。结论　炮制过程中姜酮含量随着温度升高和时间延长呈现先升高后降低的趋势，所建立
的超高液相色谱法简便、准确、重现性好，可用于炮姜中新生成分姜酮的测定。
［关键词］超高液相色谱法；炮姜；姜酮
［中图分类号］Ｒ９２７．２　［文献标志码］Ａ　［ＤＯＩ］１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．２０９５－７２４６．２０１４．０５．０２７
　　干姜为姜科植物姜Ｚｉｎｇｉｂｅｒ　ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ　Ｒｏｓｃ．
的干燥根茎，炮姜为干姜临床常用炮制品，为干姜经
砂烫炮制而成［１］。干姜味辛、性热，能走能守，长于
温中回阳；其砂烫为炮姜后，辛燥之性明显减弱，温
里之力明显弱于干姜，但作用缓和而持久，守而不
走，并长于温经止血［２］。干姜与炮姜的药性发生了
“走”与“守”的转变，功效亦随之变化，其内在机制值
得深入的研究。本课题组前期研究和文献报道均证
实，干姜炮制过程中产生了一种新成分———姜酮
（ｚｉｎｇｅｒｏｎｅ，Ｃ１１Ｈ１４Ｏ３）［３－４］，其化学结构见图１。
图１　姜酮的化学结构式
药理学研究表明，姜酮具有一定的抗炎、抗氧
化、抗菌等活性［５－６］。但到目前为止，笔者未见有关
于炮姜中姜酮质量控制和炮制工艺影响方面的系统
研究报道，本实验采用超高效液相色谱法对不同炮
制温度和炮制时间的姜酮含量变化进行了研究，为
基金项目：国家自然科学基金项目（８１１０２８１１）；安徽省自然
科学基金项目（１００４０６０６Ｑ４０）；国家中医药重点学科临
床中药学建设项目（国中医药人教发〔２０１２〕３２号）
作者简介：徐晓青（１９７７－），男，药师
通信作者：韩燕全，ｈｙｑｕａｎ２００３＠１６３．ｃｏｍ
炮姜的炮制工艺优选和质量控制提供了实验依据。
１　仪器与材料
１．１　仪器　超高效液相色谱仪 （Ｗａｔｅｒｓ　Ａｃｑｕｉｔｙ
Ｈ－Ｃｌａｓｓ　ＵＰＬＣ）：美国沃特世公司，包括四元泵、自
动进样系统、ＰＤＡ检测器、柱温箱及Ｅｍｐｏｗｅｒ　２工
作站；超声仪：江苏省昆山超声仪器有限公司；ＨＦＢ－
２００型高速中药粉碎机：湖南省吉首市中州中药机
械厂；炒药设备：自制。
１．２　试药　对照品姜酮（批号 １２２－４８５，纯度为
９８．５１％）：由上海鼎瑞 化 工 有 限 公 司 提 供，经
１　Ｈ－ＮＭＲ、１３Ｃ－ＮＭＲ、ＩＲ、ＭＳ和 ＵＶ等光谱检测确
认其结构；乙腈为色谱纯：美国 ＴＥＤＩＡ公司；水为
市售屈臣氏牌蒸馏水；甲醇等试剂均为分析纯；０．２２
μｍ微孔滤膜：北京八方世纪公司。
２　方法与结果
２．１　炮姜的制备　取干姜１６份，每份５０ｇ，参照课
题组前期实验方法［７］并稍作改进，采用砂烫法，
１８０～２２０℃，每１０℃为间隔，每个温度点分别炒制
６、７、８ｍｉｎ，得３份样品；共炮制得到１５份炮姜样
品，１份干姜不炮制备用，实验共重复进行２次，计
算平均值。
２．２　对照品溶液的制备　精密称取姜酮对照品
７．３２ｍｇ，精密称定，置１０ｍｌ容量瓶中，加甲醇溶解
并定容至刻度，摇匀，制成０．７３２ｍｇ／ｍｌ的对照品储
备液，４℃冷藏。实验前，精密移取１．０ｍｌ对照品储
备液至１０ｍｌ容量瓶中，加甲醇稀释定容至刻度，得
质量浓度为０．０７３　２ｇ／ｍｌ的实验用对照品溶液。
２．３　供试品溶液的制备　分别取干姜和各炮姜饮
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片适量，粉碎后过４０目筛。取过筛粉末０．３ｇ左
右，精密称定后，置具塞锥形瓶中，加１０ｍｌ甲醇称
定质量，超声（１５０Ｗ，４０Ｈｚ）３０ｍｉｎ，放冷，称量，加
甲醇补足损失质量，摇匀，静置，测定前用０．２２μｍ
滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。
２．４　方法学考察
２．４．１　色谱条件［８－９］：色谱柱为 Ｗａｔｅｒｓ　Ａｃｑｕｉｔｙ
ＵＰＬＣ　ＢＥＨ　Ｃ１８柱（１００ｍｍ×２．１ｍｍ，１．７μｍ）；流
动相为乙腈（Ａ）－水溶液（Ｂ），梯度洗脱程序为（Ａ－Ｂ：
０～３ｍｉｎ，２４∶７６；３～３．５ｍｉｎ，１００∶０；３．５～５ｍｉｎ，
１００∶０；５～６ｍｉｎ，２４∶７６；６～８ｍｉｎ，２４∶７６）；检测波
长为２８０ｎｍ，流速为０．３０ｍｌ／ｍｉｎ，柱温３０℃。此条
件下对照品、干姜和炮姜样品色谱图见图２。
图２　姜酮对照（Ａ）、干姜（Ｂ）和炮姜（Ｃ）的超高效液相色谱图（１．姜酮）
２．４．２　标准曲线的绘制：精密吸取对照品溶液１．０、
２．０、３．０、４．０、５．０μｌ，自动进样器进样，测定峰面
积，以色谱峰面积值（ｙ）对其质量分数（ｘ）进行线性
回归计算，得线性回归方程为ｙ＝１６１　０９５．６ｘ－
８　１１５．８，ｒ＝０．９９９　８，表明姜酮进样量在０．０７３　２～
０．３６６　０μｇ时与峰面积呈良好的线性关系。
２．４．３　精密度实验：精密吸取对照品溶液２μｌ，连
续进样６次，按“２．４．１”项下的色谱条件测得姜酮峰
面积的ＲＳＤ为１．２０％（ｎ＝６），结果表明仪器精密
度良好。
２．４．４　稳定性实验：取Ｓ　１２（２１０℃，７ｍｉｎ）样品溶
液按照“２．３”项下方法制备供试品溶液，分别于０、
２、４、６、１２、２４ｈ按“２．４．１”项下的色谱条件进样，记
录姜酮峰色谱面积，结果峰面积的ＲＳＤ为２．３９％
（ｎ＝６），表明供试品溶液在２４ｈ内稳定。
２．４．５　重复性实验：取Ｓ５（１９０℃，６ｍｉｎ）样品粉
末，分别按“２．３”项下方法制备供试品溶液６份，按
“２．４．１”项下色谱条件进样，记录姜酮峰色谱面积，
结果峰面积ＲＳＤ为２．７９％（ｎ＝６），表明该方法重
现性良好。
２．４．６　加样回收率实验：取Ｓ１４（２２０℃，６ｍｉｎ）样
品粉末一定量，共６份，精密称定后，置具塞锥形瓶
中，各加入对照品适量，按“２．３”项下方法制备供试
品溶液，按色谱条件测定姜酮峰色谱面积并计算回
收率，结果６份样品的平均加样回收率为９７．１８％
（ＲＳＤ＝１．２９％）。
２．４．７　姜酮含量测定结果与分析：取干姜和１５份
炮姜样品粉末，按“２．３”项方法制备溶液，进样２μｌ，
测定峰面积，计算样品含量，见表１。
表１　样品含量测定结果（ｎ＝２）
样品
姜酮含量／
（ｍｇ／ｇ）
样品
姜酮含量／
（ｍｇ／ｇ）
Ｓ１ － Ｓ９　 ０．７２４
Ｓ２　 ０．１０８ Ｓ１０　 ０．６７９
Ｓ３　 ０．３０７ Ｓ１１　 １．０４１
Ｓ４　 ０．６４６ Ｓ１２　 ０．９７６
Ｓ５　 ０．６３３ Ｓ１３　 ０．９６７
Ｓ６　 ０．６５９ Ｓ１４　 １．０２１
Ｓ７　 ０．７５９ Ｓ１５　 ０．８４５
Ｓ８　 １．１４３ Ｓ１６　 ０．４５５
　　从表１结果可见，干姜中未能测出姜酮（见图
２），表明姜酮确为在炮制过程中产生的新成分，从炮
制样品的姜酮含量测定结果来看，随着炮制温度升
高姜酮含量呈增加的趋势，当温度到达２００℃、时间
６ｍｉｎ时，姜酮的含量达到最高；随着温度继续升高
或炮制时间的延长，姜酮的含量开始下降，提示就姜
酮的含量来看，２００℃、６ｍｉｎ左右应是炮姜的建议
炮制温度和时间。
２．４．８　验证实验：按上述姜酮含量最高的炮制工
艺，即炒制温度２００℃、炒制６ｍｉｎ，进行３批验证试
验，按“２．４．１”项下色谱条件进样，计算姜酮的含量
分别为１．１４８、１．２０１、１．１２９ｍｇ／ｇ，平均含量为
１．１５９ｍｇ／ｇ，炮制工艺重复性良好，合理可行。
３　讨论
炮制前后，中药的成分会发生“质”与“量”两个
方面的变化，尤其是“质”的变化即新成分的产生更
是其药性和功效变化直观的体现。《中华人民共和
国药典》２０１０版中规定，干姜和炮姜的含量测定要
求标准是以６－姜酚计算分别不得少于０．６０％和
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０．３０％［１］。课题组前期研究表明，干姜中的姜酚成
分含量较高，但在炮制过程中会明显下降［７］。如果
单以炮制过程中可以降低的６－姜酚最低含量来控
制炮姜的质量，存在一定的缺陷，即选用达不到干姜
标准而符合炮姜标准的药材，轻度炮制即可达标，炮
制过程的重要性明显降低。
本实验在文献和前期实验基础上，经过流动相
比例、提取方法、色谱条件等条件的优化，最终建立
了炮姜中新生成分———姜酮含量的超高效液相色谱
测定方法，该方法具有分析时间快、分离度好、色谱
条件简单等优点；对不同炮制温度和炮制时间的炮
姜中姜酮含量测定结果表明，姜酮含量较高且随着
炮制温度和炮制时间变化而变化，提示在炮姜的质
量控制和炮制机制研究时，应考虑将姜酮作为参考
指标之一。另外，对于姜酮的药理活性和对其炮制
前后药性、功效变化的影响机制则是值得进一步研
究的课题。
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Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　Ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｓ　ａｎｄ　Ｔｉｍｅｓ　ｏｎ　Ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　Ｚｉｎｇｅｒｏｎｅ
ｉｎ　Ｐｒｏｃｅｓｓｅｄ　Ｇｉｎｇｅｒ
ＸＵ　Ｘｉａｏ－ｑｉｎｇ１，ＨＯＮＧ　Ｙａｎ２，ＸＩＡ　Ｌｕｎ－ｚｈｕ１，ＧＡＯ　Ｊｉａ－ｒｏｎｇ１，ＷＡＮＧ　Ｙｏｎｇ－ｚｈｏｎｇ１，ＬＩ
Ｙｕ－ｘｉｎ１，２，ＤＥＮＧ　Ｌｏｎｇ－ｆｅｉ１，２，ＨＡＮ　Ｙａｎ－ｑｕａｎ１
（１．Ｔｈｅ　Ｆｉｒｓｔ　Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ａｎｈｕｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　＆Ｇｒａｄｅ　３　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｌａｂｏｒａ－
ｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ，Ｓｔａｔｅ　Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ａｎｈｕｉ
Ｈｅｆｅｉ　２３００３１，Ｃｈｉｎａ；２．Ｇｒａｄｕａｔｅ　Ｄｉｖｉｓｉｏｎ，Ａｎｈｕｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ａｎｈｕｉ　Ｈｅｆｅｉ　２３００３８，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｓ　ａｎｄ　ｔｉｍｅｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎ－
ｔｅｎｔ　ｏｆ　ｚｉｎｇｅｒｏｎｅ　ｉｎ　ｐｒｏｃｅｓｓｅｄ　ｇｉｎｇｅｒ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｚｉｎｇｅｒｏｎｅ　ｆｒｏｍ　１５ｓａｍｐｌｅｓ　ｏｆ　ｇｉｎｇｅｒ　ｐｒｏ－
ｃｅｓｓｅｄ　ａｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｓ　ｆｏｒ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｔｉｍｅｓ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ｕｌｔｒａ－ｈｉｇｈ－ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏ－
ｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＵＰＬＣ）．ＵＰＬＣ　ｗａｓ　ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ　ｏｎ　ａｎ　Ａｃｑｕｉｔｙ　ＢＥＨ　Ｃ１８ｃｏｌｕｍｎ（１００ｍｍ ×２．１ｍｍ，１．７
μｍ）ｗｉｔｈ　ａ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ｏｆ　ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ－ｗａｔｅｒ　ｆｏｒ　ｇｒａｄｉｅｎｔ　ｅｌｕｔｉｏｎ　ａｔ　ａ　ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　ｏｆ　０．３ｍｌ／ｍｉｎ，ａ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ
ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｏｆ　２８０ｎｍ，ａｎｄ　ａ　ｃｏｌｕｍｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｏｆ　３０℃．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｚｉｎｇｅｒｏｎｅ　ｓｈｏｗｅｄ　ａ
ｇｏｏｄ　ｌｉｎｅａｒ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｐｅａｋ　ａｒｅａ　ｗｉｔｈｉｎ　０．０７３　２－０．３６６　０μｇ（ｒ＝０．９９９　８）；ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ
ｒａｔｅ　ｗａｓ　９７．４２％，ｗｉｔｈ　ａ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｓｔａｎｄａｒｄ　ｄｅｖｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　２．３５％．Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｚｉｎｇｅｒｏｎｅ　ｉｎ　ｐｒｏｃｅｓｓｅｄ　ｇｉｎ－
ｇｅｒ　ｖａｒｉｅｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｗｉｔｈ　ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｔｉｍｅ；ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｚｉｎｇｅｒｏｎｅ　ｗａｓ　ｈｉｇｈｅｓｔ　ｗｈｅｎ
ｔｈｅ　ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｗａｓ　２００℃ａｎｄ　ｔｈｅ　ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　ｔｉｍｅ　ｗａｓ　６ｍｉｎ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ
ｚｉｎｇｅｒｏｎｅ　ｆｉｒｓｔ　ｉｎｃｒｅａｓｅｓ　ａｎｄ　ｔｈｅｎ　ｄｅｃｒｅａｓｅｓ　ａｓ　ｔｈｅ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｒｉｓｅｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　ｌａｓｔｓ．Ｔｈｉｓ　ｅｓｔａｂ－
ｌｉｓｈｅｄ　ＵＰＬＣ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｓｉｍｐｌｅ，ａｃｃｕｒａｔｅ，ａｎｄ　ｒｅｐｅａｔａｂｌｅ　ａｎｄ　ｃａｎ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｚｉｎｇｅｒｏｎｅ
ｉｎ　ｐｒｏｃｅｓｓｅｄ　ｇｉｎｇｅｒ．
［Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ］ｕｌｔｒａ－ｈｉｇｈ－ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ；ｐｒｏｃｅｓｓｅｄ　ｇｉｎｇｅｒ；ｚｉｎｇｅｒｏｎｅ
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